磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅
0.01M PBS
PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)
PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L
称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:
0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:
pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5
6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 8
7.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 90.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7
0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

在
15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。

PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2O 1000 1000 1000 1000
NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5
Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2
NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。

所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。

所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。

每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。

PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBST缓冲液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。

现用现配。

如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。

不能用盐酸调。

虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。

十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。

不需要其它任何处理。

这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~
PH8.0的PBS配方详细
1. NaCl 137mmol/L,KCl
2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制:
甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸馏水至1000ml ;
乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。

将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:
pH 甲液ml 乙液mI
5.29 2.5 97.5
5.59 5.0 95.0
5.91 10.0 90.0
6.24 20.0 80.0
6.47 30.0 70.0
6.64 40.0 60.0
6.81 50.0 50.0
6.98 60.0 40.0
7.17 70.0 30.0
7.38 80.0 20.0
7.73 90.0 10.0
8.04 95.0 5.0
你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可。

有不少人认为常规漂洗用0.01M PBS,配试剂用0.1M PBS,但也有很多人不分浓度也没有出现问题;。

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PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中,常用到PBS缓冲液。

以下是我们实验室的配方,供大家参考:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4,分子量136.09)加入100ml双蒸水中。

B液:0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,分子量177.99)加入100ml双蒸水中。

或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,分子量358.14)加入100ml双蒸水中。

pH值。

A液(ml)。

B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)、NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)和NaCl。

用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。

配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,浓度为0.01M。

PBS缓冲液的配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调节pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一,但不同实验室的配方可能不同。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml水。

0.2M NaH2PO4:取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水。

不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制:先配制0.2M PBS(pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HP,Op4H 7.2)PBS缓冲液(pH7.2〜7.4): NaCI 137mmol/L, KCI 2.7mmol/L Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L称7.9g NaC, 0.2g KC| 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO和) 1.8g K2HPO4 溶于800 ml蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4C冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O 溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O 溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4的配制:先配0.2MPB(pH=7.4, 100ml):取19ml0.2mol/L 的NaH2PO4 81ml0.2mol/L 的Na2HPO4即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB (PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4 :取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4 :取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCI的话,加入NaCI至0.9% (g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB (100ml)配方:0.2M Na2HPO4( ml) pH0.2M NaH2PO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.394.70.01M磷酸盐缓冲液(PBS配制方法称取8gNaC、0.2gKC、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4溶于800ml 蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

(完整版)磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

实验方案镧铈对铜胁迫下豌豆种子萌发和生长的影响(Ⅲ)、Ce(Ⅲ)对重金属胁迫下种子萌发影响的显效剂量筛选(1)浓度梯度设计:LaCl3/ CeCl 3溶液配置:先配置1g•L-1的LaCl3/ CeCl 3溶液母液,然后将母液分别稀释成浓度为5、10、20、40,60 mg•L-1梯度浓度,调节PH(HCL/NAOH)至6.5,对照(CK)为PH调节至6.5的去离子水。

重金属Cuso4浓度的设置:10、25、50、100、200、400 mg•L-1,对照用蒸馏水。

(2)试材培养种子预处理:选取均匀饱满的豌豆种子用0.1%HgCl2溶液消毒15min,分别用自来水和去离子水洗净,常温下晾干备用。

(3)实验设置:CK,La,Ce,Cu(共4组18个浓度57个样品)(4)试材处理:选取LaCl3、CeCl3和CuSO4各个梯度溶液溶液,豌豆种子经预处理后用各个梯度溶液浸没处理,对照用蒸馏水,置于25±1℃浸种24h后,将处理后种子均匀排列在直径9cm、垫有2层滤纸的培养皿中,每处理加入一定量水培养(以没过种子2/3为标准),每处理3皿重复,每皿20粒。

指标测定方法:种子发芽第三天测α—淀粉酶,第四天测发芽势,前三天测发芽指数和发芽率,第五天测量根长、茎长,第六天测根系活力、叶绿素含量、可溶性蛋白质、可溶性糖、SOD、POD、CA T、MDA.2.La(Ⅲ)和Ce(Ⅲ)对重金属胁迫下种子萌发及保护酶的影响(1)试材培养种子预处理:选取均匀饱满的豌豆种子用0.1%HgCl2溶液消毒15min,分别用自来水和去离子水洗净,常温下晾干备用。

(2)实验设置:在上一步骤中分别筛选出LaCl3、CeCl3的低剂量、适宜剂量、高剂量三个有效浓度和CuSO4的一个有效浓度,分别记为A1,A2,A3;B1,B2,B3;C。

(3)实验步骤:有以下几组:A+C:A1+C、A2+C、A3+CB+C:B1+C、B2+C、B3+CA+B+C:A1+B1+C 、A1+B2+C 、A1+B3+C、A2+B1+C、A2+B2+C、A2+B3+C、A3+B1+C 、A3+B2+C、A3+B3+C酸盐缓冲液(PBS)配制方法磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2M)pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml7.0 61.0 39.07.7 89.5 10.57.8 91.5 8.5Na2HPO4·2H2O分子量=178.05 0.2M溶液含35.61g/LNa2HPO4·12 H2O分子量=358.22 0.2M溶液含71.64g/LNaH2PO4·H2O分子量=138.01 0.2M溶液含27.6g/LNaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.2M溶液含31.21g/L0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2) PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

(完整版)磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

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磷酸盐缓冲液(PBS配制方法科研实验2010-04-20 22:25:48 阅读935评论0字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCI, 2.7 mM KCI, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 ,pH 7.2) PBS 缓冲液(pH7.2 〜7.4) : NaCl 137mmol/L , KCl 2.7mmol/L , Na2HPO44.3mmol/L , KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl , 0.2g KCl , 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4) 禾口 1.8g K2HPO4 ,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4 C冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4 :称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4 :称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4,即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB (PH=7.4 ):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB ( PH=7.4 ):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB ( PH=7.4 ):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl至0.9% (g/100ml )即可。

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液配制方法 Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pHPBS缓冲液(~):NaCl 137mmol/L,KCl L,Na2HPO4 L, KH2PO4 L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=的配制:先配 0.2M PB (pH=,100ml):取19ml L的 NaH2PO4, 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

0.01M PB (PH=):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

0.02M PB (PH=):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。

若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至%(g/100ml)即可。

另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)92 890 1085 1551 4945 5538 6233 6728 7223 7719ml 81ml16 8413 877 930.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法之杨若古兰创作0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最初加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.须要留意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可.然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按响应比例适当浓缩即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水浓缩至1000ml 即可.0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水浓缩至1000ml 即可.0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水浓缩至1000ml 即可.若须要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可.另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.8 92 85.9 90 106.1 85 156.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.9 7 930.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最初加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至多20分钟),保管存于室温或4℃冰箱中.须要留意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则须要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素以后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经验来看,新颖配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,特别在炎天,其电离常数发生了改变,在经过日夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸).所以做实验的同学可要留意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性.所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制成绩.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,留意从头换新液.PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍浓缩,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5摆布,明显偏酸.不克不及用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法.十倍浓缩当前,PH主动升高到所须要的值.不须要其它任何处理.这个可以先取少量试一试,配好以后再测一次~2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后,室温保管.留意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如须要,可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制:甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸馏水至1000ml ;乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g6.803g,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保管,用时甲、乙两液各按分歧比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可.。

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