尖锐湿疣病理发展过程的研究

ｓｈａｐｅ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ（ｆ）ａｎｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ，ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｔｏ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ＴＥＭ×６０００
Hale Waihona Puke 方数据．－－——４６－－－——
第３６卷
邹炳辉，等：尖锐湿疣病理发展过程的研究
第１期
图４ 尖锐湿疣的原位杂交，ＣＡｌＭ胞群的部位与垂直表皮柱一致。 ×１００ Ｆｉｇ．Ｉ ＣＡｃｅｌｌ ｃｒｏｗｄｉｎ ｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｏｎｄｙｌｏｍａ×ｉ００
Ｆｕｒｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓＳ ｏｆ ｃｏｎｄｙｌｏｍａｔａ ａｃｕｍｉｎａｔｅ（ＣＡ） ＺＯＵ
Ｂｉｎｇ－ｈｕｆ ４．ＺｔＩＡＮＧ Ｈｕ－ｘｉａｎｇ．ＷＡＮＧ Ｏｕｎ－ｊｉ．ｅｔ ａ１．＊Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ
收稿日期：２００５—０５—３０ 作者简介：邹炳辉（１９５１一），男，浙江永嘉人，主治医师。
１材料和方法
１．１材料３５０例切片均为常规石蜡切片，ＨＥ染 色并再次复阅确诊为ｃＡ。女性２９９例，占８５．４３％， 其中宫颈１５７例，阴道３１例，阴唇５例，外阴及 肛周９７例，尿道口６例，阴阜３例。男性５１例， 占１４．５７％，包括阴茎３４例，肛周１２例，阴囊３例， 阴阜２例。年龄１９～８５岁。 １．２ 方法 １．２．１ 电镜观察：病理确诊为ＣＡ ５例，标本同 时用２．５％戊二醛及１％锇酸固定作电镜标本。经丙
第３６卷第１期 ２００６年２月
温州医学院学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｗｅｎｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ
尖锐湿疣病理发展过程的研究
Ｖｂｌ．３６ ＮＯ．１ Ｆｅｂ．２００６
融司
邹炳辉，张虎祥，王群姬，黄卡特 （温州医学院第一附属医院病理科，浙江温州ｓ２５０００）
［摘要］目的：从组织学角度探讨尖锐湿疣ｃｏｎｄｙｌｏｍａｔａ ａｃｕｍｉｎａｔｅ（ＣＡ）的基本病变、发生发展过程、 病因及病理特征的关系。方法：收集３５０例病理诊断为ｃＡ的病例，观察其病理形态学特征，部分病例做 原位杂交、Ｐ５３与Ｓ－１００蛋白检测及ＴＥＭ观察。结果：①ＣＡ主要是薄层表皮增殖单位（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｐｒｏ— ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｕｎｉｔ）的慢性病毒（ＨＰＶ６、１１）性增生性炎，病变特点是含ＨＰＶ表皮细胞柱的特殊水变性（ｃＡ 细胞群），乳头状增殖、分化及凋亡，三者协同作用是本病的发病基础。②ＨＰＶ感染ＤＮＡ见于水变性表皮
绵状坏死。表层的Ｋｃ核深染、长杆状或碎裂消失， 最后向外脱落（伴水变性的凋亡）。②渗出：部分 病变的棘细胞间浆液渗出使间隙增宽且见单个核 细胞，中性粒细胞浸润，重度Ｋｃ胞浆中可见上述 炎细胞，形成吞噬坏变上皮现象。上皮脚间纤维组 织充血水肿，淋巴细胞、中性白细胞等炎细胞浸 润。③增生：表皮各层及真皮浅层有不同程度的乳 头状增生。部分乳头顶部可见数层角化不全的Ｋｃ。 基底层及深棘层核分裂多见，向上呈乳头状增生的 细胞伴同纤维血管中心索，向下增生的细胞使上皮 足突伸长。深棘层细胞核内偶见３＂－＇－＇４“ｍ嗜碱性包 含体，圆形，染色均匀紫蓝色，边缘整齐有空晕。 ２．１．２电镜观察：深棘层的细胞核水肿，核周有 狭小的水肿区，染色质问有密集大小均匀的电子 密度很高的颗粒，大小约２０ ｎｍ，形态大小一致， 排列均匀，似ＨＰＶ核壳颗粒。其四周有一层均匀电 子密度低的物质（见图１），浅棘层Ｋｃ的线粒体减 少肿胀，内质网扩张囊性变，核糖体脱失，糖原消 失，水肿较重的Ｋｃ浆内膜被颗粒及成束张力原纤 维等挤在核膜附近（见图２）。核固缩，部分核膜 内陷、裂解，染色质部分凝集成团块，部分聚集在 核膜下呈节段性颗粒状，似向凋亡小体发展（见图 ３）。ｃＡ细胞群旁棘细胞间见郎格罕氏细胞细长的 胞浆突起，但未见于ｃＡ细胞群中。相当于颗粒层 细胞的膜被颗粒，角质颗粒均因水肿而减少。 ２．２原位杂交２０例ｃＡ均见阳性表达，其分布与 ＣＡ细胞群存在的位置基本一致（见图４、图５）。该 处为浅棘层以上的细胞核，其阳性表达的形态呈细 颗粒状、环状、蜂窝状、半月状、杆状、球状，碎 裂核亦呈阳性。胞浆中偶见丝网状阳性反应，不全 角化层及有些乳头顶部见索状核。表层已脱落成碎 片的细胞残屑亦见之，为ＨＰＶ传染给他人的根据。
细胞柱的核中，偶见于胞浆及细胞的间质中。③潜伏在表皮内的ＨＰＶ及宿主免疫反应低是本病慢性发展及
反复发作的原因。结论：ＣＡ是表皮增殖单位的慢性病毒性增生性炎。 ［关键词］ 尖锐湿疣；表皮增殖单位；郎格罕细胞；凋亡细胞
［中图分类号］ Ｒ７５２．５３ ［文献标识码］Ａ
［文章编号］ １０００—２１３８（２００６）０１—００４５—０４
圉５ 尖锐湿疣的ｃＡ细胞群原位杂交Ｘ ４００ Ｆｉｇ．５ ＣＡ ｃｅｌｌ ｃｒｏｗｄｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｏｆｃｏｎｄｙｌｏｍａＸ４００
２．３ ｐ５３检测２０｛歹ｌＪＣＡ的基底细胞、Ｋｃ旁的深棘层 细胞核均有部分细胞阳性表达（＞５／｝ｌＰ），占５８．８％。 假性湿疣及ＣＡ病灶旁边的“正常”皮肤组织全部呈 阴性。ＣＡ细胞群区未见Ｐ５３阳性表达。 ２．４ ｓ一１００检测２０例ｃＡ的Ｋｃ细胞呈阴性表达，阳 性表达的细胞均见于基底层深棘层细胞的胞核、胞浆 中，呈棕褐色颗粒状。阳性细胞数为０－－－，１５个／ＨＰ（Ｘ ４００），以４－－－．８个为多见，部分散在，部分较集中（可 能为黑色素母细胞）。细胞体呈星形、杆状、梭状，突 起呈细线状或树枝状分枝，状如神经纤维，深入到深 棘层的细胞间。５例假湿疣（ＨＰＶ阴性）的皮肤亦见Ｓ． １００表达。阳性细胞数目与ＨＰＶ阳性的皮肤相似。 ３讨论 ３．１ ｃＡ细胞群形成及演变ＨＰＶ ６、ＨＰＶｌｌ感染 ＥＰＵ的基底细胞后虽受损伤，但同时分化、增殖形 成细胞柱的全部细胞。作者将此病变的细胞柱命 名为ＣＡｌｍ胞群（见图４），认为此细胞群为ｃＡ的特 殊病变，与结核结节诊断结核病相似。ＣＡ细胞群
ｃｈｒｏｎｉｃ， ｖｉｒａｌ， ｈｙｐｅｒｐｌａｓｔｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｈａｌｌｏｗ ｌａｙｅｒ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｕｎｉｔ，ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｗｅｒｅ ｓｐｅｃｉａｌ ｈｙｄｒｏｐｉｃ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（ＣＡ ｃｅｌｌ ｇｒｏｕｐ’ｏｆ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌ
ｒｕｃｕｒｒｅｎｔ ｒｅａｓｉｏｎ ｏｆ ＣＡ． Ｋｅｙ ＷＯｒｄＳ： ＣＡ；ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｕｎｉｔ；ｌａｎｇｈａｎｓ ｃｅｌｌ；ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｃｅｌｌ
目前尖锐湿疣（ｃＡ）的流行已到为全球各种性 传播性疾病的第一位或第二位…。本研究根据《实 用皮肤组织病理学》诊断标准［２］，对我科２０００一 ２００４年接受的５４９例临床拟为ｃＡ活检标本中明确 病理诊断ｃＡ的３５０例进行研究，部分病例采用电 镜、原位杂交、Ｐ５３、Ｓ一１００蛋白检测，以进一步探 索ｃＡ形态学诊断标准、主要病变发展的规律及经 久不愈的原因。
万方数据
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第３６卷
温州医学院学报
第１期
酮梯度脱水，ＥＰＯＮ８１２包埋，ＬＫＢ超薄切片机切片， 定位后，用醋酸双氢铀、枸橼酸铅双重染色， ＨＩＴＡＣＨＩ．７５００型透射电镜观察。 １．２．２原位杂交方法：常规病理确诊为ｃＡ ２０例， 检测ＨＰＶ６、ＨＰＶｌｌ，采用北京中杉金桥生物技术有 限公司原位杂交试剂盒，方法及步骤参照说明书， 阳性表达为核呈深蓝色。 １．２．３免疫组化方法检测Ｐ５３、Ｓ一１００蛋白：ＣＡ２０ 例，假性ＣＡ５例，Ｐ５３单克隆抗体、Ｓ一１００抗体均来 自ＺＹＭＥＤ公司产品，由北京中杉金桥生物技术有限公 司分装。染色用ｓ－Ｐ法，结果判定Ｐ５３阳性表达为细 胞核黄褐色。在高倍显微镜（×４００）检测１０个高 倍视野病灶及病灶旁“正常组织”（或正常皮肤）的 阳性数，阳性＞５个／Ｈｅ，阴性＜４个／ＨＰ。Ｓ一１００阳 性表达在胞核、胞浆中呈棕褐色颗粒状。在病变组 织中检测１０高倍视野（×４００）出现阳性棕褐色的 细胞数与疣旁正常组织比较每个高倍视野的均值。
２结果
２．１ 形态学观察 ２．１．１光镜包括油镜观察：ｃＡ的病变部位与表皮 增殖单位（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｕｎｉｔ ＥＰＵ） 一致，表现该处棘层上皮细胞群水变性、坏死及增 生为主的炎症，其病变为：①变质：主要为浅棘层 以上的细胞水变性，部位与垂直表皮柱一致。水变 性的程度由深棘层到表层依次递增，开始为浆内水 肿、疏松、淡染，出现空泡以后核周有狭窄的空隙 （核周晕），水肿范围渐扩张，使浆内形成大小不一 的空泡，且多位于一侧而变长圆形；严重者，胞浆 呈气球状即挖空细胞（Ｋｏｌｉｏｃｙｔｅ，Ｋｃ）。核呈异型 性，即染色深呈梭形、毛虫状、杆状、空洞形等。严 重的Ｋｃ其细胞间桥及核消失，互相融合成灶性海
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ＣＡ ｗａｓ ｏｂｅｒｓｅｒｖｅｄ，Ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｄｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＩＳＨ）ｗａｓ ｍａｄｅ ｉｎ ｓｏｍｅ ｃａｓｅＳ．Ｐ５３
ａｎｄ ｓ一１００ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｏｂｅｒｓｅｖｅｄ ｕｎｄｅｒ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：１．ＣＡ ｗａｓ
ｃｏｌｕｍｎ ｗｈｉｃｈ ｃｏｎｔａｉｎ ＨＰＶ ａｎｄ ｐａｐｉｌｌｏｓｅ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ｏｆ ｓｔｒａｔｕｍ ｓｐｉｎｏｓｕｍ ｃｅｌｌ．Ｔｈｅ ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ｗａｓ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂａｓｉｓ ２．ＤＮＡ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ＨＰＶ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｎｕｃｌｉ；ｏｆ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌ ｃｏｌｕｍｎ ｗｉｔｈ ｈｙｄｒｏｐｉｃ ｄｅｇｅｎｅｒａ— ｔｉｏｎ，ｏｃｃａｓｉｏｎａｌｌｙ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ａｎｄ ｉｎ ｍａｔｒｉｘ。３。Ｔｈｅ ｒｅａｓｏｎ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ