食用菌多糖的提取工艺_PPT课件
灵芝多糖的提取纯论文制作PPT

请各位老师批评指正, 谢谢!
2、实验内容
紫外分光光度计
1)多糖含量的测定
根据《中国药典》(2010版)一部灵芝项下规定, 制定标准曲线,得出线性回归方程: y=17.751x+0.0326,R2=0.9991,n=6,线性关系 良好,如下图:
1.2
1 0.8 吸光度A 0.6 0.4 0.2 0 0 0.01 0.02 0.03 多糖浓度mg/ml 0.04 0.05 0.06 0.07 y = 17.75x + 0.032 R² = 0.999
灵芝多糖的提取纯化工艺研究
研究背景
灵芝味甘,性平,归心、肺、肝、肾经。 《中国药典》(2010版)记载灵芝为多孔菌科 真菌赤芝或紫芝的干燥子实体,有补气安神, 止咳平喘的功效,用于心神不宁,失眠心悸, 肺虚咳喘,虚劳短气,不思饮食等。药理试验 证明,灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免 疫力、抗氧自由基、抗衰老等生物活性。 随着生活节奏的加快、生活压力的不断攀 升,人们的健康越来越受到威胁,心脑血管、 癌症等疾病的病发率逐年上升,使得具有提高 免疫力、抗肿瘤等功效的灵芝多糖深受重视。
整体框架
1、前言 灵芝多糖的来源与分类 灵芝多糖的主要成分 灵芝多糖的结构分析 灵芝多糖的提取方法 灵芝多糖的纯化方法 灵芝多糖的测定方法
2、实验内容
1)多糖含量的测定
单因素试验 2)提取工艺研究
正交试验设计 3)纯化工艺研究:正交试验设计 3、讨论 4、结论
提取时间 提取温度 提取次数
1、前言
我国已发现灵芝的品种有90多种,包括赤芝、黄芝、 紫芝、黑芝等,多分布于云、贵、冀、吉、苏等省。 灵芝的化学成分复杂,现已发现灵芝含有灵芝多糖、 三萜类化合物、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量 元素等多种化学成分。
香菇多糖的提取工艺

复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan,LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分,是香菇的主要有效成分, 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator, HDP),临床与药理研究表明,香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分,香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖,主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成,沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基,呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。
香菇多糖提取工艺 ppt课件

8000r/min离心五分钟,取上清液,用旋转蒸发仪浓缩至10~20ml,加入两倍 体积的无水乙醇,进行醇沉。放置过夜后再次离心,留取沉淀物,干燥至恒重。
复合酶浸提法 向香菇处理物的中加 0.1g纤维素酶和0.5g果胶酶,目的是为了酶解细
胞表面结构及细胞间连接物,使其部分糖类物质的溶出。往酶解后的香菇处理物中加入 20 倍体积的蒸馏水,并在40水浴恒温下浸泡80min 。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离 心沉淀,上清液浓缩,乙醇沉淀。
香菇多糖提取工艺
精品资料
• 你怎么称呼老师?
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
香菇多糖提取工艺
thanks for watching
香菇多糖提取工艺
复合酶解,酸与热水相结合浸提法 向香菇处理物中加 0.1g纤维素酶和 0.5g果
胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。加 20倍体 积的水在 40 水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤 液, 再调节 pH分别为 4.5、5.0、5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合 并两次滤液。浓缩。
热水浸提法 向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4h。
放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽 提 30min、 60min、90min ,用4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏 水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤液。
实验一 银耳多糖的制备ppt课件

• 生态环境:生于栎及其他阔叶树腐本上。
• 资源分布:分布于西南及陕西、江苏、安徽、浙江、江西、 福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。
8
• 性状鉴别:子实体由数片至10余片薄而多皱褶的瓣片
1. 银耳能提高肝脏解毒能力,起保肝作用;银耳对老年慢性 支气管炎、肺原性心脏病有一定疗效;
2. 银耳富含维生素D,能防止钙的流失,对生长发育十分有 益;因富含硒等微量元素,它可以增强机体抗肿瘤的免疫 力;
3. 银耳富有天然植物性胶质,加上它的滋阴作用,长期服用 可以润肤,并有祛除脸部黄褐斑、雀斑的功效;
• 2、提取液中加(提取液的)1/5~1/3V氯仿、(提取液的) 1/25 V正丁醇振摇5min,分层,离心(8500 rpm, 7 min), 吸取上清,重复2-3次左右,得到去蛋白的多糖液(约10-20 ml)。
• 3、去蛋白的多糖液加2V乙醇,离心得沉淀,真空干燥,获 得银耳多糖粗品,下次实验备用。
组成,呈菊花形、牡丹花形或绣球形,直径3-15cm,白色 或类黄色,表面光滑,有光泽,基蒂黄褐色。角质,硬而 脆。浸泡水中膨胀,有胶质。气微,味淡。
• 功效 :具有润肺止咳、补肾健脑、健身嫩肤的功效,
擅长补益肺气,可以提高肺组织的防御功能,提高机体的 免疫能力,从而增强体质,达到抗衰老的作用。
9
银耳的作用5Fra bibliotek糖的分类
• 单糖、双糖、多糖
葡萄糖
6
多糖的共同特性
1.分子量一般很大,在几万以上。在水中不能形成 真溶液,有的根本不溶于水,如纤维素。 2.物理性质:有旋光性,但无变旋现象。无甜味。 3.化学性质:无还原性,不能成脎。
香菇多糖的分离与鉴定课件

10
15
吸光度
y = Ax + C,R2 =
0.8
0.6
0.4
0.2
0 0
10 15 20 25 30 35 40 45 Glucose Concentration (μg/mL)
20
25
30
35
香菇多糖
样品 1
吸光度
测得浓度 (μg/mL)
含糖量 %
样品 2
样品 3
含糖量 % = 测得浓度 / 配制浓度 × 100 %
香菇多糖的分离与鉴定
生物物质分离工程
Name Affiliation
Start
Registered
多糖
抗肿瘤
免疫 调节
抗氧化 降血脂
香菇多糖的分离与鉴定
学习目标
(1)掌握对香菇多糖的提取和分离方法 (2)掌握香菇多糖的总糖含量、单糖组成
和相对分子质量的测定方法
学习内容
(1)多糖的提取 (2)多糖的总糖含量测定 (3)多糖的单糖组成测定 (4)多糖的相对分子质量的测定 (5)多糖的酶解
=
%
3
分子量的测定
实验步骤
高效尺寸排阻色谱法分析香菇多糖相对分子质量 ➢ 配制50mmol/L乙酸铵溶液作为流动相,0.45μm膜过滤,超声30min脱气 ➢ 称取5mg香菇多糖,加1mL水,于60℃ 30min充分溶解,0.45μm膜过滤 ➢ 采用尺寸排阻色谱柱TSKgelG5000 与TSKgelG3000串联,连接蒸发光散射仪,
开速率快、混合物易分离、可平行分析多个样品,酶解后的样
品不需要处理即可点样。
致谢
汕头大学教学改革项目(38030210) 广东省教育创新计划项目(18219114)
[教材]酶解法提取食用菌多糖
![[教材]酶解法提取食用菌多糖](https://img.taocdn.com/s3/m/b1c45808a66e58fafab069dc5022aaea998f4103.png)
酶解法提取食用菌多糖食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。
冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。
食用菌多糖提取的原理和方法

食用菌多糖的来源与分布
来源
食用菌多糖主要来源于各种食用菌,如香菇、金针菇、黑木耳等,这些食用菌 在自然界中广泛分布,且具有丰富的多糖含量。
分布
食用菌多糖不仅分布于各种食用菌中,还可通过发酵工程等方法在微生物中获 得。
02
食用菌多糖提取的原理
物理原理
物理原理主要包括机械破碎、 超声波破碎、微波辅助等。这 些方法通过物理手段破坏食用 菌细胞壁,使细胞内的多糖成
特性
食用菌多糖具有较高的分子量、 复杂的分子链结构、良好的水溶 性和生物活性,通常具有抗氧化 、抗炎、抗肿瘤等作用。
食用菌多糖的生物活性与医疗价值
生物活性
食用菌多糖能够调节免疫系统、抗肿 瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性 ,对预防和辅助治疗多种疾病具有潜 在的应用价值。
医疗价值
在医疗领域,食用菌多糖可用于开发 新型药物、功能性食品和保健品,为 人类健康提供更多选择。
分释放出来。
机械破碎是通过机械力量将食 用菌组织破碎,常用的设备有
破碎机、磨碎机等。
超声波破碎是利用超声波的振 动效应破碎细胞,具有高效、 低能耗的优点。
微波辅助是利用微波的加热效 应使细胞内的水分迅速升温产 生压力,从而使细胞壁破裂。
化学原理
化学原理主要是通过酸、碱、盐等化 学试剂的作用,使食用菌细胞壁溶解 或改变其结构,从而释放出多糖成分。
沉淀分离
利用多糖在水中的溶解度差异 ,通过加入沉淀剂使多糖沉淀 析出。
凝胶色谱分离
利用凝胶色谱技术根据多糖分 子量大小进行分离纯化。
干燥与保存
干燥方法
采用真空干燥、冷冻干燥等方法去除多糖中的水分,便于保存和运输。
保存条件
干燥后的多糖应存放在阴凉、干燥、避光的地方,避免受潮和污染。同时要关注 温度和湿度对多糖稳定性的影响。
香菇多糖的复合酶法提取.pptx

离出的一种重要的具有生理 活性的物质。
第1页/共19页
➢ 香菇多糖的作用:
香菇多糖具有抗病毒、 抗肿瘤,调节免疫力、 降血糖、抗氧化等功 能。有关香菇多糖的 研究,特别是结构方 面的研究已引起国内 外学者的高度关注, 并有望成为多糖领域 的研究热点。
第2页/共19页
与其他抗肿瘤药物相 比,香菇多糖几乎无 任何副作用,对胃癌、 鼻咽癌、直肠癌、乳 腺癌和慢性粒细胞白 血病等有抑制和防止 术后微转移的作用, 是目前已知最强的免 疫增强剂之一。
酶法提取由于反应特异性 强、条件温和易获得、提取时 间短、提取率高、绿色节能等 已引起广泛的关注,具有较大 的应用潜力,且随着对酶法技 术的不断研究,酶法与其他技 术如超声波、超高压、微波等 技术的联用也将第17页成/共1为9页 另一个热 点研究方向。
Thቤተ መጻሕፍቲ ባይዱnks
第18页/共19页
1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高
提取率,缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。
第6页/共19页
复合酶提取香菇多糖:
复合酶
纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+ 瓜蛋白酶 性蛋白酶 纤维素酶 纤维素酶
多糖得率(%)12.90
7.02
第3页/共19页
香菇多糖的提取方法:
热水浸提法 稀酸(碱)浸提法 微波法提取香菇多糖 超声波提取法 深层发酵培养提取法 酶解法
第4页/共19页
酶解法:
酶解法就是指在浸提的过程 中加入相应的酶来水解纤维素、 果胶、蛋白质分子等,以使多糖 从细胞中分离出来。
第5页/共19页
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
单一酶法 只用一种酶来辅助提取食用菌多糖
复合酶法 使用两 种以上的酶对多糖进行提取
常用的酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶
优点:可提高多糖的得率,且反应温度较低,提 取时间较短。 缺点:酶的价格较高,易失活,实验过程中温度 控制要求严格且多糖的高级结构可能因酶的作用 而改变。
谢谢!
目录
一.食用菌多糖简介 二.食用菌多糖的应用 三.食用菌多糖提取方法
一.简介
食用菌多糖是由10 个以上的单糖以糖苷键连接 而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实 体和发酵液中。
食用菌多糖种类繁多,一般可将其分为4类:杂 多糖、甘露聚糖、葡聚糖、糖蛋白和多糖肽。
二.应用
2.1食用菌多糖在医学中的应用
优点:选择性好,适合分离热敏物质,溶剂回收简 单,二氧化碳具惰性保护作用、无毒,萃取后无有 害物质残留,可最大限度地保证产品的天然品质。 缺点:需在相当高的压力下操作, 压缩设备投资以 及附加费用较大,对配套设备要求很高, 进一步提 高了投资费用,且在连续化上还存在工艺设备方面 的困难。
3.2化学方法
其优点在于提取温度低、效率高、时间短; 但超声时间不宜过长, 否则可能使多糖发生 断裂而降低多糖的得率。
3.1.2微波法
微波提取的机理:微波透过对微波透明的溶剂, 到达物料内部的维管束和细胞内部,微波转化成分 子的动能而发热,连续的高温使细胞内部压力超过 其空间膨胀的能力,从而导致细胞破裂,胞内有效 成分流出,从而容易进入提取溶剂。
3.2.2酸碱浸提法
酸碱浸提法是通过食用菌细胞与酸碱液的充分 作用,使食用菌细胞基质、细胞壁充分吸水胀破, 致使食用菌多糖充分游离,提高产率。
优点:稀碱液浸提后提取的多糖含量高,既能节省 时间,又能减少原材料及试剂的消耗。 缺点:碱提后的溶液浓度增大,造成过滤困难。
3.3酶解法
食用菌组成复杂,含有多种会影响多糖浸出的 物质,因此在多糖提取过程中适当加入酶制剂有利 于多糖的浸出,在提高溶出效率的同时,为后续提 取液的精制创造有利条件。
优点:简单、高效、安全,具有高选择性。 缺点:此法耗电量较大,微波功率稍高,易出现焦 糊状态, 破坏食用菌多糖。
3.1.3超临界流体萃取技术
超临界CO2流体萃取分离过程是通过调节体系 的压力和温度,来控制溶解度和蒸汽压两个参数进 行分离,故超临界流体萃取综合了溶剂萃取和蒸馏 的两 种功能和特点。
3.2.1热水浸提法
多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶 剂。用热水进行提取,主要是借助于热力作用使 食用菌细胞发生质壁分离,水作为溶剂渗入细胞 壁和细胞质中,溶解液泡中的物质,使其穿过细 胞壁, 扩散到外部溶剂中。
优点:试验设备简单,操作容易, 准确度高,成 本低廉,一次性投入较小,适用于大规模的工业 生产。 缺点:需要的劳动强度大,提取效率低且费时, 产品纯化困难且活性损失较大。
三.提取方法
3.1物理方法
3.1.1超声波法
超声波法提取食用菌多糖是利用超声波的高频 振荡、空化效应和机械剪切效应,通过强化固体微 粒向液体的传质,促进提取剂向固·液界面扩散。另 外,空化作用产生的冲击波和射流可破坏植物细胞 壁和细胞膜结构,并除去部分妨碍酶与底物接触的 物质,从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力。 固体微粒和缔合水分子也被粉碎,变成微小的质团, 从而提高了有效成分溶出的速度,即可提高多糖的 得率。
药理作用:抗肿瘤作用,免疫调节作用,降血 压、血糖、血脂作用,抗氧化作用,抗衰老作用, 抗病毒作用。
目前食用菌多糖作为抗肿瘤、抗突变、抗艾滋 病(HIV)、降血压新药,主要应用于对人体多种致癌 物的抑制。
2.2食Байду номын сангаас菌多糖在保健食品中的应用
食用菌多糖具有良好的排毒养颜、润肺益气、健 脾和胃、补肾利尿、强精护扶、健脑、增寿等保健 功效,还具有降低胆固醇、防止血管硬化、促进儿 童生长发育的作用,具有很大的开发价值,在保健 品、功能性食品等方面都可以得到广泛应用。