糖类新抗原CA199方法学验证报告

糖类抗原CA199检测系统/方法的分析性能验证评价

验证内容：正确度、精密度、线性范围、临床可报告范围的验证、干扰物质及参考区间的确认

验证人员：王爱林马力张卫李琳

一、检测系统信息

项目：CA199

仪器名称全自动电化学发光免疫分析仪

仪器型号Cobas e601

试剂及厂商：罗氏诊断有限公司

检测方法：双抗体夹心法

二、厂商提供的相关参数

三、验证过程

1、正确度

目的：评价仪器测量结果与真值的一致程度。通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的正确度

评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标

正确度验证试验数据记录表

2精密度(Precision)

重复性精密度

目的：考察仪器检测方法的随机误差

原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度

方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，质控结果在控制范围内，计算SD，CV，得到重复性精密度

标本来源：高低值标本均为混合血

结果：本室CA199重复性精密度低值CV为：1.7% 、高值CV为：2.2%

结果判断方式：重复性精密度CV值<1/4CV总误差

重复性精密度验证试验数据记录表

日间精密度：

目的：考察目前实验室检测方法批间精密度

原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。

方法：新鲜混合血清（高值、低值）分装20份冷冻，每天取两份混合血清随标本连续测定10天，测定前定标做质控且结果在控制范围内，计算CV，SD，得到日间精密度

结果：本室CA199日间精密度平均低值CV：3.9% 平均高值CV：3.4%

结果判断方式：日间精密度CV值<1/3CV总误差

日间精密度验证试验数据记录表

3线性范围（Linearity range, AMR）

目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。

标本要求：高值标本可使用病人混合血清。一般地样本的高值推荐在AMR上限的90％，低值推荐在AMR下限的10％，但这不是绝对的规则。最好有5个或以上的系列浓度的实验样品，数据点数不得低于4个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。

方法：

a)以50ul为一个体积单位，将高值标本与低值标本以3：1、2：2、

1：3的体积比例混合，加上高低值标本共5个标本按照由低到高测定，记录结果。

b)线性统计：以直接测定结果计算得出的相应浓度为X，以通过稀

释测定结果为Y，回归方法学统计，得到a、b及r值。

c)结果判断：

若b在0.97-1.03范围内，r2>0.95，作a与0有无显著性差异的t 检验，如果P>0.05，则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度。若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。

线性范围确认：已验证CA199的测定结果是否在范围内呈线性，如小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为上限+上限＊10％验证下限扩展为下限-下限＊90％，扩展后的线性范围：1.68-1081.19

U/ml

线性范围验证试验数据记录表

4临床可报告范围（Clinical reportable range ,CRR）

目的：分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数，从而确保高值样本报告的准确性。

原理：未经过任何处理的病人检验标本，通过检测系统检测得到的可靠结果范围。

方法;结合本实验室制定的CA199的可报告范围（CRR）及该项目的检测范围，从而确定该项目的最大稀释倍数，予以验证

过程描述：

1、10倍稀释验证：测定标本为病人血清，测定原值为910U/ml，将高值的标本稀释10倍上机测定两次，结果分别为906U/ml，914U/ml. 判断标准：R值应在100%±允许总误差之间。符合上述条件的最大稀释度为该项目的最大稀释倍数。

临床可报告范围试验数据记录表

结论：CA199临床可报告范围0.600-10000U/ml，最大稀释倍数10倍，当结果>1000 U/ml时，用肿瘤标志物稀释液进行10倍稀释，结果乘以稀释倍数，若10倍稀释结果仍超出报告>10000U/ml.

5分析灵敏度（Analytical Sensitivity）:

直接引用罗氏试剂说明书上提供的分析灵敏度：0.600 U/ml 6 干扰物质

干扰物质对本项目的影响大小沿用厂商参数，详细内容见本项目SOP。

7 参考区间（Reference intervals）:

目的：选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。

原理：收集20 例正常健康人血清标本进行检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立参考范围。

验证范围：0-27 U/ml

方法：将20份标本按所需项目上机检测，

CA199标本的要求

1、体检合格健康的筛选者

2、脂血、溶血均勿用，标本新鲜

R = 测定的结果在参考范围例数≥90%即合格

总测定例数

只允许10%的数据超过所验证的参考区间，否则另外在用20份标本验证，如果在范围内则验证通过。如仍超出范围，则需建立参考区间