薄层扫描法(TLCS)ppt课件
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薄层色谱讲义ppt课件
氧化铝、离子交换纤维素、硅藻土、乙酰 化纤维素及聚酰胺等。
2〕薄层板的制备
将1份吸附剂加3份左右的粘合剂 〔0.2%-0.5%羧甲基纤维素钠〕在研钵中向 一个方向充分研磨，使成均匀的糊状物， 然后再倒入已预备好的涂布器中，在玻璃 板上平稳地以直线方向挪动涂布器，使硅 胶浆均匀平整地涂布。室温枯燥后置烘箱 活化，普通在105-110℃加热30min，置枯 燥器中备用。薄层厚度普通为0.2-0.3mm
增修订工程
项目 类别
鉴别
检查
含量测定
特征
或指
纹图
显微
TLC
HP LC
GC
理化
通则
重金属 有害元
素
毒性 成分
其 他
谱
HPLC
TL CS
UV GC
其 他
10版 新增
259
1818
25
9
54 426
8
中成药
05版 收载
2811144ຫໍສະໝຸດ 1116102 627
8
提取物
10版 新增
05版 收载
21
3
2
5
1
11
16
2〕溶解样品的溶剂均有不同程度的洗 脱力，所以在上样的同时，样品在原位置 就呈环形展开，原点直径的分散促进了这 种展开，即所谓“上样环形色谱效应〞。 如样品在溶剂中溶解度很大，原点将变成 空心圈，这种效应对随后的线性展开呵斥 不利的影响，因此应选择样品在溶剂中溶 解度不宜太大的溶剂。
3〕供试液的溶剂在原点的残留，也会 改动展开的选择性，特别是供试液的溶剂 极性与展开剂的溶剂极性相差较大时更为 明显；因此，上样时同步枯燥或上样后枯 燥以除去原点残存的溶剂。如甲醇点后， 有残存甲醇时，就参与了流动相。所以应 该枯燥除去甲醇。
2〕薄层板的制备
将1份吸附剂加3份左右的粘合剂 〔0.2%-0.5%羧甲基纤维素钠〕在研钵中向 一个方向充分研磨，使成均匀的糊状物， 然后再倒入已预备好的涂布器中，在玻璃 板上平稳地以直线方向挪动涂布器，使硅 胶浆均匀平整地涂布。室温枯燥后置烘箱 活化，普通在105-110℃加热30min，置枯 燥器中备用。薄层厚度普通为0.2-0.3mm
增修订工程
项目 类别
鉴别
检查
含量测定
特征
或指
纹图
显微
TLC
HP LC
GC
理化
通则
重金属 有害元
素
毒性 成分
其 他
谱
HPLC
TL CS
UV GC
其 他
10版 新增
259
1818
25
9
54 426
8
中成药
05版 收载
2811144ຫໍສະໝຸດ 1116102 627
8
提取物
10版 新增
05版 收载
21
3
2
5
1
11
16
2〕溶解样品的溶剂均有不同程度的洗 脱力，所以在上样的同时，样品在原位置 就呈环形展开，原点直径的分散促进了这 种展开，即所谓“上样环形色谱效应〞。 如样品在溶剂中溶解度很大，原点将变成 空心圈，这种效应对随后的线性展开呵斥 不利的影响，因此应选择样品在溶剂中溶 解度不宜太大的溶剂。
3〕供试液的溶剂在原点的残留，也会 改动展开的选择性，特别是供试液的溶剂 极性与展开剂的溶剂极性相差较大时更为 明显；因此，上样时同步枯燥或上样后枯 燥以除去原点残存的溶剂。如甲醇点后， 有残存甲醇时，就参与了流动相。所以应 该枯燥除去甲醇。
第五章 薄层色谱法
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层层析用硅胶的粒度为250－300目。 硅胶H 不含粘合剂,使用时需要另外加入。 硅胶G 硅胶和石膏(13－15％)混合而成。 硅胶GF254 硅胶中既含有粘合剂石膏又含 有荧光指示剂，在254nm的紫外线照射下呈 现出黄绿色荧光。 硅胶HF254＋366 硅胶中不含有粘合剂石膏, 只含有荧光指示剂,这种荧光指示剂在254nm 和366nm的紫外线照射下均能出现荧光。
含水量越低，吸附能力越强，其活度越高。 因此层析板在使用之前必须经过活化。对于 硅胶薄层其活化温度为105~110°C，氧化 铝薄层的活化温度为150~200°C，活化后 的薄层板在使用之前应放在干燥器中备用。 (4)常用的粘合剂及其使用 湿法铺层时需要加入粘合剂，常用 的粘合剂有：煅石膏、羧甲基纤维素酸钠 （CMC）、淀粉和聚乙烯醇。
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常用的涂铺方法： ①倾倒法 将吸附剂和粘合剂加水调成糊状，将 糊状吸附剂倾倒在玻璃板上大致摊开，轻 轻振动玻璃板，使糊状物均匀地分布于玻 璃板上形成薄层，然后将其放臵在水平台 上晾干。晾干后放在100－110度的烘箱中 活化０.５小时以后，放在干燥器中备用。
3/25/2014 20
3/25/2014 28
聚乙烯醇的用量为吸附剂的0.5－0.6％, 把聚乙烯醇溶于水中配成0.3％的水溶液以供 调糊使用。 吸附剂调成糊状时，用水量为吸附剂质 量的2－3倍，用倾倒法铺层用水量应多一些， 吸附剂和水的质量之比为1：3，用涂铺器铺 层时，用水量应少一些以1：2为好。 铺好的薄层，应放在水平位臵10－20 min,待其凝固后放入烘箱，先在60－70 °C
3/25/2014 33
留在薄层上，此法涂布固定相均匀。操作简 单，但对于不太牢固的薄层，吸附剂易从玻 板上脱落。 ③展开法 把薄层的一端放在含有固定相 溶液的层析缸中向上展开一次，此法涂布的 固定相不均匀，薄层下端的固定相较多，越 往上越少，但不影响分离。 ④喷雾法 把含有固定相的溶液用喷雾器 喷到薄层上，这种方法比较简单，但薄层固
层层析用硅胶的粒度为250－300目。 硅胶H 不含粘合剂,使用时需要另外加入。 硅胶G 硅胶和石膏(13－15％)混合而成。 硅胶GF254 硅胶中既含有粘合剂石膏又含 有荧光指示剂，在254nm的紫外线照射下呈 现出黄绿色荧光。 硅胶HF254＋366 硅胶中不含有粘合剂石膏, 只含有荧光指示剂,这种荧光指示剂在254nm 和366nm的紫外线照射下均能出现荧光。
含水量越低，吸附能力越强，其活度越高。 因此层析板在使用之前必须经过活化。对于 硅胶薄层其活化温度为105~110°C，氧化 铝薄层的活化温度为150~200°C，活化后 的薄层板在使用之前应放在干燥器中备用。 (4)常用的粘合剂及其使用 湿法铺层时需要加入粘合剂，常用 的粘合剂有：煅石膏、羧甲基纤维素酸钠 （CMC）、淀粉和聚乙烯醇。
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常用的涂铺方法： ①倾倒法 将吸附剂和粘合剂加水调成糊状，将 糊状吸附剂倾倒在玻璃板上大致摊开，轻 轻振动玻璃板，使糊状物均匀地分布于玻 璃板上形成薄层，然后将其放臵在水平台 上晾干。晾干后放在100－110度的烘箱中 活化０.５小时以后，放在干燥器中备用。
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聚乙烯醇的用量为吸附剂的0.5－0.6％, 把聚乙烯醇溶于水中配成0.3％的水溶液以供 调糊使用。 吸附剂调成糊状时，用水量为吸附剂质 量的2－3倍，用倾倒法铺层用水量应多一些， 吸附剂和水的质量之比为1：3，用涂铺器铺 层时，用水量应少一些以1：2为好。 铺好的薄层，应放在水平位臵10－20 min,待其凝固后放入烘箱，先在60－70 °C
3/25/2014 33
留在薄层上，此法涂布固定相均匀。操作简 单，但对于不太牢固的薄层，吸附剂易从玻 板上脱落。 ③展开法 把薄层的一端放在含有固定相 溶液的层析缸中向上展开一次，此法涂布的 固定相不均匀，薄层下端的固定相较多，越 往上越少，但不影响分离。 ④喷雾法 把含有固定相的溶液用喷雾器 喷到薄层上，这种方法比较简单，但薄层固
薄层色谱鉴别介绍课件
薄层色谱法用于药物成分的分析和鉴别， 可分离和鉴定药物中的有效成分和杂质。
食品安全
环境监测
薄层色谱法用于食品中农药残留、添加剂 、毒素等的检测和鉴定，保障食品安全。
薄层色谱法用于环境样品中污染物的分离 和鉴定，如水体、土壤、空气中的有害物 质等。
02
薄层色谱法的实验操作
实验材料准备
薄层板
选择合适规格的薄层板 ，确保其质量可靠且无
定量分析
通过测量斑点的大小或使用紫 外可见光谱等方法，计算待测
物质的质量或浓度。
03
薄层色谱法的优缺点
优点
快速分离
薄层色谱法可以在短时间内完成样品的分离 ，特别适合于大量样品的快速分析。
操作简便
薄层色谱法的操作相对简单，不需要复杂的 设备，容易掌握。
高分离效能
薄层色谱法具有较高的分离效能，可以分离 复杂混合物中的各个组分。
改进方向
提高重现性和定量精度
联用技术
通过改进操作方法和技术手段，提高 薄层色谱法的重现性和定量精度。
将薄层色谱法与其他分析技术联用， 如质谱、光谱等，以提高分析效果和 分离效能。
拓展应用范围
研究和发展适用于大分子和极性物质 分离的薄层色谱技术，谱法的实际应用 案例
绿色环保
采用环保型溶剂和低毒性的分离 材料，降低对环境的负面影响。
感谢您的观看
THANKS
薄层色谱鉴别介绍课件
目录 CONTENT
• 薄层色谱法简介 • 薄层色谱法的实验操作 • 薄层色谱法的优缺点 • 薄层色谱法的实际应用案例 • 薄层色谱法的未来发展与展望
01
薄层色谱法简介
定义与原理
定义
薄层色谱法是一种常用的分离和 分析技术，用于分离和鉴定混合 物中的化合物。
薄层色谱方法课件
38
3、试剂显色法分离后的化合物在紫外光或可见光下不能显示斑点，可根据被检出化合物的理化性质选择适当的显 色剂使之生成颜色或荧光稳定、轮廓清楚、灵敏度 高、专属性强的斑点。这种方法是通过一种或几种试剂与被检物质产生化学反应，生成有色物质，是平面色谱广泛应用的 定位方法。
39
喷雾显色法务必在通风柜中进行。自动喷雾器适用于定 量。手动喷雾器用于定量 分析时可能因喷雾不均匀 而产生较大误差。
5
三、薄层色谱法的基本操作
薄层板的准备
定性与定量
样品处理
定位
展开
6Leabharlann ( 一) 薄层板 制备薄层板的载板包括有：玻璃板、塑 为制了薄使层薄板 定附相着有在在：： 上化便铝 素素，，、需聚要酰时胺 凝定胶相等中中，， 色的谱粘法 需在固定相中加入某些添加剂。
2
薄层色谱
高效液相色谱
色谱系统
开放式
闭路
展开方式
展开
洗脱
流速控制
吸附剂的毛细管作用
由泵调节
平衡时间
短
不定
分析样品
可同时分析多个样品
每次一个样品
样品量
高
低
板高 ( μm)
30
2~5
有效板数
<600
~5000
检测方式
静态
动态
溶剂用量
少
多
溶剂更换
易
难
固定相
一次弃去
反复使用
3
(二) 薄层色谱与高效液相色谱的比较
28
溶剂分成6类：第Ⅰ类为电子授受体溶剂；第Ⅱ类为质子给予体溶剂；第Ⅲ类为强质子给予体溶剂；第Ⅳ类为质子受体溶剂；第Ⅴ类为偶极作用力溶剂；第Ⅵ类为惰性溶剂 (即非极性溶剂)。
薄层色谱和柱层析ppt课件
氧化铝呈碱性，适用于碱性和中性物质的分离。
硅胶和氧化铝1：1量掺和使用，得中性吸附剂，或在制板 时加入稀酸或稀碱使其变性，或用酸性或碱性展开剂展开， 以改变硅胶或氧化铝原来的性质。
2021/8/9
最新
课件
9
（Ⅲ）样品的极性
物质的极性愈大，氧化铝和硅胶吸附愈牢，物质极性大小 如下：
饱和烃 < 不饱和烃 < 醚 < 酯 < 醛 < 酮 < 胺< 羟基化合物 < 酸和碱
性炭因吸附性太强和黑色，使应用受到限制。
（2）分配色谱对载体的要求
（Ⅰ）表面积大
（Ⅱ）在展开剂中不溶，与展开剂和样品组分不起化学反应或 分解作用
（Ⅲ）对样品组分无吸附性或吸附性弱
（Ⅳ）对固定液是惰性的
2021/8/9
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8
常用的有纤维素和硅藻土。
实际工作中，吸附剂、载体等的选择，首先决定于样品成
（c）酸碱薄层板和pH缓冲薄层板：有些化合物在普通板上分 离不好时，可通过改变原来吸附剂的酸碱性，改善分离效果。 如在铺层时用稀酸（一般用1～4%的盐酸或0.1～0.25mol/L草 酸溶液）代替水制成酸性板，使生物碱形成离子对而分离。
（d）混合薄层板：两种不同吸附剂按一定比例混合，制板， 也可分段铺板，前段预处理，以吸附杂质，后段分离。
2021/8/9
最新
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（e）径向薄层板：径向板铺法与一般板不同，点样前按下法 处理：
刮去
刮去
用此板展开，可使Rf值相近的化合物得到较好的分离，且 灵敏度高。 （f）梯度薄层板：梯度是指由一种性质到另一种性质的变化。 梯度薄层与常规薄层不同，它显示出具有渐变的分离性能，如
实验三 薄层色谱法(共17张PPT)
第12页，共17页。
供试液制备
取本品粉末0.1 g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过， 取滤液5 ml．蒸干，加水1Oml使溶解，再加盐酸l ml。置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提 取两次．每次 20ml．合并乙醚液，蒸干，残渣加 氯仿溶解，使成l ml，作为供试品溶液。
第13页，共17页。
属离子如钙、镁等。
第7页，共17页。
4.2 影响TLC的因素
（1）样品的预处理及供试液的制备
（2）薄层色谱的点样技术
（3）溶剂蒸气对薄层色谱的影响展开缸饱和、预吸附（板饱和）
第8页，共17页。
1.4 展开剂的选择
边缘效应
第9页，共17页。
芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱
1.查找有关资料，以组为队，写一份芩黄清肺散
实验五 中药薄层色谱法
第1页，通常是指以吸附剂为固定相，将供试品溶液点在薄层板 上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得 色谱图与适宜的对照物按同法所得的色谱图对比，并可用薄层扫 描仪进行扫描，用于中药的鉴别、检查或含量测定的分析方法。由
于吸附剂对不同成分的吸附能力不同（或不同成分在固定相和移动相中 的分配系数不同），在板上的移动速度不同，因而可以分离。
（4）双向展开：在正方形的薄层板上，若点样点在薄层 扫描仪进行扫描，用于中药的鉴别、检查或含量测定的分析方法。
查找有关资料，以组为队，写一份芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱的试验方案。 选用适宜的单一展开剂代替混合展开剂； 芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱
1)，. 一次增加展开剂板的极的性，使一化合物角斑点，推到适先当的进位置。行一次展开，然后挥去展开剂，将薄板转
用同样的或另一种展开剂进行第二次展开，直到两种物质 )，一次增加展开剂的极性，使化合物斑点推到适当的位置。
供试液制备
取本品粉末0.1 g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过， 取滤液5 ml．蒸干，加水1Oml使溶解，再加盐酸l ml。置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提 取两次．每次 20ml．合并乙醚液，蒸干，残渣加 氯仿溶解，使成l ml，作为供试品溶液。
第13页，共17页。
属离子如钙、镁等。
第7页，共17页。
4.2 影响TLC的因素
（1）样品的预处理及供试液的制备
（2）薄层色谱的点样技术
（3）溶剂蒸气对薄层色谱的影响展开缸饱和、预吸附（板饱和）
第8页，共17页。
1.4 展开剂的选择
边缘效应
第9页，共17页。
芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱
1.查找有关资料，以组为队，写一份芩黄清肺散
实验五 中药薄层色谱法
第1页，通常是指以吸附剂为固定相，将供试品溶液点在薄层板 上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得 色谱图与适宜的对照物按同法所得的色谱图对比，并可用薄层扫 描仪进行扫描，用于中药的鉴别、检查或含量测定的分析方法。由
于吸附剂对不同成分的吸附能力不同（或不同成分在固定相和移动相中 的分配系数不同），在板上的移动速度不同，因而可以分离。
（4）双向展开：在正方形的薄层板上，若点样点在薄层 扫描仪进行扫描，用于中药的鉴别、检查或含量测定的分析方法。
查找有关资料，以组为队，写一份芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱的试验方案。 选用适宜的单一展开剂代替混合展开剂； 芩黄清肺散中黄芩的薄层色谱
1)，. 一次增加展开剂板的极的性，使一化合物角斑点，推到适先当的进位置。行一次展开，然后挥去展开剂，将薄板转
用同样的或另一种展开剂进行第二次展开，直到两种物质 )，一次增加展开剂的极性，使化合物斑点推到适当的位置。
薄层色谱培训讲稿(共20张PPT)
薄层色谱培训讲稿
薄层色谱
分离原理、条件选择和操作方法
薄层色谱的概念及分离原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于 固-液吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优
点。由于薄层色谱一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 μg） 的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条 线，则可分离多达500 mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥
性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较
困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
样品中某组分移动离开原点的距离 Rf =
展开剂前沿距原点中心的距离
solvent front
new position of comp.B new position of comp.A
• 4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观 察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
什么是“比移值”？
在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离 Li （cm 或
mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离 Lo （cm 或 mm ）之比值，称为
相对移动值，或比移值，用Rf 表示：
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极 性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大， 对化合物的洗脱力也越大 选择展开剂时，除参照溶剂极性来选择外，更 多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验：
（1） 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的
极性过强；
（2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点 上，此溶剂的极性过弱。
薄层色谱
分离原理、条件选择和操作方法
薄层色谱的概念及分离原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于 固-液吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优
点。由于薄层色谱一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 μg） 的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条 线，则可分离多达500 mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥
性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较
困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
样品中某组分移动离开原点的距离 Rf =
展开剂前沿距原点中心的距离
solvent front
new position of comp.B new position of comp.A
• 4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观 察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
什么是“比移值”？
在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离 Li （cm 或
mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离 Lo （cm 或 mm ）之比值，称为
相对移动值，或比移值，用Rf 表示：
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极 性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大， 对化合物的洗脱力也越大 选择展开剂时，除参照溶剂极性来选择外，更 多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验：
（1） 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的
极性过强；
（2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点 上，此溶剂的极性过弱。