色谱概论及薄层色谱法
色谱学 第三章 薄层色谱
在吸附色谱过程中，溶质、溶剂和吸附剂三 者是相互联系而又相互竞争的，如此构成了 整个层析分离过程 。 在薄层吸附色谱过程中，主要为物理吸附， 无选择性。因之吸附剂与多元组分溶液接触 时，一方面任何溶质都可被吸附（当然单位 重量吸附剂所能吸附物质的量，即“吸附量” 会因物质种类而异），另一方面，吸附剂也 可吸附流动相分子。由于物理吸附是可逆的， 故被吸附的分子同时也可被解吸出来。
偶氮染料 偶氮苯 对甲氧基偶氮苯 苏丹黄 苏丹红 对氨基偶氮苯 对羟基偶氮苯
Ⅱ 0.61 0.28 0.18 0.11 0.04 0.01
表3-2 硅胶活度分级法 Rf Ⅲ Ⅳ 0.70 0.83 0.43 0.67 0.30 0.53 0.13 0.40 0.07 0.20 0.01 0.07
除上二种外，还有其他一些吸附剂。吸附剂品种如下： （1）硅胶：薄层色谱用为200~250目粒度，规格很多，一般如有石膏作粘 结剂，称硅胶G；石膏含量为5~20%，一般为10~13%，亦有用淀粉作粘 结剂的，称硅胶S，不加粘结剂者称硅胶H或硅胶N，为了便于观察组分的 斑点，也可在硅胶中加入荧光指示剂。如果又加有粘结剂时，则称为硅胶 GF或硅胶GF254，即吸收254nm紫外光。 （2）氧化铝：根据加有粘结剂情况不同，有H、G、HF、GF等品种。 （3）硅镁吸附剂：即费罗里硅土，使用前要在130℃下活化二小时。 （4）纤维素：长度仅为2~20微米的短纤维，分天然纤维和微晶纤维两种 形式，也可加粘合剂、一般用于亲水性物质的分离，如羟基化物等，但缺 点为不能用浓硫酸等腐蚀性溶剂进行显色。 （5）聚酰胺：这是一种使用广泛的有机吸附剂，多用于分离酚类化合物， 样品容量大，但粘结能力差，可加入纤维素或淀粉作粘结剂。 （6）烧结薄层板：这是一种多次使用的薄层板，是由200~300目石英或玻 璃粉，与200~300目硅胶或氧化铝按1：25重量混合，用乙醇调成浆料，涂 在玻璃板上。0.25~0.3毫米厚，然后在700~780℃高温下烧结，即成烧结板。 烧结板用一次后可用乙醇或其它有机溶剂洗涤，最后用水洗干净后烘干再 继续使用。
薄层色谱法
课程：分析制样技术
薄层色谱法
一、薄层色谱法概念及原理
• 薄层色谱法（常用TLC表示）又称薄层层析，属于固－
液吸附色谱。 • 样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之
间进行分离。由于吸附剂对不同组分的吸附能力的不同， 使它们在薄层上的移动速度也有差别，从而得以分离，显 然试样中吸附能力最弱的组分在薄层中移动距离最大，而 试样中吸附能力最强的组分在薄层中移动距离最小。
四、注意事项
1）展开时，层析缸中的有机溶剂蒸气必须达到饱和，否则，Rf值将不能重现。
2）在薄层用的吸附剂中，硅胶适用于酸性和中性组分的分离，碱性组分与硅胶有相互 作用，不易展开，或发生拖尾现象，不好分离；氧化铝适用于碱性好中性组分的分离 ，但不适用于酸性组分的分离。
3）如果单一展开剂效果不好，可以用混合溶剂，通过改变溶剂组分和比例来调整展开 剂的极性，从而达到分离效果的目的。
二、吸附剂与展开剂的选择
（2）展开剂：
选择展开剂时，主要考虑极性，其洗脱能力与极性成正比 。分离极性大的化合物赢选用极性展开剂，而分离极性小 或非极性的化合物应选用极性小的展开剂。 单一溶剂极性大小顺序如下： 酸>吡啶>甲醇>乙醇>正丙醇>丙酮>乙酸乙酯>乙醚>氯 仿>二氯甲烷>甲苯>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>石 油醚
① 蒸气显色法：利用样品组分与单质碘、液溴、浓氨水等物质的蒸气作用
而显色。将上述易挥发物质放于密闭容器中，再将展开剂已完全挥发的薄层板 放入则显色。
② 显色剂显色法：将一定浓度的显色剂溶液均匀喷洒在薄层上，是样品组
分显色。
③ 紫外显色法：某些化合物在紫外光照射下回发出荧光，可将展开剂挥发
薄层色谱法原理
薄层色谱法原理薄层色谱法（TLC）是一种常用的色谱分离技术，它广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
薄层色谱法原理简单易懂，操作方便快捷，因此备受青睐。
本文将对薄层色谱法的原理进行详细介绍，以帮助读者更好地理解和应用这一技术。
薄层色谱法的原理基于物质在固定相和流动相之间的分配行为。
在薄层色谱法中，样品被置于薄层色谱板上，然后板上的样品与流动相接触，流动相在板上上升，样品被带上升。
不同成分在流动相和固定相之间的分配系数不同，因此它们在上升的过程中会发生分离。
通过观察分离后的斑点，可以得到样品的成分信息。
薄层色谱法的分离原理可以用化学的分配系数来解释。
分配系数是指在两种相（通常是固定相和流动相）之间分配的物质的比例。
不同物质的分配系数不同，因此它们在两相之间的分配也不同。
在薄层色谱法中，固定相是薄层色谱板上的吸附剂，而流动相则是向上移动的溶剂。
样品在两相之间分配后，就会在薄层色谱板上形成斑点，不同物质的斑点位置不同，从而实现了分离。
薄层色谱法的原理还涉及到色谱板的选择和制备。
色谱板通常由玻璃、铝箔或塑料制成，表面涂有吸附剂。
吸附剂的选择对于分离的效果至关重要，不同的吸附剂适用于不同类型的样品。
制备色谱板时，需要注意涂布均匀、干燥彻底，以确保分离的准确性和重复性。
在实际操作中，薄层色谱法的原理可以通过简单的实验来验证。
首先准备好色谱板和溶剂，然后将样品在色谱板上施加，最后将色谱板放入溶剂中。
通过观察色谱板上斑点的形成和移动，就可以直观地了解薄层色谱法的分离原理。
总之，薄层色谱法的原理是基于物质在固定相和流动相之间的分配行为。
通过合理选择色谱板和溶剂，以及严格控制实验条件，可以实现对样品的有效分离。
薄层色谱法原理简单易懂，但在实际操作中仍需谨慎对待，以确保分离的准确性和重复性。
希望本文对读者对薄层色谱法的原理有所帮助。
薄层色谱法
第二部分色谱分析第一章薄层色谱法（TLC）一薄层色谱法概述薄层色谱法是一种基于混合物组分在固定相和流动相之间的不均匀分配或保留而将其分离的方法。
与HPLC不同，TLC将固定相涂铺在栽板上，使之形成均匀的薄层。
被分离的样品溶液点加在薄层板下沿的位置，再把下沿向下放入盛有流动相（深度约5mm）的密闭缸中，进行色谱展开，实现混合组分分离。
被展开的组分斑点即色谱谱带，通过适当技术对色谱谱带进行处理可得到定性和定量的检测结果。
薄层色谱法具有技术比较简单，操作容易，分析速度快，高分辨能力，结果直观，不需昂贵仪器设备就可以分离较复杂混合物等特点。
二薄层色谱法中的薄层板、薄层板的涂铺、点样和展开（一）薄层板TLC分离的选择性主要取决于固定相的化学组成及其表面的化学性质。
可通过改变涂层材料的化学组成或对材料表面进行化学改性来实现改变薄层色谱分离的选择性。
此外，固定相的物理性质，如比表面积、比空容、平均孔径等也对其色谱行为产生影响。
（1）载体对TLC载体的基本要求为：机械强度好、化学惰性好（对溶剂、显色剂等）、耐一定温度、表面平整、厚度均匀、价格适宜。
（2）固定相TLC固定相包括改性固定相和未改性固定相两类。
硅胶和氧化铝是最常用的两种未改性固定相。
（3）粘合剂在制备薄层板时，一般需在吸附剂中加入适量粘合剂，其目的是使吸附剂颗粒之间相互粘附并使吸附剂薄层紧密的附着在载板上。
常用的粘合剂可分为无机粘合剂和有机粘合剂两类。
（4）荧光指示剂荧光指示剂是便于在薄层色谱图上对一些基本化合物斑点（无颜色斑点、无特征紫外吸收斑点）定位的试剂。
加入荧光指示剂后，可以使这些化合物斑点在激发光波照射下显出清晰的荧光，便于检测。
（二）薄层板的涂铺涂板方法可以分为涂布法、倾注法、喷洒法及浸渍法四类，其中涂布法是应用最广泛的涂板方法。
TLC固定相薄层涂铺大多采用湿法匀浆，要求薄层均匀、平整、无气泡、不易造成凹坑和龟裂。
薄层板活化处理可以获得适宜活性，提高色谱分离效率和选择性。
色谱基本知识--薄层色谱
层析 （上行）
点 样
硅胶
硅胶是一种弱酸性的多孔性无定形吸附剂。 硅胶表面有很多硅醇基(－Si－OH)，通过硅原 子上的-OH基团与极性化合物或不饱和化合物形成 氢键而表现出吸附性能。 硅醇基的数目越大，则吸附能力增强。
硅胶也能吸附水分而成为水合硅醇基。
2
Si
—
OH
-H2O
Si
—
O
Si
—
氧化铝
氧化铝由氢氧化铝高温脱水而成。按制备方法不 同，氧化铝可分为三种：
碱性氧化铝：pH = 9～10,可分离合成染料，生物碱等 酸性氧化铝：pH = 4～5，适应于酸性物质的分离 中性氧化铝：pH = 7～7.5，适于分离醛酮，以及对酸碱 不稳定的脂和内酯等化合物
第2章 平面色谱
2.1概述
2.2滤纸及薄层板 2.3平面色谱的流动相（展开剂）
2.4平面色谱的操作方法
2.5高效薄层色谱法（HPTLC）
2.1概述 2.1.1平面色谱法的分类与原理
平面色谱是一种开放式的离线操作色谱， 分类如下： 1. 纸色谱法 2. 薄层色谱法 3. 薄层电泳法
纸色谱法
以滤纸为载体的液相色谱法。 滤纸中的纤维素能吸收20~25%的水分，其中6% 左右的水分通过氢键与纤维素上的羟基相结合，形成 液-液色谱中的固定相。 固定相：滤纸上的结合水 流动相：与水不相溶（或部分相溶）的溶剂 分离原理：被分离物质在两相中的分配系数不 同而分离.
（4）与其他分析技术联用
用平面色谱对粗提物进行分离与纯化，
然后再用其他方法分析、鉴定。
2.4.4定量方法
（1）半定量
a 目测比较法
将一系列已知浓度的对照品溶液与一定量 已知浓度的样品溶液点在同一色谱床上，经展 开定位之后，根据样品与对照品中组分斑点的 颜色深浅和面积大小估计含量。
薄层色谱法
您的位置》首页＞技术咨询＞色谱知识＞仪器分析＞薄层色谱法薄层色谱法薄层色谱法，系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。
待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
1.仪器与材料 (1) 玻板除另有规定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。
(2) 固定相或载体最常用的有硅胶G、硅胶GF<[254]> 、硅胶H、硅胶HF<[254]>,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F<[254]>等。
其颗粒大小,一般要求直径为10～40μm。
薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上, 后者系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小时)，混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5～0.7％)适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上。
也有含一定固定相或缓冲液的薄层。
(3) 涂布器应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。
(4) 点样器同纸色谱法项下。
(5) 展开室应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密的盖子，除另有规定外，底部应平整光滑，应便于观察。
2.操作方法 (1) 薄层板制备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后，倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。
使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）。
(2) 点样除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。
薄层色谱法
薄层色谱（Thin-Layer Chromatography: TLC）是在玻璃板上，塑料片或者铝箔覆盖有很薄的一层吸附剂的一种用于分离混合物的色谱法。
薄层板展开的方法是其中一端被溶剂浸润后，溶剂在吸附剂的间隙中扩散，溶剂往上方移动进行爬板（毛细管现象）。
如果在板子上点样混合物的话，那么化合物也会随着溶剂的移动而移动。
这个时候，由于化合物与固定相（吸附剂）的吸附度，移动相（溶剂）的亲和性的差异，混合物中各个化合物的移动速度与移动距离（Rf值）也不同。
也是利用这个原理，该方法可以用于有机化合物的分离纯化。
特别是在有机合成中，作为吸附剂的有硅胶，矾土，纤维素等等，展开溶剂的话通常有乙酸乙酯/正己烷体系，二氯甲烷/甲醇体系等等，根据具体情况运用到的体系也不同，这里就不多举例了。
TLC点板与跑板方法（出处：）TLC跑板法可以称为追踪一个反应的眼睛，是十分简便但又特别重要的分析手段。
往往不重视TLC或者对此方法掌握的不是很好的人，做实验也是多少有点问题的。
而怎样点板比较好呢？通常如上图所示，左边是原料，右边是混合物，中间是原料与反应混合物，这样的一个点板方式小编认为是比较推荐的。
而中间的这个原料与反应混合物叠加的点有以下三点作用：由于展开的方法问题有可能造成爬板的时候不是直线爬，所以有时候原料与反应混合物的Rf值可能差距不大，会分不清楚避免由于反应混合物中溶剂残留的问题，影响到Rf值有时候反应混合物在点板的时候会分解，有可能观测不到。
除了以上三点以外，我想这样点板还有很多好处，希望能够作为参考。
另外展开后，如何确认点的位置，一般我们用UV 或者显色剂的方法来观测，这在我们chem-station 以前的文章（各种TLC显色剂的调配方法）中有详细阐述，有需要的同学可以作为参考。
薄层色谱法的原理
薄层色谱法的原理
薄层色谱法是一种基于吸附作用的分离和纯化技术，其原理是根据化合物在高效吸附材料上的亲和性不同，通过在涂层在薄层状的基底上，由于不同物质对于固定相的亲和力、扩散速度等不同的影响，从而使样品分离出不同的成分。
其主要分离机制是通过涂层在薄层基底上的吸附效应，使样品中各成分间在固态载体上得到分离、富集和纯化的过程。
具体来说，薄层色谱的样品溶液滴于薄层板表面，待样品挥发后，以流动相为带动，并沿着固定相的吸附效应分离样品中的各组分。
在样品组分移动的过程中，移动速度越快，与涂层吸附的能力也越弱，所以分离程度越高；同时，结合了碘和紫外光的显色处理，可以明显地看到样品分离后的各组分。
因此，薄层色谱法的分离机理是基于各样品成分吸附在高效吸附材料的不同能力，而且吸附能力与溶剂有关，适用于非极性、微极性和极性物质的分离和检测。
它可以在分离效率高、分离时间短、简单方便以及样品损失小等方面显示出独特的优势。
薄层色谱法
检验基本技能培训之薄层色谱法1简述薄层色谱法，系用栽板，如玻璃，金属或塑料薄片，上涂布或烧结以薄层物质作为固定相的液相色谱法。
采用不同的固定相，可以进行吸附、分配、离子交换和分子排阻色谱分离。
薄层色谱较纸色谱分析时间短、灵敏度高、分离能力强。
2分离原理由于薄层的毛细管作用，展开剂沿着薄层渐渐上升、试样中的各组分沿着薄层在固定相和流动相（展开剂）之间不断发生溶解、吸附、在溶解、再吸附过程。
由于分配系数不同各组分在薄层上移动的距离不同，从而达到分离。
2.1比移值：Rf=ds/dmds：原点至溶质斑点中心之间的距离dm：原点至展开剂前沿的距离比移值与分配系数有关，所以利用Rf的特征值可以对组分进行定性鉴别。
影响Rf的因素主要有：溶质和展开剂的性质、固定相的性质、温度，展开方式和展开距离等。
只有在完全相同的条件下，Rf对于某一组分才是常数。
2.2相对比移值：Ris=Rf（i）/Rf（s）Rf（i）是试样至原点的距离Rf（s）是标样至原点的距离3仪器与材料3.1薄层板3.1.1自制：玻璃板要求为光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。
常用固定相有硅胶G、硅胶GF254和硅胶HF254等等。
一般要求颗粒直径5~40μm（200目以上）。
薄层涂布，一般可分无粘合剂和含粘合剂两种；前者是将固定相直接涂布于玻璃板上，后者是在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10%-15%煅石膏（CaSO4.2H2O在140℃加入4小时）,混匀后加水适量使用，或用适量，调成糊状，均匀涂布于玻璃板上。
除另有规定外，1份固定相和3份水在研钵中向同一方向研磨混匀，去除表面的气泡后，在玻璃板上平稳涂110℃活化30分钟，干燥器中保存备用。
铺好的薄层板使用前应检查其均匀度，表面应均匀、平整、光滑，无麻点，无气泡，无破损及污染3.1.2市售3.2点样器有手动、半自动或自动点样器，一般采用微量注射器或定量毛细管。
3.3展开容器带盖子合适大小的展缸3.4显色剂按标准规定配置4操作方法4.1点样应在洁净干燥的环境下进行，一般应为圆点，应尽量使点样位置集中。
薄层色谱法
薄层色谱概念 薄层色谱属于液-固吸附色谱。同柱色谱 不同的是吸附剂被涂布在玻璃板上，形 成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一 端点样，竖直放入一个盛有少量展开剂 的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂 层，借毛细作用向上移动。与柱色谱过 程相同，经过在吸附剂和展开剂之间的 多次吸附-溶解作用，将混合物中各组分 分离成孤立的样点，实现混合物的分离。
9、斑点的检出：将展开后的薄层板从展开槽中 取出，挥尽展开剂，应用下列几种方法对被分离 的化合物进行检出定位。 光学检出法： a：化合物本身有色，在自然光下可直接看出斑 点。 b：有些化合物在可见光下不显色，但可吸收紫 外线光，在紫外光灯下显现不同颜色的暗点。 c：有些化合物不仅能吸收紫外光，而且能发射 更长波长的光而显现不同颜色的荧光斑点。荧光 灯有短波型（254nm）和长波型（365nm）两种， 有的化合物需在短波荧光灯下观察，有的化合物 需在长波长荧光灯下检出即可。
d：在可见光、紫外光下都不显示，也没 有合适显色方法的化合物，可以用荧光 薄层法进行分离。化合物在紫外光灯可 以发亮的背景上显示暗点。这是由于这 些化合物减弱了吸附剂中荧光物质的紫 外吸收强度、引起了荧光的淬灭。 光学检出法不仅方便，而且不会改 变化合物的性质。对光敏感的化合物要 注意避光，以及尽量缩短用紫外光灯照 射的时间。
7、薄层板的预饱和：必要时，可 以将点样后的薄层板置内有展开 剂或规定的试液的展开室中放置 一定时间进行预饱和，起到克服 边缘效应及改善分离效果等作用。 用双槽展开室很容易做到，即先 将点好样品的薄层板放入展开室 没有溶剂的一侧槽中，平衡后再 将溶剂倾入此槽中展开。
8、展开：将展开室置于水平位置，将点好 样品的薄层板放入加有展开剂的展开室中， 薄层板浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜， 密闭，待展开至规定距离，除另有规定外， 一般为8～15cm，取出薄层板，晾干，以备 检测。一般采用上行展开。采用二次展开 的，第一次展开的展距为7cm；高效薄层板 的展距一般不超过7cm。少数沸点较高、扩 散系数较低的溶剂系统（如异辛烷、正丁 醇等）适当延长展距可提高分离度。但过 度延长展距会使斑点扩散。
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色谱概论及薄层色谱法
一、引言
色谱是一种分离技术，可以分离、鉴别及测定任何化合物，是一种常
用的理论和技术工具，用于研究具有多种绣属性的有机化合物和离子的组成、结构、组成、结合力和动力学特性。
色谱在现代科学研究领域发挥着
重要作用，在分析化学，有机化学和定量生物学等领域得到广泛应用。
色谱分类方法比较多，如层析色谱、衍生色谱、色谱分析色谱、色计
数色谱、色谱结构色谱等，薄层色谱法是其中不可或缺的一部分。
二、薄层色谱
薄层色谱是指将样品溶解于适当的溶剂或添加特定的添加剂，滴落在
薄层片上，经过移动相分离，而沿着薄膜表面形成不同的印记的方法。
它
是一种迅速、简便的分离方法，广泛地用于有机化合物及其衍生物的快速
分离、鉴别和定量。
薄层色谱法常用的溶剂有甲苯，乙腈，甲醇，乙醇，氯仿和硝酸酐等，其中最常用的是甲苯、乙腈和氯仿。
薄层色谱片的纸张是指不同的膜纸，
如滤纸，热解纸，磷酸纸和各种色谱纸等。