抗中性粒细胞胞浆抗体ANCAppt课件
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抗中性粒细胞胞浆抗体(精选)PPT文档19页
抗中性粒细胞胞浆抗体（精 选）
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
ANCA
# 非典型型ANCA（atypical ANCA，aANCA或 xANCA） 兼有 cANCA和pANCA 两种特性，aANCA不易与 pANCA区分， 并且主要靶抗原还不清楚，所以许多实验室将其列入 pANCA 之列，作为pANCA 的一个亚型
ANCA两种荧光染色型
核周型ANCA（pANCA）
胞浆型ANCA（cANCA）
..
ANCA两种荧光染色型
间接免疫荧光法（ indirect immunoflurescence, IIF）是检测ANCA最早采用的方法
应用乙醇固定的白细胞制备的抗原底物片，主要 表现为两种阳性荧光染色型：
# 胞浆型ANCA（cytoplasmic ANCA，cANCA） 胞浆弥漫性颗粒样染色，并在核叶之间有重染 # 核周型ANCA（perinuclear ANCA，pANCA） 环绕细胞核周围胞浆亮染
系统性血管炎诊断与鉴别诊断
炎症性肠病诊断与鉴别诊断 自身免疫性肝病诊断与鉴别诊断
其它疾病诊断与鉴别诊断
结缔组织病 感染性疾病
系统性血管炎（systemic vasculitis）
是以血管的炎症反应为主要病理改变的一类炎
性疾病
由于血管的炎性病变导致相应的组织器官供血
障碍、组织坏死
pANCA滴度与IBD临床活动性、病程、病变部位无关 IBD自身抗体谱联合检测有助于IBD诊断与鉴别诊断
pANCA与IBD
IBD患者血清中存在的ANCA主要是 p/aANCA 其靶抗原目前尚不清楚，LF、Cath G、BPI、
LYS、HEL等均有报道，但尚无统一结论
pANCA在UC中呈高特异性，在涉及到结肠病变
ANCA自身抗体谱
（Antineutrophil Cytoplasmic Autoantibodies）
ANCA
• 1988年Falk等发现了与系统性血管炎和坏死性新月体
形成型肾小球肾炎有关的另一种ANCA-MPO
• 1989年Targen等发现ANCA与炎症性肠病（IBD）有
关 —pANCA /aANCA
• 1990年lüdemann等证实为cANCA的主要靶抗原为，
PR3 ，约占cANCA的80%～90%
（HEL）抗体
• 1992年Halbqachs-Mecareli等在IBD中发现抗组织蛋白酶G
（Cath G）抗体
• HEL与Cath G是中性粒细胞中嗜苯氨蓝颗粒中除PR3以外的
两种丝氨酸蛋白酶，与PR3存在氨基酸序列同源性，分子量 均为29 000，具有蛋白水解酶活性
其他特异性ANCA
• 抗溶酶体（lysozyme, LYS）抗体：1993年，Schmit等首先报
# 核周型ANCA（perinuclear ANCA，pANCA） 环绕细胞核周围胞浆亮染
# 非典型型ANCA（atypical ANCA，aANCA或 xANCA） 兼有cANCA和pANCA两种特性，aANCA不易与pANCA区分， 并且主要靶抗原还不清楚，所以许多实验室将其列入pANCA 之列，作为pANCA 的一个亚型
• 疾病活动性和病期阶段敏感性，初发不活动WG中，
阳性率50%，而活动性典型WG，几乎100%阳性
• 其它原发性血管炎25%的阳性机会，如显微镜下型多
血管炎（MPA）Байду номын сангаас坏死性新月体型肾小球肾炎 （NCGN）、结节性多动脉炎（PAN）等
• 该抗体滴度与病情活动一致，常被作为判断疗效、
估计复发的指标，从而指导临床治疗
Clinical Application of ANCA autoantibodies
形成型肾小球肾炎有关的另一种ANCA-MPO
• 1989年Targen等发现ANCA与炎症性肠病（IBD）有
关 —pANCA /aANCA
• 1990年lüdemann等证实为cANCA的主要靶抗原为，
PR3 ，约占cANCA的80%～90%
（HEL）抗体
• 1992年Halbqachs-Mecareli等在IBD中发现抗组织蛋白酶G
（Cath G）抗体
• HEL与Cath G是中性粒细胞中嗜苯氨蓝颗粒中除PR3以外的
两种丝氨酸蛋白酶，与PR3存在氨基酸序列同源性，分子量 均为29 000，具有蛋白水解酶活性
其他特异性ANCA
• 抗溶酶体（lysozyme, LYS）抗体：1993年，Schmit等首先报
# 核周型ANCA（perinuclear ANCA，pANCA） 环绕细胞核周围胞浆亮染
# 非典型型ANCA（atypical ANCA，aANCA或 xANCA） 兼有cANCA和pANCA两种特性，aANCA不易与pANCA区分， 并且主要靶抗原还不清楚，所以许多实验室将其列入pANCA 之列，作为pANCA 的一个亚型
• 疾病活动性和病期阶段敏感性，初发不活动WG中，
阳性率50%，而活动性典型WG，几乎100%阳性
• 其它原发性血管炎25%的阳性机会，如显微镜下型多
血管炎（MPA）Байду номын сангаас坏死性新月体型肾小球肾炎 （NCGN）、结节性多动脉炎（PAN）等
• 该抗体滴度与病情活动一致，常被作为判断疗效、
估计复发的指标，从而指导临床治疗
Clinical Application of ANCA autoantibodies
抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的检测及临床意义之欧阳引擎创编
抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义欧阳引擎（2021.01.01）――间接荧光免疫(IIF)方法（欧盟）一、ANCA概念及分类抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成份为靶抗原的自身抗体，对系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义，已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。
目前，已经有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA 的靶抗原，蛋白酶3(PR3)，髓过氧化物酶(MPO)，人白细胞弹性蛋白酶(HEL)，乳铁蛋白(LF)，组织蛋白酶G(Cath G)，杀菌/通透性增强蛋白(BPI)，人溶酶体相关膜蛋白2(H-LAMP2)，溶菌素(LYS)，天青杀素，防御素，烯醇化酶，葡萄糖醛酸酶。
根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中，可以区分两种不同的荧光模型：一种胞浆型（c-ANCA），是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光。
在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中，其荧光模型表现相同。
其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。
另一种是核周型（p-ANCA），是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧光。
由多种抗原引起，主要靶抗原是髓过氧化物酶(MPO)，人白细胞弹性蛋白酶(HEL)，乳铁蛋白(LF)，组织蛋白酶G(Cath G)，杀菌/通透性增强蛋白(BPI)，人溶酶体相关膜蛋白2(H-LAMP2)，溶菌素(LYS)等。
不同抗体在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中，其荧光模型表现有所不同。
抗MPO抗体产生的p-ANCA因耐甲醛，其荧光模型与在乙醇固定的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故叫甲醛抗性的p-ANCA。
而其他非MPO抗体不与甲醛固定的中性粒细胞反应，无荧光表现，这种类型又称为甲醛敏感的p-ANCA。
故根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片表现，可初步判定ANCA的靶抗原PR3，MPO，非MPO三类。
二、ANCA的检测间接荧光免疫方法是检测ANCA的参考方法或者标准方法，至今也是最常用的经典方法。
抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)荧光判读与讲解
EUROIMMUN
cANCA: 相关疾病
韦格纳肉芽肿（WG） - 典型的WG：可逐渐发展成为肾小球肾炎 - 局限性的WG：可不累及肾小球
>90% 70%
显微镜下多动脉炎（MPA）
up to 30%
变应性肉芽肿性血管炎（Churg-Strauss 综合征）
10-20%
结节性多动脉炎(PAN)
c, p p, c(少见)
p, c(少见) 低阳性率 p
PR3(30%),MPO(70%) PR3(25%),MPO(65%)
PR3(10%),MPO(60%) PR3( 5%),MPO(15%) MPO(30%)
EUROIMMUN
ANCA临床意义(2)：IBD/ALD/CTD
相关疾病
炎症性肠病 溃疡性结肠炎(UC, 60-80%) 克罗恩病(Crohn’s病, 10-20%)
结果
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA 间接免疫荧光法是检测ANCA的经典方法
特点：敏感性高，半定量，是区分cANCA和 pANCA的基础
局限性：间接免疫荧光法测定的是总ANCA，不能 区分靶抗原，需要确认实验作为补充
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA
核周型ANCA（pANCA）
ANA阴阳性
1）ANA阴阳性 2）ANCA：粒细胞是否荧光增强
pANCA
猴肝
注意
ANA阳性 ANA阳性 辅助判读 辅助判读
EUROIMMUN
cANCA
1
4
粒细胞 (乙醇固定)
猴肝
2
3
粒细胞 (甲醛固定)
EUROIMMUNHEp-2 cells
cANCA: 靶抗原
cANCA: 相关疾病
韦格纳肉芽肿（WG） - 典型的WG：可逐渐发展成为肾小球肾炎 - 局限性的WG：可不累及肾小球
>90% 70%
显微镜下多动脉炎（MPA）
up to 30%
变应性肉芽肿性血管炎（Churg-Strauss 综合征）
10-20%
结节性多动脉炎(PAN)
c, p p, c(少见)
p, c(少见) 低阳性率 p
PR3(30%),MPO(70%) PR3(25%),MPO(65%)
PR3(10%),MPO(60%) PR3( 5%),MPO(15%) MPO(30%)
EUROIMMUN
ANCA临床意义(2)：IBD/ALD/CTD
相关疾病
炎症性肠病 溃疡性结肠炎(UC, 60-80%) 克罗恩病(Crohn’s病, 10-20%)
结果
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA 间接免疫荧光法是检测ANCA的经典方法
特点：敏感性高，半定量，是区分cANCA和 pANCA的基础
局限性：间接免疫荧光法测定的是总ANCA，不能 区分靶抗原，需要确认实验作为补充
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA
核周型ANCA（pANCA）
ANA阴阳性
1）ANA阴阳性 2）ANCA：粒细胞是否荧光增强
pANCA
猴肝
注意
ANA阳性 ANA阳性 辅助判读 辅助判读
EUROIMMUN
cANCA
1
4
粒细胞 (乙醇固定)
猴肝
2
3
粒细胞 (甲醛固定)
EUROIMMUNHEp-2 cells
cANCA: 靶抗原
医学检验·检查项目：抗中性粒细胞抗体(ANGA)_课件模板
常用的有间接免疫荧光法与ELISA： 1、间接免疫荧光法
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>体上， 直接与相应抗原反应。
第一步，用未知未标记的抗体(待检 标本)加到已知抗原标本上，在湿盒中 37℃保温30min，使抗原抗体充分结合， 然后洗涤，除去未结合的抗体。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
临床意义： 胞抗体出现在HIV感染的非症状期且在症 状期大量增加。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
正常值： 间接免疫荧光法，ELISA法：阴性。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。)。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
医学检验·各论 抗中性粒细胞抗体
（ANGA） 内容课件模板
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
简介：
“抗中性粒细胞抗体”(ANGA)通常指 中性粒细胞减少症患者血清中的抗体以及 抗中性粒细胞膜成分抗体，这些自身抗体 与“抗中性粒细胞胞浆抗体”(ANCA)不同。 测定ANGA可以协助诊断临床上各种引起粒 细胞减少的疾病。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
简介： 进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗 涤除去多余的游离反应物，从而保证试验 结果的特异性与稳定性。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
临床意义：
ANGA阳性多见于多系统自身免疫紊乱 常伴有自身免疫性中性粒细胞减少症如系 统红斑狼疮(SLE)、干燥综合征、Graves 病以及混合性自身免疫性紊乱。霍奇金病、 非霍奇金病和慢性淋巴细胞白血病的病毒 感染可伴有免疫性中性粒细胞减少症，尤 其是EB病毒和艾滋病病毒(HIV)感染，中 性粒细
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>体上， 直接与相应抗原反应。
第一步，用未知未标记的抗体(待检 标本)加到已知抗原标本上，在湿盒中 37℃保温30min，使抗原抗体充分结合， 然后洗涤，除去未结合的抗体。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
临床意义： 胞抗体出现在HIV感染的非症状期且在症 状期大量增加。
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正常值： 间接免疫荧光法，ELISA法：阴性。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。)。
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医学检验·各论 抗中性粒细胞抗体
（ANGA） 内容课件模板
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
简介：
“抗中性粒细胞抗体”(ANGA)通常指 中性粒细胞减少症患者血清中的抗体以及 抗中性粒细胞膜成分抗体，这些自身抗体 与“抗中性粒细胞胞浆抗体”(ANCA)不同。 测定ANGA可以协助诊断临床上各种引起粒 细胞减少的疾病。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
简介： 进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗 涤除去多余的游离反应物，从而保证试验 结果的特异性与稳定性。
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>
临床意义：
ANGA阳性多见于多系统自身免疫紊乱 常伴有自身免疫性中性粒细胞减少症如系 统红斑狼疮(SLE)、干燥综合征、Graves 病以及混合性自身免疫性紊乱。霍奇金病、 非霍奇金病和慢性淋巴细胞白血病的病毒 感染可伴有免疫性中性粒细胞减少症，尤 其是EB病毒和艾滋病病毒(HIV)感染，中 性粒细
ANCA相关性血管炎培训课件
• 系统性血管炎常累及的部位为皮肤、肾脏、 肺、神经系统等。
1
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系统性血管炎分类 处，请联系网站或本人删除。
主动脉
小动脉
微动脉
毛细血管 微静脉
静脉
肉芽肿性 多血管炎
嗜酸性肉芽肿 2
性多血管炎
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C-ANCA
P-ANCA
3
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抗中性处，请粒联系细网站胞或本胞人删浆除。 抗体
• 最主要的靶抗原为髓过氧化物酶（MPO） 和蛋白酶3（PR3）
• C-ANCA——PR3 • P-ANCA——MPO • 根据靶抗原可将ANCA分为MPO-ANCA 、
AAV发病机制 处，请联系网站或本人删除。
• 目前研究较多的自身免疫启动机制分为两 种，直接分子模拟机制和互补肽的抗独特 型反应机制。
• 直接分子模拟机制：某些微生物的抗原肽结构可能与自身 抗原相似——抗体的交叉反应性
• 互补肽的抗独特型反应机制：自身抗原互补肽的抗独特型 抗体导致针对自身抗原的免疫反应
AAV（48.1%）。
9
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中国处A，请A联V系网站的或本流人删行除。病学
• 中国人群中 MPA 占显著的优势，占 AAV 患者的 80%，但在白人中，尤其是北欧国家，人群中 GPA 更常见。
• 相应地，在中国 AAV 患者中 MPO 较 PR3 占有显 著的优势。
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1
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主动脉
小动脉
微动脉
毛细血管 微静脉
静脉
肉芽肿性 多血管炎
嗜酸性肉芽肿 2
性多血管炎
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C-ANCA
P-ANCA
3
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• 最主要的靶抗原为髓过氧化物酶（MPO） 和蛋白酶3（PR3）
• C-ANCA——PR3 • P-ANCA——MPO • 根据靶抗原可将ANCA分为MPO-ANCA 、
AAV发病机制 处，请联系网站或本人删除。
• 目前研究较多的自身免疫启动机制分为两 种，直接分子模拟机制和互补肽的抗独特 型反应机制。
• 直接分子模拟机制：某些微生物的抗原肽结构可能与自身 抗原相似——抗体的交叉反应性
• 互补肽的抗独特型反应机制：自身抗原互补肽的抗独特型 抗体导致针对自身抗原的免疫反应
AAV（48.1%）。
9
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中国处A，请A联V系网站的或本流人删行除。病学
• 中国人群中 MPA 占显著的优势，占 AAV 患者的 80%，但在白人中，尤其是北欧国家，人群中 GPA 更常见。
• 相应地，在中国 AAV 患者中 MPO 较 PR3 占有显 著的优势。
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风湿性疾病中自身抗体的意义ppt课件.ppt
以永生内皮细胞株（Eaby 926）
提取抗原，由免疫印迹法检测
AECA，并以双向电泳、免疫印 迹和质谱分析发现AECA的共同 靶抗原主要是分子量为47000内 皮细胞蛋白，其成分为α-烯醇化 酶
AECA在不同疾病中的阳性 率
组别
系统性血管 炎
SLE
总例数 AECA阳性 例数
113
78
阳性率 （%）
PSC (Primary sclerosing cholangitis)
Ig↑（IgM↑） AMA（-） ANCA(+)、IgG—ANCA、IgG1—ANCA
自身抗体进展
北京协和医院研究了抗内 皮细胞抗体（AECA）对 系统性血管炎的诊断作用
AECA主要见于免疫性血 管炎疾病，有潜在致病性， 该抗体对血管炎的诊断和 判断疾病的活动性、预后 有一定意义。
2. 诊断RA的敏感性：46.6%，特异性： 96.6%。
3. 与APF、AKA相关（CCP是filaggrin的一 段肽链）， 但不完全重叠。
4. 与HLA-DR4相关，提示抗CCP（+）病情 重，骨破坏明显。
自身免疫性肝病
自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis, AIH)
原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis, PBC）
类风湿因子
（Rheumatoid Factor）
RF由外周淋巴结、关节滑膜、扁桃 体淋巴滤泡和骨髓产生。（CD5+ B 淋巴细胞是产生IgM-RF主要细胞。）
RF的临床意义
是诊断RA的标准之一，不是一标准，并非 RA特有
作为血清阴性脊柱关节病区分标准 正常人2%阳性，老年人可达5%阳性 RA 50-90%、SS 75-95%、MCTD 50-60%、IgA