药残检测原理
农药残留检测流程(酶抑制法)
农药残留检测流程【简介】农药残留是指在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品中的现象。
有机磷和氨基甲酸酯类农药中存在着部分高毒和剧毒品种，如果被施用于生长期较短、连续采收的蔬菜，则很难避免因残留量超标而导致人畜中毒。
农药进入粮食、蔬菜、水果中，造成食物污染，危害人的健康。
由于农药残留对人和生物危害很大，各国对农药的施用都进行严格的管理，并对食品中农药残留容许量作了规定。
【检测原理】有机磷或氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用，通过测定该酶的活性被抑制的程度即可知样品中含有农药的残留情况。
计算公式：抑制率(%)=(ΔA0-ΔA i)/ ΔA0×100%【检测对象】粮食、蔬菜、水果等【试剂配制】①缓冲液：将缓冲液试剂袋中的试剂倒出，溶于500mL 蒸馏水中，溶解、混匀即可。
②底物：往标注为底物的瓶中加入13mL蒸馏水。
2~4ºC环境下冷藏保存。
③显色剂：无需配制放入冰箱冷藏（2~4ºC），切勿冷冻结冰。
④酶试剂：酶试剂已配成溶液可直接使用。
平常要在2~4ºC环境条件下冷藏保存！【操作步骤】1.样品前处理：(1) ①植株：称取2.0g样品（叶菜剪成宽度为1厘米的菜样，块根菜取1厘米左右的表皮样品）放入三角瓶中，加入10mL缓冲液后，振荡提取2分钟；②茶叶：称取0.5g茶叶样品，加入5ml丙酮，振荡提取5分钟；取0.2mL上述丙酮溶液，40~50℃水浴蒸干；加入2.5mL缓冲液，振荡2分钟；[备注]：葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质，易产生假阳性。
处理这类样品时，可采取整株浸提，避免次生物物质干扰。
2.检测样品的制备：(1) 空白对照液:①取酶100μL，缓冲液2.5mL，加入专用反应瓶中，再加入显色剂100μL，静置15分钟（35度恒温更佳）。
②加入底物100μL；③摇匀后立即测试。
酶抑制率法测农药残留的原理
酶抑制率法测农药残留的原理
酶抑制率法是一种常见的测定农药残留的方法。
其原理是基于农药对生物体内酶的影响，利用酶抑制率来测定农药残留的含量。
酶抑制率法是通过测定在一定条件下酶的活性水平的变化，来判断农药残留量的多少。
这种方法是利用农药对农作物体内的酶活性的影响来测定农药残留量。
主要考察的是农药
对某一种特定酶的影响，常常是一些代谢酶，如酯酶、氧化酶、脱羧酶等。
在酶抑制率实
验中，将待测样品添加到适当的酶溶液中，观察酶活性的改变来判断样品中农药残留的含量。
一般来说，酶活性与待测样品中的农药残留量呈反比关系。
对于酶抑制率法的操作，首先应该选择一种合适的酶作为检测对象。
其次，应该根据
酶活性的变化来绘制抑制曲线，以确定待测样品中农药残留的含量。
最后，应该对结果进
行计算和解析，以得出准确的检测结果。
使用酶抑制率法测定农药残留的优点是仪器简单易用，可以快速获得结果，而且可以
同时检测多种残留物。
同时，酶抑制率法也有一些缺点，比如与实际残留量的相关性不高，容易受到环境等因素的影响。
在实际应用中，酶抑制率法通常与其他检测方法结合使用，以提高检测的准确性和可
靠性。
通过采取综合测定的方法，可以更加全面地了解农药残留状况，并针对性地进行农
药残留的控制和预防。
蔬菜农药残留快速检测技术
蔬菜农药残留快速检测基础知识一、蔬菜农药残留酶抑制法检测原理农残速测仪检测原理是酶抑制法，在必然条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
在正常情况下，酶催化代谢产物水解，其水解产物与显色剂反映，产生黄色物质，用分光光度计在410纳米处测定吸光度随时间的转变值，计算出抑制率，通过抑制率的大小可以判断样品中是不是有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
二、农药残留速测法检测对象一、有机磷类农药包括：甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。
二、氨基甲酸酯类农药包括：叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威（呋喃丹）、异丙威、灭多威等。
三、农药残留速测法依据的标准中华人民共和国国家标准GB/—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布四、检测方式一、准备阶段试剂或条件发生转变及时间距离比较长时，应重做。
①开机预热15分钟。
②仪器调0。
③仪器调100。
④制作对照。
第①、②、③步在天天利用前必需做，在改换新一瓶试剂时也必需做。
二、对照①在干净的试管顶用移液管加入提取液。
②用移液器提取的酶，加入到试管中。
③用移液器提取的显色剂，加入到试管中。
④适度晃动试管，使液体混合均匀，25℃左右的温度放置15分钟。
⑤15分钟后，用移液器提取的底物，加入到试管中，晃动试管，使液体混合均匀，马上倒入比色皿中，放入仪器1通道，按启动键开始检测。
⑥时间到后显示对照结果，一般对照值应在30以上，按Y保留，对照结束。
3、样品检测液①用天平称取表面干净蔬菜或水果1g剪成1cm左右的方块，放入小烧杯中。
②用移液器提取5ml的提取液用振荡器震荡2分钟。
③将烧杯中的液体用移液器提取的上清液到试管中，为检测液。
《药残检测原理》课件
利用酶催化反应、免疫放大等技术，实现对药物残留信号的放大，提高检测的灵敏度。
信号放大技术
采用固相萃取、免疫亲和层析等技术，实现对复杂样品中药物残留的选择性富集和净化，降低干扰物质的影响，提高检测的特异性。
选择性富集和净化样品
03
便携式与移动式检测设备
开发便携式和移动式药残检测设备，方便现场快速检测和实时监控。
企业责任意识强
企业高度重视产品质量安全，在发现问题后立即启动应急预案，主动召回问题产品，同时加强生产环节的卫生管理，确保产品质量安全。
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抗癌药物残留问题突
抗癌药物在杀死癌细胞的同时，也可能在患者体内残留，对患者的肝、肾等器官造成损害，甚至引发二次癌症。某医院在对患者进行药物残留检测时，发现了多种抗癌药物的残留。
检测技术要求高
抗癌药物残留检测需要采用高灵敏度的检测技术，如质谱法、色谱法等，对药物残留进行准确的定性定量分析，确保检测结果的可靠性。
医护人员责任重大
医护人员在对患者进行治疗和护理过程中，需要严格遵守操作规程，确保患者用药安全，同时对患者进行必要的药物残留检测，及时发现和处理药物残留问题。
THANK YOU
总结词
药残是指在种植、养殖、加工等环节中因不合理使用或非法使用药物而残留在食品中的药物残留物。这些残留物可能对人体健康造成危害，因此需要进行检测和控制。药残根据来源和性质的不同，可以分为农药残留、兽药残留、食品添加剂残留等。
详细描述
总结词：药残检测方法主要包括化学分析法、免疫分析法、色谱分析法等。这些方法各有优缺点，应根据具体情况选择合适的检测方法。
《药残检测原理》ppt课件
农药残留检测原理
农药残留检测原理
农药残留检测原理指的是通过科学的方法和技术，检测农产品和环境中农药残留的含量和种类。
其主要基于以下几个原理：
1.色谱分析原理：农药残留检测主要采用气相色谱(GC)和液相
色谱(LC)技术进行分析。
色谱技术通过分离和检测农药残留物的特征峰，来确定农药种类和浓度。
2.质谱分析原理：质谱技术可以对农药分子进行精确的分析和
鉴定。
农药残留检测中常用的质谱技术包括气相质谱(GC-MS)
和液相质谱(LC-MS)。
质谱技术能够提供农药分子的准确质量，从而确定农药的种类和含量。
3.光谱分析原理：光谱技术通过测量样品对辐射的吸收、散射
或荧光等光学性质来确定农药的存在和浓度。
常用的光谱技术有紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱(FS)等。
4.生物传感技术：生物传感技术利用生物分子与农药残留物之
间的相互作用，来实现农药残留物的快速检测。
常见的生物传感技术包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫荧光分析法(IFMA)等。
5.电化学分析原理：电化学技术通过测定样品中农药分子的电
化学行为来检测农药残留。
常用的电化学技术有循环伏安法(CV)和常规极谱法(DP)等。
综合利用以上不同的原理和技术，农药残留检测可以提供准确、快速、灵敏和可靠的结果，确保食品安全和环境保护。
农药残留检测原理
农药残留检测原理
农药残留检测的原理是基于化学分析技术。
主要包括以下几个步骤：
1. 采样：在实际农田或农产品中，随机采集一定数量的样品，以确保结果的可靠性和代表性。
2. 样品准备：将采集到的样品进行处理，以提取样品中的农药残留物。
这一步骤通常包括样品研磨、浸提、萃取等。
3. 提取液净化：由于样品中可能存在其他复杂的化合物，需要对提取液进行净化处理以去除干扰物质，以保证测定的准确性。
4. 分析方法选择：根据具体的农药成分和样品特点，选择适合的分析方法。
常用的分析方法包括气相色谱-质谱联用（GC-MS）、高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）等。
5. 测定农药残留：使用选择的分析方法进行测定。
根据农药的特性，可以进行定性或定量的检测。
对于定性检测，比对样品中目标农药的特征峰，确认是否存在农药残留。
对于定量检测，将测得的峰面积或峰高与标准曲线进行比对，以确定农药残留量。
6. 数据分析与结果表达：根据分析结果，计算出农产品中的农药残留含量。
常用的表示方法包括质量浓度（mg/kg）、检出限、加标回收率等。
通过以上步骤，可以准确地检测农产品中的农药残留，为确保食品安全和环境保护提供科学依据。
农药残留检测仪检测农药残留的原理及方法
农药残留检测仪检测农药残留的原理及方法农药残留检测仪是一种用于检测农产品和环境中农药残留物的仪器设备。
它的工作原理基于常见的物理、化学和生物学分析技术，通常包括样品制备、提取、测定和数据处理等步骤。
以下是农药残留检测仪的原理及方法的详细介绍。
1.原理：-物理分析：常用的物理分析方法包括质谱法、傅里叶变换红外光谱法等。
质谱法主要通过质量光谱器对样品进行分析，可以鉴定农药的种类和含量；傅里叶变换红外光谱法则是通过光谱仪测定样品中的吸收谱，找出样品中农药的特征。
-化学分析：化学分析方法主要是利用化学反应，测定农药残留物含量。
常用的方法有气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）和高效液相色谱法（UPLC）等。
这些方法主要通过测定样品中农药残留物与特定试剂之间的化学反应，来测定农药的含量。
-生物学分析：生物学分析方法主要利用生物学反应，来检测农药残留物的存在。
常用的方法包括酶标记法和免疫赋形法。
酶标记法是利用酶作为标记物，与样品中的农药发生反应，通过测定酶的活性来测定农药的含量；免疫赋形法则是利用抗体与农药残留物结合，通过测定抗体与农药结合的强度来测定农药的含量。
2.方法：（1）样品制备：将待测样品（例如农产品或环境样品）进行处理，如去皮、去籽、粉碎、过筛等，以获得代表性的样品。
（2）样品提取：将样品中的农药残留物提取出来。
提取方法可以采用浸提法、萃取法、超声波萃取法等。
这些方法利用不同溶剂和不同温度对样品中的农药进行提取。
（3）测定：采用各种分析技术对提取的样品进行测定。
常见的方法有气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）和高效液相色谱法（UPLC）等。
这些方法主要是通过测定分离出来的农药残留物与特定试剂之间的化学反应或物理性质来测定农药的含量。
（4）数据处理：对测定结果进行分析和计算，得到农药残留的含量。
根据国家标准或行业标准，对检测结果进行评估，判断样品是否合格或者是否超过安全标准。
此外，为了提高检测的准确性和可信度，农药残留检测仪一般会进行质控和方法验证。
农残快速检测原理及操作流程
农残快速检测原理及操作流程农残快速检测是一种用于快速检测农产品中农药残留的技术。
其原理是利用化学或生物基础的方法，将农产品样品与检测试剂发生特异性反应，通过测量反应产物的信号强度来判断样品中农药残留的含量。
下面将详细介绍农残快速检测的原理及操作流程。
一、农残快速检测的原理：1.化学法：基于化学反应的原理，通过特定的反应产生变色或发光等信号。
常见的化学反应方法有酶促反应、免疫反应等。
-酶促反应：利用特定酶对农药进行催化反应，生成可观测的信号。
如酯酶对乳胶颗粒的催化分解，使溶液变浊，可根据浊度的变化来判断样品中农药残留的含量。
-免疫反应：基于特异性抗体与农药残留物的结合，产生特定信号的原理。
如ELISA(酶联免疫吸附实验)技术，通过将抗体与农药结合后添加酶标记的二抗，使得样品中的农药残留物与反应后的酶产物生成颜色或荧光等信号。
2.生物法：利用生物体对特定农药残留物的识别和反应机制，通过特异性的生物传感器来检测农药残留。
常见的生物法包括酵母菌生物传感器、细菌生物传感器等。
-酵母菌生物传感器：利用酵母菌的生物反应对农药残留物进行识别与检测。
当样品中存在特定的农药残留物时，酵母菌的生长状态或代谢产物会发生变化，通过测量这些变化来判断样品中农药残留的含量。
-细菌生物传感器：利用细菌的生物反应对农药残留物进行检测。
细菌在检测过程中会产生特定的物质，如荧光、发光或溶解酶等，通过测量这些物质的变化来判断样品中农药残留的含量。
二、农残快速检测的操作流程：1.样品的准备：将待检测的农产品样品进行处理和准备。
通常包括样品的打碎与均匀混合，确保样品的代表性。
2.反应试剂的制备：根据检测方法的要求，准备好反应试剂，包括特定酶、抗体、底物等。
3.反应过程：将样品与反应试剂混合并加入到反应体系中，接触一定的时间，使反应发生。
具体的反应条件与时间根据不同的农药和检测方法而定。
4.信号检测：通过仪器对反应产物进行检测并判断含量。
可以根据具体的检测方法选择合适的仪器，如光度计、荧光仪等。
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瘦肉精-间接竞争ELISA法
孵育
加底物 + Substance
显色
+ Substance
+ Substance
抗原
抗体
二抗
酶标二抗
TMB 底物
ELISA显色机理
3,3’，5,5’-四甲基联苯胺(TMB)
TMB 氧化产物 加硫酸终止液后
酶联免疫检测兽药残留的方法类型
实例2. 氯霉素-直接竞争ELISA法(杭州迪恩)
标品或样品中的游离氯霉素与酶标记的氯霉素竞争结合酶 标板微孔中固相化的抗氯霉素抗体，通过清洗洗掉未结合的酶 标记氯霉素，通过添加底物显色。样品的吸光值与浓度成负相 关，根据标准曲线，得出氯霉素的残留量。
磺胺七合一直接竞争ELISA法(天津九鼎)
氯霉素-直接竞争ELISA法
孵育
加底物
显色
&ELISA法 孵育(1)
阴性
孵育(2)
加底物
显色
阳性
加底物
加底物
抗原
抗体
二抗
酶标二抗
第二部分：液质质联用技术在药残 检测中的应用
液质质联用技术
药物在体内经过肝肾等器官的代谢被转化后，经尿液和 粪便排出体外，只有极少部分残留在肌肉组织，在肝脏和肾 脏中的浓度较高，但总体浓度均在ppb级(μg/kg=ng/mL)。痕 量检测最常用的方式是酶联免疫试剂盒和液相-质谱/质谱联 用技术。
此处的衍生试剂还没有确定是否和GB中的衍生化试剂类似？
硝基呋喃-间接竞争ELISA法
孵育
加底物 + Substance
显色
+ Substance
+ Substance
抗原
抗体
二抗
酶标二抗
酶联免疫检测病毒抗体的方法类型
实例4. 伪狂犬病病毒(PRV)直接竞争ELISA法
在酶标板微孔条上预包被PRV的抗原PRV gB，阳性对照或样本中的抗 体在第一次孵育时和包被抗原特异性结合；清洗微孔后加入酶标记的抗 PRV gB的单克隆抗体，第二次孵育时酶标单抗和样本中的抗体竞争吸附微 孔条中的抗原。再次清洗微孔后加入底物TMB显色，加入酶标二抗后，用 TMB底物显色，样本吸光值与抗体浓度负相关。即免疫成功，产生了抗体， 显色的OD630值小于阴性对照。
+ Substance
+ Substance
抗体
氯霉素
酶标-氯霉素
酶联免疫检测兽药残留的方法类型
实例3. 硝基呋喃-间接竞争ELISA法(无锡同昕)
ELISA原理类似于瘦肉精的检测，不同之处是硝基呋喃需要衍生。 硝基呋喃类药物在体内很快就能被代谢，代谢物在组织中则能存留 较长的一段时间，所以我们检测的实为硝基呋喃的代谢物。由于代谢物 均为较小分子，属于半抗原，因此制备其抗体时，需要进行衍生后，免 疫动物获得抗体(也有可能是单克隆抗体)。
抗典型性猪流感病毒血清，抗口蹄疫病毒血清的检测均采用直接竞争 ELISA法。
(PRV)疫苗直接竞争ELISA法
孵育(1)
孵育(2)
显色
阴性
加底物
阳性
加底物
抗原
抗体
酶标抗体
加底物
酶联免疫检测病毒抗体的方法类型
实例5. 猪繁殖与呼吸道综合症(蓝耳病，PRRS/US)的间接ELISA法
在酶标板微孔条上预包被PRRS/US的抗原，阳性对照或样本中的抗 体在第一次孵育时和包被抗原特异性结合；清洗微孔后加入酶标记的抗猪 的二抗，第二次孵育时酶标二抗和抗原抗体复合物结合。再次清洗微孔后 加入底物TMB显色，样本吸光值与抗体浓度正相关。即免疫成功，产生 了抗体，显色的OD450值大于阴性对照。
药物残留检测的基本原理
王玉峰 2013.04
药物残留 主要包括农药残留和兽药残留、真菌毒素。
农药残留 在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残
存于谷物、蔬菜、果品 、畜产品、水产品以及土壤和 水体中的现象。如滴滴涕，毒死蜱，马拉硫磷等。
兽药残留 是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、
奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物。如氯霉素， 克伦特罗，硝基呋喃等。
真菌毒素
黄曲霉素：B1、M1、B2、M2、G1、G2 桔霉素： 展青霉素： 玉米赤霉类：玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉烷酮
其它
孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫、隐性结晶紫 糖皮质激素：泼尼松龙、甲基泼尼松龙、泼尼松、氢化可的松、可 的松、倍他米松、地塞米松、倍氯米松、醋酸氟氢可的松 雌激素类：己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚
兽药残留检测方法
酶联免疫法：各种试剂盒 液质质联用仪：LC-MS/MS，三重四级杆质谱仪、杂合三
重四级杆(QTRAP) 试纸条： 微流控芯片： 微生物抑制法： 高效液相色谱
第一部分 酶联免疫技术在药残检测和 病毒抗体检测中的应用
酶联免疫检测的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体 既保留其免疫活性，又保留酶的活性。 ③在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体 按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固 相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体 上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ④加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本 中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。
液质质联用技术，顾名思义将液相色谱的高效分离和 质谱的高灵敏度有机结合，串联质谱更提高了检测结果的 准确性。液质质联用是药残检测最常用的检测方法之一， 在国标，欧盟和美国标准中被广泛采纳。
液质质联用仪简图
三重四级杆(Q1Q2Q3)工作原理
MS1 (母离子选择)
MS2 (子离子选择)
离子源 离子传输 离子过滤 离子碰撞 离子过滤 离子检测
优点：①灵敏度高(ppb) ②操作步骤易掌握； 不足：①有些试剂盒价格昂贵 ②易出现假阳性，导致实验反复
酶联免疫检测兽药残留的方法类型
三种必要的试剂： ①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作 用的底物。
实例1. 瘦肉精，磺胺类药残-间接竞争ELISA法(北京勤邦)
在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，标品或样本中残留的 克伦特罗和预包被抗原竞争抗克伦特罗的抗体，加入酶标二抗 后，用TMB底物显色，样本吸光值与残留物克伦特罗负相关， 根据标准曲线，得出克伦特罗残留量。