种子生活力测定PPT课件
.
8
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗，不 要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情况 （可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活力 的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生活 力的种子。
有
无生活力的种子
生活Leabharlann 力的种子
.
9
任务5 计算： 种子生活力（%）=（有生活力的种子数／检测种子数）
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
.
1
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
.
2
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
.
3
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
×100%（保留整数） 先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
.
10
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载表
产地 送检样品重（g）
品种名称
重复
Ⅰ
Ⅱ
检验粒数
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
. 填表日期：
年月日
11
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
.
12
➢而丧失生活力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择 吸收能力，染料可以自由进入细胞内，使胚部染色。 因此，可以根据种子胚部是否被染色来判断种子的生活 力。
.
4
项目四. 材料和用具
材 料：
小麦种子
.
5%的红墨水
5
用具：小烧杯、单面刀片、镊子、培养皿、塑料 垫板（切种子用）、放大镜、标签纸等。
.
6
项目五. 实验步骤
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。
任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切面上），置于编号的培养皿中备用。
.
7
任务3 样品染色：向上述4个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
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种子生活力测定原理及方法PPT课件
控制劣变试验、复合逆境活力测定、砖砂试验、幼苗生长测定 和四唑测定。
2012/03/10
14
第14页/共49页
• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
2012/03/10
9
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
2012/03/10
24
第24页/共49页
应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
种子生活力的测定PPT课件
• 生活力Seed viability：种子发芽的潜在能力 或种胚具有的生活力
种子生活力测定的必要性：
• 1、休眠种子必须进行生活力测定： • 2、快速预测种子发芽能力
1
第1页/共13页
一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看！
第13页/共13页
第3页/共13页
四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种：软化种子，活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦： 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米： 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中，35℃ 0.5-1h
第4页/共13页
⑷ 观察鉴定 小麦：观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色，但不定根原基体 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤 玉米：观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
第2页/共13页
三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL （辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢） 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因而不容易被染色；而丧失生活力 的种子，胚部细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入到细胞内，使胚部染色。
种子生活力测定的必要性：
• 1、休眠种子必须进行生活力测定： • 2、快速预测种子发芽能力
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一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看！
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四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种：软化种子，活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦： 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米： 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中，35℃ 0.5-1h
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⑷ 观察鉴定 小麦：观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色，但不定根原基体 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤 玉米：观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料：小麦、玉米、大豆 2. 试剂：0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具：镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
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三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂，参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL （辅酶ⅠH2) （四唑）（辅酶Ⅰ）（甲 月替）（氯化氢） 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质，而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子，胚部细胞不让染料进入，因而不容易被染色；而丧失生活力 的种子，胚部细胞丧失了选择透过性，染料可以自由的进入到细胞内，使胚部染色。
课件：实验六 植物种子生命力的快速测定
TTC本身会变色。 4）显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中。
染料染色法：
1）染料浸泡时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 2）染色时间不能太长，否则不易区分。
BTB法：
1）BTB溶胶层厚度取决于种子大小，原则上保证种胚接触 皿底后尚有部分露出胶层上方，胶层厚度可使种子稳定 在其中；
2）取完好小麦种子，将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
供试粒数
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
30
30
BTB
30
分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果，比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法：
1）TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中， 放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2）TTC反应温度一般以30~35℃为宜。 3）TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放
➢ 种子发芽率是种子品质和实用价值的主要依据，与播种 的用种量直接有关，但是常规方法（直接发芽，测定发 芽率）所需时间较长，遇到休眠种子也无法得出正确的 结论。快速测定法能较短时间的获得结果 。
➢ 掌握快速测定植物种子生命力的方法。 ➢ 理解TTC/BTB/染料法测定种子活力的原理。
2. 实验原理
材料：小麦种子 仪器设备：小烧杯；刀片；镊子；温箱 试剂： 0.12％～0.5％TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈 中性，pH7±0.5，不宜久藏，应随用随配）。 0.02％～0.2％靛红溶液或5％红墨水（酸性大红G）。 1％BTB琼脂
4. 实验步骤
TTC/红墨水法
1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认
染料染色法：
1）染料浸泡时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 2）染色时间不能太长，否则不易区分。
BTB法：
1）BTB溶胶层厚度取决于种子大小，原则上保证种胚接触 皿底后尚有部分露出胶层上方，胶层厚度可使种子稳定 在其中；
2）取完好小麦种子，将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
供试粒数
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
30
30
BTB
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分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果，比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法：
1）TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中， 放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2）TTC反应温度一般以30~35℃为宜。 3）TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放
➢ 种子发芽率是种子品质和实用价值的主要依据，与播种 的用种量直接有关，但是常规方法（直接发芽，测定发 芽率）所需时间较长，遇到休眠种子也无法得出正确的 结论。快速测定法能较短时间的获得结果 。
➢ 掌握快速测定植物种子生命力的方法。 ➢ 理解TTC/BTB/染料法测定种子活力的原理。
2. 实验原理
材料：小麦种子 仪器设备：小烧杯；刀片；镊子；温箱 试剂： 0.12％～0.5％TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈 中性，pH7±0.5，不宜久藏，应随用随配）。 0.02％～0.2％靛红溶液或5％红墨水（酸性大红G）。 1％BTB琼脂
4. 实验步骤
TTC/红墨水法
1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认
植物生理学实验6种子生活力的测定ppt课件
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
TTC还原反应如下：
氯化三苯基四氮唑
三苯甲腙
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
有生活力种子 占供试粒数的%
TTC
30
红墨水
30
BTB
30
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
注意事项
? 沿种胚中央准确切开，同粒 TTC/红墨水法各一半 ? TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
染料染色法 TTC法
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
?种子生活力（ seed viability ）：指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。
?种子活力（ seed vigor）：
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
思考题
三种方法测定种子生活力的理论依据有何不同 ?
第五章 种子的活力、劣变和寿命 作物种子学课件(共23张PPT)
4407.6
第二十三页，共23页。
• 80年代以来，我国开展了较为深入的种子活力研
究和应用。
活力种子
可指导我们(wǒ men)生产、选用高
进行种子活力测 正确评定种子质量等级和价格
定，及时了解种 掌握仓贮变化，改善仓贮条件
子活力状况
保证播种质量，一播全苗
妥善处理低活力种子
第六页，共3页。
二、种子劣变的发生和机理： 1. 活力下降和劣变发生 种子活力在达真正成熟时最高，然后便进入活力下降的 不可逆变化，这些不可逆变化的综合效应便称为种子劣变 (deterioration)。
应用(yìngyòng)此方
程可求算
种子要保持一定时间的寿命所要求的温度、
水分
例：一批水稻种子含水量10%，贮藏于10 ℃ ，平均寿命？
预测： LogP50 = 6.531 - 0.159 × 10-0.069 × 10 = 4.251
P50 = 17824〔天〕〔约49.5年〕
此方程简单，缺点是只能求平均寿命，而农业生产上要
细胞器损伤
萌发时修复能力降低——影响正常代谢
代谢的中间产物如乙醇、CO2、醛、酮、酸类、多 胺、丙二醛的积累使活 组织中毒
第八页，共23页。
生理活性物质破 坏与失衡
维生素氧化、损坏——酶活性下降、胚劣变 GA、CK减少，ABA增加——萌发受抑
谷胱甘肽氧化〔2GSH+1/2 O2 GSSG+H2O〕——蛋白合成受阻
种子(zhǒng zi)水分在 5~14% 范围内，每降低 1%，种子(zhǒng zi)寿命延长1倍； 贮藏温度在 1~50℃ 范围内，每降低 5℃ ，种子(zhǒng zi)寿命也延长1倍； 种子(zhǒng zi)平安贮藏的指标是： RH% + ˚ F ≤100
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• 80年代以来，我国开展了较为深入的种子活力研
究和应用。
活力种子
可指导我们(wǒ men)生产、选用高
进行种子活力测 正确评定种子质量等级和价格
定，及时了解种 掌握仓贮变化，改善仓贮条件
子活力状况
保证播种质量，一播全苗
妥善处理低活力种子
第六页，共3页。
二、种子劣变的发生和机理： 1. 活力下降和劣变发生 种子活力在达真正成熟时最高，然后便进入活力下降的 不可逆变化，这些不可逆变化的综合效应便称为种子劣变 (deterioration)。
应用(yìngyòng)此方
程可求算
种子要保持一定时间的寿命所要求的温度、
水分
例：一批水稻种子含水量10%，贮藏于10 ℃ ，平均寿命？
预测： LogP50 = 6.531 - 0.159 × 10-0.069 × 10 = 4.251
P50 = 17824〔天〕〔约49.5年〕
此方程简单，缺点是只能求平均寿命，而农业生产上要
细胞器损伤
萌发时修复能力降低——影响正常代谢
代谢的中间产物如乙醇、CO2、醛、酮、酸类、多 胺、丙二醛的积累使活 组织中毒
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生理活性物质破 坏与失衡
维生素氧化、损坏——酶活性下降、胚劣变 GA、CK减少，ABA增加——萌发受抑
谷胱甘肽氧化〔2GSH+1/2 O2 GSSG+H2O〕——蛋白合成受阻
种子(zhǒng zi)水分在 5~14% 范围内，每降低 1%，种子(zhǒng zi)寿命延长1倍； 贮藏温度在 1~50℃ 范围内，每降低 5℃ ，种子(zhǒng zi)寿命也延长1倍； 种子(zhǒng zi)平安贮藏的指标是： RH% + ˚ F ≤100
种子生活力测定的原理PPT课件
结果计算到近似整数
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23
第23页/共29页
种 子 检 验 结 果 报 告 单
第24页/共29页
第25页/共29页
第26页/共29页
第27页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法（BTB法） • 红墨水染色法 • 软Ｘ射线造影技术
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
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14
第14页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h) 斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆：凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3不染色，或子叶表面有小范围。
2021/7/27
22
第22页/共29页
第六章 种子生活力测定的原理和方法
（6）计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
第11页/共29页
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种 子 检 验 结 果 报 告 单
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法（BTB法） • 红墨水染色法 • 软Ｘ射线造影技术
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h) 斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆：凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3不染色，或子叶表面有小范围。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（6）计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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