种子活力的快速测定(实验五)
种子生活力测定
3、炒种法
数出一定数目的种子，放在锅里或铁板上炒， 能爆响的种子多为有生活力的种子，爆响频率 越快、声音越响，种子生活力就越强；虽然能 爆响，但声音弱而无力的，则是无生活力的种 子。
4、剥胚法
先将种子放在清水中浸泡10～24小时，然后剥去 种皮，放入铺有吸水纸的玻璃器皿中，将玻璃器 皿置于温度为20～25℃的湿箱中6～10小时，凡 是胚不腐烂，且各部分增长伸开，饱满而有光泽 的为有生活力的种子。
种子生活力测定
通过以下四种方法可鉴定果树种子生活力：
1、形态鉴定法
凡砧木种子大小均匀，籽粒饱满，千粒重较重， 种皮有光泽，无霉变气味，无病虫危害，剥去种 皮后，胚和子叶呈乳白色、不透明，压之有弹性、 不出油的种子为有生活力的种子；反之，则为失 去生活力或生活力极弱的种子。
2、染色法
将砧木种子浸入水中10～24小时，使种皮软化， 然后细心剥去种皮（桃、杏、李、核桃等有坚硬 木质外壳的种子，只需轻轻砸碎外壳，不需用水 浸泡），放入染色剂(5％红墨水，或0.1％靛蓝胭 脂红，或0.1％曙红溶液）中，染色1～2小时，再 将种子取出，用清水冲洗干净。观察染色后的种 子，凡胚和子叶完全染色者，为无生活力的种子； 胚或子叶部分染色者，为生活力弱的种子；胚和 子叶没有染色者，为有生活力的种子。
植物生理学实验
实验五种子活力的测定（红墨水法）一、实验目的掌握快速测定种子活力的方法二、实验原理种子生命力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。
活细胞不能吸收红墨水所以不染色。
三、试剂、材料5%红墨水、培养皿、刀片青稞种子四、实验过程1、将随机购买的种子用温水浸泡3-6小时，使其充分吸胀。
2、吸胀后的种子挑选50粒，沿胚中心线纵切为两半。
3、一半至于培养皿中，用红墨水浸泡染色10分钟，染色后倒去红墨水，用清水冲洗至液体无色。
4、另取50粒种子吸胀，沸水煮熟成死种子，重复步骤3，作为空白对照。
五、计算结果未被染色的种子数目种子活力＝*100％总种子数目实验一植物组织水势的测定--小液流法一、实验目的1、掌握植物细胞水势概念及计算公式；2、了解小液流法测定植物组织水势的方法。
二、实验原理1、植物细胞、组织之间以及植物体和环境间的水分间移动方向都由水势差决定；2、当植物细胞或组织放在外界溶液中时：A、ψw＜ψs，则植物组织吸水，C外↑，液滴↓；B、ψw＞ψs，则植物组织失水，C外↓，液滴↑；C、ψw＝ψs，则二者水分保持动态平衡，C外不变，液滴不动。
三、试剂、材料试管、试管架、滴管、打孔器、蔗糖溶液菠菜四、实验过程1、取出8支试管，依次编号1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M、0.60M、0.70M、0.80M一系列不同浓度的蔗糖溶液，取出8支试管用力混匀。
五、实验结果根据公式计算叶片细胞的水势公式：ψw =-RTiC式中：ψw为细胞水势，R为摩尔气体常数，0.083×105（L٠Pa）/（mol٠K）；T为热力学温度，单位K；即273+t ，t为实验温度，单位是℃；i为解离系数，蔗糖为1；C为等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/L。
种子活力的测定
肇庆学院生命科学学院生物科学系植物生理学课实验报告08 年级生本班 B 组28 实验日期10.22姓名杨丹平老师评定＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿实验题目实验五种子活力的测定一、实验目的：掌握种子活力快速测定的几种方法。
二、实验原理：1、活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。
当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲（TTF）。
2.、活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
3红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
三、实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶3、材料：玉米、绿豆吸胀种子四、实验步骤：1．浸种种子在30—35℃温水中浸种5h2.0.5%TTC显色实验将吸胀的玉米种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜；将吸胀的绿豆种子去皮，随机选30粒置于培养皿中，加入0.3%TTC，置于30C观察培养箱中培养30min。
观察浸种胚是否为红色。
另30半粒玉米和已去皮的30粒绿豆置于沸水中2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30C培养箱中染色处理作为对照观察。
计算活种子的百分率。
3.1%BTB染色将吸胀的玉米种子30半粒和去皮的30粒绿豆种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，平放，间距约1cm。
随堂测试--种子活力测定(精)
任务五种子活力测定实训试题库参考答案一、判断题1.不论是何种作物种子，只要是陈种子，在生产上都无利用价值。
（×）2.一般深色种皮的种子比浅色种皮的种子寿命长。
（√）3.一般在低温低湿条件下，采用密闭方式，可延长种子寿命。
（√）4.种子活力和发芽率是衡量种子生理质量的不同指标，具有完全不同的涵义，但是在有的情况下，两者的测定值是基本一致的。
（√）5.电导率测定法适用于所有农作物种子活力测定。
（×）二、选择题1. 在下列检验项目中，测定时需要使用对照样品的是（ C ）A．发芽试验 B.净度分析 C.活力测定 D.水分测定2.能表示种子死与活的概念是（B ）A、生命力B、生活力C、发芽力D、活力3.根据种子寿命通则，若种子含水量由4%到5%，水分每上升1%则种子寿命（D）A 、延长两倍 B、缩短两倍 C、延长一倍 D、缩短一倍4.种子发芽力通常以( B C)表示A.活力B.发芽势C.发芽率D.生活力5.影响贮藏种子的寿命的最最关键因素( D )A.氧气B.水分C.温度D.以上都对6.种子安全贮藏和延长种子寿命的必要条件是（ D）A.通气B.干燥C.低温D.以上都是7. 下列方法可以用于种子活力测定的是（A ）A.电导率测定B.四唑测定C.电泳法D.低恒温烘干法8.活力测定的结果可以衡量种子质量特性中的（C ）A.遗传质量B.物理质量C.生理质量D.卫生质量9.对于种子发芽率和活力的含义和区别，下列哪种表述最为准确？( C )A.发芽率高的种子，其活力必然也高B.发芽率是比活力更敏感的种子生理质量指标C.两批发芽率相同的种子，其种子活力可能具有较大差异D.发芽率和活力是不同的指标，两者之间没有关系10.种子活力测定可以（ A ）A.提供有关高发芽率种子批的田间出苗潜力的信息B.提供种子发芽的潜在能力或胚具有的生命力的信息C.提供种子在适应条件下长成正常植株的能力的信息D.提供种子在室内条件下长成正常幼苗的能力的信息三、简答题：1.什么是种子活力、生活力、发芽力？答：种子活力：指决定种子和种子批在发芽和出苗期间活性强度及该种子特征的综合表现，在广泛的田间条件下，影响种子快速整齐出苗及长成正常幼苗的全部潜在能力特性总称。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。
种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。
本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。
实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。
2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。
3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。
结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。
培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。
种子活力测定—种子活力测定方法分类和要求
三、种子活力测定方法的分类
（四）逆境测定法： 5、冷浸测定（将种子浸入冷水而引起吸胀冷害和损伤，然后移到正常条件 下发芽，按正常幼苗百分率，评定种子活力） 6、高温浸种测定（预先将种子用高温水浸种，冷却后移至适宜温度发芽， 计算正常发芽率，评定种子活力） 7、砖粒测定（生长力测定，希尔特纳测定）（利用一定大小砖粒做发芽床 和覆盖层，观察和测定种子穿透覆盖砖砾层的能力，评定种子活力） 8、盐水浸种测定（利用盐水中氯离子对种子伤害，按正常发芽率评定种子 活力）
三、种子活力测定方法的分类
（五）田间测定法： 1、田间土地出苗率和成苗率测定（测定在田间环境下出苗率和成苗率高低， 评定种子活力） 2、田间早播出苗率和成苗率测定（按早播低温田间条件下出苗率和成苗率， 评定种子活力） 3、田间生长发育性能测定（如禾谷类种子可按分蘖力、株高及其变异系数、 每穗粒数，结实率，千粒重等指标测定） 4、作物产量测定（按不同作物收获产品的单位面积产量测定） 5、作物产品质量测定（按不同作物收获产品的质量测定）
三、种子活力测定方法的分类
（一）物理测定法： 1、种子大小和重量测定法（千粒重、百粒重测定） 2、种子负电性测定（负电性仪器测定） 3、软X-射线测定（种子发育、饱满度、虫蛀和损伤测定） 4、机械损伤测定（三氯化铁溶液测定） 5、种子自由基的测定（自由基扫描仪测定） 6、种子出苗力量测定（盖纸法和测力仪法） 7、种子荧光圈测定（根据不同活力种子外渗荧光颜色的差异测定） 8、种子游离离子根测定（根据不同活力种子带有游离离子根的差异测定）
一、选用原则
2、根据作物的特性选用适宜的方法 低温试验和冷发芽----发芽期间耐寒 性较差的喜温作物，如玉米、大豆等， 不适用于耐寒性较强的作物，如大麦、 小麦、油菜等。 电导率测定是豌豆种子的典型测定方 法，其测定结果与田间出苗率高度相关， 但对其他作物种子，还有待研究。
种子活力的快速测定(实验五)
七、注意事项
以上介绍的两种方法都是以细胞对该物质 的渗透为前提的，因此只能快速的了解种子 具有的发芽潜力，为急需之用。
八、作业
1、比较TTC法与红墨水法两种测定方法的优缺 点。 2、列表格比较两种方法测定的玉米与小麦的新 种与陈种的测定结果。
三、器材与试剂
恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子， 5%红墨水，0.5%TTC。
四、实验材料
玉米、小麦等种子
五、方法与步骤
1．小时左 右），以增强种胚的呼 吸作用。
2．染色观察
①
已洗胀的种子
沿胚中线切割成两半 ②
③
5%或0.5%TTC红墨水染色30～60 min
二、实验原理（红墨水法）
凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物 质的能力，而死的种胚细胞原生质膜丧失 这种能力， 于是染料便能进入死细胞而染色。
二、实验原理（TTC法）
有活力种胚中的脱氢酶可以将2，3，5—氯化三苯基
四氮唑 （TTC）还原成不溶性的红色三苯基甲月替 （TTF），如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不 能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部 位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
将一半置于培养皿中
检查种子的死活(TTC法): 倒去红墨水，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止
沸 水 杀 死 的 种 子
凡种胚不着 色或着色很 浅的为活种 子；凡种 胚 与胚乳着色 程度相同的 为死种子
检查种子的死活(TTC法):凡种子胚部产生 红色反应以鉴定其生活力。
六、计算
种子生活力（％）＝活种子/供试 种子总数×100％
种子活力的快速测定
一、实验目的
了解几种快速测定种子活力的方法，掌握红 墨水染色法和TTC法。
实验七种子生活力的快速测定(精)
种子冲洗l~2次，观察种胚被 染色的情况。凡种胚全部或 大部分被染成红色的即为具 有生活力的种子，种胚不被 染色的为死种子。如果种胚
（30℃~35℃）中保温
中非关键性部位（如子叶的
0.5~1h。另取100粒吸涨种 一部分）被染色，而胚根或
子，于沸水中煮5min后，
胚芽的尖端不染色，都属于
再加入0.5%TTC溶液染色。 不能正常发芽的种子。根据
2
实验原理
有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸代谢途 径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的2，3， 5 - 三苯基氯化四唑（2，3，5 - triphenyl tetrazolium chloride 简称为TTC）还原为红色、不溶 性的甲月替，而且种子的生活力越强，代谢活动越
旺盛，被染成红色的程度越深。死亡的种子由于没 有呼吸作用，因而不会将TTC还原为红色。种胚生 活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被
染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的 深浅程度来判定种子的生活力。
2019/5/4
3
实验材料和器材
• 实验材料
水稻种子
• 器材：恒温箱、小白瓷碗、
镊子、刀片、小烧杯
• 试剂： 0.5% TTC溶液：
称取0.5 g TTC放入小烧杯 中，先加少许乙醇溶解后， 再用蒸馏水稀释定容至100 mL。TTC溶液最好随用随 配，不宜久藏。溶液应遮光
实验七：种子生活力的快速测定
（一）实验目的及意义 （二）实验原理 （三）实验步骤 （四）实验报告
2019/5/4
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实验目的和意义
种子生活力（seed viability测定种子
生活力常采用萌发实验，即在适宜的条件下，
实验五、种子活力的快速测定
实验五、种子活力的快速测定一、实验目的熟悉种子活力快速测定的方法⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法⏹BTB（溴麝香草酚蓝）法⏹红墨水法⏹纸上荧光法二、实验原理⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法二、实验原理⏹红墨水法⏹活细胞的原生质膜具有选择透性，死亡的种胚细胞原生质膜无选择透性；⏹红墨水中的染色成分大红G不能通过选择透性膜，但能通过非选择透性膜。
三、实验材料、器材及试剂⏹材料：小麦种子⏹仪器及器皿：恒温箱，恒温水浴锅，镊子，刀片，培养皿，小烧杯⏹试剂：⏹0.5% TTC溶液（随配随用，若已变为红色则不能继续使用。
）⏹5%红墨水四、实验步骤⏹1、材料准备：将待测小麦种子用30-35℃温水浸种6~8h。
⏹2、切种子：随机取种子30粒以上,用刀片沿种子胚中心线切成两半。
⏹3、染色处理：取一半的种子放在培养皿中，加入染色溶液（刚好浸没种子），30-35℃恒温箱中保温0.5-1h。
⏹4、对照处理：另一半于沸水中煮死，染色同3。
⏹5、结果观察：倒出染色溶液，TTC处理种子用清水将种子冲洗1-2次，红墨水处理种子则用水冲洗至冲洗液无色为止。
观察种胚着色状况。
⏹6、结果验证：随机取种子30粒以上，25℃保温保湿培养，48h检测发芽率。
五、结果与讨论⏹1、计算两种测定法得到的种子发芽率。
统计分析两种测定方法的结果是否有差异。
⏹讨论两种方法有什么不同？你认为哪一种方法测定的结果较好，为什么？⏹2、统计分析种子活力快速测定结果与实际种子萌发结果的差异性。
⏹讨论可能原因。
比较分析种子活力快速测定与种子直接发芽率测定的优缺点。
注意事项⏹TTC处理染色结束后要立即进行鉴定。
凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不能染色都属于不能正常发芽的种子。
⏹红墨水处理后要冲洗充分后观察。
凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
种子生活力测定方法
种子生活力测定方法
种子生活力是指种子在适宜条件下发芽和生长的能力，是种子质量的重要指标
之一。
种子生活力的好坏直接影响着作物的产量和品质。
因此，科学准确地测试种子的生活力是农业生产中非常重要的工作。
种子生活力的测定方法有很多种，其中常用的包括种子萌发率测定法、种子发
芽指数测定法、种子活力指数测定法等。
首先，种子萌发率测定法是通过将一定数量的种子放置在适宜的温湿度条件下
观察其发芽情况来测定种子的生活力。
这种方法简单易行，能够快速地获得种子的生活力信息，因此在实际生产中得到了广泛应用。
其次，种子发芽指数测定法是通过统计一定数量的种子在一定时间内发芽的数
量来测定种子的生活力。
这种方法能够更加客观地反映种子的生活力情况，但需要较长时间来进行实验，因此在实际生产中使用较少。
最后，种子活力指数测定法是通过将种子在一定温湿度条件下培养一段时间后，测定其发芽率和发芽势来综合评价种子的生活力。
这种方法能够较为全面地评价种子的生活力，但操作复杂，需要较长时间来完成实验。
综上所述，种子生活力的测定方法各有优缺点，农业生产中应根据实际情况选
择合适的方法进行测试。
只有通过科学准确地测定种子的生活力，才能保证种子的质量，提高作物产量，为农业生产做出更大的贡献。
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一、实验目的
了解几种快速测定种子活力的方法，掌握红 墨水染色法和TTC法。
种子活力
种子活力是指种子的健壮度，包括迅速、整齐萌发 的发芽潜力、生长潜力。 种子活力的大小取决于遗传基础和发育状态，当种 子成熟时，活力水平达到高峰，随后在采收、加工、 贮藏过程中，种子会发生不同程度的劣变，引起活 力的衰退，进而在播种时，直接影响农作物的产量。 快速测定种子活力可以及时的鉴定种子的健壮度， 对是否还具有发芽的潜力及其使用价值作出尽可能 切合实际的判断。
七、注意事项
以上介绍的两种方法都是以细胞对该物质 的渗透为前提的，因此只能快速的了解种子 具有的发芽潜力，为急需之用。
八、作业
1、比较TTC法与红墨水法两种测定方法的优缺 点。 2、列表格比较两种方法测定的玉米与小麦的新 种与陈种的测定结果。
将一半置于培养皿中
检查种子的死活(TTC法): 倒去红墨水，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止
沸 水 杀 死 的 种 子
凡种胚不着 色或着色很 浅的为活种 子；凡种 胚 与胚乳着色 程度相同的 为死种子
检查种子的死活(TTC法):凡种子胚部产生 红色反应以鉴定其生活力。
六、计算
种子生活力（％）＝活种子/供试 种子总数×100％
三、器材与试剂
恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子， 5%红墨水，0.5%TTC。
四、实验材料
玉米、小麦等种子
五、方法与步骤
1．浸种 将待测种子在30～35℃ 温水中浸种（大麦、小 麦6 h，玉米5 h小时左 右），以增强种胚的呼 吸作用。
2．染色观察
①
已洗胀的种子
沿胚中线切割成两半 ②
③
5%或0.5%TTC红墨水染色30～60 min
二、实验原理（红墨水法）
凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物 质的能力，而死的种胚细胞原生质膜丧失 这种能力， 于是染料便能进入死细胞而染色。二、实验原理（TTC法）
有活力种胚中的脱氢酶可以将2，3，5—氯化三苯基
四氮唑 （TTC）还原成不溶性的红色三苯基甲月替 （TTF），如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不 能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部 位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。