微生物与生化药学问答题
微生物考试试题附答案

试卷一.选择题(每个2分,共20分)1、组成病毒粒子衣壳的化学物质是()A、糖类B、蛋白质C、核酸D、脂肪2、属于细菌细胞特殊结构的为()A、荚膜B、细胞壁C、细胞膜D、核质体3、噬菌体属于病毒类别中的()A、微生物病毒B、昆虫病毒C、植物病毒D、动物病毒4、半固体培养基中,琼脂使用浓度为()。
A、0B、0.3—0.5%C、1.5—2.0%D、5%6.下述那个时期细菌群体倍增时间最快()A稳定期B衰亡期C对数期D延滞期7.下面关于连续培养的说法中,叙述不正确的是()A.恒化连续培养的控制对象是菌体密度B.恒浊连续培养中微生物菌体以最高生长速率生长C.恒化连续培养的产物是不同生长速率的菌体D.恒浊连续培养无生长限制因子8. 下列叙述中正确的说法是()A.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。
9.厌氧的微生物需要较低的氧化还原电位。
C.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus 属名,Staphyloccus 是种名D.类病毒是有侵染性的蛋白颗粒。
10下述诱变剂中常引起移码突变的是:()A 亚硝酸B 烷化剂C 碱基类似物D 丫啶类染料10.下述那个最可能产生一个重组细胞:()A F+ x F-B Hfr x F+C Hfr x F-D F+ x F-二、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释(每个2分,共12分)1.Gram positive bacteria2.parasporal crystal3,colony4, life cycle5,capsule6,endospore三、判断改错题(每个2分,共10分)1.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物,唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物()2.遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。
()3.低剂量照射紫外线,对微生物几乎没有影响,但以超过某一阈值剂量的紫外线照射,则会导致微生物的基因突变。
微生物制药考试题及答案

微生物制药考试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 微生物制药中,以下哪种微生物不是用于生产抗生素的主要微生物?A. 链霉菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 假单胞菌答案:B2. 微生物制药中,以下哪种物质不是微生物代谢产物?A. 抗生素B. 维生素C. 激素D. 蛋白质答案:C3. 以下哪种培养基不是微生物培养常用的固体培养基?A. 牛肉膏蛋白胨培养基B. 马铃薯培养基C. 液体培养基D. 琼脂培养基答案:C4. 微生物制药中,以下哪种方法不是用于分离纯化微生物的方法?A. 稀释涂布法B. 梯度稀释法C. 离心分离法D. 抗生素筛选法答案:C5. 以下哪种微生物不是用于生产疫苗的微生物?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:D6. 以下哪种微生物不是用于生产酶制剂的微生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 藻类答案:D7. 以下哪种微生物不是用于生产生物农药的微生物?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:D8. 微生物制药中,以下哪种方法不是用于微生物发酵的方法?A. 固态发酵B. 液态发酵C. 气态发酵D. 好氧发酵答案:C9. 以下哪种微生物不是用于生产生物肥料的微生物?A. 固氮菌B. 磷细菌C. 钾细菌D. 蓝藻答案:D10. 以下哪种微生物不是用于生产生物活性物质的微生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 植物答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)11. 微生物制药中,以下哪些微生物是用于生产抗生素的主要微生物?A. 链霉菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 假单胞菌答案:A, C12. 微生物制药中,以下哪些物质是微生物代谢产物?A. 抗生素B. 维生素C. 激素D. 蛋白质答案:A, B, D13. 微生物制药中,以下哪些方法用于分离纯化微生物?A. 稀释涂布法B. 梯度稀释法C. 离心分离法D. 抗生素筛选法答案:A, B, D14. 微生物制药中,以下哪些微生物用于生产疫苗?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:A, B15. 微生物制药中,以下哪些微生物用于生产酶制剂?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 藻类答案:A, B, C三、填空题(每空1分,共20分)16. 微生物制药是指利用微生物的代谢活动,生产______、______、______等生物活性物质的过程。
微生物药物学试题及答案

微生物药物学试题及答案一、单项选择题(每题2分,共40分)1. 微生物药物学是研究()的科学。
A. 微生物的分类和鉴定B. 微生物的生理和生态C. 微生物的致病性和防治D. 微生物来源的药物答案:D2. 下列哪项不是微生物药物的特点()。
A. 生物活性强B. 来源广泛C. 化学结构简单D. 作用机制多样答案:C3. 微生物药物学的主要研究内容包括()。
A. 微生物药物的筛选B. 微生物药物的制备C. 微生物药物的药理作用D. 以上都是答案:D4. 微生物药物的筛选不包括()。
A. 菌种的分离和鉴定B. 菌种的培养和发酵C. 菌种的基因工程改造D. 药物的临床试验答案:D5. 下列哪项不是微生物药物的制备过程()。
A. 菌种的筛选B. 发酵过程的控制C. 药物的提取和纯化D. 药物的临床试验答案:D6. 微生物药物的药理作用研究不包括()。
A. 药物的体内外活性评价B. 药物的作用机制研究C. 药物的毒理学研究D. 药物的生产工艺研究答案:D7. 下列哪项不是微生物药物的分类()。
A. 抗生素B. 免疫调节剂C. 激素类药物D. 抗肿瘤药物答案:C8. 抗生素是一类具有()的微生物次级代谢产物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案:A9. 下列哪项不是抗生素的特点()。
A. 低毒B. 高效C. 广谱D. 耐药性答案:D10. 下列哪项不是抗生素的作用机制()。
A. 抑制细菌细胞壁合成B. 干扰细菌蛋白质合成C. 破坏细菌核酸结构D. 促进细菌生长答案:D11. 免疫调节剂是一类具有()的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 调节免疫反应活性D. 抗肿瘤活性答案:C12. 下列哪项不是免疫调节剂的作用机制()。
A. 增强机体免疫功能B. 抑制机体免疫功能C. 调节细胞因子的产生D. 促进细胞分裂答案:D13. 抗肿瘤药物是一类具有()的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案:C14. 下列哪项不是抗肿瘤药物的作用机制()。
微生物与生化药学问答题

微生物与生化药学问答题微生物与生化药学问答题第二章基因工程制药1、利用基因工程技术生产药物得优点?答:1、大量生产过去难以获得得生理活性蛋白与多肽,为临床使用提供有效得保障;2、可以提供足够数量得生理活性物质,以便对其生理、生化与结构进行深入得研究,从而扩大这些物质得应用范围;3、可以发现、挖掘更多得内源性生理活性物质;4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在得不足之处,可通过基因工程与蛋白质工程进行改造与去除;5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。
2、基因工程药物制造得主要步骤?答:目得基因得克隆;构建DNA 重组体;将DNA 重组体转移入宿主菌构建工程菌;工程菌得发酵;外源基因表达产物得分离纯化;产品得检验等。
3、化学合成目得基因得先决条件?答:较小得蛋白质或多肽得编码基因可以采用人工化学合成,其先决条件:已知目得基因得核苷酸序列或蛋白质得氨基酸序列,按相应得密码子推导出DNA 得碱基序列。
4、人工合成基因得限制有哪些?答:1、不能合成太长得基因,50~60 个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码得简并会为选择密码带来很大得困难:3、费用高。
5、基因工程宿主菌应满足那些要求?目前应用最广泛得宿主菌有哪些?答:1、容易获得较高浓度得细胞;2、能利用廉价易得得原料;3、不致病、不产生内毒素;4、发热量低,需氧低,适当得发酵温度与细胞形态;5、容易进行代谢调控;6、容易进行DNA 重组技术操作;7、产物得产量、产率高,产物容易提取。
宿主菌可分两大类:1、原核细胞:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌;2、真核细胞:酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。
6、表达载体须具备哪些条件?常用载体有哪些?答:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2、具多个限制酶切点,但每种切口最好只有1 个,以便与外源基因连接。
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。
4、所产生得mRNA 必须有翻译得起始信号。
5、具有很强得启动子。
6、有很强得终止子。
南开大学微生物与生化药学答案

2. ①吸附 ②侵入 ③脱壳 ④病毒大分子的合成 ⑤装配与释放 注:此题分数较多,考试作答时应适当展开一些。参考沈萍《微生物》第二版
第 177 页。 3. ①迟缓期 细菌数量维持恒定或增加很少,细胞内的 RNA、蛋白质等物质 含量有所增加,细胞体积相对最大。
②对数生长期 以最大的速率生长和分裂,导致细菌数量呈对数增加,细胞 内各成分按比例有规律地增加,细菌代谢活性及酶活性高而稳定,细胞大小一致。 生产上广泛用作“种子”。
动鞭毛顺时针旋转,细菌做翻筋斗运动。如果引诱物结合到 MCP 上,则 CheA 的自身磷酸化被抑制,CheY 不能与鞭毛传动器结合,此时鞭毛逆时针旋转,细 菌则进行直线运动。CheY 的磷酸化由于 CheZ 蛋白的去磷酸化作用,只有很短 的 10s 左右,是翻筋斗时间不至于太长,以便随时适应环境变化。 7.见沈萍《微生物学》第二版 第三十页。 8.指受检者口服少量 13C 标记的尿素,30min 后呼出的气体用质谱仪检测是否含 有 13CO12,如果有,则表明,肠胃被幽门螺杆菌 HP 感染,因为 HP 具有人体不 具有的尿素酶,能分解尿素产生 13CO12。 9. 见沈萍《微生物学》第二版 第 249 页,负控诱导系统。 10.根据碳源、能源及电子供体性质的不同,微生物可分为:光能无机自养型、 光能有机异养型、化能无机自养型、化能有机异养型。 四.问答题 1.外毒素与内毒素的主要区别:
见沈萍《微生物》第二版第 412-413 页的抗病毒感染的免疫机制,可说明机 体内发的体液免疫和细胞免疫并无截然界限,二者是相辅相成的。
6. ①经典激活途径(CP) 由抗原抗体复合物结合与补体成分 C1,自 C1 至 C9 依次激活的途径成为经典激活途径。 ②替代途径(AP)又称旁路途径 由酵母多糖、LPS 等多种微生物及其产物 从 C3 和 B 因子开始激活的途径成为替代途径。 ③凝集素途径(lectin pathway) 由急性期蛋白与病原体结合从 C2 和 C4 开 始激活的途径。 图见沈萍《微生物》第二版第 399 页。 三条途径的中心均为 C3.经典途径由抗原 –抗体复合物活化 C1,作用于 C4 和 C2,产生经典途径的 C3 转化酶 C4b2a 并切割 C3 产生 C3b,进一步组成 C5 转 化酶 C4b2a3b,将 C5 切割为 C5a 和 C5b。Lectin 途径由肝产生的急性蛋白与病 原体的甘露糖残基结合后活化丝氨酸蛋白酯酶,后者与 C1 活性类似,作用于 C4 和 C2 引起与经典途径相同的反应过程。替代途径由体液中微量的 C3B 在病原体 等适当接触表面上与 B 因子结合后被 D 因子加工为旁路途径的 C3 转化酶 C3bBb, 切割 C3b 进一步组成 C5 转化酶 C3bBb3b。其后,都以同样的方式切割 C5,由 C5b 与后继成分装配成攻膜复合物,在菌膜或靶细胞膜上聚合成孔,造成内容物 泄露,导致细胞破裂死亡。 五.实验设计题 ①通过合成的方法得到 IL-2 基因。 ②将 IL-2 基因通过酶切、连接等分子生物学手段连接到带有 GST 或 His 标签的 载体上。 ③将质粒转化至大肠杆菌 BL21(DE3)中,涂板培养。 ④上述培养 12h 后,挑取单菌落接到含有 4mL 培养基的试管中 37℃过夜培养。 ⑤取 2mL 上述菌液 1:100 的比例接种至 200mL 培养瓶中同时加入相应的抗生 素,扩大至 OD 值约为 0.6。 ⑥扩大后将菌液放在 4℃冰箱冷却。 ⑦冷却后加入相应的诱导剂和适量的 DTT,在低温下诱导 24h,收菌。 ⑧在低温下用相应的亲和层析柱进行纯化,便可得到活性较高且稳定性较强的 IL-2 蛋白。
生物技术制药试题

生物技术制药试题生物技术制药试题1. 生物技术制药生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。
2. 基因表达基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。
3. 质粒的分裂不稳定通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。
在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。
一般情况下具有质粒的细胞(即P+细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。
4. 补料分批培养发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。
它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。
因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。
但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。
5. 人-鼠嵌合抗体嵌合抗体( chimeric atibody )是最早制备成功的基因工程抗体。
它是由鼠源性抗体的 V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因,然后插入载体,转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。
因其减少了鼠源成分,从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应,并有助于提高疗效。
6. 悬浮培养非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
微生物32道问答题及答案范文

1.微生物的分类(按大小、结构来分)非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物2、革兰阳性菌与阴性菌的细胞壁有何差异2.青霉素++ +溶菌酶++ +3、何为细菌L型,它的成因和特点是怎样的细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。
特点:高度多形性,大小不一;大多为革兰阴性菌;有一定的致病力。
4、细菌特殊结构有哪些,它们各自的意义如何荚膜:抗吞噬作用,是病原菌的重要毒力因子;抗杀菌物质损伤,如溶酶体、补体;粘附作用,与致病性有关;形成生物膜鞭毛:细菌的运动器官;某些细菌鞭毛与致病有关;鞭毛蛋白有抗原性:H抗原菌毛:普通菌毛粘附结构,性菌毛传递质粒芽胞:有强大的抵抗力;致病性;芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异,有重要的鉴别价值5、根据细菌对氧气的需求与否可把细菌分为哪几类;专性厌氧菌厌氧的原因(1)专性需氧菌(2)专性厌氧菌(3)兼性厌氧菌(4)微需氧菌专性厌氧菌厌氧的原因:缺乏完善的呼吸酶系统,利用氧以外的其他物质作为受氢体6、细菌个体及群体的繁殖规律细菌个体的生长繁殖:二分裂繁殖;繁殖速度一般20~30分钟一代细菌群体的生长繁殖:以培养时间为横坐标,培养物中活菌数的对数为纵坐标,可绘制一条生长曲线。
分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期7、生长曲线的分期及各期的应用生长曲线分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期研究细菌的生物学性状(形态染色、生化反应、药物敏感试验等)选对数期的细菌;细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生8、IMViC试验是哪几个试验,典型的大肠埃希菌的试验结果是怎样的I:吲哚试验M:甲基红试验Vi:VP试验C:枸橼酸盐于鉴定肠道杆菌,大肠埃希菌+ + - -9、热原质的定义及特点热原质:细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。
大多数是G-菌的脂多糖。
热原质耐高温,高压蒸汽灭菌不能破坏(121℃,20 min),250℃高温干烤才能破坏。
微生物简答题

1、微生物是如何命名的?举例说明答:微生物的命名是采用生物学中的二名法,即用两个拉丁字命名一个微生物的种,这个种的名字是由一个属名和一个种名组成,属名和种名都用斜体表示,属名在前,用拉丁文名词表示,第一个字母大写。
种名在后,用拉丁文的形容词表示,第一个字母小写。
如大肠埃希氏杆菌的名字是Escherichia coli2、写出大肠埃希氏杆菌和枯草杆菌的拉丁名全称答:大肠埃希氏杆菌的名称是Escherichia coli枯草杆菌的名称是Bacillus subtilis3、微生物有哪些特点答:(1)个体极小:微生物的个体极小,有几纳米到几微米,要通过光学显微镜才能看见,病毒小于微米,在光学显微镜可视范围外,还需要通过电子显微镜才可看见(2)分布广,种类繁多:环境的多样性如极端高温,高盐度和极端PH造就了微生物的种类繁多和数量庞大(3)繁殖快:大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代,在适宜的环境条件下,十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。
在物种竞争上取得优势,这是生存竞争的保证。
(4)易变异:多数微生物为单细胞,结构简单,整个细胞直接与环境接触易受外界环境因素影响,引起遗传物质DNA的改变而发生变异。
或者变异为优良菌种,或使菌种退化。
4、细菌有哪几种形态?各举一种细菌为代表。
答:细菌有四种形态:球状,杆状,螺旋状和丝状。
分别叫球菌,杆菌,螺旋菌和丝状菌。
球菌:金黄色葡萄球菌,杆菌:芽孢杆菌,螺旋菌:弧菌,丝状菌:铁丝菌5、叙述革兰氏染色的机制和步骤。
答:机制:①革兰氏染色与细菌等电点有关②革兰氏染色与细胞壁有关步骤:1在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀,固定。
2用草酸结晶紫染液1分钟,水洗。
3用碘-碘化钾媒染1分钟,水洗。
4用中性脱色剂(如乙醇)脱色,革兰氏阳性菌不褪色仍呈紫色,格兰仕阴性菌褪色,呈无色。
5用蕃红染液复染1分钟,革兰氏阳性菌仍呈紫色,格兰仕阴性菌呈红色。
革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来6、细菌有哪些一般结构和特殊结构它们各有哪些生理功能答:细菌是单细胞生物。
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微生物与生化药学问答题第二章基因工程制药1. 利用基因工程技术生产药物的优点?答:1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽,为临床使用提供有效的保障;2、可以提供足够数量的生理活性物质,以便对其生理、生化和结构进行深入的研究,从而扩大这些物质的应用范围;3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质;4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处,可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除;5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。
2. 基因工程药物制造的主要步骤?答:目的基因的克隆;构建DNA 重组体;将DNA 重组体转移入宿主菌构建工程菌;工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化;产品的检验等。
3. 化学合成目的基因的先决条件?答:较小的蛋白质或多肽的编码基因可以采用人工化学合成,其先决条件:已知目的基因的核苷酸序列或蛋白质的氨基酸序列,按相应的密码子推导出DNA 的碱基序列。
4. 人工合成基因的限制有哪些?答:1、不能合成太长的基因,50~60 个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码的简并会为选择密码带来很大的困难:3、费用高。
5. 基因工程宿主菌应满足那些要求?目前应用最广泛的宿主菌有哪些?答:1、容易获得较高浓度的细胞;2、能利用廉价易得的原料;3、不致病、不产生内毒素;4、发热量低,需氧低,适当的发酵温度和细胞形态;5、容易进行代谢调控;6、容易进行DNA 重组技术操作;7、产物的产量、产率高,产物容易提取。
宿主菌可分两大类:1、原核细胞:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌;2、真核细胞:酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。
6. 表达载体须具备哪些条件?常用载体有哪些?答:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2、具多个限制酶切点,但每种切口最好只有 1 个,以便与外源基因连接。
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。
4、所产生的mRNA 必须有翻译的起始信号。
—5、具有很强的启动子。
6、有很强的终止子。
常用载体有:1、细菌细胞的质粒。
2、λ噬菌体载体。
7. 真核基因在大肠杆菌中的表达形式?答:有三种形式:(1)融合蛋白的表达形式。
(由一段短的原核多肽和真核蛋白结合在一起的蛋白质,称为融合蛋白.。
)(2)非融合蛋白的表达形式。
(3)分泌型表达形式。
8. 表达用的酵母菌应满足哪些条件?答:表达用的酵母宿主菌应具备:①体生长力强.②菌体内蛋白酶要较弱.③菌株性能稳定.④分泌能力强。
9.基因工程菌在发酵过程中对发酵罐有哪些要求?答:①要提供菌体生长的最适宜条件;②培养过程不得污染,保证纯菌培养;③培养及消毒过程中不得游离出异物;④不能干扰细菌代谢活动。
10.离子交换层析的原理?答:当离子交换剂处于水溶液中时,活性离子可以从活性基因上解离下来,在基质骨架与溶液间自由迁移,并可与溶液间的同性离子,因与活性基因的化学亲和力不同而发生交换,即发生离子交换作用。
11.疏水层析的基本原理?答:蛋白质表面多由亲水基团组成,也有一些疏水性较强的疏水区。
在高盐浓度时,蛋白质表面疏水部位的水化层被破坏,暴露出疏水部位,疏水作用增强,与固定相上的疏水基团产生疏水性作用而被吸附;盐浓度降低时蛋白质疏水作用减弱,目的蛋白质被逐步洗脱下来。
12.亲和层析的基本原理?答:通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质(也称载体)上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
(被固定在基质上的分子称为配体,配体与基质共价结合,构成亲和层析的固定相,称为亲和吸附剂。
)13.凝胶过滤层析的优缺点?答:优点:设备简单、操作方便、样品回收率高、实验重复性好、不改变样品生物学活性。
缺点:分辨率较低,尤其是相对分子质量相近的分子之间。
—第三章细胞工程制药1.动物细胞的生理特点?答:1 细胞分裂周期长(动物细胞分裂所需时间一般为12~48h。
)。
2 细胞生长需贴附于基质,有接触抑制现象。
3 二倍体细胞寿命有限(异倍体细胞系寿命长)。
4 对生长环境要求敏感。
5 培养基要求高。
6 合成的蛋白质有修饰。
2.动物细胞培养时加入血清的作用机制?答:提供基本营养物质;提供激素和各种生长因子;提供贴附因子和伸展因子;对培养中的细胞起到某些保护作用;提供缓冲物质,调节培养基PH;影响培养系统中的某些物理特性如:剪切力、黏度、渗透压和气体传递速度等。
3.无血清培养基的优点?答:优点:①可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性。
②避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染;③避免血清组分对实验研究的影响;④有利于体外培养细胞的分化;⑤可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。
(缺点:主要表现为细胞的适用范围窄,细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养的保存和应用不如传统的合成培养基方便。
)4.动物细胞大规模培养的方法有哪些?答:①根据培养细胞的种类:原代细胞培养和传代细胞培养。
②根据培养基的不同:液体培养和固体培养。
③根据生产实际:贴壁培养、悬浮培养和贴壁-悬浮培养(假悬浮培养)。
5.动物细胞悬浮培养的优缺点?答:优点:适用的细胞较广;容易更换培养液;容易采用灌流培养的方式使细胞达到高密度。
缺点:操作比较麻烦;培养条件不易均一;传质、传氧较差;不能有效监测细胞的生长;需要合适的贴附材料和足够的面积;扩大培养比较困难,投资大。
6.动物细胞贴壁培养的优缺点?答:优点:操作简单,培养的体积大、成本低;培养条件比较均一;传质、传氧较好;传代时无需消化分散;容易扩大培养规模。
缺点:由于细胞体积较小,难采用灌流培养,细胞密度较低7.动物细胞包埋或微囊培养的优点?答:包埋在在体内的细胞可以获得保护,避免了剪切力的损害。
可以获得较高的细胞密度,一般都在10^7~10^8 个/ml 以上。
可以使产品浓缩在微囊内,利于下游产物的纯化。
可以采用多种生物反应器进行大规模培养。
8.动物生物反应器的作用、类型及应满足哪些条件?答:应满足的条件:材质无毒;结构的传质、传热和混合性能;密封性好;参数能自动检测和调控;长期连续运转;内面光滑、无死角;拆装、清洁、维修和消毒;设备成本。
动物生物反应器的作用:是给动物细胞的生长代谢提供一个最优化的环境,从而使其在生长代谢过程中产生出最大量、最优质的所需产物。
反应器类型:搅拌罐式反应器、气升式生物反应器、中空纤维式生物反应器、透析袋或膜式生物反应器和固定床或流化床式生物反应器。
第四章抗体工程制药1.免疫导向疗法为什么没有成功?从哪些方面可以对单克隆抗体进行改造?答:阻碍:A.单克隆抗体的均是鼠源性抗体,应用于人体可内可产生人鼠源抗体,加速了排斥反应,在人体内的半衰期只有5-6h,难以维持有效药物的作用靶组织时间。
B.完整的抗体份子Ig 分子质量过大,难以穿透实体肿瘤组织,达不到有效的治疗浓度。
改造:A.降低单克隆抗体的免疫原性。
B.降低单克隆抗体的相对分子质量(1)人-鼠嵌合抗体:由人抗体的恒定区与鼠源单抗的可变区融合得到。
(2).改型抗体:把鼠抗体的CDR 序列移植到人抗体的可变区内,所得到的抗体(3)小分子抗体小分子抗体包括:Fab、Fv 或ScFv 、单域抗体、最小识别单位。
这些部位都可以改造。
2.单克隆抗体的制备流程及方法。
流程:将有用抗原免疫过的淋巴细胞与骨髓瘤用PEG 进行杂交融合。
把融合的细胞在HAT 培养基上选择出来。
将选择后的整合细胞分散,培养成杂交瘤细胞。
使能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆化。
杂交瘤细胞抗体的性状的鉴定。
单克隆抗体的大量制备,一是在培养液中大更是繁殖,二是注入纯系小鼠腹腔中大量繁殖。
单克隆抗体的纯化。
制备方法:体内诱生法和体外法。
3.动物体内诱生法制备单克隆抗体的优缺点答:优点:简单,比较经济,所得单克隆抗体量较多且效价较高,可有效地保存杂交瘤细胞株和分分离已污染的杂菌的杂交瘤细胞株。
缺点:小鼠腹水中混有来自小鼠的多种杂蛋白,给纯化带来难度。
4.鼠源性单克隆抗体改造后的抗体类型及各自的特点?答:①人-鼠嵌合抗体:保持鼠源性单克隆抗体的抗原结合特异性,但对人免疫原性大幅下降了。
②改型抗体:鼠源性单克隆抗体的互补决定区(CDR 区)序列替换人的Ig 分子中的CDR 序列。
基本消除免疫原性。
③小分子抗体:Fa b 将Ig的重链在铰链区的 C 端裂解,获得两个完全相同的抗原结合片段。
才铰链区和二硫键相连。
有完整的生双价抗体活性,相对分子质量减少为三分之一,排斥反应也降低,人体内很稳定。
Fv 含有L 链和Fd 链一半的N 端可变区。
有完整的抗体相似的结能力,相对分子质量减少为六分之一。
④单链抗体scFv:单链易改造;体内半衰期短,免疫原性低;稳定性低,重轻链之间的分子间作用力弱;功能单一,只能与一种抗原特异性结合;亲和力低,稳定性差,体内清除过快。
域抗体:只由一个CDR 构成。
5.多功能抗体的优点。
答:具有高亲和力性能,由于具有多个结合价,可同时与细胞膜上相邻的两个或多个靶抗原结合,与肿瘤细胞表面抗原的多价结合有利于肿瘤的影像分析及治疗。
6.有应用价值的多功能抗体应具备有哪些特征。
能高选择性,高亲和性地同靶抗原或肿瘤相关抗原结合。
在血循环中,与效应细胞或细胞毒触发分子有较低亲和力。
应为人源化抗体,最大限度地减少人抗鼠蛋白的排斥反应,使得复给药不受限制。
分子应大小适中,既能渗透到肿瘤组织内部,又能保证适当的滞留时间。
7.抗体导向酶-前药疗法中酶和前药有哪些要求?答:(1)对酶的要求:活化酶最好来自非哺乳动物,而人体内不存在相应的类似物,以保证高度的特异性。
酶还能通过化学交联与单抗结合,在较长的一段时间内保持稳定性和活性。
(2)对前药的要求:前药本身应无活性或活性很低,只能被相应的酶活化为高度扩散性的小分子,以实现在肿瘤组织内的广泛分布和杀伤肿瘤细胞。
而且前药还应具有极短的生物半衰期,避免重新进入循环产生非特异性毒性。
第六章酶制药工程1.用微生物生产酶制剂的优点:答:(1)微生物种类多,品种齐全(2)微生物生长繁殖快,生长周期短,产量高(3)培养方法简单,原料来源丰富,价格低廉,经济效益高,并可以通过控制培养条件来提高酶的产量(4)微生物具有较强的适应性和应变能力2.优良的产酶菌株应满足哪些要求:答:1 繁殖快,产酶量高,酶的性质应符合使用要求,最好是产生胞外酶的菌,2 不是致病菌,在系统发育上与病原体无关,也不产生有毒物质,3 产酶性能稳定,不易变异退化,不易感染噬菌体,4 能利用廉价的原料,发酵周期短,易于培养3.固定化酶的优点:答:1 可以较长时间内多次使用,酶的稳定性高。
2 反应后,酶与底物和产物易于分开,易于纯化,产品质量高。
3 反应条件易于控制。
4 酶的利用率高。
5 比水溶性酶更适合于多酶反应。
4.物理吸附法制备固定化酶的优缺点:答:优点:操作简单,可选用不同电荷和不同形状的载体,固定化过程和纯化过程同时实现,酶失活后载体仍可以再生。