人类红细胞血型检测方法
血型的鉴定方法

血型的鉴定方法血型是人类体内的一种生物学特征,是指血液中红细胞表面的抗原和血浆中的抗体的组合。
血型的鉴定是医学中的一项基础工作,可以为献血、输血、器官移植等医疗活动提供重要的依据。
本文将介绍血型的鉴定方法。
一、ABO血型鉴定ABO血型系统是最常见的血型系统,分为A、B、AB、O四种,其鉴定方法主要有以下几种:1. 直接凝集法将献血者的血液滴在含有不同抗A和抗B血清的玻片上,观察是否出现凝集现象,从而确定其ABO血型。
2. 反凝集法将献血者的血液加入已知ABO血型的红细胞悬液中,观察是否出现凝集现象,从而确定其ABO血型。
3. 红细胞溶血法将献血者的血液与已知ABO血型的红细胞混合,在特殊条件下加热或冷却,观察是否出现红细胞溶解现象,从而确定其ABO血型。
二、Rh血型鉴定Rh血型系统是人类血型系统中的第二大血型系统,分为Rh阳性和Rh阴性两种。
Rh血型的鉴定方法主要有以下几种:1. 直接凝集法将献血者的血液滴在含有Rh抗体的玻片上,观察是否出现凝集现象,从而确定其Rh血型。
2. 反凝集法将献血者的血液加入已知Rh血型的红细胞悬液中,观察是否出现凝集现象,从而确定其Rh血型。
3. 红细胞溶血法将献血者的血液与已知Rh血型的红细胞混合,在特殊条件下加热或冷却,观察是否出现红细胞溶解现象,从而确定其Rh血型。
三、其他血型鉴定除了ABO和Rh血型外,还有其他一些罕见的血型,如Kell血型、Duffy血型、Lewis血型等。
这些血型的鉴定方法主要有以下几种: 1. 免疫荧光法将献血者的血液加入含有特定抗体的荧光素标记红细胞悬液中,观察是否出现荧光信号,从而确定其血型。
2. 免疫吸附法将献血者的血液加入含有特定抗体的固相吸附板中,观察是否出现吸附信号,从而确定其血型。
3. PCR技术通过PCR技术检测献血者的DNA中是否存在特定基因,从而确定其血型。
总之,血型的鉴定是医学中的一项重要工作,其准确性直接关系到献血、输血、器官移植等医疗活动的安全性和成功率。
血型的鉴定方法及操作

方法学评价
灵敏度和准确性高,实验结果重复性好,可长时间保存 自动化程度高,实验过程标准化,ISO9000/CE认证 成本高
03
间接Coomb’s(indirect antiglobulin test, IDAT)
DAT:检查红细胞是否致敏
IDAT:检测血清中不完全抗体
原理和方法 低离子强度盐溶液(low ionic strength salt solution, LISS):降低介质离子强度,增加抗原抗体结合 聚凝胺:中和红细胞表面负电荷,使红细胞发生非特异性凝集。 重悬液(resuspension)
正反定型不一致的可能原因(三)
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规则抗体和不规则抗体
规则抗体:ABO系统产生抗A、抗B是有规律的。
Landsteiner规律: A型-抗B,B型-抗A,O型-抗A,抗B
不规则抗体:除ABO 系统外,其他系统产生的抗体均不符合上述规律。
正常人血液中一般没有不规则抗体,又称为意外抗体(unexpected antibody)。
完全抗体和不完全抗体
血型(blood type)
红细胞血型原理与检测策略

红细胞血型原理与检测策略引言:红细胞血型是指红细胞表面的抗原和血清中的抗体的特异性反应。
根据不同的抗原和抗体的存在与否,可以将人类的红细胞血型分为A、B、AB和O型。
了解红细胞血型具有重要的临床意义,包括输血、器官移植和孕产妇管理等方面。
本文将介绍红细胞血型的原理以及常用的检测策略。
一、红细胞血型的原理红细胞血型是由红细胞表面的抗原和血清中的抗体决定的。
抗原是一种能够刺激机体产生抗体的物质,而抗体则是一种能够与抗原特异性结合的免疫球蛋白。
根据红细胞表面抗原的不同,人类的红细胞血型可分为A、B、AB和O型。
1. ABO血型系统:ABO血型系统是最常见和最重要的红细胞血型系统之一。
根据红细胞表面是否存在A抗原和B抗原,人类可以分为A型、B型、AB 型和O型。
A型红细胞表面有A抗原,B型红细胞表面有B抗原,AB型红细胞表面同时具有A抗原和B抗原,而O型红细胞表面则没有A抗原和B抗原。
2. Rh血型系统:Rh血型系统是另一个重要的红细胞血型系统。
Rh血型系统中最重要的抗原是Rh因子,也称为D抗原。
如果红细胞表面有Rh因子,则为Rh阳性;如果没有Rh因子,则为Rh阴性。
二、红细胞血型的检测策略红细胞血型的检测通常包括血型鉴定和抗体筛查两个方面。
1. 血型鉴定:血型鉴定是指确定个体的ABO血型和Rh血型。
常用的血型鉴定方法包括直接血细胞法和血清试剂法。
直接血细胞法是通过将被测血液与已知血型的抗血清混合,观察凝集反应来确定血型。
例如,将被测血液与抗A血清混合,如果出现凝集反应,则说明被测血液为A型;如果与抗B血清混合后出现凝集反应,则说明被测血液为B型。
血清试剂法是通过将被测血液与已知血型的红细胞混合,观察凝集反应来确定血型。
例如,将被测血液与A型红细胞混合,如果出现凝集反应,则说明被测血液为B型。
2. 抗体筛查:抗体筛查是为了检测血清中是否存在与红细胞抗原相对应的抗体,以避免输血引起的不良反应。
常用的抗体筛查方法包括交叉试验和抗人球蛋白试验。
血型的鉴定方法及操作全解

规则抗体:ABO系统产生抗A、抗B是有规律的。 Landsteiner规律: A型-抗B,B型-抗A,O型-抗A,抗B 不规则抗体:除ABO 系统外,其他系统产生的抗体 均不符合上述规律。 正常人血液中一般没有不规则抗体,又称为意外抗体 (unexpected antibody)。
完全抗体和不完全抗体
原理:根据IgM类抗体与红细胞膜上特异性抗 原能发生凝集反应。 正定型:已知血型抗体试剂 + 红细胞
鉴定红细胞上血型抗原
反定型:已知标准红细胞 + 血清
鉴定血清中抗体
反应条件:生理盐水介质,室温,肉眼可见凝 集反应 平板法,试管法,微孔板法,试管离心法最可 信赖。 应用:ABO血型定型、RhD抗原定型 (IgG+IgM,IgM单克隆抗体),交叉合血
增强IgG抗体 的凝集作用
注意事项:
Rh血型不需作反定型 每次实验均需作阳性、阴性对照
方法学评价
简单经济
稳定性、准确性较差,不能检出MN、Duffy血 型系统
3.抗人球蛋白实验(Coomb’s test)
原理和方法
抗IgG
待测红细胞 + 抗RhD(IgG)
红细胞凝集
+ 抗人球蛋白
应用延伸:
红细胞血型
红细胞血型分类: ISBT(The International Society of Blood Transfusion)
2002年,29个系统,200多个抗原 目前,30个系统,300多个抗原
一、ABO血型系统
1. ABO血型抗原和抗体特性
2.ABO血型的遗传与生化
(1)ABO基因型与表型 A型——AA,AO B型——BB,BO AB型——AB O型——O
人血型实验报告

一、实验目的1. 掌握ABO血型鉴定原理和方法。
2. 观察红细胞凝集现象,了解抗原抗体反应。
3. 通过实验,学会使用血型鉴定工具,并能够独立进行血型鉴定。
二、实验原理人类的ABO血型系统是由三个复等位基因(IA、IB、i)决定的。
根据基因型组合,红细胞表面可以存在A、B抗原或两者兼有,或者都不存在。
血清中则含有相应的抗体,即抗A和抗B。
血型鉴定通过观察红细胞与标准血清之间的凝集反应来确定个体的血型。
三、实验材料1. 受试者血液样本2. A型标准血清3. B型标准血清4. 载玻片5. 滴管6. 红细胞洗涤液7. 生理盐水8. 显微镜9. 红细胞洗涤液四、实验步骤1. 准备样本:将受试者血液样本与红细胞洗涤液按1:4比例混合,室温下静置5分钟,以去除血浆蛋白。
2. 制备红细胞悬液:取洗涤后的红细胞,用生理盐水稀释至1%浓度。
3. 滴加标准血清:在载玻片上分别滴加A型标准血清和B型标准血清。
4. 加入红细胞悬液:用滴管吸取稀释后的红细胞悬液,分别滴加到A型和B型标准血清中。
5. 观察凝集现象:静置5分钟后,用显微镜观察红细胞是否发生凝集现象。
6. 记录结果:根据凝集现象,记录受试者的血型。
五、实验结果与分析1. A型血:加入A型标准血清后,红细胞发生凝集;加入B型标准血清后,红细胞不发生凝集。
结论:受试者血型为A型。
2. B型血:加入B型标准血清后,红细胞发生凝集;加入A型标准血清后,红细胞不发生凝集。
结论:受试者血型为B型。
3. AB型血:加入A型标准血清和B型标准血清后,红细胞均发生凝集。
结论:受试者血型为AB型。
4. O型血:加入A型标准血清和B型标准血清后,红细胞均不发生凝集。
结论:受试者血型为O型。
六、实验讨论1. 实验过程中,受试者血型鉴定结果与预期相符,说明实验操作规范,结果可靠。
2. 血型鉴定在临床输血、器官移植等领域具有重要意义,了解血型有助于预防输血反应等并发症。
3. 实验过程中,要注意观察红细胞凝集现象,避免误判。
血型检测实验报告结论(3篇)

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过血液学检测方法,对受试者的血型进行鉴定,了解其血型特征,为临床输血、器官移植等医疗活动提供科学依据。
二、实验原理血型鉴定是依据人类红细胞表面抗原的差异进行分类的。
根据不同的抗原,血型可分为A、B、O、AB四种类型。
本实验采用凝集反应原理,通过观察红细胞与抗血清之间的反应,判断受试者的血型。
三、实验材料1. 受试者血液样本2. 抗A、抗B标准血清3. 抗A、抗B、抗AB混合抗血清4. 生理盐水5. 试管、滴管、显微镜等实验器材四、实验步骤1. 将受试者血液样本加入试管中,加入生理盐水,混匀后取少量置于玻片上。
2. 分别用滴管滴加抗A、抗B标准血清至玻片上,观察红细胞是否发生凝集。
3. 重复步骤2,加入抗A、抗B、抗AB混合抗血清,观察红细胞是否发生凝集。
4. 根据凝集情况,判断受试者的血型。
五、实验结果1. 当受试者血液与抗A血清发生凝集,与抗B血清不发生凝集时,可判定其为A 型血。
2. 当受试者血液与抗B血清发生凝集,与抗A血清不发生凝集时,可判定其为B 型血。
3. 当受试者血液与抗A、抗B血清均发生凝集时,可判定其为AB型血。
4. 当受试者血液与抗A、抗B血清均不发生凝集时,可判定其为O型血。
六、实验结论通过本次实验,我们成功鉴定了受试者的血型。
实验结果表明,受试者的血型为____型(A型、B型、AB型或O型)。
在临床输血、器官移植等医疗活动中,了解受试者的血型具有重要意义,可以有效避免输血反应和移植排斥等不良反应。
此外,本次实验过程中,我们还发现以下问题:1. 实验操作过程中,应严格控制试剂的添加量和操作时间,以确保实验结果的准确性。
2. 在观察凝集现象时,应使用高倍显微镜,以便更清晰地观察红细胞与抗血清之间的反应。
3. 在实验过程中,应保证实验器材的清洁和消毒,以防止交叉污染。
针对以上问题,我们提出以下改进措施:1. 在实验操作过程中,严格按照实验步骤进行,确保试剂的添加量和操作时间准确。
实验报告检测血型
一、实验目的1. 掌握血型鉴定的基本原理和方法。
2. 熟悉血型鉴定在临床医学中的重要性。
3. 培养实验操作技能和实验报告撰写能力。
二、实验原理血型是指红细胞表面的抗原类型。
根据红细胞表面抗原的不同,人类血型可分为A 型、B型、AB型、O型四种。
血型鉴定是通过检测红细胞表面的抗原,判断个体的血型。
常用的血型鉴定方法有直接凝集法和间接凝集法。
三、实验材料1. 标本:抗A抗体、抗B抗体、抗AB抗体、抗O抗体、抗A-B抗体。
2. 试剂:生理盐水、A型标准血清、B型标准血清、AB型标准血清、O型标准血清、红细胞悬液。
3. 仪器:离心机、移液器、显微镜、载玻片、滴管等。
四、实验步骤1. 制备红细胞悬液:将新鲜血液离心,取上层红细胞,用生理盐水洗涤3次,最后加入适量生理盐水制成红细胞悬液。
2. 制备抗血清:取抗A抗体、抗B抗体、抗AB抗体、抗O抗体、抗A-B抗体各一份,分别加入等量生理盐水,混匀后备用。
3. 检测A型血:a. 在载玻片上滴加一滴A型标准血清。
b. 滴加一滴制备的红细胞悬液。
c. 观察红细胞是否发生凝集,判断血型。
4. 检测B型血:a. 在载玻片上滴加一滴B型标准血清。
b. 滴加一滴制备的红细胞悬液。
c. 观察红细胞是否发生凝集,判断血型。
5. 检测AB型血:a. 在载玻片上滴加一滴AB型标准血清。
b. 滴加一滴制备的红细胞悬液。
c. 观察红细胞是否发生凝集,判断血型。
6. 检测O型血:a. 在载玻片上滴加一滴O型标准血清。
b. 滴加一滴制备的红细胞悬液。
c. 观察红细胞是否发生凝集,判断血型。
五、实验结果1. A型血:红细胞与抗A抗体发生凝集。
2. B型血:红细胞与抗B抗体发生凝集。
3. AB型血:红细胞与抗A抗体和抗B抗体均不发生凝集。
4. O型血:红细胞与抗A抗体、抗B抗体、抗AB抗体、抗O抗体均不发生凝集。
六、实验分析通过本次实验,我们成功鉴定了四种血型。
血型鉴定在临床医学中具有重要意义,如输血、器官移植、亲子鉴定等。
检测血型最简单的方法
检测血型最简单的方法引言血型是指人体红细胞膜上的抗原和抗体的组合,对我们的健康具有重要的指导意义。
因此,了解自己的血型对于日常生活以及医疗救助都非常重要。
在过去,检测血型需要进行繁琐的实验室检测,但现在已经有了一些简单的方法来快速检测血型。
1. 血型的基本知识在了解如何简单检测血型之前,我们需要先了解一些关于血型的基本知识。
人类的血液主要分为A、B、AB和O四个基本类型,每一种类型都可以携带Rh因子(+/-)。
根据人体红细胞上的抗原和血浆中是否带有特定抗体,我们可以将血型分为A型、B型、AB型和O型。
2. 观察和猜测法最简单的方法之一是通过观察和猜测来推测血型。
我们可以通过以下方式进行血型的初步猜测:- 观察眼睛和头发的颜色。
一般说来,A型血的人眼睛颜色较深,B 型血的人眼睛颜色较浅,O型血的人则基本上都是棕色眼睛。
此外,A型血的人头发颜色偏黑,B型血的人头发颜色偏黄,O型血的人则是深棕色或棕黄色。
- 观察皮肤的色泽。
A型血的人的皮肤一般会有一定程度的红晕,B 型血的人则皮肤较为黄亮,O型血的人则皮肤较为白皙。
- 猜测性格特点。
一般说来,A型血的人比较内向、敏感,B型血的人较为外向、适应力强,O型血的人则更加独立、不拘小节。
请注意,这种方法只是初步判断血型的依据,并不是十分准确的方式,需要进一步的确认。
3. 使用试纸法另一种简单的方法是使用试纸法进行血型的初步检测。
试纸法使用的试纸具有特定的抗原和抗体,可以与血液中的抗原和抗体发生反应,从而确定血型。
以下是使用试纸法进行血型检测的步骤:1. 清洁和消毒手指,用无菌棉球或酒精棉球进行清洁,确保无菌状态。
2. 使用消毒针或无痛采血器将手指刺破,让血液滴在清洁的杯子或试管中。
3. 取出试纸,将试纸的尾部放入杯子中的血液中,并保持静止数秒,直至试纸吸取足够的血液。
4. 将试纸放入试纸盒子中,等待约1分钟,根据试纸上显示的颜色变化,可以初步确定血型。
试纸法是一种快速方便的检测方法,但由于试纸上的抗原和抗体数量有限,因此可能无法检测出稀有的血型。
血型的鉴定方法及操作
血型的鉴定方法及操作血型在医学和生物学中扮演着重要的角色,对于治疗疾病、血液输血以及遗传研究都有着重要意义。
本文将介绍血型的鉴定方法及相关操作。
一、血型的分类与意义人类的血液主要有A、B、O和Rh四种类型,根据红细胞膜表面的抗原的类型和组合,可以将血型分类为A、B、AB和O四种基本类型。
同时,Rh血型分为Rh阳性和Rh阴性两种。
血型的鉴定对于输血安全至关重要,错误的输血可能导致输血反应甚至危及生命。
此外,血型还与各种疾病的易感性以及药物反应等有关,因此了解个体的血型信息对于医疗保健和疾病预防也有一定的指导意义。
二、血型的鉴定方法1. 直接血涂片法直接血涂片法是一种简单有效的鉴定血型的方法。
操作步骤如下:(1)将被测血的一滴滴于玻璃片上,用纤维棒均匀地在玻璃片上涂抹;(2)取相应的抗血清:如A型血的抗A血清、B型血的抗B血清、AB型血的抗A和抗B血清、O型血的抗A和抗B血清以及Rh抗血清等;(3)将抗血清滴于涂片中,与血液充分混合;(4)观察血涂片的凝集反应,如果呈现凝集,即为抗血清与红细胞抗原的配血现象,反应凝结越强,说明抗血清与红细胞抗原之间的亲和力越高。
2. 输血试验为了确保输血安全,一般在输血前需要进行输血试验。
输血试验包括供者血型和受者血型鉴定,以及鉴定受者血浆对供者红细胞抗原的抗体情况。
输血试验的操作步骤如下:(1)进行供者和受者的血型鉴定,使用与直接血涂片法相同的方法;(2)对受者的血浆进行抗体筛查,这是为了查找受者血浆中特异性抗体的存在情况;(3)进行交叉配血试验,将受者血浆与供者红细胞反应,观察有无凝集反应。
若有凝集反应出现,则代表受者血浆中的抗体与供者红细胞的抗原有亲和力,此时该供者的血液不适合输给受者。
三、注意事项在进行血型鉴定和输血试验时,需要注意以下事项:1. 操作前需准备好所需试剂和设备,保持无菌状态;2. 确保工作区域安全,避免交叉污染;3. 操作过程中要仔细,避免误操作导致错误结果;4. 严格遵守操作规范,保证试验的准确性和可靠性;5. 注意个人防护,避免自身接触到血液和试剂。
实训报告血型测定方法
一、实验目的通过本次实训,了解血型测定的原理和方法,掌握血型鉴定的基本技能,提高实验室操作能力,为临床输血工作提供理论和技术支持。
二、实验原理血型是指血液成分中红细胞表面所具有的特异性抗原。
根据红细胞表面抗原的不同,人类血型可分为A、B、O、AB四种基本血型。
此外,根据红细胞膜上凝集原的不同,血型系统还可分为多种亚型。
血型测定是通过对血液中凝集原和凝集素的检测,来判断受检者的血型。
三、实验步骤1. 准备工作(1)实验器材:抗A、抗B标准血清、抗A、抗B、抗AB、抗O标准红细胞悬液、玻片、滴管、显微镜、生理盐水等。
(2)实验试剂:生理盐水、0.9%氯化钠溶液、2%柠檬酸钠溶液、2%草酸铵溶液等。
2. 实验操作(1)取受检者血液1-2ml,加入抗凝剂(如2%柠檬酸钠溶液)制成抗凝血。
(2)将抗凝血离心,取上层血清备用。
(3)将受检者血清分别加入四个玻片,每个玻片滴加1滴抗A、抗B、抗AB、抗O 标准红细胞悬液。
(4)轻轻混匀,室温下放置15-20分钟。
(5)用显微镜观察红细胞凝集现象,记录结果。
3. 结果判断(1)若受检者血清与抗A、抗B、抗AB红细胞悬液均不发生凝集,则受检者血型为O型。
(2)若受检者血清与抗A红细胞悬液发生凝集,与抗B红细胞悬液不发生凝集,则受检者血型为A型。
(3)若受检者血清与抗B红细胞悬液发生凝集,与抗A红细胞悬液不发生凝集,则受检者血型为B型。
(4)若受检者血清与抗A、抗B、抗AB红细胞悬液均发生凝集,则受检者血型为AB型。
四、实验总结1. 通过本次实训,掌握了血型测定的原理和方法,提高了实验室操作能力。
2. 了解了不同血型系统的亚型,为临床输血工作提供了理论和技术支持。
3. 发现了在实验操作过程中可能出现的误差,如血清污染、操作不规范等,并提出了相应的改进措施。
4. 认识到血型测定在临床医学中的重要性,为今后从事相关领域工作奠定了基础。
五、改进措施1. 严格操作规程,确保实验结果的准确性。
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人类红细胞血型检测方法
发表时间:2009-08-04T11:56:06.750Z 来源:《中外健康文摘》2009年第20期供稿作者:唐银华 (黑龙江省农垦总局宝泉岭分局梧桐河农场职工医院
[导读] 自发现人类第一个红细胞血型以来,一个世纪中,人们使用免疫学和生物化学力几乎所有的血液成分中
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)20-0250-02
自发现人类第一个红细胞血型以来,一个世纪中,人们使用免疫学和生物化学力几乎所有的血液成分中,检出数百种遗传多态性标记。
这个领域的成果,已用于输血移植等临床医学,以及免疫学、遗传学、法医学、人类学等许多方面。
红细胞血型检查主要用于一般体检,产前检查及输血前检查。
临床上最重要的为ABO血型及Rh血型两种,必要时还需检查其他血型。
1 常用试剂
血型检查的常用试剂包括抗-A,抗-B,抗-H以及抗-D。
这类试剂有来自人血清的、单克隆抗体以及外源凝集素。
现在实验室所用的大多为单克隆抗体。
根据免疫球蛋白的性质,抗体可分为IgM、IgG两种。
前者在盐水介质中与相应的红细胞血型抗原凝集,后者在抗人球蛋白试验、酶试验或其他胶体介质中发生凝集。
血型鉴定常用立刻离心试管法,以肉眼观察凝集反应,根据凝集反应的强度,以4+,3+,2+,1+及±区别。
所谓混合外观是指极大多数红细胞不凝集,只有少数红细胞呈凝集现象。
如少量的A型红细胞混匀于O型红细胞时,与抗-A血型试验即呈混合外观,原则上与弱凝集有所区别。
单克隆抗-A(B)试剂的研制成功和应用,为临床节省了大批珍贵的人源试剂血清。
但近年来,在ABO血型检测过程中,国外已有多篇因单克隆试剂引起假凝集现象的报道,国内孙爱农等亦有类似报道。
即单克隆抗-A与B型红细胞反应,单克隆抗-B与A型红细胞反应,这种现象均表明单克隆试剂与人源多克隆试剂存在一定差异鉴于单克隆试剂可造成假阳性结果,因此Butch(1994年)等认为输血前单个标本ABO/Rh血型检测,应该用人源多克隆血清。
由于目前国内市场上供应的几乎都是单克隆试剂,所以孙爱农等认为:厂家生产单克隆抗一A(B)成品时,应取不同来源杂交瘤细胞制备的抗-A(B)混匀,并用大批量包括亚型在内的标本验证,对输血前所有病人的检查,必须增加ABO反定型试验,对于有疑问的标本的血型鉴定和吸收放散试验,应该采用人源抗-A(B),以确保安全输血。
2 ABO定型
ABO血型与其他血型不同的是,正常人红细胞上有A,B或A和B抗原者,其血清中必定有与之不同的抗体或没有抗体。
例如A型人必定有抗-B,B型人必定有抗-A,O型人有抗-A和抗-B,而AB人没有抗-A和抗-B。
因此ABO血型的鉴定,包括正反定型两个方面:正定型是以已知的抗-A,抗-B血清测定未知的抗原;反定型是以已知的A型及B型红细胞测定未知的抗体。
两者必须相符,否则应进一步分析研究不符的原因,是技术性还是病理性的。
3 Rh定型
常见有抗-D,抗-C,抗-E,抗-c,抗-e用来鉴定Rh血型抗原。
因为抗-e来源比较困难,所以临床上通常以抗-D,抗-C,抗-E,抗-c 4种抗体来测定。
Rh抗体以IgG为常见,所以通常以抗人球蛋白试验测定。
现在市售的抗-D为单克隆化学改性抗体,可以用立刻离心凝集试验测定。
4 交叉配血试验
交叉配血试验是输血前必须做的试验。
交叉配血实验包括主测及次测两部分。
主测是受者的血清加上供者红细胞,次测是供者血清加上受者红细胞。
理想的配血结果应该是两测都无凝集及溶血现象。
在特殊情况下,如自身免疫性溶血性贫血,次测往往可以见到极弱的凝集。
检验工作者应特别注意。
第一次输血后,如在两周后再次输血时,仍为同一供血者或亲属,仍应做交叉配血试验,因为该供者如有该受者所缺乏的某种血型抗原,第一次输血后,因免疫而产生抗体,第二次交叉配血时可以产生不相配的现象。
5 抗体测定与抗体鉴定
抗体测定与抗体鉴定是血型血清学中十分重要的工作。
抗体测定又称抗体筛检,它是一种初步检查血清中有无血型抗体的方法。
抗体测定必须应用试剂红细胞(又称筛检红细胞),一般都推荐用两种不同血型的0型红细胞等量混合,而这种红细胞的抗原组成必须是互补的,所以应包括Rh,Kidd,MNS,Ouffy,Diego,Xg,Kell,Lewis,P及Lutheran等。
如果被检血清与筛检红细胞发生凝集,则应用谱细胞进一步加以鉴定。
谱细胞一般应用9-11个不同血型互补的红细胞。
为了提供Rh系统复合抗体(如抗-ce)与混合抗体(如抗-c+抗-e)的鉴定根据,谱细胞的Rh基因型也应加以标明,这必须通过家系调查来决定,目前有一定的难度。
ABO血型系统中的抗体为最具临床意义的抗体,其他抗体一般认为是具有潜在临床意义的抗体。
根据其发生频率排列为:抗-D,抗-K,抗-E,抗-c,抗-Fya,抗-c,抗-Jkb,抗-s,抗-Jkb。
我国引起HTR的抗体以抗-E最多,而HDN以抗-D为最多。
如果在交叉配血时测到受者具有针对低频率抗原的抗体,则不必为了确定供者抗原阴性而进一步加以鉴定,只要从贮存的血液中,任取一个供者血液,一般不含此低频率抗原。
因此,与该受者血清交叉是相容的。
反之,如在产前检查,发现针对罕见抗原的抗体时,抗体鉴定是必不可少的,它可以预测HDN的可能性及其严重程度,供换血用的血液是不难找到的。
另一方面,如果病人血清中含有针对高频率抗原的抗体,不必考虑这种研究是为了输血还是预测HDN,必须加以鉴定,对估计临床意义以及确定输血用的血液都有帮助。
6 分泌型唾液中血型物质的测定
唾液中HAB血型物质测定可用作ABO。
血型鉴定的辅助方法。
分泌型唾液中血型物质的强度各人不同,A,B,H物质之间也不一样,唾液中血型物质测定常用凝集抑制试验,所用抗血清的浓度应当适当。
分泌型AX及Ael,BX及Bel人唾液中只有H物质而无A或B物质。
7 吸收放散试验
血清学方法中,吸收放散试验是确定ABO亚型及目前鉴定Del的惟一方法。
这种红细胞与抗-A,抗-B,抗-D不起凝集,但可以吸收抗-A,抗-B及抗-D并放散出来,是血型鉴定中十分重要的方法。
8 采用血凝反应的增强剂和改变血凝反应体系
一些血凝反应的增强剂,如凝聚胺(polybrene)、聚乙二醇(PEG)、盐水、牛白蛋白、低离子强度悬液(LISS)、抗人球蛋白试剂、酶试剂等,以及有别于常规试管反应的反应体系,如固相反应、微量板反应和微量试管柱式反应等,已被广泛地使用。
但事实上,每项技术都
有其各自的优、缺点和局限性。
对新的血型血清学技术的应用,有公认的基本要求:在用于抗体检测时,必须优于经典的低离子强度一间接抗球蛋白试验(LISS-IAT),必须有助于检测灵敏度的提高和节省经费,必须不受无临床意义的抗体的干扰。
9 聚合酶链反应(PCR)
聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)是一种在体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术。
它以待扩增的两条DNA链为模板,由一对人工合成的寡核苷酸引物介导,通过DNA聚合酶酶促反应,快速体外扩增特异DNA序列。
由于PCR技术经过变性、复制、延伸约30个循环就可在2h内将靶DNA扩增数百万倍,具有操作简单、快速、特异和灵敏的特点。
目前,国内已经选用PCR-SSP技术进行了ABO血型基因型检测的研究。
另外,RhD DNA定型推知其表型的方法也迅速地建立起来,使对Rh(-)母亲所怀胎儿的RhD基因定型已经成为可能。