犬瘟热病毒N蛋白单克隆抗体的制备和特性研究及犬细小病毒VP2基因变异分析
犬细小病毒中国内蒙株VP2基因克隆及序列分析
犬细小病毒中国内蒙株VP2基因克隆及序列分析Ξ董江丽1,李淑芬2,张鹤龄11(内蒙古大学生命科学院,呼和浩特010021)2(内蒙古农业大学生物工程系,呼和浩特010018)摘要:从我国内蒙古地区流行的犬细小病毒病病犬的肠溶物中分离提纯犬细小病毒(CPV )。
提取病毒基因组DNA ,并以此DNA 为模板,采用人工合成的引物进行PCR 扩增,PCR 产物经B am H I 、S ac I 双酶切后,克隆于pUC19质粒的B am H I/S ac I 位点。
重组质粒pUCVP2经PCR 鉴定、限制酶切分析和序列分析,结果表明:获得了犬细小病毒内蒙株(CPV 2IM )VP2基因的全长克隆,VP2基因全长1755nt ,与国外报道的美国1株(CPV 2N )、美国2株(CPV 2B )和猫全白细胞减少症病毒(FPLV )的核苷酸序列同源性分别为99.32%、98.29%、98.52%,氨基酸序列同源性分别为98.87%、97.09%、97.77%。
关键词:犬细小病毒;VP2基因;序列分析中图分类号:S852.655 文献标识码:A 文章编号:1003-5125(2000)04-0379-09犬细小病毒(Canine Parvovirus ,CPV )属自主复制的细小病毒,该病毒可引起犬细小病毒病,又称犬细小病毒性肠炎。
本病以剧烈呕吐、出血性肠炎、白细胞显著减少为主要特征,不同品种和年龄的犬都易感,幼犬在16周出现心肌炎、死亡率高达20%～100%[1]。
目前,国内主要采用CPV 灭活疫苗和犬五联弱毒疫苗进行免疫预防,由于母源抗体的干扰及CPV 毒株在强大的免疫压力下产生抗原漂移,常导致免疫失败。
1993年,布日古德等用HA 和HI 调查内蒙警犬基地的CPV 感染,结果表明,在正常接种下,感染率高达26%[2]。
细小病毒是目前动物病毒中最小、最简单的一类单链线状DNA 病毒。
CPV 病毒粒体直径为25nm ,无囊膜,呈二十面体,其基因组为单链、负链DNA ,全长5323nt 。
犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析
犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析林鹏;赵航;王建科;程悦宁;任静强;易立;仝明薇;程世鹏【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2015(042)010【摘要】本试验从北京某动物医院疑似犬细小病毒(CPV)感染犬粪便中分离出一株病毒.通过电子显微镜观察、血凝试验、动物回归试验和分子生物学鉴定,本试验成功分离出一株CPV,命名为BJ-24.对BJ-24株的VP2基因序列分析发现该分离株为CPV-2a亚型,其VP2基因与GenBank中19株CPV VP2基因核苷酸序列有较高的同源性,均在98.7％以上,甚至与CPV-JS2株达到100.0％.系统进化分析结果表明所分离的BJ-24株属于中国分支,与CPV-JS2株遗传距离最近.本试验对进一步开展北京地区CPV的流行病学调查提供基础依据,并对防制病毒传播和疫苗研制奠定了坚实的基础.【总页数】7页(P2587-2593)【作者】林鹏;赵航;王建科;程悦宁;任静强;易立;仝明薇;程世鹏【作者单位】中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.犬细小病毒YBYJ株的分离鉴定及VP2基因的序列分析 [J], 张立媛;高旭;陈海迪;于清洋;方爽2.犬细小病毒JN株的分离鉴定及VP2基因序列分析 [J], 姜燕霞;张淑玲;王金良;申识川3.犬细小病毒昆明流行株的分离鉴定与VP2基因序列分析 [J], 赵屹钦;曾梦颖;郭娟;张迪;高洪;严玉霖4.犬细小病毒VP2基因序列分析及BJ-1株的分离鉴定 [J], 周宏专;苏霞;林路路;齐颀;张进;徐福洲;杨兵5.三株犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因序列分析 [J], 陈延宗;钱晶;王晶宇;赵航;毕振威;夏兴霞;诸玉梅;芮荣;王永山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其表达产物抗原性鉴定
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犬 瘟 热 病 毒 Ｎ 蛋 白基 因 的克 隆 、 核 原
表 达 及 其 表 达 产 物 抗 原 性 鉴 定
申卫 红 ，马素 贞 ，陈胜 男 ， 腾 飞 ，陶玉 成 ， 子 健 刘 简
（ 疆农 业 大 学 动 物 医学 学 院 ， 鲁 木 齐 新 乌 ８０５） ３ ０ ２
摘 要 ： 参 考 Ｇｅ Ｂ ｎ ｎ ａ ｋ中 发表 的 Ｃ Ｖ Ｎ 蛋 白基 因 序列 ， Ｏｌ ｏ ． Ｄ 用 ｉ ６ ０软 件 设 计 一 对 特 异 性 引物 ， 患 犬 瘟 热 的犬 ｇ 从
犬细小病毒VP2基因的克隆与生物信息学分析
犬细小病毒VP2基因的克隆与生物信息学分析叶新慧;申魁魁;符欣蕙;王丽霞;李恭贺;张明;卢晟盛;卢克焕;郑喜邦【期刊名称】《基因组学与应用生物学》【年(卷),期】2012(31)6【摘要】本研究旨在克隆犬细小病毒VP2(Canine parvovirus VP2,CPV-VP2)基因,构建克隆载体pMD18-T-VP2,分析其生物信息学特征。
以犬细小病毒(CPV)阳性病犬血液基因组病毒DNA为模板,PCR扩增CPV-VP2基因,通过TA克隆获得pMD18-T-VP2重组质粒,测序后对其进行生物信息学分析。
结果表明:(1)CPV-VP2完整的开放阅读框由1755个核苷酸组成,共编码585个氨基酸残基,其序列同源性与浣熊最高,达97.6%;(2)信号肽在线预测认为,CPV-VP2基因无信号肽;(3)CPV-VP2大多数氨基酸偏好以T、A结尾的密码子;(4)CPV-VP2蛋白可能存在7个糖基化位点,其丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸分别存在8个、10个和7个磷酸化位点;(5)CPV-VP2可能存在76个B细胞抗原表位;(6)CPV-VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;(7)CPV-VP2蛋白二级结构的α-螺旋区域占9.93%、β-折叠区域占24.49%、无规则卷曲区域占65.58%;(8)CPV-VP2蛋白三级结构存在多个螺旋和折叠区域,主要以无规则卷曲为主。
本研究为制定CPV-VP2基因原核或真核高效表达策略提供了参考资料,并为进一步制备CPV胶体金快速诊断试纸条和基因工程疫苗奠定了基础。
【总页数】5页(P554-558)【关键词】犬细小病毒;VP2基因;分子克隆;生物信息学分析【作者】叶新慧;申魁魁;符欣蕙;王丽霞;李恭贺;张明;卢晟盛;卢克焕;郑喜邦【作者单位】广西大学动物科技学院;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】S858.315.3【相关文献】1.猪细小病毒SC-1株VP2基因的克隆及生物信息学分析 [J], 罗燕;郭万柱;刘艳丽;殷华平2.成都地区犬细小病毒VP2基因克隆分析及基因型鉴定 [J], 杨晓农;王成东;项振义;王斌;张焕容;杨发龙;于学辉;龙虎;刘群;陈世界;严玉宝;余华3.南宁地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析 [J], 徐闰;黄华旭;徐小明;李政泰;马麟;劳小香;吴显实4.猫细小病毒VP2基因克隆与生物信息学分析 [J], 姜伟;郭明佳;吴树康5.猪细小病毒自然弱毒N株VP2基因的克隆、测序及生物信息学分析 [J], 李斌;梁家幸;赵武;苏乾莲;何颖;梁保忠;秦毅斌;何苹萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定王铮;王铁成;冯娜;虞一聪;高玉伟;杨松涛;夏咸柱【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】用纯化后的犬瘟热病毒免疫Balb/c小鼠，采用间接ELISA方法筛选分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株，并挑选阳性孔进行亚克隆，用Vero细胞交叉反应试验及间接免疫荧光检测单克隆抗体的特异性。
结果获得2株能稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体细胞株，分别命名为062-1、062-2。
实验室已有的一株单克隆抗体为6 H8。
交叉反应试验及间接免疫荧光染色检测表明，3株单克隆抗体的特异性较好；经过体外连续传代及反复冻存、复苏，杂交瘤细胞均能稳定分泌特异性单克隆抗体。
培养上清液及小鼠腹水间接 ELISA效价分别为1∶105和1∶108。
相加试验表明，单克隆抗体062-1、062-2具有共同的表位，而单克隆抗体6 H8识别的位点与其他两株不同。
%Canine distemper virus was purified and used to immunize Balb/c mice.The hybridoma culture su-pernants were screened by indirect ELISA.The positive cells were subcloned until all clones were positive. The specificity of monoclonal antibodies was confirmed by Vero cross-reaction test and IFA.The results showed that three hybridoma cells secreting anti-CDV McAb were obtained.These two cells were named 062-1,062-2.The lab had one McAb called 6H8.All the three McAbs confirmed by cross-reaction test and IFA were specific against CDV.The positive hybridomas were also able to secrete McAbs stably by series passage in vitro with freezing and recovering.The titers of cell culture supernant andascites tested by ELISA were 1∶105 and 1∶108 ,respectively.Additivity ELISA results showed that epitopes recognized by 2 McAbs(062-1,062-2)differed from that of by McAb 6H8.【总页数】5页(P73-77)【作者】王铮;王铁成;冯娜;虞一聪;高玉伟;杨松涛;夏咸柱【作者单位】吉林农业大学，吉林长春130062; 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春130062;吉林农业大学，吉林长春 130062; 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春130062;军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春 130062【正文语种】中文【中图分类】S852.655【相关文献】1.犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及特性鉴定 [J], 苏建青;岳妙姝;王化磊;薛琳;夏咸柱2.犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及鉴定 [J], 孙玮;靳晓霞;夏咸柱;王铁成;杨松涛;高玉伟;王承宇;张涛;杨玉姣;刘玉秀;阮洋3.犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 [J], 袁维峰;贾红;于萍萍;侯绍华;郭晓宇;史利军;赵占中;朱鸿飞4.抗犬瘟热病毒核蛋白单克隆抗体的制备及其线性抗原表位鉴定 [J], 曹智刚;易立;程悦宁;仝明薇;李爽;王建科;林鹏;孙亚茹;程世鹏5.抗犬瘟热病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 [J], 赵爽爽; 刘云; 李彤彤; 王文静; 薛雨佳; 刘明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
犬细小病毒河南方城株分离及VP2_基因序列分析
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要：为了解犬细小病毒的临床流行及变异情况，本研究于河南省方城县采集了8份疑似CPV 感染犬粪便样品，经过PCR 检测、CRFK 细胞增殖培养、透射电镜观察和病毒滴度测定后，对其VP2基因进行序列分析。
结果表明5株分离株为犬细小病毒，病毒滴度分别为10-4.22/0.1 mL （China-HN-01株）、10-3.56/0.1 mL （China-HN-02株）、10-3.78/0.1 mL （China-HN-05株）、10-4.47/0.1 mL （China-HN-06株）、10-4.4/0.1 mL （China-HN-07株）。
VP2基因序列比对和遗传进化树分析结果显示，4株分离株基因型为New CPV-2a ，1株分离株基因型为CPV-2c ，5株分离株与疫苗株的同源性为97.8%~98.7%，与国内外参考毒株的同源性为94.0%~99.0%，4株New CPV-2a 基因型毒株与四川的Canine/China/24/2017株亲缘关系最近，CPV-2c 基因型毒株与蒙古国5-MGL 分离株位于同一分支，与我国河南地区的3株CPV-2c 毒株亲缘关系较远。
对河南方城地区CPV 毒株的分析，为研究CPV 变异株在河南地区的传播和宠物疫病防控提供了理论依据。
关键词：犬细小病毒；分离；VP2基因；进化分析中图分类号：S852.65文献标志码： A文章编号：1674-6422（2023）03-0054-08Isolation and Sequence Analysis of VP2 Gene of Canine Parvovirus from Fangcheng, HenanLIN Yuting 1,2, ZHAI Qi 2, ZHAI Shaolun 2, LYU Dianhong 2, ZHOU Xiurong 2, JIA Chunling 2, HUO Wei 2,WEN Xiaohui 2, Wei Wenkang 1,2,3(1. College of Animal Science & Technology, Zhongkai University of Agriculture and Engineering, Guangzhou 510225, China; 2. Institute of Animal Health, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of Livestock Disease Prevention of Guangdong Province, Scientific Observation and Experiment Station of Veterinary Drugs and Diagnostic Techniques of Guangdong Province, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Guangzhou 510640, China; 3. Agro-biological Gene Research Center, Guangdong Academy of AgriculturalSciences, Guangzhou 510640, China)收稿日期：2021-01-11基金项目：国家重点研发计划（2016YFD0501000）；广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金（2019KJ119）；广东省农业科学院学科团队建设（201634TD）；广东省农业科学院院长基金（202024）作者简介：林瑜婷，女，硕士研究生，预防兽医学专业；翟颀，男，助理研究员，主要从事动物疫病诊断技术研究 通信作者：温肖会，E-mail：*******************；魏文康，E-mail：**************犬细小病毒河南方城株分离及VP2基因序列分析林瑜婷1,2，翟 颀2，翟少伦2，吕殿红2，周秀蓉2，贾春玲2，霍 玮2，温肖会2，魏文康1,2,3（1.仲恺农业工程学院动物科技学院，广州510225；2.广东省农业科学院动物卫生研究所 广东省畜禽疫病防治研究重点实验室 农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站，广州510640；3.广东省农业科学院农业生物基因研究中心，广州510640）2023,31(3):54-61Abstract: In order to investigate the prevalence and variation of Canine parvovirus, 8 fecal samples were collected from dogs suspected of CPV infection from Fangcheng county, Henan province. Five CPV isolates were obtained based on PCR amplifi cation, growth on CRFK cells, transmission electron microscopy and virus titration. The TCID 50 titers of these isolates were 10-4.22/0.1 mL (China-HN-01 strain), 10-3.56/0.1 mL (China-HN-02 strain), 10-3.78/0.1 mL (China-HN-05 strain), 10-4.47/0.1 mL (China-HN-06 strain) and 10-4.4/0.1 mL· 55 ·林瑜婷等：犬细小病毒河南方城株分离及VP2基因序列分析第31卷第3期犬细小病毒病是由细小病毒科（Parvoviridae）细小病毒属（Parvovirus ）的犬细小病毒（Canine parvovirus, CPV）感染犬只引起的致命性传染病[1]，该病常以出血性肠炎、白细胞含量显著减少、腥臭血便和严重脱水等为主要临床特征，部分表现为突然死亡的急性心肌炎型[2]。
犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测
犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测段欣强;张洪亮;周保琨;杨瑞梅;单虎【摘要】本研究旨在克隆犬细小病毒VP2 (CPV-VP2)基因,构建乳酸菌重组表达载体,以乳酸菌表达CPV-VP2目的蛋白,通过重组目的蛋白检测及分析,为CPV乳酸菌口服疫苗研究提供支撑.以PCR方法扩增CPV-VP2编码目的基因,纯化后连接表达载体pMG36e,构建重组乳酸菌表达载体pMG36e-VP2,电转至乳酸球菌MG1363感受态,经PCR鉴定、双酶切鉴定及测序分析,挑选阳性重组菌株,命名为:pMG36e-VP2-MG1363.使用诱导剂Nisin诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定重组蛋白.结果显示,成功构建重组表达载体pMG36e-VP2,SDS-PAGE,结果表明,重组目的蛋白分子大小约65 kD,与理论值相符;Western Blotting结果表明,重组目的蛋白可被犬源CPV阳性血清所识别,具有良好免疫反应性.本研究用乳酸菌成功表达犬细小病毒蛋白,为该病新型疫苗的研究提供基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2018(054)010【总页数】5页(P7-10,15)【关键词】犬细小病毒;VP2;活乳酸菌载体;原核表达【作者】段欣强;张洪亮;周保琨;杨瑞梅;单虎【作者单位】青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109;青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109;山东省即墨区畜牧兽医局,山东青岛266200;青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109;青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109【正文语种】中文【中图分类】S852.69犬细小病毒病(CPD),是由犬细小病毒(CPV)感染犬的一种致死性、急性、高传染性疾病。
CPV是细小病毒科,细小病毒属成员,该属成员有水貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)等,相似性达到90%[1]。
犬细小病毒VP2基因的克隆表达与免疫印迹分析
犬细小病毒VP2基因的克隆表达与免疫印迹分析
陈胜男;马素贞;陶玉成;申卫红;刘腾飞;简子健
【期刊名称】《新疆农业大学学报》
【年(卷),期】2010(033)001
【摘要】根据基因库已发表犬细小病毒序列设计合成了VP2基因的1对特异引物,以细小病毒感染的犬粪样品中提取的总DNA为模板,进行PCR扩增.把扩增产物克隆至pMD18-T载体进行测序、鉴定.将克隆的VP2基因片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,再将构建成功的原核表达质粒载体pGEX-4T-2-VP2转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行鉴定、测序、表达.结果表明,克隆的VP2基因片段全长1 755 bp,与13个VP2基因序列的同源性为98.4%～99.8%.系统进化树分析表明,所克隆的VP2 CSN830611序列同日本株(AB054222)、意大利株(AF306445)的进化途径一致.Western-blotting分析显示,表达产物为90 kD的融合蛋白,可被犬细小病毒阳性血清所识别,具有良好的反应原性.
【总页数】6页(P47-52)
【作者】陈胜男;马素贞;陶玉成;申卫红;刘腾飞;简子健
【作者单位】新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木
齐,830052;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052
【正文语种】中文
【中图分类】S851.659.2
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犬瘟热病毒N蛋白单克隆抗体的制备和特性研究及犬细小病毒
VP2基因变异分析
犬瘟热(Canine Distemper,CD)是由副黏病毒科麻疹病毒属的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。
犬细小病毒性肠炎是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)引起的以肠炎、腹泻与主的烈性传染病。
为了更好的控制与预防上述两种疫病的流行,本研究开展了犬瘟热病毒N蛋白单克隆抗体的制备和特性研究及犬细小病毒VP2基因变异分析。
首先,本研究以CDV3的RNA为模板,原核表达纯化了带His标签的N蛋白截短片段(aa277-471),免疫BALB/c雌鼠后,将其B淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过包被N蛋白截短片段(aa277-471)的ELISA筛选,获得分泌抗CDV的单克隆抗体杂交瘤阳性细胞1株,命名为1N8,亚类鉴定为Ig G1a,kappa链,该单克隆抗体间接免疫荧光检测阳性、WB检测阳性。
接下来采用噬菌体展示和肽扫描的方法,筛选1N8结合的抗原表位:合成N
蛋白(aa277-471)的15肽文库,每条多肽长度15aa,位移5aa,通过结合和筛选,得到一条与单克隆抗体1N8阳性反应的多肽,通过多肽N端和C端的不断缩减,最终证明该抗原表位的最小识别单位:351NFGRSYFDP359。
通过3D模拟,发现此表位位于N蛋白的外侧,其与CDV阳性血清具备一定的ELISA反应能力。
通过比对,其与CDV同属麻疹病毒、牛瘟病毒,小反刍兽疫病毒一致,并对小反刍兽疫病毒进行了WB验证,其结果为阳性。
以杂交瘤细胞1N8为模板,分离出抗体轻链和重链可变区,通过基因工程的方式组装成单链抗体,通过原核表达,获得了重组1N8单链抗体蛋白,经过间接ELISA和竞争ELISA方法检测,其具备1N8
单抗的部分活性。
以腺病毒为表达载体,研究了351NFGRSYFDP359表位疫苗的免疫效力:构建含351NFGRSYFDP359表位和肠炎细小病毒VP2基因的表达盒,通过PCR和WB检测,重组腺病毒在核酸和蛋白水平上均能表达出外源片段。
小鼠免疫试验显示:与商品化对照疫苗相比,重组腺病毒的CPV的ELISA效价与之相当,但CDV的ELISA 效价比较低。
最后,在本研究开展了CPV VP2基因遗传变异研究:历经4年,收集到我国主要城市的犬细小病毒阳性样品37份,分离病毒8株,获得犬细小病的阳性样品VP2基因序列22份,其中CPV-2a型20份,CPV-2b型2份,测序结果显示我国CPV 存在CPV-2a(Ser297Ala)变异,而且CPV VP2基因序列相似度为99.3-99.9%,系统发育树证明本次分离的大多数CPV毒株为一个大的分支中,与泰国KU143-09株类似,且不呈现地域相关性。