HPLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价
HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价【摘要】目的：使用HPLC方法来针对连翘中连翘苷含量的不确定性进行分析，总结导致不确定因素产生的成因。
方法：结合我国官修药典相应的连翘含量测定法来规范测定过程，并且针对测量过程进行分析来找出不确定度产生的成因；结果：使用HPLC这种方法来测定连翘苷含量的不确定度大约为1%，最终确定其含量不确定度的主要源为对照品称量。
【关键词】连翘；连翘苷；含量测定；不确定度；高效液相色谱法实验室质量控制可以在很大程度上决定实验结果和测量不确定度。
通过一系列不确定因素的控制就可以找到一个测量数值的合理区间，进而让一个数值变为一个阈值范围，不免将检验结果错判，保证检测结果的有效性。
连翘花是木犀科植物的一种，在民间多作为茶类饮品，对于风热感冒、咽喉肿痛等症状的治疗有奇效。
但是目前对于连翘花中的连翘苷测定的相关文献还仍然较少，本文对连翘苷含量的测定方法进行了简要介绍，并且总结了不确定度的影响要素，希望可以给相关工作的开闸能提供一些参考。
1仪器与材料戴安Ultimate3000高效液相色谱仪(CHROMELEON工作站，紫外检测器)；METrLERAX205DR电子天平(瑞士)；RQ一300VDE型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
连翘苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号为110821—200508)，甲醇(色谱纯，MERCK)，水为高纯水。
连翘花药材2007年4月采自河南省林州市石板岩乡王相岩桃花谷，经李振国主任药师鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspense(Thunb．)VaIll的干燥花。
二、连翘花中连翘苷的含量测定（一）色谱条件色谱柱为DIONEXC18色谱柱(DIONEXAcclaim，5Ixm，150x4．6am)，乙腈一水(25：75)为流动相，流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长277nm。
（二）对照品溶液制备精密称取连翘苷对照品5．14mg置25ml容量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，摇匀，，备用。
HPLC测定双黄连口服液中连翘酯苷A的含量
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｆ ｏ ｒ ｓ ｙ ｔ ｈ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ Ａ ｉ ｎ Ｓ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｌ ｉ ａ ｎ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
摘 要 ：目的 建立双 黄连 口服液 的连翘 酯苷 含量 测定方法 。方法 采用Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ￣ Ｊ Ｊ 定连翘酯苷Ａ的含量 ，检测 波长２ ８ ０ ｎ ｍ； 流动相 ：甲醇． ０ ． ４ ％冰醋 酸（ ３ ０ ： ７ ０ ） ；流 速： １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ 。结果 连翘酯苷Ａ在 １ ． ４ － １ ５ ｇ 范围 内线性 关系 良好 。加 样 回收率 ９ ８ ． ０ １ ％，Ｒ Ｓ Ｄ ＝ Ｏ ． ８ ９ ％。结论 所用方法简便可行 ，重复性好 ，为双黄连 口服液 的质 量控 制提供 了依据 。 关键词 ：双 黄连 口服 液；连翘 酯苷Ａ；高效液相色谱法 中图分 类号 ：Ｒ９ ２ ７ ． ２ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ６ ７ ２ ． ９ ７ ９ Ｘ （ ２ ０ １ ３ ）０ １ ． ０ ０ ４ ９ ． ０ ２
０ ． ８ ９ ％ ５ ） ． Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｈｏ ｔ ｄ ｉ ｓ ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ｎｄ ａ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｉ ｂ ｌ ｅ ． Ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏｒ ｆ ｈｅ ｔ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｓ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｌ ｉ ｎ ａ
HPLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
中图分类 号 ：Ｒ ８ ；Ｒ９ ７ ２ ２４ ２．
文献 标 识码 ：Ａ
文章 编号 ：１ ０ —７ ７ （０ ０ ８０ ５ — ３ ０ ２７ ７ ２ １ ）０ —７ ４０
Ｄｅｅ ｍｉ ａｔｏ ｆＦｏ ｓ ｔ ｎ ｉ ｈｕ ｎｇ ａ ｌａ Ｐａ ｔｃ ｅ ｙ ＨＰＬＣ ｔ ｒ ｎ ｉ ｎ ｏ ｒ ｙ ｈｉ ｎ Ｓ ａ ｈｕ ｎｇＩ ｎ ｒ ｉｌｓ ｂ ｉ
ｂ ｙ ＨＰＬＣ．Ｍ ｅｈ ｄ ｅ ｏ ｔ ｉｅ ｅｈ ｄ ｗａ ｃ ｉｖ ｄ ｆ ｒ ｔ ｅ ｓ ｐ ｒｔｏ ｎ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｈ ｅｅ ｔ ｄ ｔ ｏ ｓＴｈ ｐ ｉ ｚ ｄ ｍ ｔ ｏ ｓａ ｈ ｅ ｅ ｏ ｈ ｅ ａ ａｉｎ ａ ｄ ｄ ｔｃｉ ｆｔ ｅ ｓ ｌｃｅ ｍ ｏ
连 翘 中连 翘 苷 含量 测 定 方 法 进 行 了研 究 ＿ Ｊ １ 。结 果
号 ：１Ｏ ２ —２ｏ０ ） 双 黄连 颗粒 （ １８ １ ０ ６９ 哈尔 滨儿 童 制 药 厂有 限 公 司 ，批 号 ：０ ０ ０ 、０ ０ ０ 、０ ０ ０ 、 ７ ８ １ ７ ８ ２ ７ ６ ３
７４ ５
中 国药 事 ２ １ 第 ２ 卷 第 ８期 ０ ０年 ４
ＨＰ Ｃ法 测 定 双 黄 连 颗 粒 中连 翘 苷 的 含 量 Ｌ
杨 立 志 ，杨 瑞 琪 ，姜 雪 敏 （ 龙 省 西 药品 验 鸡西 １ １ ； 黑 江 药品 验 ） 黑 江 鸡 市 检 所， ｔ ， ｎ ｔｃ ｎ ｂ ｐ ｌ ｄｆ ｒｔ ｅ ｑ ａｉｙ ｃ ｎ ｒ ｌｏ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ ｌ ｎ Ｐ ｒｉｌｓ ｉ ｌ ｎ ｃ ｕ ａ ｅ ａ ｄ ｉ ａ ｅａ ｐ ｉ ｏ ｈ ｕ ｌ ｏ ｔｏ ｆＳ ｕ ｎ ｈ ａ ｇ ｉ ａ ｔｃｅ ． ｅ ｔ ａ ＫＥＹ ＯＲＤＳ ｆ ｒｙ ｈ ｎ￣ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ １ ｎ Ｐ ｒｉｌｓ Ｈ Ｐ Ｗ ： ｏ ｓ ｔ ｉ Ｓ ｕ ｎ ｈ ａ ｇｉ ａ ｔｃｅ ； ＬＣ ａ
HPLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
的患儿。如芬太尼复合丙泊酚组麻醉 中为了控制应 激反应 用 大剂量 芬 太尼往 往会 引起 胸壁 肌 肉僵硬 而
影响 患者 的呼 吸功 能 ， 时 间输注会 有 蓄积 ， 响患 长 影 儿的苏 醒 ， 会 引 起 术后 延 迟 性 呼 吸抑 制 。因此 芬 也
［］ １ 王若松． 静脉麻 醉与药 物输注学 ［ ．北京 ： 民军医 出版社 ， Ｍ］ 人
维普资讯
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２ ９２ ・
滨州医学院学报 ２ ０ ０ ７年 ８月第 ３ ０卷第 ４期
Ｂ ｏｒａ． ｇ ２０ Ｖ １３ Ｎｏ４ ＭＵ Ｊｕ １Ａｕ．０ ７， ｏ．０。 ． ｎ
表 ２ 三组患儿皮质醇（ ｏ） Ａ Ｔ 变化 （ ２ ， Ｉ） Ｃｓ与 Ｃ Ｈ ｎ＝ ０ － － ｓ
副作用 ， 且两种药半衰期短 ， 适合用于短时间手术麻 醉…。本文结果表明瑞芬太尼、 丙泊酚复合全凭静 脉麻醉用于ｄ Ｊ扁桃体 、 ，Ｌ 腺样体切除术时 比其他两
种麻 醉方 法有更 加 稳 定 的血 流动 力 学 变 化 ， 醒 时 苏 问也 明显 短 于 其 他 两 种 麻 醉 方 法 。瑞 芬 太 尼 是 阿片受体 激 动剂 ， 具有 起效 快 、 清除快 、 衰期 短 、 半 长 时 间输注 无 蓄积 等 特点 ＇ ， ４ 因而 适 用 于如 扁 桃 体 、 Ｊ 腺样 体切 除术 等要 求 止 痛 充分 ， 后要 求 迅 速 苏 醒 术
滨州 医学 院 学 报 ２ ０ ０ ７年 ８月第 ３ Ｏ卷 第 ４期
Ｂ ｏｒａ， ｇ ２０ Ｖ １３ Ｎ ． ＭＵ ＪｕｎｌＡｕ．０ ７， ｏ．０， ｏ４
・
２９ ・ ３
方 中连 翘含 量 最 大 ， 有 清 热 解 毒 、 肿 散 结 的 作 具 消 用， 其有 效 成分 为连 翘苷 。 为有效 控 制药 品质 量 ， 我 们试用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法 测 定 双 黄 连 颗 粒 中连 翘 苷 的含 量 ，
两种高效液相色谱法测定双黄连注射液中连翘苷含量的比较研究
科研动态50 中国动物保健 | 2018.11doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2018.11.028结果与标准血清结果一致后进行样品检测，以保证试验结果的准确性。
可重复的原则是科学事实成立的重要判据，是科学确定性、普遍性的奠基石。
但是对于已经产生抗体的机体来说，产生治疗效果的机体抗体水平下降需要一定的时间，因此在给药后通过鸡毒支原体抗体阳性水平的变化来评价药物的治疗效果，可能不能及时地反映出药物的真实治疗效果，所以在样品检测过程中如遇到可疑结果，有充足的待测血清进行重复验证，重复结果一致后进行样品的判定。
建议可以在给药后分不同时间对鸡毒支原体抗体水平进行检测，并通过其他检测方法同步验证鸡毒支原体抗原及抗体水平的变化。
最后，分组是科研设计的重要环节。
分组合理与否，直接影响结果的可靠性，分组处理是为了进行比较，为了做出合乎于逻辑的判断，也是为了从比较中验证研究的目的。
在本试验采集的200个样品中分析给药泰万菌素对鸡毒支原体的血清阳性水平的控制作用，设置了对照组100个样品，在对照组、给药组的试验样品一致的前提下进行结果判定，保证试验结果的科学性。
大样本时随机化分组是适宜的，而小样本时随机化不能保证组间一致,所以小样本时要用人为加随机的方法来保证组间一致性,其实质是更好地体现随机化原则。
设置公鸡母鸡不同性别的对照使得试验结果更加精细，但使得同级比较的数量减少，造成数据统计结果误差可能增大。
结合本试验各项数据结果可以发现：当药物浓度达到250ppm 饮水给药时，由中牧实业股份有限公司提供的泰万菌素对鸡体内的鸡毒支原体有良好的抑制作用，本药物能显著降低鸡体内的抗体阳性率。
3 结论由中牧实业股份有限公司提供的泰万菌素以250ppm 饮水给药连续5d，对鸡毒支原体抗原有明显的抑制作用。
泰万菌素经饮水给药，方便简洁，溶解迅速，剂量容易控制，对鸡没有不良的影响，鸡的饮欲、食欲正常，适口性良好，可用于鸡毒支原体感染预防和治疗的首选药物。
HPLC法测定小儿金翘颗粒中连翘苷的含量
４ 、０６ ｉ，结 果 表 明２０ｇ 试 品 加 入 ２ Ｌ ０５ 、０ｒ ｎ ａ ． 供 ０ｍ ８％的 甲醇 超声 提取 ３ ｉ，供 试 品 中连翘 苷 即 可 ０ ０ｒｎ ａ
提取 完全 。
２精 密称 取 连 翘 苷 对 照 品
大理 学 院学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬＯＦ ＤＡＬ Ｉ ＲＳ ＴＹ Ｉ ＵＮ ＶＥ Ｉ
第 １ 卷 第６ ２ １ 年６ １ 期 ０２ 月
Ｖｏ． ｌ Ｎ ． Ｊ ｎ ２ ２ １ １ ｏ６ ｕ ． ０１
Ｈ Ｌ 法测定ｄ ＰＣ ｑＬ 金翘颗粒中连翘苷的含量
李志成 ， 邓 涛， 杨永寿
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎｏ ｏ ｓ ｔｉ ｉｏ ｒｉｑ ａ ｒ ｎ ｌｓ ｙＨＰ Ｃ ｅｅ ｍｉ ａｉ ｆ ｒｙｈ ｎｉ Ｘ ａ ｅ ｊ ｉｏ Ｇ ａ ｕｅ Ｌ ｏ Ｆ ｎ ｎ ｂ
Ｌ ｉｈ ｎ ， Ｉ Ｚｈｃ ｅ ｇ ＤＥＮＧ Ｔ ｏ ＹＡＮＧ ｎ ｓ ｏ ａ ， Ｙｏ ｇ ｈ ｕ
纯水 。
常用 于儿童咳嗽、 咽痛 、 风热袭肺所致乳蛾等症… 。
金银 花 和 连翘 是该 制 剂 的 主药 ， 连翘 苷 为 连翘 的主 要 成 分 ｒ］研究 表 明连翘 苷 有 一定 的抑 菌 能 力 ［ ， ２， 部分 含 有 连翘 的 复方 ， 以连翘 苷含 量 作 为质 量评 多 价依 据 ， 小儿 金 翘 颗粒 的 现行 质量 标 准 中并 未 对 但 其含 量 进行 控 制 ，为 了有 效 控制 该 制 剂 的质量 ， 本 研 究 采 用 高效 液 相 色 谱 法 对 ｄ ． 金 翘 颗 粒 中 连 翘 ，Ｌ Ｉ
高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量
５ １ ０， ｈｎ ３ ｎ ｎＵ ｉ ｒｉ Ｃ Ｚ ｅ ｇｈ ｕ ５ ０ ８ Ｃ ｉ ） １４ ０ Ｃ ｉ ａ ． ａ ｎｖ ｓ ｏ Ｍ， ｈ ｎｚｏ ０ ０， ｈｎ Ｈｅ ｅ ｔ ｆＴ ｙ ４ ａ
Ａｂｔａ ｔ ｓ ｃ：０ｂｅｔ ｅＴ ｓａ ｆ ｈ ａｌＨＰ ｃ ｍｅｈｏ ｏ ｅｅｍｉａ ｏ ｆＦ ｒｙｈｎ ｉ ｆ ｃｉｅｐ ｒｓｏ ｒ ｊｃ ｖ ｏｅ ｔｂ ｓ ｌ ｉ ｉ Ｌ ｔ ｄ ｆｒｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｏ ｓ ｔ ｉ ｅ ｅ ｔ ａ ｔ ｆ ｉ ｎ ｖ
１ 广东药学院， ． 广东 广州 ５ ００ ；２ 何贤纪念 医院， 东 广卅Ｉ １ ４ ０ ． １０ ６ ． 广 １０ ；３ 河南 中医学院， ５ 河南 郑州 ４ ０ ０ ５ ０８
摘要 ：目的
建立双黄连 口服液有效部位 中连翘苷的含量测定方法。方法
采用大连依 利特 Ｈ ｐ ｒ ｉ Ｄ ２Ｃ ｙ ｅ ｓ Ｏ Ｓ ｌ
・
５ ・ ２
Ｃ ｎ ｅ ｏ ｎ ｏ Ｉ ｏｒ ｈｉ ｅｓ Ｊ ｕｒ ａ１ ｆ ｎｆ ｍａｔ ｏ ｏ Ｔ Ｍ ｉｎ ｎ Ｃ
Ｍａｒ ２０ ２ ｏ１ １９ ｏ １ Ｖ ． Ｎ ．３
．
高效液相色谱法测定双黄连 口服液 有 效部位 中连翘 苷含量
王战红 谭玉彬 。李淑芳 王淑 美 ， ， ， ， 梁生 旺 ， 张海龙 。 ， 陈国琴 。
关 键 词 ：双 黄 连 １服 液 ； 连翘 苷 ； 高效 液 相 色谱 法 ； 含 量 测 定 ： ２
Ｄ ｌ １ ． ９ ９ ｊ ｉ ｓ． ０ ５ ５０ ． ０ ２ ０ ． ２ Ｏ ： ０ ３ ６ ／ ． ｎ １ ０ — ３ ４ ２ １ ． ３ ０ ０ ｓ
连
所建立 的方法 简便 、
中 图分 类 号 ：Ｒ ８ ． ２ ４１
应用HPLC测定双黄连口服液中主要成分含量
应用HPLC测定双黄连口服液中主要成分含量作者：靳慧娟来源：《科学与财富》2017年第09期摘要：目的：建立双波长高效液相色谱法梯度洗脱方法测定双黄连口服液中主要成分含量。
方法：采用HederaODS-2色谱柱，以0.2%磷酸水溶液-甲醇流动相进行梯度洗脱，流速1.0ml/min，检测波长324nm、280nm，柱温为30℃。
结果：该方法在试验浓度范围内线性关系良好、溶液稳定性、专属性良好，且与《中国药典》方法检验结果一致。
结论：本方法用于双黄连口服液主要成分含量测定，操作简便、准确。
关键词：高效液相色谱；黄芩苷；绿原酸；连翘苷；含量双黄连口服液组方金银花、黄芩和连翘。
具有疏风解表、清热解毒之功效，临床上常用于治疗细菌和病毒引起的感冒、流行性感冒以及气管炎、扁桃体炎、肺炎等症。
《中国药典》2010年版一部采用高效液相色谱法对双黄连口服液中主要成分黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量分别进行测定。
供试品溶液需分别制备，检验时限较长，检验方法较为繁琐。
本研究通过建立双波长高效液相色谱法梯度洗脱方法用于双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量的同时测定，操作更加简便快速，具体方法学考察如下：1.仪器与试药1.1仪器CPA225D电子天平（赛多利斯公司）Agilent1260高效液相色谱仪，HP1100型二极管阵列检测器（安捷伦科技有限公司）1.2试药黄芩苷、绿原酸、连翘苷对照品（中国食品药品检定研究院）甲醇为色谱纯试剂（迪马科技公司）磷酸为色谱纯（天津市科密欧化学试剂有限公司）试验用水为二次蒸馏的纯化水2.方法2.1色谱条件与系统适用性试验采用Hedera ODS-2色谱柱（4.6mmx250mm，5μm）。
0.2%磷酸水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，梯度洗脱程序：0-5min，20%→30%B；5-35min，30%→45%B；35-50min，45%→70%B；50-55min，70%→20%B；55-60min，20%B。
高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量
高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量目的建立双黄连口服液有效部位中连翘苷的含量测定方法。
方法采用大连依利特Hypersil ODS2 C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 ?m），流动相为甲醇-0.05%磷酸水（35∶65），流速1.0 mL/min，检测波长278 nm。
结果连翘苷在0.143 6～1.436 ?g范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.91%，RSD=2.95%。
结论所建立的方法简便、准确，可作为双黄连口服液有效部位的质量控制方法。
标签：双黄连口服液；连翘苷；高效液相色谱法；含量测定双黄连口服液由金银花、黄芩、连翘配伍组成，具有疏风解表、清热解毒之功效。
适用于外感风热引起的头痛身痛、恶寒发热、喉痛咳嗽诸症[1]。
我们为了纯化该复方的有效部位，提供工艺优化的依据，采用AB-8大孔树脂对复方中金银花和连翘的有效成分吸附性能及影响吸附性能的因素进行了研究，并结合药效学试验筛选出双黄连有效部位。
且根据复方有效部位及其主要化学成分的研究分析，确定以复方有效部位中主要有效成分连翘苷的含量，来控制双黄连口服液有效部位的内在质量。
本试验参考文献[2-3]，建立了双黄连口服液有效部位中连翘苷反相高效液相色谱（RP-HPLC）含量测定方法，并对3批样品进行含量测定。
1 仪器与试药LC-2010A高效液相色谱仪（日本岛津），SPD-ML0Avp二极管阵列检测器（日本岛津）。
甲醇为色谱纯，乙醇为分析纯，磷酸为分析纯，水为重蒸水。
连翘苷对照品（批号110821-200508）购自中国药品生物制品检定所；连翘和黄芩药材购自河南省医药公司，金银花药材采自河南封丘金银花规范化种植基地，经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定，连翘为木樨科连翘属植物连翘（Forsythiae Suspense Thunb.Vahl）的干燥果实，金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera Japonica Thunb.）干燥花蕾或带初开的花，黄芩为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根。
连翘含量测定方法连翘苷
连翘含量测定方法（连翘苷）来源: 作者:佚名连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspense（Thunb.）Vahl的干燥果实。
2005版《中国药典》采用高效液相色谱法测定了连翘苷的含量。
文献报道的连翘苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法和薄层扫描法。
一、高效液相色谱法2005《中国药典》连翘含量测定项下：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相，检测波长为277nm；理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备：取本品粉末约1克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加置中性氧化铝（100～120目，1g，内径1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的HPLC法，流动相系统以乙腈-水为多，也有以乙腈-冰醋酸溶液为流动相的。
现总结如下：王隶书等用HPLC法测定抗病毒滴丸中连翘苷的含量。
采用日本岛津LC210AT高效液相色谱仪，紫外分光检测器；日立U23400型分光光度计；日本岛津ODS-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)；以乙腈-水(24：76)为流动相；柱温30℃；检测波长277nm。
杨德柱等采用高效液相色谱法测定夏莲颗粒剂中连翘苷的含量时，采用日本岛津公司高效液相色谱仪；色谱柱：Shim-pack ODS柱（日本岛津公司, 5μm，150mm×4.6mm）；柱温：25℃；流动相：乙腈-水-三乙胺（24：76：0.02）；流速：1.0mL/min；检测波长：276nm。
样品的制备方法同药典。
徐晓梅等采用RP-HPLC法测定病毒清口服液中连翘苷的含量。
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2. 6 稳定性试验 取同一样品溶液在 0、2、4、6、8、
10、12 h分别进样 20 L,l 依法测定, 结果 7次测定连
翘苷峰面积均值为 621758, RSD= 0. 81% 。 2. 7 加样回收试验 取已知含量的样品适量, 精密
称定, 精密加入连翘苷对照品适量, 按 2. 2. 2样品溶
7. 46 ? 1. 70
T4 261. 62 ? 108. 53*
5. 90 ? 0. 59* 205. 15 ? 94. 42*
7. 05 ? 2. 80v 250. 59 ? 57. 72*
7. 29 ? 0. 46v
¹ 组内各时间与麻醉前比较* P < 01 05; º R 组比较 v P < 01 05, F组比较# P < 01 05
瑞芬太尼的强止痛效果 ( 镇痛效价为芬太尼的 115 ~ 3倍 )降低了两者的需要量, 也减少了围手术期的
瑞芬太尼、丙泊酚复合全凭静脉麻醉时有效的抑制 了麻醉诱导插管及手术刺激 时的 ACTH、皮质醇的
副作用, 且两种药半衰期短, 适合用于短时间手术麻 醉 [ 1] 。本文结果表明瑞芬太尼、丙泊酚复合全凭静
变化。说明瑞芬太尼、丙泊酚复合全凭静脉麻醉苏 醒患儿疼痛明显, 这就要求麻醉结束后应及时加用
脉麻醉用于小儿扁桃体、腺样体切除术时比其他两 必要的镇痛措施。
种麻醉方法有更加稳定的血流动力学变化, 苏醒时
瑞芬太尼、丙泊酚全凭静脉麻醉能有效地抑制
间也明显短于 其他两种麻醉 方法。瑞芬太 尼是 L 小儿扁桃体、腺样体切除手术中的不良应激反应, 具
ACTH ( pg /m l) E 组 Cos( ng /m l)
ACTH ( pg /m l)
T1 3361 23 ? 871 72
7. 01 ? 1. 40 264. 04 ? 73. 98
7. 78 ? 2. 02 309. 16 ? 76. 38
6. 87 ? 1. 70
T2 3421 24 ? 121. 60
[ 4] 渡辺省五. Ì ¿ µ Ó « Ë [ J] . 临床 麻醉, 2001, 24( 5 ): 857860. ( 收稿日期: 2007-01-07 )
HPLC 法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
孙玉萍1 崔俊凤2 1 滨州医学院残疾人医学系 滨州市 256603; 2 滨州市药品检验所
参 考文献
激反应用大剂量芬太尼往往会引起胸壁肌肉僵硬而 影响患者的呼吸功能, 长时间输注会有蓄积, 影响患 儿的苏醒, 也会引起术后延迟性呼吸抑制。因此芬 太尼、丙泊酚全凭静脉麻醉不适合时间短的手术。
应激反应是机体受强烈刺激而发生的交感神经 兴奋和丘脑下部-垂体前叶-肾上腺皮质功能增强为 主要特点的一种非特异性防御反应, 但过强的应激 反应能引起能量的无谓消耗及器官功能衰竭乃至生
[ 1]王若松. 静脉麻醉与 药物输注 学 [M ]. 北京: 人民军 医出版社, 2001: 44-55, 135-149, 206-216.
[ 2] 庄心良, 曾因明, 陈伯銮. 现代麻醉 学 [ M ]. 北京: 人民卫 生出版 社, 2003: 167-179, 190-191.
[ 3]吴新民, 叶铁虎, 岳云. 国 产用盐酸 瑞芬太 尼有效 性和安 全性的 评价 [ J] . 中华麻醉学杂志, 2003, 4: 245-248.
3 讨论
存能力衰竭。 ACTH、皮质醇在麻醉、手术应激反应
小儿扁桃体、腺样体切除术有时间短、应激反应 强的特点, 过浅的麻醉不能有效抑制患儿术中应激 反应, 但过深的麻醉虽然能有效抑制应激反应却又 影响苏醒。丙泊酚、瑞芬太尼合用时丙泊酚镇静和
中是比较灵敏的指标, 麻醉中常用其指标的变化来 确定手术 应激强烈程度 [ 2 ] 。本研究发现静 吸复合 全麻组皮质醇的变化与依托咪酯对皮质醇合成的抑 制有关 [ 2] , 这组患者不能有效 抑制 A CTH 的变 化。
2. 3 线性关系考察 精密量取对照品储备溶液, 1, 2, 4, 6, 8, 10 m l分别置 50 m l量瓶中, 用甲醇稀释至 刻度, 摇匀。按上述方法进样 20 L,l 依法测定, 外表 法计算, 以峰面积 Y 对浓度 X ( Lg /m l) 得线性回归 方程: Y = 6. 145 @ 104X - 2. 736 @ 102, r = 0. 9999。
阿片受体激动剂, 具有起效快、清除快、半衰期短、长 有良好的血流动力学稳定性; 而且苏醒时间短、质量 时间输注无蓄积等特点 [ 3, 4] , 因而适用于如扁桃体、 高, 很适合用于扁桃体、腺样体切除手术麻醉。
腺样体切除术等要求止痛充分, 术后要求迅速苏醒 的患儿。如芬太尼复合丙泊酚组麻醉中为了控制应
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方中连翘含量最 大, 具有 清热解毒、消肿散结的作 用, 其有效成分为连翘苷。为有效控制药品质量, 我 们试用 H PLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量, 取得良好效果。
( 收稿日期: 2007-03-08 )
表 2 样品中连翘苷的测定结果
批号 20060612
n
含量 ( m g /g)
பைடு நூலகம்
RSD ( % )
5
0. 87
1. 05
20060816
5
20060824
5
0. 93
0. 97
0. 98
0. 94
3 讨论 用 H PLC 法测定连翘苷含量, 试验比较了多种
比例的流动相, 以乙腈-水 ( 25B 75) 为优, 保留时间 适中。本试验采用中性氧化铝洗脱, 可以除去杂质, 70% 乙醇可以完全洗脱连翘苷, 并可以制成近无色 的供试品溶液, 这样有利于分离和保护色谱柱。该 方法简便可靠, 精密度高, 分离度好, 可用于小儿感 冒颗粒等的质量控制。
=关键词 > 双黄连; 连翘苷; HPLC; 药物含量测定 =中图分类号 > R 92712 =文献标识码 > B =文章编号 > 1001-9510( 2007) 04-0292-02
双黄连颗粒是由金银花、黄芩、连翘制成的纯中 药制剂, 具有疏风解表、清热解毒的功效。其质量标
准收载于 5中国药典 62005年版一部, 但标准中没有 连翘的含量测定方法, 不能有 效的控制药品质 量。
-
-
5. 13
3. 57
8. 75 101. 5
99. 2
0. 15
5. 91
2. 56
8. 40 97. 4
-
-
6. 03
3. 08
9. 07 98. 9
-
-
2. 8 样品测定 取对照品溶液和样品溶液用 0145 Lm 微孔滤膜滤过, 各进样 20 L,l 读取峰面积, 按外 表法计算含量, 结果见表 2。
液制备方法制备回收试验液, 按 2. 8 样品测定方法 测定含量, 结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
样品含量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 R SD
( mg)
(m g) (m g) (% )
(% )
(% )
5. 58
3. 12
8. 66 98. 69
-
-
5. 63
2. 98
8. 60 99. 7
6. 45 ? 0. 97 307. 43 ? 87. 22*
6. 45 ? 0. 76 290. 42 ? 61. 77
7. 72 ? 2. 5
T3 242. 38 ? 90. 34*
6. 62 ? 1. 04 234. 54 ? 93. 67
6. 90 ? 0. 76 251. 98 ? 51. 17*
1 仪器与试药 Ag ilent T echno log ies 1200 Series高效液相色谱
仪, Ag ilent T echnolog ies G1314B VW D 检测器, 色谱 工作站: LabA lliance PC-2000分析之星, 连翘苷对照 品 ( 中国药品生物制品检定所, 批号 0821-200104) ; 双黄连颗 粒 ( 批 号 20060612、20060816、20060824, 哈药集团制药六厂 ) ; 甲醇为色谱纯, 其它试剂均为 分析纯。 2 方法与结果 2. 1 色谱 条 件 色谱 柱 K rom asilC18 ( 4. 6 @ 200 mm, 5 Lm ) , 流动相乙腈-水 ( 25B 75), 流速 110 m l/ m in, 检测波长 277 nm, 柱温 30e , 进样量 20 Ll。 2. 2 溶液的制备 2. 2. 1 对照品溶液的制备: 精密称取 80e 干燥至 恒重的连翘苷对照品 5. 65 m g, 置于 100 m l量瓶中, 用甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀。 2. 2. 2 样品溶液的制备: 精密称取本品粉末 3 g, 置 具塞锥 形瓶中, 精密加入 50% 甲醇 25 m ,l 称定质 量, 浸渍过夜, 超声处理 30 m in, 放冷, 再称定质量, 用 50% 甲醇补足减少的质量, 摇匀, 滤过, 精密量取 续滤液 10 m ,l 蒸至近干, 加中性氧化铝 0. 5 g, 拌匀, 加置中性氧化铝柱 ( 100~ 120 目, 2 g, 内径 1 cm ) 上, 用 70% 乙醇 50 m l洗脱, 收集洗脱液, 浓缩至干, 残渣用 50% 甲醇溶解并转移至 10 m l量瓶中, 用甲 醇稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。 2. 2. 3 阴性对照液: 取缺连翘的处方药, 按样品溶 液制备方法制备阴性对照液。
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