动物消化率测定课件
2）种类：外源指示剂（ Cr2O3 ） 内源指示剂（酸不溶灰分） 3）优点：在于减少收集全部粪便带来的麻烦，省时省力，尤其 是在收集全部粪便较困难时。
4）缺点：指示剂回收率对消化率影响较大，并且很难找到回收 率很理想的指示物质。指示剂分析误差对结果影响很大，较难获 2得020/3重/28 复性高的测定数据。内源指消化率示测定剂受砂砾的影响大，因此收集6
准确地量化饲料中各种养分被动物消化利用的程度，也是 评定饲料营养价值的重要方法。 3.种类（见图1）
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消化率测定
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消化实验
体内（in vivo） 消化实验
尼龙袋法(nylon bags technique)
食入养分
[食入养分 -（粪中养分-内养分）]
真消化率 =
X 100%
粪中养分组成：
食入养分
饲料中未消化的养分；消化道分泌物；
消化道脱落细胞；消化道微生物及其代谢产物。
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消化率测定
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二、体内消化实验
(2)指示剂法 1）对指示剂的要求：
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二、体内消化实验
5）指示剂法消化率计算公式： 原理：食入指示剂量=排出指示剂量
饲粮指示剂含量 粪中养分含量
养分消化（%）= 100% —
×
×100%
粪中指示剂含量 饲粮养分含量
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消化率测定
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四、指标的测定方法
干物质：烘箱法，具体参数因样品而异。 能量：氧弹式测热法 蛋白：凯氏定氮法 钙：高锰酸钾滴定法 磷：钼黄比色法 具体操作方法参见：《饲料分析及饲料质量检测技术》第3版， 张丽英，2007
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缺点：手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。
回
—
图 3
直 肠
吻
合
术
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消化率测定
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二、体内消化实验
4）可移动的回-盲瘘管术 优点：手术简单，荷术动物生理 影响小； 缺点：仍需要指示剂。
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图4 可移动的回-肓瘘管术
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消化率测定
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二、体内消化实验
2）套算法：被测料替代实用基础饲料的一部分，分别测定基础 饲粮和替代后饲粮的养分消化率。 然后根据两种饲料的养分消 化率，计算待测养分消化率。
公式：
D(％)＝[100*(A-B)/F]＋B
排泄物污染严重（易被饲料、毛、皮屑、尿污染） 采食量、排泄量难以准确记录 粪便需要及时保存和处理 工作量大
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消化率测定
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二、体内消化实验
3）全收粪法消化率计算公式
（食入养分 - 粪中养分）
表观消化率 =
X 100%
式中：D为被测饲料养分消化率
A为基础饲粮养分消化率
B为新饲粮养分消化率
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F为被测饲料养分占新消化率饲测定粮该养分的比例。
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三、体外消化实验
1）方法：用安装瘘管的办法收取小肠液，在试管中进行孵化。
2）优点：操作方便，环境条件、处理方法和时间易控制，更容 易标准化。
消化率测定
离体（in vitro）消 化实验
全收粪法ห้องสมุดไป่ตู้
指示剂法 消化道消化液 人工消化液
肛门收粪 回肠末端收粪 回肠指示剂 内源指示剂
图1 消化实验方法剖析
外源指示剂
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消化率测定
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二、体内消化实验
(1)全收粪法 1）优点：试验操作方便、测定较准确； 2）缺点：
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内容
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一.消化实验概念、目的
1.概念： 以测定动物对饲料养分的消化能力或饲料养分的可消化性
为目的的试验。 2.目的：
消化率测定
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二、体内消化实验
(4)直接法和套算法 1）直接法：将被测饲料直接饲喂动物经行消化试验。 优点：只需要进行一次消化实验，即可测定饲料养分的消化率。 缺点：适用范围有限，仅适合于适口性好的原料，如玉米等；采 用单一饲料与实际饲粮组成相差大，不能考虑饲料之间的互作。
3）缺点：与动物的生理系列化过程有一定的差异。
4）操作步骤：用胃蛋白酶加盐酸溶液初步孵化，然后用小肠液 在pH7.0 的条件下进一步孵化（用此法得到的结果与全收粪法无 显著差异）。
有研究报道：在用胃蛋白酶孵化之前，先用pH5.8 得
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4
.
Na2HPO4
.
淀粉酶缓冲消化液率测定处理，效果更佳。
二、体内消化实验
2）桥式瘘管 优点：其对荷术动物生理影响小， 手术成功率高；测量结果优于T型 瘘管。 缺点：人工手术复杂，饲养管理繁 重。
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图2、桥型瘘管示意图
消化率测定
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二、体内消化实验
3）回-直肠吻合术 优点：收粪简便，而且可收集全部粪样；
二、体内消化实验
（3）回肠末端消化率测定： 1）T型瘘管： 优点：安瘘管后对荷术动物生理影响小； 缺点：测定结果误差大；必须用指示剂， 因不可能收集全部粪尿，由此。取样缺乏 代表性，而且较麻烦。
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消化率测定
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兽医课件-消化系统及直检
听诊：助手先给动物戴上口笼，然后将动物站 立保定。术者位于动物左侧，戴上听诊器，左手 按在背部作支点，右手持听诊器集音头密贴胃区 听诊。
犬胃检查
拇指重压触诊
犬胃检查
听诊
犬肠管检查
检查方法： 肠管检查部位：腹中部和腹后部。 触诊：助手先给犬戴上口笼，然后将其站立
瘤胃检查
触诊----健康：内容物似面团样，触压后可留压痕。 ----病变：触诊内容物坚实—瘤胃积食 触诊腹壁紧张有弹性—瘤胃臌气 触诊内容物较软—前胃弛缓 冲击触诊有振水音－瘤胃积液
瘤胃臌气
瘤胃检查
叩诊----健康—上部：鼓音 —中部：半浊音 —下部：浊音
----病变—浊音范围扩大：瘤胃积食 —鼓音范围扩大：瘤胃臌气
牛皱胃检查
听诊
牛皱胃检查
切入触诊
羊皱胃检查
检查方法：
触诊：助手将动物站立保定，术者于动物右侧， 取半蹲姿势，右手按在背部作支点，左手触诊： 按压触诊，切入触诊，冲击触诊。 听诊：助手将动物站立保定，术者于动物右 侧，戴上听诊器，取半蹲姿势，右手按在背部 作支点，左手持听诊器集音头密贴皱胃区听诊。 视诊：助手将动物站立保定，术者站于动物 正后方，对比观察皱胃区的突起情况。
牛网胃检查
检查方法： 触诊：术者站于动物左侧,助手站于右
侧,两人抬杠压迫网胃区,压迫后迅速放下。 视诊：由助手强迫病畜上、下坡或行
进中急转弯，术者在一旁视诊。
牛网胃检查
双人抬杠式触诊
羊网胃检查
检查方法： 动物站立保定。 术者于动物左侧，取半蹲姿势。右手按
在背部，下压，左手握拳用力上压。
羊网胃检查
第03章鱼虾营养试验及消化率测定--学生文件
• 2、养殖条件影响饲料的消化率
– 养殖条件包括水温/水中溶氧、地理纬度、水质好坏等都直接或间 接地影响饲料的消化率。如水温，鱼的代谢，每体内酶的活性都 与温度有关，在一定范围内温度变化中，随水温的升高，鱼类消 化食物的能力加强。
• 3、饲料中粗纤维含量影响饲料消化率。
– 过多粗纤维，使鱼对饲料的消化率降低。
第03章鱼虾营养试验及消化率测定第一节养分含量的测定第二节消化率测定第三节鱼虾营养试验的一般规律第一节养分含量的测定?一养分含量测定与饲料营养价值的关系?二样本采集?三养分含量与营养价值?四各养分含量的测定?五用养分含量法评价饲料的优点和缺限特点一养分含量测定与饲料营养价值的关系?化学分析是饲料价值评定的基石饲料中各种养分含量作为饲料营养价值高低配合饲料配方饲料包括饲料原料和配合饲料的购买和配合饲料加工的依据
• (六)、灰分测定
– 500-600℃下灼烧下的剩余物。
• (七)、无N浸出物的测定
– 饲料总量-粗蛋白-粗脂肪-粗脂肪-灰分=无N浸 出物。
• (八)、维生素的测定
– 常规分析养分中，一般不测定饲料中的维生 素，因测定维生素一来需要复杂的设备，
五、用养分含量法评价饲料的优点和缺限(特点)
• 1.是饲料其它评价法的基础。 • 2.可概略地评定某种饲料的营养价值。 • 3.不能反映鱼体对饲料消化性、利用性，必 须与消化试验、代谢试验、饲养试验结合 起来，才能确知饲料的营养价值。
真消化率% = 摄入饲料量− （粪便量− 假饲粪排量） ×100% 摄入饲料量
• 真消化率往往用假饲或用不含某种饲料成分的 饲料来确定代谢过程中非饲料因素引起的粪便 排出量的多少，从而测定某种饲料成分的消化 率。
• ②间接法之一(外源性指示剂法) • 基本原理是把指示剂均匀地混入饲料中，投喂给鱼 类，然后根据饲料和粪便中指示物质的变化比例，计 算出试验鱼对饲料的消化率或对饲料某种养分的消化 率。
n07第七章 消化率的测定
饲料指示剂添加量:3%
粪中CF含量: 40%
粪中指示剂含量:6%
CF消化率= 100 － 3 × 40 ×100 6 40 = 50
消化能值的计算
直接测定
根据消化试验结果和结合能值测定进行 DE = （GE - FE）/采食量（kg） 例如
体重50Kg的猪，每日食入日粮2Kg，含总能33.47MJ，每日排粪中的总能为 8.34MJ，计算其采食饲料的的消化能。 饲料消化能 = （33.47-8.34）/2 =12.57（MJ/Kg）
第二组
基础日粮 + 被测饲料
试验期
基础日粮
消化率的计算
D(％) ＝ (B-A) X100 ＋ A F
式中：D为被测饲料养分消化率 A为基础饲粮养分消化率 B为混合饲粮养分消化率
F为被测饲料养分占混合饲粮该养分的比例。
假定
基础饲粮养分消化率不变 养分间无互作效应
四、消化试验的基本步骤与要求
1、动物选择 2、日粮配制 3、试验步骤 4、食糜的收集和处理
全收粪法养分消化率计算
例 1：测定仔猪饲粮CP消化率
日采食量：1000g， 饲粮CP含量：16% 日排粪量：250g， 粪中CP含量：12% CP消化率=
( 1000×16%-250×12%）
（1000×16%）
×100
= 81.2%
指示剂法养分消化率计算
例 2: 某饲粮消化实验结果如下,计算CF消化率
消化率计算公式
（食入养分 - 粪中养分） X 100% 表观消化率= 食入养分 食糜养分组成
饲料中未消化的养分; 消化道分泌物; 消化道脱落细胞; 消化道微生物及其代谢产物。
动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定
动物性蛋白质饲料
胃蛋白酶消化率的测定过滤法参考标准：GB/T17811-2008
一、适用范围
三、实验内容
3每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。
误差来源及分析
附录2：盐酸标准溶液的配制与标定
参考标准：GB/T601-2002 1.盐酸标准溶液的配制
按下表的规定量取盐酸，注人1000mL水中，摇匀。
注意事项：
1.灼烧温度不能超过300度，当温度超过300度时无水碳酸钠分解，可将马福炉的温度调至250，等升温稳定后再调至280，或者将马福炉事先升温至280度，待稳定后再放入无水碳酸钠
2.无水碳酸钠的称量质量小于0.2g时要用十万分子之一天平称量。
3.混合指示剂为0.1%甲基红，0.1%溴甲酚绿，1：1混合。
4.滴定一定要滴到暗红色再煮沸，可事先根据大体浓度计算大约的滴定体积。
5.滴定终点到达之后一定是再次去煮不会变回绿色。
实验一 鱼类饲料的总消化率及其
实验一 鱼类饲料的总消化率及其蛋白质消化率的测定一、 实验目的掌握用外源指示剂Cr 2O 3间接测量鱼、虾饲料消化率的基本方法。
二、原 理与饲料均匀混合的外源指示剂Cr 2O 3，完全不被动物吸收而随粪便排出。
根据指示剂及蛋白质(或其他营养成分)在食物及粪便中的含量变化，饲料的总消化率和蛋白质的消化率由如下两式给出：饲料总消化率：D(％)=[1－'B B] ×100蛋白质消化率：D(％)=[1－ 'A A ×'B B] ×100A 、A’分别为饲料粪便中的粗蛋白含量；B 、B’分别为饲料和粪便中的Cr 2O 3 含量三、实验材料1．试验鱼 可根据实际情况选择实验鱼的种类。
但用易驯化、习惯实验环境的鱼类(如金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。
体重20～25g ，每试验组10尾。
2．水族箱 每试验组配50～1001容积的水族箱2个，一个作投饲槽、一个作排泄槽。
3. 充氧设备 每水族箱配微型充气泵一台4. 集粪工具 每组配虹吸管1支、漏斗2个及玻璃纤维若干5. 小捞网1个6. 100目分样筛1个7. 100ml 凯式烧瓶2只8. 100ml 容量瓶1个，10ml 容量瓶10个9．刻度移液管l 套。
10．凯氏定氮装置1套。
11．分光光度计一台。
一、 试验饲料的制备试验饲料的组成可用第二章表2—7的典型配方。
但其中的酪蛋白和明胶用优质鱼粉代为简便起见，也可直接使用市售鱼用饲料，经重新粉碎后使用。
全部试验饲料要统—制作。
所有干性原料要经粉碎，并通过100目筛。
化学纯Cr 2O 3，也要经过100目筛。
按每千克干饲料的1％准确称取Cr 2O 3，与少量的干性原料混合，分四级逐步扩大到全部干性饲料组分，充分混合均匀，混合操作可在大白搪瓷盆进行。
因Cr 2O 3为绿色，所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判断混合的均匀程度，若有必要，可进行均匀度检查，变异系数要求小于5%。
动物蛋白质的胃蛋白酶消化率(体外消化)
1、标定：
精确称取0.15g于120℃烘3小时至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min。加150m水，用配制好的硫代硫酸钠溶液滴定。近终点时加3ml淀粉指示液(5g/L)，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时作空白试验。
三、设备：
1、恒温水浴振荡器：45±2℃。
2、测定粗蛋白质的全套设备。
3、过滤装置。
4、索氏脂肪浸提器。
四、试剂：
除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂：
1、0.2%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释6.1ml盐酸到1L。在使用前，现配0.2%胃蛋白酶溶液。
2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。
3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在0.75mol/L盐酸中的0.2%胃蛋白酶溶液。
先后用0.5NKOH水溶液和水各20ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止。
用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在105℃温度下烘1h，冷却称重，再烘30min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于30ml中性乙醚乙醇中，用0.02N氢氧化钾滴定至粉红色。
四、结果计算：
2、分析：
合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。
植物油脂检验不皂化物测定法GB5535-85
本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。
油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。
一、仪器和用具：
锥形瓶：250ml
动物营养学动物对饲料的消化课件
注意动物的饲养环境与管理措施
01
提供适宜的饲养环境，如温度、湿度、通康状况，及时发现和处理疾病和寄生虫等问
题。
采用分群饲养、定时饲喂等管理措施，提高饲料的利用率和动
口腔消化
口腔是消化系统的入口，具有初步消化和味觉功 能。
唾液腺分泌的唾液中含有消化酶，可以帮助分解 食物。
咀嚼和混合食物与唾液，促进食物的初步消化。
胃部消化
胃是消化系统的重要部分，主 要负责储存和进一步消化食物
。
胃部的机械性搅拌和化学消 化酶的作用，将食物进一步
分解。
胃部可以分泌胃酸和消化酶， 帮助分解食物中的蛋白质。
采用微生物发酵、物理化学 处理等工艺，提高饲料的消
化率和营养价值。
针对不同生长阶段的动物， 设计合理的饲料配方，满足 动物不同的营养需求。
合理配制饲料营养成分与比例
保证饲料中各营养成分的含量与比例合 理，如蛋白质、脂肪、碳水化合物、维 生素和矿物质等。
适当添加酶制剂、酸化剂、抗氧化剂等饲料 添加剂，以提高饲料的消化率和营养价值。
饲料消化率的评估标准与影响因素
评估标准
评估饲料消化率是否符合动物生长和生产需要。
影响因素
饲料成分、加工方式、动物生理状况、饲养环境等。
不同动物的饲料消化率比较
比较不同动物对不同饲料的消化率，找出最佳的饲料配方。
比较同一动物在不同生长阶段对不同饲料的消化率，为饲养管理提供参考。
05
提高饲料消化率的途径与措施
两栖动物
口腔内的消化
两栖动物的唾液有助于软化饲料。
食道的消化
两栖动物的食道将食物送至胃中。
动物对饲料的消化2课件
•动物对饲料的消化 (2)
•2
第一节 动物对饲料的消化吸收
一、消化方式
Digestion method
二、各类动物的消化特点
Digestion characteristics of various animal
三、消化后养分的吸收
Absorption of digestive nutrient
•动物对饲料的消化 (2)
•动物对饲料的消化 (2)
•42
二、影响消化率的因素
（一）动物
3、年龄
动物从幼年到成年，随消化器官和机能发育的完善程度不同， 对饲料养分（蛋白质、脂肪、粗纤维）的消化率逐渐提高。 幼年动物尤其是反刍动物，消化器官还未发育完善，不能向 成年动物利用CF含量多的料。老年动物牙齿不好，影响咀 嚼，从而影响消化率。
1、消化力：动物消化饲料中营养物质的能力。 2、消化性：饲料可被动物消化的性质或程度。 3、消化率：衡量饲料消化性和动物消化力的统一指标，
是指饲料中可消化养分占食入饲料养分的百分
率，计算公式如下：
饲料中可消化养分 = 食入饲料中养分-粪中养分
饲料某养分消化率= 食入食饲入料饲中料某中养某分养-粪分中某养分×100%
•23
Rumen protozoa
Rumen protozoa
Rumen bacteria
Rumen fungus
瘤
胃
Rumen fungus
微
生
物
消化饲料中70-85%DM和50%以上的CF！
•动物对饲料的消化 (2)
•24
•动物对饲料的消化 (2)
•25
一、消化方式
（3）瘤胃内环境
瘤胃pH 5.0～7.5，中性略偏酸；
兽医临床生化检验学-消化系统PPT资料
• 梗犬，雄性，8岁 • 主诉：精神沉郁，厌食，昨夜呕吐3次 • 体格检查：触诊腹部柔软，有气体和液体；
无反应 • 存在问题：1、抑郁；2、食欲缺乏；3、呕吐
《兽医临床生化检验学》第11讲
胃肠及外分泌胰腺系统特殊检查
3. 口服D-木糖耐量试验： D-木糖服后在空肠部吸收。
犬先饥饿12h, 然后按0.5g/kg配成5%溶液口服；马按2g/kg 配成20%溶液口服。口服前后分别采血测定D-木糖浓度。 正常在口服60-90min后至少达到3.0mmol/l， 当小肠绒毛萎缩、水肿、胃内食物停留时间过长、肠道细 菌过度生长、食物通过肠道速度过快，血液中D-木糖不能 达到3.0mmol/l的峰值。
《兽医临床生化检验学》第11讲
消化系统疾病常见临床症状
• 吞咽困难和返流（咽、食道阻塞） • 呕吐（胃、十二指肠炎症） • 腹泻（小肠性腹泻） • 里急后重（大肠性腹泻） • 便秘（猫巨结肠） • 腹部增大（腹水、胃肠臌气） • 急腹症（胃扭转、肠套叠）
《兽医临床生化检验学》第11讲
粪便检查分析
• 粪便颜色 鲜血：后部肠管出血 黑粪症：提示胃或小肠出血 潜血：不能用肉眼直接观察出来的少量血液，常用联苯
3.2↓ 86↓ 1.8↓ 1.74
犬参考值
54～71 25～36 24~40
15～58 16～43 10～73
1~5 510～1864
90~527 2～15 2～5 3.3~6.7 1.8～10.4 60～110 145～153
4.2～5.6 110～118 2.57～2.97 0.81～1.87
血浆无浑浊
实验后2小时
血浆无浑浊
实验后3小时
血浆无浑浊
• D-木糖耐量实验：
MM_FS_CNG_0236 动物蛋白质饲料消化率的测定
动物蛋白质饲料消化率地测定适用范围本方法适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率地胃蛋白酶测定方法.原理概要脱过脂地试样，用温热地胃蛋白酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化，过滤分离不溶性残渣，洗涤、干燥，测定残渣地粗蛋白含量.同时，测定空白和脱脂未酶解试样地粗蛋白含量..主要试剂和仪器主要试剂胃蛋白酶溶液(％)：将浓盐酸稀释至水中(溶液～)，加热至～℃，加入活性为∶生化级胃蛋白酶〔若活性不是∶，可使用活性∶生化级胃蛋白酶(不可使用非生化级胃蛋白酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升〕，并缓慢搅拌直至溶解.勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热.临用前配制.乙醚；丙酮；定氮试剂：硫酸（含量，无氮）；混合催化剂：硫酸铜（个结晶水），硫酸钾()或硫酸钠()，磨碎混匀；氢氧化钠[水溶液（）]；硼酸[水溶液（）]；混合指示剂：甲基红乙醇溶液，溴甲酚绿乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月；盐酸标准溶液：（邻苯二甲酸氢钾法标定，）量取下述规定体积地盐酸，注入水中，摇匀.() 盐酸，盐酸标准溶液（）盐酸注入蒸馏水中；盐酸标准溶液（）：盐酸注入蒸馏水中；蔗糖；硫酸氨（干燥）；硼酸吸收液：硼酸水溶液（），加入溴甲酚绿乙醇溶液，甲基红乙醇溶液，氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序）. 仪器恒温式平转摇床：温控范围～℃，式或空气浴式均可，转速可调(水浴～) 实验室用样品粉碎机；分样筛：孔径（目）；分析天平：感量；消煮炉或电炉；滴定管：酸式，、；凯氏烧瓶；凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式；锥形瓶、；容量瓶；消煮管；定氮仪：以凯氏原理制造地各类型半自动，全自动蛋白质测定仪器、设备规定..试样制备取具有代表性试样，用四分法缩分至，然后粉碎至全部过孔筛(目)，混匀装于密封容器，保存备用..过程简述脱脂称取～试样用乙醚脱脂(含脂肪小于％可不脱脂，含脂肪％～％建议脱脂，含脂肪大于％则必须脱脂).脱脂方法可参照：将试样置于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入°烘箱中，烘干分钟（或称侧水分后地干试样，折算成干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管地高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准.将滤纸筒或包放入提取管，在抽提瓶中加无水乙醚，在°地水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约次，共回流约次（含油高地试样约次）或检查抽提管流出地乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点.取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，胃蛋白酶消化称取脱脂烘干后样品若干克(精确至，含氮量约～)于带盖磨口瓶中，加新配制地并已预热至～℃地胃蛋白酶溶液，要确保样品完全被胃蛋白酶溶液浸湿，盖紧瓶盖，将瓶夹于恒温摇床上，于℃恒定搅动进行保温消化.消化残渣地处理从搅动器上取下磨口瓶，呈°角放置，让残渣沉淀以上，随后在铺有快速滤纸地布氏漏斗上抽滤，先用少量水将瓶盖上地残渣洗至滤纸上，再将磨口瓶保持沉淀时地角度移至布氏漏斗上，慢慢倾出内容物，使之通过滤纸后形成连续地细流，避免任何不必要地搅动.液体通过滤纸地速度应与倾入地速度相同.当上层液体通过滤纸后，于瓶中加入丙酮，用拇指盖住瓶口剧烈振摇，放开.再用拇指堵住瓶口，在滤纸上方将瓶倒置振摇，放开拇指让丙酮和残渣流到滤纸上.再用一份地丙酮进行洗涤，照上法振摇和倒出.检查瓶子，并用丙酮再次洗涤.当全部液体通过滤器后，用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次，并抽干.从布氏漏斗上小心取下载有残渣地滤纸，无损地移入凯氏烧瓶中，并将凯氏烧瓶置于℃烘箱内烘干..粗蛋白地测定.烘干残渣()粗蛋白含量地测定().仲裁法试样地消煮称取试样—(含氮量—)准确至，放入凯氏烧瓶中，加入混合催比剂，与试样混合均匀，再加入硫酸和粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力(℃)直至呈透明地蓝绿色，然后再继续加热，至少.氨地蒸馏(蒸馏步骤地检验见附录)常量蒸馏法将试样消煮液冷却，加入蒸馏水，摇匀，冷却.将蒸馏装置地冷凝管末端浸入装有硼酸吸收液和滴混合指示剂地锥形瓶内.然后小心地向凯氏烧瓶中加入氢氧化钠溶液，轻轻摇动凯氏烧瓶，使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体积为.降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏.半微量蒸馏法将试样消煮液冷却，加入蒸馏水，转入容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液.将半微量蒸馏装置地冷凝管末端浸入装有硼酸吸收液和滴混合指示剂地锥形瓶内.蒸汽发生器地水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸.准确移取试样分解液注入蒸馏装置地反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封，防止漏气.蒸馏降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏.注：上述两种蒸馏法测定结果相近，可任选一种.蒸馏步骤地检验精确称取硫酸铵，代替试样，按或步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为土％，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确.滴定用上述两种蒸馏法蒸馏后地吸收液立即用.或.盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点.推荐法试样地消煮称取试样(含氮量)准确至，放入消化管中，加片消化片(仪器自备)或混合催化剂，硫酸，于℃下在消煮炉上消化.取出放凉后加入蒸馏水.氨地蒸馏采用全自动定氮仪时，按仪器本身常量程序进行测定.采用半自动定氮仪时，将带消化液地管子插在蒸馏装置上，以硼酸.为吸收液，加入滴混合指示剂，蒸馏装置地冷凝管末端要浸入装有吸收液地锥形瓶内，然后向消煮管中加入氢氧化钠溶液进行蒸馏.蒸馏时间以吸收液体积达到时为宜.降下锥形瓶，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内.滴定用标准盐酸溶液滴定吸收液，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点..空白测定称取蔗糖，代替试样，按第七章进行空白测定，消耗盐酸标准溶液地体积不得超过.消耗盐酸标准溶液体积不得超过..分析结果地表述计算见下式：式中: ——滴定试样时所需标准酸溶液体积，;——滴定空白时所需标准酸溶液体积，；——盐酸标准溶液浓度，;——试样质量，;——试样分解液总体积，;'——试样分解液蒸馏用体积，;——每毫克当量氮地克数;——氮换算成蛋白质地平均系数.重复性每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果.当粗蛋白质含量在％以上时，允许相对偏差为％.当粗蛋白质含量在％一％之间时，允许相对偏差为％.当粗蛋白质含量在％以下时，允许相对偏差为％..脱脂未酶解样品（）中粗蛋白含量地测定().仲裁法试样地消煮称取试样—(含氮量—)准确至，放入凯氏烧瓶中，加入混合催比剂，与试样混合均匀，再加入硫酸和粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力(℃)直至呈透明地蓝绿色，然后再继续加热，至少.氨地蒸馏(蒸馏步骤地检验见附录)常量蒸馏法将试样消煮液()冷却，加入蒸馏水，摇匀，冷却.将蒸馏装置地冷凝管末端浸入装有硼酸吸收液和滴混合指示剂地锥形瓶内.然后小心地向凯氏烧瓶中加入氢氧化钠溶液，轻轻摇动凯氏烧瓶，使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体积为.降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏.半微量蒸馏法将试样消煮液()冷却，加入蒸馏水，转入容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液.将半微量蒸馏装置地冷凝管末端浸入装有硼酸吸收液和滴混合指示剂地锥形瓶内.蒸汽发生器地水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸.准确移取试样分解液注入蒸馏装置地反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封，防止漏气.蒸馏降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏.注：上述两种蒸馏法测定结果相近，可任选一种.蒸馏步骤地检验精确称取硫酸铵，代替试样，按或步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为土％，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确.滴定用上述两种蒸馏法蒸馏后地吸收液立即用.或.盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点..推荐法试样地消煮称取试样(含氮量)准确至，放入消化管中，加片消化片(仪器自备)或混合催化剂，硫酸，于℃下在消煮炉上消化.取出放凉后加入蒸馏水.氨地蒸馏采用全自动定氮仪.时，按仪器本身常量程序进行测定.采用半自动定氮仪.时，将带消化液地管子插在蒸馏装置上，以硼酸.为吸收液，加入滴混合指示剂，蒸馏装置地冷凝管末端要浸入装有吸收液地锥形瓶内，然后向消煮管中加入氢氧化钠溶液进行蒸馏.蒸馏时间以吸收液体积达到时为宜.降下锥形瓶，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内.滴定用标准盐酸溶液滴定吸收液，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点..空白测定称取蔗糖，代替试样，按第七章进行空白测定，消耗盐酸标准溶液地体积不得超过.消耗盐酸标准溶液体积不得超过..分析结果地表述计算见下式：式中: ——滴定试样时所需标准酸溶液体积，;——滴定空白时所需标准酸溶液体积，；——盐酸标准溶液浓度，;——试样质量，;——试样分解液总体积，;——试样分解液蒸馏用体积，;——每毫克当量氮地克数;——氮换算成蛋白质地平均系数..结果计算结果按式()计算(％)＝－×……………………()式中：——试样地胃蛋白酶消化率，％；——脱脂未酶解地原样品中粗蛋白地平均含量，％；——脱脂酶解后残渣中粗蛋白地平均含量，％.所得结果表示到小数点后一位..允许差每个试样脱脂后取两份试料进行平行测定，以其算术平均值为测定结果. 每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果.当粗蛋白质含量在％以上时，允许相对偏差为％.当粗蛋白质含量在％一％之间时，允许相对偏差为％.当粗蛋白质含量在％以下时，允许相对偏差为％..来源中国国家标准：—。