纯水检验标准操作规程

1.目的

建立生产用纯水的检验标准操作规程，对生产用纯水检验进行规范。

2.范围

生产用纯水检验。

3.职责

QC负责本规程实施，部门负责人监督执行。

4.仪器

4.1电导率仪

4.2ABI7500荧光定量PCR仪

4.3微量移液器及相匹配的带滤心吸头

4.4生物安全柜

4.5数字式酸度计

4.6恒温培养箱

4.7超净工作台

4.8250ml砂芯容器过滤器

5.材料与试剂

5.1待检纯水（由纯水系统制备）；

5.2检验合格的α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒；

5.3灭菌过的1.0 ml PCR反应管或1.5ml的离心管；

5.4营养琼脂培养基

5.5PCR反应管

6.规程

6.1 性状：本品为无色的澄清液体；无臭，无味。

6.2 PH值的检测：

6.2.1 量取100ml纯水，按《数字式酸度计使用、维护、保养规程》，需对各出水管道进行PH值检测

6.2.2 评价标准：PH值范围（25℃）应在5.0-

7.5。

6.3 电导率的检测：

6.3.1 准备一个烧杯，开始测试前将各接水口的开关打开，使水预流冲洗烧杯半分钟，然后将电导率测定仪电极放入烧杯中，记录下趋于稳定的读数；电导率应在取水口在线检测。

6.3.2 各使用点的纯水的电导率应≤5.0μs/cm则可判定为合格；

6.4 PCR扩增：（必要时检测）

以待检纯水做为模板，利用本司已检验合格的α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法），依照《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法）说明书》进行PCR扩增，重复操作3人份。扩增结果为阴性。

6.5微生物限度：

6.5.1准备工作：

6.5.1.1.将待测纯水样品、培养基等实验相关物品放置于无菌室传递窗，开启传递窗紫外灯照射灭菌30分钟；

6.5.1.1操作人员更换无菌衣，从缓冲间进入到菌检室内，将超净工作台操作面和酒精灯，已灭菌好的1ml移液管、试管、生理盐水、微量移液器以及吸头盒子等实验器具用75%酒精擦拭干净后摆放整齐备用，按超净工作台的标准操作规程作净化准备；

6.5.1.1从传递窗内取出相关的样品、培养基和实验器具，按种类和实验组别在经75%酒精擦拭后，在超净工作台上摆放整齐备用。

6.5.2 菌落总数检测操作过程：

6.5.2.1在超净工作台中，用1ml移液管吸取1ml样品纯水，加入9ml的生理盐水中，再从中取1ml加入到9ml生理盐水中，作为样品稀释液备用。

6.5.2.2按“溶剂过滤器操作规程”，用负压抽滤过滤10ml 样品稀释液到0.22μm无菌过滤膜，每个样品稀释液过滤一张滤膜；

6.5.2.3将此滤膜用无菌摄子取出，在无菌条件下将滤膜转入营养琼脂培养基平皿中，在30-35℃下培养48小时后计数，作为细菌菌落数。

6.5.2.4重复操作6.6.2.1和6.6.2.2, 此滤膜用无菌摄子取出，在无菌条件下将滤膜转入玫瑰红钠琼脂培养基平皿中，在23-28℃下培养72小时后计数，作为霉菌、醇母菌菌落数。

6.5.2.5最后将细菌、霉菌、醇母菌菌落数相加*102作为报告菌落总数。

6.5.3清洁清场

6.5.3.1将装阳性对照的容器放入盛有消毒液的容器中浸泡处理后方能废弃；

6.5.3.2用消毒液充分擦拭超净工作台，开启紫外灯照射半小时后关机，填写设备使用记录。

6.5.4结果判断

6.5.4.1各平皿在各自条件中取出计数，菌落总数为平皿上肉眼可见的菌落数；

6.5.4.2纯水：每毫升不超过100CFU；

6.5.4.3检测不合格时应采取措施：连续三次结果超过接受限度时，应停止使用不合格水用于生产，并采取纠正性措施，以使检测时的结果符合标准。

7相关文件：

7.1 《工艺用水质量标准》FSD-WI-QT-001

7.2 《纯水系统标准操作规程》FSD-WI-EO-124

7.3 《营养琼脂培养基平皿制备标准操作规程》FSD-WI-QO-006

7.4 《溶剂过滤器操作规程》FSD-WI-EO-125

8. 记录

8.1 《检验报告单》FSD-QR-101

8.2 《原料检验记录》FSD-QR-105