高效液相色谱法测定独角莲膏中连翘苷的含量

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连翘中连翘苷的提取方法研究

连翘中连翘苷的提取方法研究作者：闫久江来源：《科学与财富》2017年第05期摘要：本实验采用正交实验设计法，以高效液相色谱法测定从连翘药材中提出连翘苷的量为考察指标，考察提取次数、加水倍数、提取时间3个因素。

含量测定方法：色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）；流动相以乙腈-水（22：88）；检测波长为277nm；流速1.0mL·min-1；柱温：35℃。

连翘苷对照品在50～350μg/ml范围内线性关系良好。

连翘苷平均回收率分别为99.6%。

连翘苷最佳提取工艺为加入8倍量水，煎煮提取90分钟，连续提取2次。

本工艺稳定、可行、收率高；测定方法简便、准确。

关键词：连翘；提取；工艺连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa （Thunb.）Vahl的干燥果实。

连翘分布辽宁、河北、河南、山东、江苏、湖北、江西、云南、山西、陕西、甘肃等地。

连翘具有清热解毒，消肿散结等功效。

《日华子本草》记载："通小肠，排脓。

治疮疖，止痛，通月经。

"连翘常用于痈疽、乳痈、风热感冒、神昏发斑、温病初起、温热入营、热淋尿闭等。

连翘具有改善学习记忆障碍、舒张血管、抗氧化、抗菌、抗感染、解热、抗DNA损伤、防护耳毒性等药理作用。

连翘苷为连翘主要成分之一。

连翘苷作为药用的为木犀科植物连翘Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl的干燥果实的提取物，具有清热、解毒、散结排脓等功效。

本实验以连翘苷为指标对连翘提取工艺进行研究。

1 仪器与试药实验室用高纯水制备器（北京科誉兴业科技发展有限公司）；TMSH-6050B超级恒温水槽（上海添时科学仪器有限公司）；FA1204CFAC型全自動內校電子分析天平（北京同德创业科技有限公司）；EX1600四元低压梯度液相色谱仪（南京皓而普分析设备有限公司）；TY-727型可见分光光度计（台州斯帕克仪器仪表有限公司）；PHS-550智能型台式酸度计（杭州陆恒生物科技有限公司）；WP-UP-Ⅲ-20精密型实验室专用超纯水机（四川沃特尔水处理设备有限公司）。

HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价

HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价【摘要】目的：使用HPLC方法来针对连翘中连翘苷含量的不确定性进行分析，总结导致不确定因素产生的成因。

方法：结合我国官修药典相应的连翘含量测定法来规范测定过程，并且针对测量过程进行分析来找出不确定度产生的成因；结果：使用HPLC这种方法来测定连翘苷含量的不确定度大约为1%，最终确定其含量不确定度的主要源为对照品称量。

【关键词】连翘；连翘苷；含量测定；不确定度；高效液相色谱法实验室质量控制可以在很大程度上决定实验结果和测量不确定度。

通过一系列不确定因素的控制就可以找到一个测量数值的合理区间，进而让一个数值变为一个阈值范围，不免将检验结果错判，保证检测结果的有效性。

连翘花是木犀科植物的一种，在民间多作为茶类饮品，对于风热感冒、咽喉肿痛等症状的治疗有奇效。

但是目前对于连翘花中的连翘苷测定的相关文献还仍然较少，本文对连翘苷含量的测定方法进行了简要介绍，并且总结了不确定度的影响要素，希望可以给相关工作的开闸能提供一些参考。

1仪器与材料戴安Ultimate3000高效液相色谱仪(CHROMELEON工作站，紫外检测器)；METrLERAX205DR电子天平(瑞士)；RQ一300VDE型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

连翘苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号为110821—200508)，甲醇(色谱纯，MERCK)，水为高纯水。

连翘花药材2007年4月采自河南省林州市石板岩乡王相岩桃花谷，经李振国主任药师鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspense(Thunb．)VaIll的干燥花。

二、连翘花中连翘苷的含量测定（一）色谱条件色谱柱为DIONEXC18色谱柱(DIONEXAcclaim，5Ixm，150x4．6am)，乙腈一水(25：75)为流动相，流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长277nm。

（二）对照品溶液制备精密称取连翘苷对照品5．14mg置25ml容量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，摇匀，，备用。

高效液相色谱法同时测定连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷含量探讨

高效液相色谱法同时测定连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷含量探讨【摘要】目的：在测定连翘叶中连翘苷与连翘酯苷A含量时采取高效液相色谱法进行同时测定。

方法：流动相是甲醇-0.11%磷酸溶液(32：68)，色谱柱是Agilent Zorbax SB－C18柱，227 nm为流动波长，1.0mL/min为流速，30℃为柱温度，10μL为进样量。

结果：连翘酯苷A进样量为293.170 ～3664.624ng(r=0.999980)，平均回收率98.97%(RSD=1.89%)；连翘苷进样量为333.760~4172.000ng(r=0.999991),平均回收率99.74%(RSD =2.16%)。

结论：依据高效液相色谱法对连翘叶中连翘苷与连翘酯苷A含量同时测定具有结果准确、操作简便、专属性强等优势，值得广泛应用。

【关键词】高效液相色谱法；连翘叶；连翘苷；连翘酯苷；含量连翘是木犀科连翘，属落叶灌木植物，其果常被用作一种中药材，具备消肿散结、清热解毒、疏散风热的作用，尤其是应用在抗病毒、抗菌以及解热中效果更为显著，此外也是临床上用来治疗瘰疬、痈疽、乳痈、风热感冒、丹毒、等的关键药物[1]。

在国内山西、河南、山东等地民间不少制成茶叶饮用，被人们当做一种保健的药物。

《中华本草》以及《中药大辞典》记载连翘主治心肺积热，具有叶清热解毒之功效。

1 资料与方法1.1 实验仪器与设备高效液相色谱仪型号为Agilent 1100 ，主要有高压四元梯度泵、在线真空脱气机、柱温箱、自动进样器、美国Agilent公司研发的二极管阵列检测器、XW-80A微型旋涡混合仪、JA5003A分析天平仪、KQ-250E型超声波清洗仪。

连翘苷对照品选自中国食品药品检定研究院（对照品批号110821-200610）；连翘酯苷A对照品选自中国食品药品检定研究院（测定用含量为93.2%，对照品批号111810-201102）；色谱纯为甲醇，超纯水为实验用水，其他试剂均为分析纯。

高效液相色谱法测定感冒热毒清合剂中连翘苷的含量

高效液相色谱法测定感冒热毒清合剂中连翘苷的含量目的建立感冒热毒清合剂中连翘苷的高效液相色谱（HPLC）法含量测定方法。

方法对处方中连翘进行定性鉴别，并对连翘苷进行HPLC法测定，采用色谱柱资生堂SHISEIDO CAPCELL PAK MG-C18柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm），流动相乙腈-水（76∶24），流速1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长277 nm。

结果连翘苷在6.88～137.6 μg/mL范围内呈良好的线性关系（r = 0.9992），连翘苷的平均回收率为99.20%、99.96%、98.73%。

结论本文首次建立了感冒热毒清合剂中连翘苷的HPLC含量测定方法，结果准确，重复性好，可作为感冒热毒清合剂的质量评价方法。

[Abstract] Objective To establish a method on content determination of phillyrin in Ganmao-reduqing Mixture by high performance liquid chromatography （HPLC）. Methods Phillyrin was performed qualitative identification. The content of phillyrin in mixture was determined by HPLC with a SHISEIDO CAPCELL PAK MG-C18 column （4.6 mm × 250 mm，5 μm），acetonitrile-water （76∶24）was used as mobile phase and the flow rate was 1.0 mL/min. The columm temperature was set at 30℃and the wavelength of the detector was set at 277 nm. Results The linear range for phillyrin was 6.88-137.6 μg/mL and the correlation cofficient was 0.9992. The average recovery of phillyrin was 99.20%，99.96%，98.73% respectively. Conclusion This is the first time to establish a method using HPLC for determination of phillyrin in Ganmao-reduqing Mixture. The method is accurate，reproducible and suitable to be used for quality assessment of Ganmao-reduqing Mixture.[Key words] Ganmao-reduqing Mixture；Phillyrin；High performance liquid chromatography；Content determination感冒熱毒清合剂（南制字2011F19001）是解放军第一一七医院结合长年的临床实践，并进行处方筛选而研制成的适合临床、治疗感冒效果好、质量稳定的纯中药制剂。

高效液相色谱法测定人血浆中连翘苷含量

高效液相色谱法测定人血浆中连翘苷含量【摘要】目的建立高效液相色谱法，用于测定人血浆中连翘苷的质量浓度。

方法采用内标法，以ThermoC18柱（4.6mm×250mm，5μm）为固定相，以乙腈-水-冰醋酸(17：83：0.4 ) 为流动相，流速为1mL／min，检测波长为277nm。

结果血浆中连翘苷质量浓度在0.10～4.00μg／ml范围内与峰面积比值线性关系良好(R2= 0.999) ，最低检测浓度为0.05μg／ml，回收率达90％以上。

结论该方法具有较高的准确度，线性范围宽，方法灵敏，专一性好，操作简便，适用于连翘苷血药浓度的测定及临床药代动力学研究。

【关键词】高效液相色谱法；连翘苷；血药浓度HPLC determination Of Phillyrin in Human PlasmaQIN Ying-pu1，MO Wu-ming21.Guangxi Wuzhou People’s Hospital, Wuzhou 543000, China;2.Guangxi Wuzhou Sanjian Pharmaceutical Co., Ltd，Wuzhou 543001, China;【Abstract】Objective To determine the concentration of Phillyrin in human plasma by HPLC with ultraviolet detetion．Methods The internal standard method was used．The evaluation of Phillyrin was car ried out by ThermoC18 colum (4.6mm×250mm，5μm)w ith the mobile phase ofAcetonitrile - water - acetic acid (17：83：0.4 ) and the detection wavelength was 277nm．The flowrate was 1 mL／min．Results The calibration curve for plasma Phillyrin in range of 0.10～4.00μg／ml (R2= 0.999)．The detection limit of Phillyr in was 0.05μg／ml．The recovery was more than 90%．Conclusion This method is accurate，sensitive，specific and convenient，which could be used in the determination of plasma Phillyrin and its pharmacokinetic study in clinic．【Key words】HPLC；Phillyrin；blood drug concentration连翘，又名旱莲子(《药性论》)、大翘子(《新修本草》) ，为木犀科植物连翘Forsythia suspense(ThunbVah1)的干燥果实。

高效液相色谱法测定养阴合剂中连翘苷含量

高效液相色谱法测定养阴合剂中连翘苷含量王祯旭;车坷科;杨帆;邓开英;丁家昱【摘要】Objective To establish an HPLC method for the content determination of phillyrin in Yangyin Mixture to provide a quality control methods for it. Methods The Waters SunFire C18 column(150 mm × 4. 6 mm,5 μm) was used with the mobile phase of ace-tonitrile-0. 2% phosphoric acid(19 :81)with the flow rate of 2. 0 mL/min. The column temperature was 30 ℃,and the detection wavelength was set at 230 nm. Results The linear range of phillyrin was 0. 021 24-0. 424 8 μg ( r=0. 999 9). The average recovery was 98. 44% with the RSD of 1. 42%( n=6). Conclusion The method is simple,rapid and accurate,and can be used for the quality control of Yangyin Mixture.%目的：建立测定养阴合剂中连翘苷含量的高效液相色谱（HPLC）法，用以控制养阴合剂的质量。

方法色谱柱为Waters SunFire C18柱（150 mm ×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈－0.2%磷酸（19：81），流速为2.0 mL／min，柱温为30℃，检测波长为230 nm。

HPLC测定连翘酯苷-β-CD包合物中连翘酯苷的含量

HPLC测定连翘酯苷-β-CD包合物中连翘酯苷的含量
HPLC测定连翘酯苷-β-CD包合物中连翘酯苷的含量
建立连翘酯苷-β-CD包合物中连翘酯苷的含量测定方法.采用高效液相色谱法,Thermo C18(250×4.6mm)以乙腈-水-冰醋酸为流动相,其比例为13:87:0.2.检测波长为332nm,流速为1.5mL/min,柱温25℃.连翘酯苷浓度在5.7-19.0μg·mL-1与峰面积积分值呈良好的线性关系,A=2×108C+44126,r2=0.9999.该方法灵敏,简便,重现性好,结果准确,可用于连翘酯苷-β-CD包合物中连翘酯苷的含量测定.
作者：王引珍霍丽丽张立伟WANG Yin-Zhen HUO Li-Li ZHANG Li-Wei 作者单位：山西大学分子科学研究所,山西省太原市坞城路92号,030006 刊名：光谱实验室 PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY 年，卷(期)：2009 26(2) 分类号： O657.7+2 关键词：高效掖相色谱法连翘酯苷-β-CD包合连翘酯苷。

中药连翘色谱法检测

中药连翘色谱法检测连翘，临床常用中药。

来源于木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实。

功能与主治：清热解毒，消肿散结，疏散风热。

用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。

单位购进两个产地连翘，标号为1号连翘、2号连翘，见下图。

用薄层色谱法、高效液相色谱法鉴别其真伪优劣。

薄层色谱法检测分别取1号连翘、2号连翘粉末1g，各加石油醚（30～60℃）20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。

另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。

吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

见下图。

结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

1号连翘、2号连翘均为真品。

高效液相色谱法检测色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为277nm。

对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.27mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备分别取1号连翘、2号连翘细粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加在中性氧化铝柱（100～120目，1g，内径为1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml冼脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

中药分析课程论文

连翘药材中连翘苷的含量的测定及提纯应用化学112班王奔摘要:建立连翘药材中连翘苷的含量测定方法，比较不同连翘药材中连翘苷的含量。

方法:采用反相高效液相色谱法测定不同产地连翘药材中连翘苷的含量，流动相为乙睛一水(25 :75)，流速为1.OmL /min-1，检测波长为277nm，进样量为10 μL，柱温为30 0C。

结果:在选定色谱条件下，连翘苷分离度良好，线性范围为0.4348一4. 348μg ，r = 0. 9999，平均回收率98.9%,RSD=0.68% (n=6);不同连翘药材中连翘苷含量差异较大，其中陕西洛南，湖北邵县以及四川成都的连翘药材中连翘苷含量相对高于其它产地。

结论:该方法测定连翘中连翘苷的含量，简单、灵敏、准确、重现性好，连翘苷在各产地连翘间差异较大。

关键词:HPLC法;连翘;连翘苷Abstract : Objective:To develop a method for determining the content of phillyrin in Fruc;tus Forsythiae and to c;om-pare the content in Fruc;tus Forsythiae from different habitats. Methods:HPLC was adopted to determine the content of phillyrin} the mobile phase was ac;etonitrile一water (25:75)，the velocity was 1.0mL·min-1，the UV detection wavelength was 277nm} the sampling volume was l0mL} the temperature of column was 300C.Results:Under the selected Chromatography condition the phillyrin was observed in a good separation degree ，a good linear with range of 0. 4348-4.348μg，r=0.9999，the average recovery was 98.9% and RSD was 0. 68%(n=6) . The content of phillyrin in Fructus Forsythiae from different habitats is different of which the content of phillyrin in Fruc;tus Forsythiae from Luonan( Shaanxi )，Shaoxian ( Hubei) and Chengdu ( Sichuan) are higher than that of others. Conclusion : The method is simple sensitive } ac;c;urate and with good reproducibility. It c;an he used to determine the content of phillyrin in Fruc;tus Forsythiae. The content is different with the habitat of Fruc;tus Forsythiae.Key words:HPLC;Habitat;tus Forsythiae;Phillyrin引言：连翘为木犀科植物,为常用中药材,具有清热解毒、消肿散结的功效具有较强的抑菌和抗病毒，抗疲劳，减肥等作用。

连翘苷

连翘苷
【英文名】Phillyrin
【分子式】C27H34O11
【分子量】534.56
【CAS号】487-41-2 @新乡博凯生物技术有限公司
【检测方式】高效液相色谱法HPLC≥98%
【性状】本品为结晶粉末
【提取来源】本品为木犀科植物连翘的干燥果实
【药理性质】熔点184℃～185℃
【用法】色谱条件：流动相；乙腈-水（25：75）为流动相，检测波长为277nm
【性味与归经】苦，微寒。

归肺、心、小肠经
【功能与主治】清热解毒，消肿散结。

用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋尿闭。

连翘苷可药用，具有清热、解毒、散结排脓等功效。

主治温热、疮疡、瘰疬、丹毒、班疹、流感，可水煎服，或加入方剂中。

人药，兽药，农业用途广泛。

常用于风热感冒。

【来源】在中国，作为药用的为木犀科植物连翘的干燥果实的提取物。

一般每公斤含量可达3%左右。

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ｎｎｔ。结果连翘苷进样量在０１２ｇ０７２．４４～．１
２１。结论．６
时线性良好（＝０９９８，均回收率为９．２，Ｓｒ．９９）平９２ＲＤ为
该方法准确、简便、重现性好、专属性强，可用于该产品中连翘苷含量的测定。
［ｓａｔ０ｊｃｉｅＡｂｔｃｒ］ｂｅｔＴｏｅｔｂｉｔｏｅｅｍｉｅｈｏｔｎｆｈｌｒｆｊｏｉｇｏｖｓａｌｈａｍｅｈｄｔｄｔｒｎｅｎｅｔｉｙｉｏｉｌｎａｓＯｔｃｏｐｌｎＤｕａａ
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６・
ＳＣＵＡＯＵＡＦＡＴＩＨＮＪＲＮＬＯＮＡＯＭＹＶ．８Ｎ１２１ｏＬ１ｏ．００
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论著・
高效液相色谱法测定独角莲膏中连翘苷的含量
朱俊德，余资江，龚明 △
（．１贵阳医学院基础医学院人体解剖学教研室，贵州贵阳５００；２贵州益佰制药股份有限公司药物研究所，５０４．贵州贵阳５００）５０２
独角莲膏系《朱仁康临床经验集》中的经验方，由独角莲、角刺、皂白芷、己、花、翘、南星、猬防银连生刺皮、山甲片、当归、海桐皮、苏木、海带、大麻仁、旆莶、干蟾、乳香、没药与血余等组成，具有提脓拔毒，消肿轻坚。临床上用于主治痈肿，毛囊炎，瘢痕疙瘩，神经性皮炎等。由于该制剂的药材较多，组成复杂，且每一种成分的含量偏底。中连翘中主要含连翘苷、其连翘酚、连翘酯苷、齐墩果酸、素、松脂樟脑、龙脑等成分［。对１］连翘的含量测定，文献报道较多的是连翘中连翘苷的含量测定，其含量测定方法有高效液相色谱法、薄层扫描法、薄层一分光光度法等［。为了更好控制该制２］剂的质量，故对该制剂中连翘苷的含量进行高效液相色谱测定。结果表明，该方法准确、简便、重现性好、专属性强，可用于该产品中连翘苷含量的测定。
（．ｐｒｍｅｔｆＡｎｔ１Ｄｅａｔｎａｏｏｍｙ，ｕｙｎｄｃｌｏｌｅＧｉａｇ５００；．ＤｅａｔｎｆＤｒｇＧｉａｇＭｅｉｌｇ，ｕｙｎ５０４２ａＣｅｐｒｍｅｔｕｏ
ＲｅｅｒｈＧｕｚｏｉａａｍａｙＣｄ，ｉａｇ５００，ｉａ－ｓａｃｉｈｕＹｂｉＰｈｒｃｏＬｔＧｕｙｎ５０２Ｃｈｎ）
【要】目的建立用高效液相色谱（Ｌ）ｔ摘ＨＰＣｉ定独角莲膏中连翘苷的含量的方法。方法采用Ｈｐｒｌ￣Ｊｙｅｓｉ
ＯＤ２５００ｍｍ）Ｓ（． ×２０色谱柱，乙腈与水（４７）２：６的混合液为流动相；流速为１０ｍｌｎ柱温为３．／，ｍｉＯ℃ ，检测波长２７２
ｔｒｎｈｏｔｎｆｈｌｒｆｕｉｌｎａ．ｅｍｉｅｔｅｃｎｅｔｉｙｉｏｊｏｉｇｏｏｐｌｎＤａａ
［ｙｒｓｐａｔｒｐｒｔｎ；ｃｒｍａｏｒｐｙｉｈｐｅｓｒｑｉ；Ｐｉｙｉ；ＤｕｉｌｎａＫｅＷｏｄ］ｌｎｅａａｉｓｈｏｔｇａｈ；ｈｇｒｓｕｅｌｕｄｈｌｒｐｏｉｌｎｊｏｉｇｏａａ
【关键词】植物制剂；色谱法；高效液相；连翘苷；独角莲膏
【中图分类号】Ｒ３３１
【文献标识码】Ａ
ＤｔｍｉａｉｎｏｈｌｒｎｏｕｉｏｉｎａｙＨＰＣｅｅｎｔｆｉｙｉｆｊａｌｇｏｂＬｒｏＰｌＤａＺＨＵＪｎｄＵｉｉｎＯＮＧｎｕ — ｅ，ＹＺ－ａｇ，ＧｊＭｉｇ。