高效液相色谱法测定通塞益脑口服液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量
α—细辛醚与β—细辛醚对中枢神经系统作用的比较研究
α—细辛醚与β—细辛醚对中枢神经系统作用的比较研究作者：边洪伟杜志云唐莹来源：《中国科技博览》2013年第09期[摘要]目的：运用行为药理学手段对α-细辛醚与β-细辛醚中枢神经系统作用进行比较。
方法：大鼠自发活动实验、异戊巴比妥钠诱导睡眠实验、小鼠包埋实验、小鼠悬尾实验及大鼠强迫游泳实验观察α-细辛醚与β-细辛醚对受试动物的影响。
结果：在大鼠自发活动实验、异戊巴比妥钠诱导睡眠实验、小鼠包埋实验中α-细辛醚24mg/Kg与β-细辛醚24mg/Kg均产生了明显的镇静催眠及抗焦虑作用，与溶媒对照组相比具有明显差异（P[关键词]α-细辛醚；β-细辛醚；药理学；神经系统作用中图分类号：R338.2 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）09-0267-02菖蒲属（Acorus）系天南星科Araceae 植物，自古以来都是我国中药宝库中颇具价值的一大家族，最早在《神农本草经》中对其就有详细的记载[1]。
菖蒲分类广泛，根据来源产地、形态特征、成分、药性等方面的不同可分为石菖蒲、水菖蒲（白菖蒲）、外菖蒲（小菖蒲）、九节菖蒲、茴香菖蒲、细叶菖蒲（钱菖蒲）等等[2]，虽同属菖蒲，它们既存在相似之处，同时在药用范围、药理作用与临床功效上又很大的差异。
目前，天南星科植物石菖蒲（ Acorus tatarinowii Schott. ）应用最为普遍，被称为菖蒲中的佳品[3]。
石菖蒲又名石蜈蚣、山菖蒲、水剑草、香菖蒲、药菖蒲，味辛性温，具有开窍醒脑、宁神涤痰、祛风解毒、和脾健胃、益智健脑的功效[4]。
自古以来被广泛用于治疗患有癫痫、惊厥、失眠、健忘、痴呆等神经系统疾病的病人，并有很好的疗效。
近年来越来越多的研究发现，石菖蒲的挥发油是其发挥镇静、催眠、抗惊厥作用的最主要物质基础[5]，而实验证实石菖蒲挥发油共含有35种基本活性物质，其中α-细辛醚（0.3%）、β-细辛醚（0.7%）、γ-细辛醚、榄香素等醚系列物是主要的活性成分[6]。
高效液相色谱法测定通塞益脑口服液中α—细辛醚和β—细辛醚的含量
高效液相色谱法测定通塞益脑口服液中α—细辛醚和β—细辛醚的含量目的建立通塞益脑口服液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量测定方法，为生产质量提供保障。
方法采用高效液相色谱法测定，色谱柱为Lichrospher-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（54∶46），流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为257 nm。
结果α-细辛醚在1.248～6.240 μg/mL范围内有良好的线性关系，Y = 85 526X-1.0581（r = 0.9999），β-细辛醚在2.632～13.159 mg/mL范围内有良好的线性关系，Y = 41 727X-0.0433（r = 0.9999），平均回收率分别为99.07%、101.94%，RSD分别为2.15%、2.83%（n = 6）。
结论该方法准确易行，便于通塞盖脑口服液的质量控制。
[Abstract] Objective To establish a method for the determination of α-asarone and β-asarone in Tongsaiyinao Oral liquid，and protect the production of quality. Methods The determination was performed by HPLC method，the chromatographic colum was Lichrospher-C18 column （250 mm×4.6 mm，5 μm），the mobile phase was methanol-0.05% H3PO4 （54∶46），the flow rate was 1.0 mL/min and the temperature of column was 30℃with the detection wavelength of 257 nm. Results The linear correlation of α-asarone was 1.248-6.240 μg/mL，Y = 85 526X-1.0581，r = 0.9999，and the average recovery was 99.07%，RSD was 2.15% （n = 6）. The linear c orrelation of β-asarone was 2.632-13.159 μg/mL，Y = 41 727X-0.0433，r = 0.9999，and the average recovery was 101.94%，RSD was 2.83% （n = 6）. Conclusion The HPLC method is accurate and feasible. It can be used very convenient in quality control.[Key words] α-asarone；β-asarone；HPLC method；Content determination通塞益腦口服液是南京军区南京总医院（以下简称“我院”）的院内制剂，能够活血通络，豁痰开窍，是由石菖蒲、地龙、川芎、延胡索、泽泻和鸡血藤共6味药材组成的复方制剂，用于治疗脑梗死所致的偏瘫无力、口眼歪斜、记忆力减退等[1]，经我院多年临床研究，显示其疗效突出。
HPLC法测定醒脑滴鼻液中β-细辛醚、α-细辛醚的含量
HPLC法测定醒脑滴鼻液中β-细辛醚、α-细辛醚的含量柯雪红;魏刚;方永奇;林双峰【期刊名称】《中药新药与临床药理》【年(卷),期】2002(13)6【摘要】目的测定醒脑滴鼻液中β-细辛醚、α-细辛醚的含量。
方法色谱条件:HypersilDivisionODSC18分析柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水=6∶4(1000mL中加入磷酸二氢钾1.4g、十二烷基磺酸钠1.2g);检测波长:257nm,流速:1.0mL/min。
结果β-细辛醚、α-细辛醚的平均回收率分别为99.38%(RSD=2.25%),96.59%(RSD=2.16%)。
结论方法快速准确,样品处理简便易行,可作为该药的质控指标。
【总页数】2页(P389-390)【关键词】HPLC法;醒脑滴鼻液;β-细辛醚;α-细辛醚;含量测定;高效液相色谱法;中药制剂【作者】柯雪红;魏刚;方永奇;林双峰【作者单位】广州中医药大学第一附属医院实验中心【正文语种】中文【中图分类】R286.0【相关文献】1.HPLC测定石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量 [J], 柯雪红;魏刚;方永奇2.高效液相色谱法测定安徽产石菖蒲中α-细辛醚、β-细辛醚的含量 [J], 陈龙梗;杨青山;杨烁;程旺兴;李欢欢;邵福平;田蕾;田妹;戴玉叶;杨康;3.HPLC法测定宁心益智胶囊中β-细辛醚和α-细辛醚的含量 [J], 郑厚林;陈阳建4.高效液相色谱法测定通塞益脑口服液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量 [J], 乔立业;岩林苹;汪玥;贾佳;苏华;任海祥5.RP-HPLC测定石菖蒲、水菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量 [J], 柯雪红;方永奇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定细辛脑注射液有关物质
第48卷第10期2020年5月广 州 化 工Guangzhou Chemical IndustryVol.48No.10May.2020高效液相色谱法测定细辛脑注射液有关物质李宜檀,钟斯卉,翟新卉,金祥飞,沈卫阳(中国药科大学理学院,江苏 南京 210009)摘 要:建立高效液相色谱法检查细辛脑注射液有关物质㊂色谱柱ZORBAX RX-C 18柱(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(70︓30),检测波长为258nm㊂细辛脑及其有关物质分离良好,杂质β-细辛脑的检测限为0.1ng,检测的平均回收率为100.9%(n =9),RSD =1.1%㊂本方法专属性强㊁灵敏度高㊁准确度好,操作简便,重现性好,可用于细辛脑注射液的有关物质检查㊂关键词:细辛脑注射液;有关物质;液相色谱法;校正因子 中图分类号:O657.7 文献标志码:A 文章编号:1001-9677(2020)10-0098-03第一作者:李宜檀(1994-),女,硕士研究生,专业方向:药物仪器分析与药物质量控制㊂通讯作者:沈卫阳(1970-),男,副教授,从事仪器分析与药物质量控制研究㊂Determination of the Related Substances of Asarone Injection by HPLCLI Yi -tan ,ZHONG Si -hui ,ZHAI Xin -hui ,JIN Xiang -fei ,SHEN Wei -yang(School of Sciences of China Pharmaceutical University,Nanjing Jiangsu 210009,China)Abstract :HPLC method for the determination of the impurities in asarone injection was established.The analysis was performed on a ZORBAX RX-C 18(4.6×250mm,5μm)column with methanol-water (70︓30)as mobile phase and the detection wavelength was 258nm.Asarone and its impurities could be separated completely with an average recovery of 100.9%(n =9),RSD =1.1%.The limit of detection for the impurity β-asarone was 0.1ng.The method has strong specificity,high sensitivity,good accuracy,simple operation and good reproducibility,so it can be used for the determination of related substances of asarone injection.Key words :asarone injection;related substances;HPLC;correction factor细辛脑,又名α-细辛脑或α-细辛醚,化学名为(E)-2,4,5-三甲氧基-1-丙烯基苯,英文名为Asarone㊂自20世纪60年代开始,国内外对菖蒲属植物的有效成分细辛脑进行研究,包括提取㊁合成㊁药理㊁毒理及临床应用研究[1-2],发现细辛脑具有抗炎㊁止咳㊁祛痰㊁平喘等药理作用,在临床中主要用于治疗肺炎㊁支气管哮喘㊁慢性阻塞性肺疾病㊂细辛脑难溶于水,先后被开发成片剂㊁胶囊剂㊁雾化吸入剂㊁前体脂质体㊁注射剂等剂型[3]㊂目前,细辛脑注射液通过静脉注射使用,具有起效快的特点,细辛脑注射液有关物质检查方法的研究报道相对较少[4-7],且细辛脑注射液标准未收载于国外药典,因此开发准确㊁高效㊁简易操作的有关物质检查方法可有助于全面㊁有效控制细辛脑注射液的质量,保证临床用药安全㊂1 材料与仪器1.1 试 剂细辛脑原料药(批号:170501),广西亿康;细辛脑注射液(自制,规格2mL:8mg);细辛脑对照品(批号100298-201203),中国食品药品检定研究院;β-细辛脑对照品(纯度96%,批号:1-NYL -34-1),TRC;甲醇(AR,批号021*******),国药集团;娃哈哈纯净水㊂1.2 仪 器LC-2010CHT 高效液相色谱仪,日本岛津制作所;Agilent 1260高效液相色谱仪,美国安捷伦公司;BT25S 电子分析天平,德国赛多利斯科学仪器有限公司;XW-80A 涡旋混合仪,上海青浦沪西仪器厂㊂2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱:ZORBAX RX-C 18(4.6×250mm,5μm);进样量:20μL;流速:1mL /min;柱温:30℃;检测波长:258nm;流动相为甲醇-水(70︓30)㊂2.2 系统适用性取细辛脑20mg,加甲醇适量溶解后,用流动相稀释制成每1mL 中含0.2mg 的溶液㊂取适量,置紫外灯(365nm)下照射30min 后,作为系统适用性溶液㊂取系统适用性溶液20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,杂质β-细辛脑峰(相对保留时间为0.9)与细辛脑峰间的分离度为2.9㊂2.3 专属性取细辛脑注射液0.5mL,置10mL 量瓶中,分别进行以下第48卷第10期李宜檀,等:高效液相色谱法测定细辛脑注射液有关物质99 试验:①酸降解试验:加入0.5mol /L 的盐酸溶液破坏1h;②碱降解试验:加入0.5mol /L 的氢氧化钠溶液破坏1h;③氧化降解试验:加入30%过氧化氢溶液破坏1h;④高温降解试验:加入流动相,置100℃水浴3h;⑤光照降解试验:加入流动相,置4500lux 强光照射箱中照射1h㊂随行开展未降解试验作为平行对照㊂降解完毕,溶液放至室温,加流动相稀释至刻度㊂取上述降解样品溶液各20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图(见图1)㊂结果表明,α-细辛脑在酸性㊁氧化及光照条件下不稳定,有关物质的量显著增加,但各杂质峰均与α-细辛脑完全分离,峰纯度满足要求;α-细辛脑在高温及碱性条件下较稳定㊂图1 专属性试验HPLC 色谱图Fig.1 The HPLC chromatograms of specificity test2.4 线性与校正因子α-细辛脑线性㊂取α-细辛脑对照品25mg,精密称定,加甲醇适量溶解,加流动相稀释至刻度,配制成浓度为1mg /mL 的储备液㊂精密量取储备液适量,用流动相稀释制成α-细辛脑为0.1000㊁0.2001㊁0.5002㊁1.000㊁2.001㊁3.001㊁4.002μg/mL 的溶液㊂表1 α-细辛脑和β-细辛脑的线性范围与校正因子Table 1 Linear ranges and relative response factor ofα-asarone and β-asarone成分线性范围/(μg /mL)线性方程相关系数r 校正因子α-细辛脑0.1000~4.002A =84691.4*C-735.40.9997/β-细辛脑0.1003~4.014A =55189.4*C-617.40.99961.5β-细辛脑线性㊂取β-细辛脑对照品25mg,精密称定,加甲醇适量溶解,加流动相稀释至刻度,配制成浓度为1mg /mL 的储备液㊂精密量取储备液适量,用流动相稀释制成β-细辛脑为0.1003㊁0.2007㊁0.5017㊁1.003㊁2.007㊁3.010㊁4.014μg/mL 的溶液㊂取上述线性样品溶液各20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,以质量浓度C 为横坐标,峰面积A 为纵坐标进行线性回归,得线性方程,并以标准曲线法[8]计算杂质β-细辛脑相对于α-细辛脑的校正因子,结果见表1㊂2.5 精密度㊁重复性进样精密度㊂取 2.4”线性项下2.007μg /mL 的溶液连续进样6针,RSD(n =6)为0.62%,保留时间RSD(n =6)为0.21%㊂重复性㊂照 3”有关物质检查项下配制分别供试品溶液和对照溶液各6份,在上述色谱条件下进样,测定6份供试品溶液中有关物质的含量,按照加校正因子的主成分高低浓度自身对照法计算杂质含量,试验结果见表2,该方法重复性良好㊂表2 重复性结果Table 2 The results of repeatabilityNo.1β-细辛脑其它杂质杂质总量10.1060.02830.13420.1050.02820.13330.1030.02800.13140.1040.02710.13150.1040.02790.13160.1050.02810.133RSD /%1.21.61.22.6 检测限㊁定量限取 2.4”线性项下最低浓度溶液经稀释法测定,β-细辛脑的定量限为0.4ng,最低检出限为0.1ng㊂100 广 州 化 工2020年5月2.7 回收率采用杂质对照品加样回收试验考察方法的准确度㊂取β-细辛脑对照品20mg,精密称定,稀释配制成浓度为19.97μg /mL 的杂质储备液㊂取杂质储备液1mL,置10mL 量瓶中,用流动相稀释制至刻度,摇匀,作为β-细辛脑对照品溶液㊂取细辛脑注射液0.5mL,置10mL 量瓶中,共10份,其中一份用流动相稀释制至刻度,摇匀,作为回收率供试品溶液;其余9份分别加杂质储备液0.5mL㊁1.0mL㊁1.5mL 各三份,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得回收率加样供试品溶液㊂取回收率供试品溶液㊁回收率加样供试品溶液㊁β-细辛脑对照品溶液各20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法测定并计算回收率㊂结果见表3,杂质β-细辛脑的回收率(n =9)为:100.9%;RSD 为:1.1%,可见该方法准确度良好㊂表3 回收率结果Table 3 The results of accuracyNo.加入量/μg 测得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD /%(n =9)50%-150%-250%-3100%-1100%-2100%-3150%-1150%-2150%-30.99851.9972.9960.999599.91.006699.20.9916100.71.9694101.41.9890100.41.9930100.22.9396101.92.9483101.62.9196102.6100.91.12.8 稳定性取 2.5”重复性项下的供试品溶液和对照溶液,分别于0㊁2㊁4㊁8㊁12㊁24h 进样,测得β-细辛脑及杂质总量,RSD 分别为1.5%㊁1.9%,表明供试品溶液在24h 内稳定性良好㊂2.9 耐用性使用另一台液相色谱仪(LC -2010CHT),另一根色谱柱CAPCELL PAK C 18(4.6mm×250mm,5μm),依建立的色谱方法,进行细辛脑注射液的有关物质检查,细辛脑与有关物质的分离度为2.9,检出的杂质个数均为2个,杂质β-细辛脑及其它杂质的量基本一致㊂3 有关物质检查表4 细辛脑注射液有关物质检查结果Table 4 Results of related substances of asarone injection批号β-细辛脑/%其它杂质/%杂质总量/%1910080.1060.0330.1391910090.0840.0190.1031910100.0970.0210.118 取细辛脑注射液0.5mL,用流动相稀释制成每1mL 中含0.2mg 的溶液,作为供试品溶液㊂精密量取供试品溶液1.0mL,用流动相稀释100倍,作为对照溶液㊂精密量取对照溶液1.0mL,用流动相稀释20倍,作为灵敏度溶液㊂取灵敏度溶液20μL,注入液相色谱仪,S /N 大于10,取供试品溶液㊁对照溶液各20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍,按照加校正因子的主成分高低浓度自身对照法计算杂质含量㊂经检验,3批自制细辛脑注射液中有关物质检查结果见表4㊂4 讨 论4.1 流动相选择反相色谱法的有机相主要为甲醇与乙腈,本实验对比了这两种溶剂对峰形㊁分离度㊁理论板数㊁拖尾因子的影响,发现甲醇-水(70︓30)㊁乙腈-水(60︓40)时均能获得较好的分离度且峰形对称性良好,但乙腈-水体系出峰较甲醇-水体系晚㊂从经济㊁溶剂毒性方面考虑,选择甲醇-水(70︓30)体系为流动相㊂4.2 波长选择细辛脑在波长258nm 和313nm 处有最大吸收,其主要杂质β-细辛脑在252nm 和302nm 处有最大吸收㊂根据方法验证结果,选择258nm 为检测波长,能有效检测杂质的含量,且检测灵敏度更高㊂专属性试验结果表明,本品不具有光稳定性,在光照条件下,细辛脑易转化成β-细辛脑,杂质量增加,因此试验过程应进行避光操作㊂5 结 论本方法用于检查细辛脑注射液的有关物质,其操作简便,准确灵敏,重现性好,经方法学验证符合细辛脑注射液有关物质检查要求,可用于细辛脑注射液质量控制㊂参考文献[1] 童光智,杨玉.α-细辛脑的研究进展[J].江苏医药,1990(12):673-674.[2] 张梦林,林娜,邓强,等.细辛脑的临床前毒性研究进展[J].毒理学杂志,2019(2):161-165.[3] 赵李宏,吴建梅,武凤兰.α-细辛脑10年研究概述[J].中国中药杂志,2007(7):562-565.[4] 张婷,崔颖,徐平声.高效液相色谱法测定细辛脑注射液的含量及有关物质[J].广东药学院学报,2006(5):499-500.[5] 李少刚,郭欢,郭小青.HPLC 法检测细辛脑注射液的有关物质[J].临床医药实践杂志,2008(10):850-851.[6] 贾树娟.HPLC 测定细辛脑注射液有关物质的测定[J].中国医药指南,2013,11(16):114-115.[7] 朱蓉,陈红,李欣.细辛脑注射液有关物质检测方法[J].医药导报,2015,34(s1):113-115.[8] 许明哲,黄宝斌,杨青云,等.分析方法验证㊁转移和确认概念解析[J].药物分析杂志,2015,16(1):168-175.。
【推荐下载】高效液相色谱法测定安眠补脑口服液
察。取本品(批号20050306)6份，按标准草案正文所述方法，制成供试液，依法测定含
4
[键入文字]
量，结果相对标准偏差2.0%，表明本方法重复性良好。结果见表4。表4重复性实
验结果
2.4专属性实验按一个处方量配制缺制何首乌药材的阴性样品，吸取上述溶液5l，
样量为2l时，2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品的色谱峰面积约
为基线噪音的3倍，故最小检出量为2.024g/ml210-3ml=4.04810-3g，表明高效液相
色谱仪测定2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷灵敏度较高。
2.6准确度采用加样回收法，取已知含量样品(20050306，含量平均值为0.2971
方法，选择乙腈-水(15∶85)作为流动相，对2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡
萄糖苷对照品分离较好，此条件下2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷与
其它组分均能达到基线分离。
不同品牌色谱柱测定结果：分别选用HypersilC18(4.6mm250mm，10m，大连依利
特制造)和AzchRoMC18(4.6mm250mm，5m)配制一定量2，3，5，4，-四羟基二苯
乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品溶液，分别进样10l，色谱峰对称性较好，测定理论塔板
数，根据测定结果，理论板数按2，3，5，4，-四Байду номын сангаас基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷峰计
3
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算，应不低于4 000。见表1。表1理论塔板数测定结果
注入高效液相色谱仪中测定，可得缺制何首乌阴性样品色谱图，与供试品及对照品溶
高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中β-细辛醚的含量
参杞益脑胶囊具有补益肝 肾 ， 益气养血 ， 健脑益智 等功 能， 适 １５ ０Ｗ） ０ 。 用于肝 肾不足 ， 脑神失养所 致 的健忘 ， 眠 ， 失 多梦 ， 记忆力 减退等 甲醇为色谱纯 ， 水为 超纯 水 ， 其它 试剂 均为 分析 纯 。Ｂ一细 症 。其处方来源 于国家药 品监督管理局标准 ， 由枸杞子 、 黄精 、 辛醚对照品 （ 自 广州 中医药大学第一 附属 医院实验 中心 ， 面积 归 按 首乌 、 石菖蒲 、 猪脑粉 、 、 蓉 、 金 、 志 （ ） 骨碎补 、 荷梗 肉苁 郁 远 蜜 、 紫 化法测定 ， 含量 为 ９ ．４ 。参杞 益脑胶囊 （ 号 ：０ ６ ７ １ ８９ ％） 批 ２ ００ ０ ， ０ ００ ０ ０ ３， ０ ０ ４， ０ ６ ７ ０６ ０ ０６ ０ 苏子 （ 、 炒） 人参 、 鹿茸 等 １ ３味中药组 成 。现行 质 量标准 中未 收 ２０ ６ ７ ２，２ ０６ ７０ ２０ ６ ７０ ２ ０ ０ ０５，２ ０ ０８ １，２ ０ ０８ ２， 载含量测定项 目， 目前仅有报道测定参杞益脑胶囊 中毛蕊花糖苷 ２０ ００ ，０ ６ ８４ ２ ０ ００ ０ ６８ ３ ２ ００ ０ ，０ ６ ８ ５深圳 万基 药业 有限公 司生 产并 提 的含量作为 肉苁 蓉 的质量 控制 … 。石 菖蒲 具有 化湿 开 胃 ， 窍 供） 不含 石菖蒲的阴性 样 品（ 圳万 基药 业有 限公 司生 产并 提 开 ； 深 豁痰 ， 醒神 益脑 的功能 ， 为其 主药 之一 。而 ｐ一细辛 醚为石 菖 供） 。 蒲的主要活性成分 之一 ｜ ， ３ 其在 市售 的石 菖蒲 挥 发油 中的含 量 ２ 方 法 与 结 果 占 ８ ．５ ３ ７ ％ 。本实验采用 高效 液相 色谱法 测定参 杞益 脑胶 囊 ２ １ 色谱条件 色谱柱 ： ｈ ｒ ｏＢ ＳＨ ｐｒｉＣＲ２ ０ｍ ４ ６ ． Ｔ ｅ Ｄ ｙ ｅｓ １ ５ ｍ ｘ ． ｍ ｌ （ 中 ￥ 细辛醚的含量 ， 一 为参杞 益脑 胶囊 中石菖 蒲 的含量提 供 了质 ｍ ５ ｍ） 流动 相 ： ｍ， ； 甲醇 一０ １ 冰 醋酸溶 液 （ ０ ０ ； 温 ： ．％ ６ ：４ ） 柱 量控 制 方 法 。 ３ Ｃ； ５ ｏ 流速 １０ｍ ・ ｉ ～； ． ｌ ｒ ｎ 检测波长为 ２ ７ｎ 进样体积 ２ ｌ ａ ５ ｍ， ０ 。 １ 仪 器 与 试 药 在上 述色谱条件下 ｐ一 细辛 醚与其它组分 能达 到基线分 离 ， 色谱 Ａ ｉ ｎ １０ ｇ ｅｔ １０高效液相色谱仪 ， ｌ 配置 Ｇ ３ １ １ １ Ａ四元泵 ； １ １Ａ 峰的理论 板数为 ３ ３ 并且石菖蒲 阴性样 品无干扰 ， Ｇ ３３ １９， 色谱 图见 图
高效液相色谱法测定安眠补脑口服液中2,3,5,4,-四羟
一、前言近年来，睡眠不足、焦虑情绪常见，因此，安眠药作为一种治疗手段，被广泛应用于临床。
然而，安眠药长期使用会产生一系列副作用，如依赖性、耐药性等，因此需要对安眠药进行检测和控制。
2，3，5，4，-四羟基苯甲酸酯（THPA）作为安眠药中的主要成分之一，成为安眠药中的一项重要检测指标之一。
本文主要介绍高效液相色谱法检测安眠补脑口服液中2，3，5，4，-四羟基苯甲酸酯的方法。
二、实验部分2.1 仪器设备高效液相色谱仪，紫外检测器，注射器，色谱柱等。
2.2 试剂和药品2，3，5，4，-四羟基苯甲酸酯标准品（purity≥98%，Sigma-Aldrich Chemical Co.），安眠补脑口服液样品。
2.3 标准曲线的绘制将标准品的10 mg溶于90 mL的甲醇中，放入超声波中超声处理5 min。
然后将溶液置于室温静置半小时，通过0.22 μm的微孔滤膜进行过滤，得到THPA标准品的1 mg/mL的溶液。
然后依照不同组别浓度分别用乙酸钠溶液和甲醇制成一定浓度的标准品溶液，分别称取0.2 mL 、0.4 mL 、0.6 mL 、0.8 mL 、1 mL 的标准品溶液加入5 mL的10 mL瓶中，用甲醇调稀至10 mL，按其质量浓度绘制标准曲线。
2.4 样品的制备将安眠补脑口服液进行稀释，得到1 g/ mL的样品溶液。
在质量浓度较高的情况下，继续进行稀释，至符合检测范围内。
2.5 色谱条件色谱柱：C18色谱柱，250 mm ×4.6 mm，5μm；移动相：甲醇 - 乙酸钠溶液（pH ＝4，83/17）；流速：1.0 mL/min；检测波长：273 nm；进样量：20 μL。
2.6 操作步骤（1）开机预热开机预热15 min，建议在打开仪器前进行温度平衡。
（2）洗涤柱根据操作技术，先用纯甲醇洗干净色谱柱，净化柱子。
然后，用移动相进行洗涤，保证柱子内外均匀分布，避免空点现象。
（3）进行检测将样品注入注射器中，按压注入按钮将样品注入色谱仪中。
高效液相色谱-荧光检测法同时测定香精香料中4种禁限用添加剂
高效液相色谱-荧光检测法同时测定香精香料中4种禁限用添加剂李韵;汪宏毅;廖晓玲;肖少红;陈慧【期刊名称】《烟草科技》【年(卷),期】2014(000)012【摘要】建立了一种测定烟用香精香料中芝麻酚、β-萘酚、β-细辛醚和黄樟素4种禁限用添加剂的高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FD）方法。
样品用乙醇振荡萃取，提取液过0.45μm有机相滤膜后进行HPLC-FD分析。
结果表明：①以乙腈-水为流动相，在流速1.0 mL/min下梯度洗脱，4种添加剂在8 min内得到了良好分离；在0.02~10μg/mL线性范围内，方法的定性检出限为0.01~0.09 mg/kg （S/N=3）。
回收率为86.4%~112.1%，相对标准偏差（RSD）小于10%。
②19个烟用香精香料样品中均无禁限用成分检出，说明烟草行业在香精香料添加剂使用方面管理非常严格。
该方法操作简单快捷、重现性好，适用于烟用香精香料中芝麻酚、β-萘酚、β-细辛醚和黄樟素的同时测定。
【总页数】4页(P32-35)【作者】李韵;汪宏毅;廖晓玲;肖少红;陈慧【作者单位】湖北省烟草产品质量监督检验站，武汉市宝丰路6号 430030;湖北省烟草产品质量监督检验站，武汉市宝丰路6号 430030;湖北省烟草产品质量监督检验站，武汉市宝丰路6号 430030;湖北省烟草产品质量监督检验站，武汉市宝丰路6号 430030;湖北省烟草产品质量监督检验站，武汉市宝丰路6号430030【正文语种】中文【中图分类】TS426;TQ657+.4【相关文献】1.高效液相色谱法同时测定果蔬汁饮料中20种禁限用食品添加剂 [J], 刘胜男;张国庆;王素方;郭保宝;权明珠;石志格2.高效液相色谱法同时测定果蔬汁饮料中20种禁限用食品添加剂 [J], 刘胜男;张国庆;王素方;郭保宝;权明珠;石志格;3.超高效液相色谱法同时测定香精香料中14种禁限用物质 [J], 李晶;徐济仓;李雪梅;周建光;朱岩;缪明明4.新型基质固相分散萃取净化-高效液相色谱荧光检测法测定香精香料中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2 [J], 刘欣;杨叶昆;陈建华;李雪梅;米其利;杨光宇;孔维松;李晶5.微波萃取-高效液相色谱荧光检测法测定食品包装用纸中11种荧光增白剂 [J], 周良春;马俊辉;张晓飞;文彬羽;李双琦;杨婷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定细辛脑注射液的含量及有关物质
高效液相色谱法测定细辛脑注射液的含量及有关物质
张婷;崔颖;徐平声
【期刊名称】《广东药学院学报》
【年(卷),期】2006(22)5
【摘要】目的建立测定细辛脑注射液的含量及有关物质的高效液相色谱法.方法
采用Kromasil C18柱,以甲醇-水(体积比80∶20)为流动相,检测波长313 nm.结果本色谱条件能分离细辛脑及有关物质;在2～80 mg·L-1浓度范围内,细辛脑的峰面积与其浓度呈线性关系,方法平均回收率为100.2%,RSD为0.37%.结论本法可用于细辛脑注射液的含量及有关物质测定.
【总页数】2页(P499-500)
【作者】张婷;崔颖;徐平声
【作者单位】中南大学湘雅医院,药剂科,湖南,长沙,410008;天津武警医学院,药学教研室,天津,300162;中南大学湘雅医院,药剂科,湖南,长沙,410008
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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福建高效液相色谱仪测定血液血清中细辛脑浓度
高效液相色谱仪测定血液血清中细辛脑浓度液相色谱法《高效液相色谱仪测定血液血清中细辛脑浓度液相色谱法》由南京科捷为您整理提供，此资料仅供参考：1、高效液相色谱仪测定血液血清中细辛脑浓度实验方法：1。
1 试剂与仪器细辛脑对照品(桂林制药二厂提供，批号：981006)；细辛脑片剂1、细辛脑片剂2(均由湖北省药检专科学校研制，批号：20000301、20000405)；细辛脑注射液(桂林制药二厂，批号：981006)；甲醇(优级纯，北京化工厂)；其它试剂均为分析纯。
LC600型高效液相色谱(HPLC)仪、RF 535型荧光检测器(日本Shimadzn)。
LC600高效液相色谱仪(等度配置)P600宝石恒流泵1台UV600紫外检测器1台7725i六通进样阀1只进口C18柱150x4.6 5u 1根WS600色谱工作站1套1。
2 色谱条件色谱柱：Shimpack CLC ODS(150mm×6.0mm。
10μm)：保护柱：Shimpack G ODS(10mm×4.0mm，10μm)；流动相：甲醇-水(80：20)；流速：lml／min；柱温：40℃；荧光激发波长：265nm，发射波长：365nm。
1。
3 血样处理取血清0.2ml，加入2.5ml二氯甲烷，旋涡振荡2min，再以2O00g离心10min，下层液全部转移至另一尖底试管中，置于35℃水浴锅中，并用氮气挥干。
残留物用50μl甲醇溶解后，取20μl进样。
1。
4 标准曲线的制备精密称取细辛脑对照品50mg，置于5Oml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度为lmg／ml的标准贮备液。
临用前再以甲醇稀释成一定浓度的系列标准工作溶液，分别精密量取适量，加入0.2ml空白人血清中，配制成浓度为1、5、25、50、100、200ng／ml的标准血清，按照“1。
3”项下方法进行处理。
1。
5 计算以外标法计算细辛脑含量。
2、高效液相色谱仪测定血液血清中细辛脑浓度结果：2。
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【 摘要】 目的 建立通塞益脑 口服液中 ０ Ｌ 一 细辛醚和 ｐ 一 细辛醚的含量测定方法 ， 为生产质量提供保障。 方法 采用高 效液相色谱法测定 ， 色谱柱 为 Ｌ ｉ ｃ ｈ ｒ ｏ ｓ ｐ ｈ ｅ ｒ — Ｃ 柱 （ ２ ５ ０ ｍ ｍ ｘ ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ Ｉ ｘ ｍ） ， 流动相为 甲醇一 ０ ． ０ ５ ％磷酸 溶液 （ ５ ４ ：
７ ２ ７ Ｘ 一 ０ ． ０ ４ ３ ３ （ ｒ ＝０ ． ９ ９ ９ ９ ） ， 平均回收率分别为 ９ ９ ． ０ ７ ％、 １ ０ １ ． ９ ４ ％， Ｒ Ｓ Ｄ分别为 ２ ． １ ５ ％、 ２ ． ８ ３ ％（ ｎ＝６ ） 。 结论 该方法
准确 易行 ， 便 于通 塞 盖脑 口服液 的质量 控制 。
［ 关 键 词】 一 细辛 醚 ； １ ３ 一 细 辛醚 ； 高效液 相 色谱 法 ； 含 量 测定 【 中图 分类 号】 Ｒ９ ２ ７ 【 文献 标识 码】 Ａ 【 文 章编 号】１ ６ ７ ３ — ７ ２ １ ０ （ ２ ０ １ ５ ） ｏ ７ （ ｃ ） 一 ０ ０ ０ ４ — ０ ４
２ ５ ７ Ｂ ｉ ｎ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｔ － ａ ｓ ａ ｒ ｏ ｎ ｅ ｗａ ｓ １ ． ２ ４ ８ — ６ ． ２ ４ ０ Ｉ ｘ ｇ ／ ｍＬ ，Ｙ ＝ ８ ５ ５ ２ ６ Ｘ－１ ． ０ ５ ８ １ ，ｒ＝ ０． ９ ９ ９ ９ ，ａ ｎ ｄ
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论
著 ・
中 国 医 药 导 报２ ０ １ ５ 年 ７ 月 第１ ２ 卷 第２ １ 期
高 效 液相 色 谱 法测 定通 塞 益 脑 口服 液 中 细辛醚 和 １ ３ 一细辛醚 的含量
一
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华
任 海祥
南京军区南京总医院制剂科 ， 南京
２ １ ０ ０ ０ ２
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