R和C带技术及其临床意义

1.目的:R显带可补充G显带末端浅染的缺点,加强染色体末端微小变异的识别;R显带适用于大批量实验以及较难处理的标本如骨髓。

2.应用范围外周血、骨髓等各种标本的染色体分析技术。

3.实验原理3.1.R显带法产生的带纹在染色强度上与G带相反,故也称为逆转显带。

R 显带染色体的末端为阳性染色,为了观察染色体的末端缺失,应当用R带。

在这一点上G带和Q带不如R带。

虽然有许多荧光素不必预处理就能在染色体上产生R带。

但标准的R带技术是把染色体放在高温(通常为87℃)的离子溶液中,再以Giemsa或吖啶橙染色。

这时原来为G带阴性的带,经Giemsa 染色后为阳性带,经吖啶橙染色者为绿色荧光,而原来G带的阳性带则呈现红色的吖啶橙荧光。

3.2.R带按制备方法的不同可分为荧光R带和姬母萨R带两类,但以Dutrillaux首创的热处理姬母萨R显带法为最基本的方法。

其显带机制尚未完全明了。

Dutrillaux认为是由于DNA受热变性的缘故。

此时富含AT碱基对的区段单链化,故不易为姬母萨液所染色,乃呈浅带;而富含GC碱基对的区段仍保持正常的双链结构,故易于为姬母萨液染色,乃呈深带。

但目前了解的Giemsa着色机制并不十分支持次假说。

3.3.R带与G带、Q带技术产生的大多数条带在整个染色体臂上显示出一系列阳性和阴性的染色带,但没有“间带”。

这些带的带型在不同组织中是恒定的,且在发育期间不发生变化。

在分裂的前期是许多的细微带出现在细长的染色体上,到了前中期由于它们彼此融合而成为稍大一点的带,带的数目也随之减少;在高度浓缩的中期染色体上,这些带几乎合并成一个带而占据着整条染色体。

可见这些带在有丝分裂过程中不断地改变其大小,故称为变动带。

变动带相当于粗线期的染色粒,而且代表了有丝分裂中染色体上的浓缩过程,蛋白质的巯基被氧化成二硫化物。

最先浓缩的染色体带一般是在S 期的后期复制的DNA,它们富含A-T碱基对,几乎没有活性基因。

阴性的G 带和阳性的R带通常是早复制的,浓缩得晚些,含有大多数活性基因,很易遭受染色体损伤。

变动带在分裂前期的发展和融合表明,在染色体上最先浓缩和最晚浓缩的区段之间,某些特性的变化可能是逐步发展的过程,而不是划分得一清二楚的。

4.实验流程4.1.标本采集4.1.1.采集要求4.1.1.1.外周血以晨起空腹采血为佳;4.1.1.2.骨髓抽取以髂骨、胸骨为佳。

4.1.2.标本类型肝素钠抗凝血或培养液保存的血。

4.1.3.标本量4.1.3.1.外周血为3ml左右。

4.1.3.2.骨髓为5±1ml。

4.1.4.储存容器一次性无菌肝素钠抗凝管或培养液。

4.1.5.标本保存4.1.5.1.外周血4~10℃保存,24h内尽快送检;4.1.5.2.骨髓2~8℃保存,6~8h尽快送检。

4.1.6.标本拒收标准4.1.6.1.标本缺乏唯一性条形码识别;4.1.6.2.标本量不足检测;4.1.6.3.标本严重溶血、凝血、脂血、污染;4.1.6.4.标本使用非肝素钠抗凝;4.1.6.5.骨髓标本计数有核细胞过少。

4.2.试剂与仪器4.2.1.试剂4.2.1.1.试剂组成1640培养基(外周血或骨髓),秋水仙素,甲醇,冰醋酸,生理盐水,NaCl,KCl,NaH2PO4.2H2O,Na2HPO4,MgSO4.7H2O,葡萄糖,酚红,CaCl2,Tris-Base,Giemsa粉,甘油,香柏油,无水乙醇,三蒸水等。

4.2.1.2.储存和稳定性4.2.1.2.1.储存1640培养基-20℃保存,秋水仙素、Earle's液2~8℃保存,其它试剂均于室温下保存,切莫倒置。

4.2.1.2.2.稳定性未开封,正确保存可稳定至表明的保质期;开封后,正确保存可稳定12周。

4.2.1.3.使用方法4.2.1.3.1.1640培养基、秋水仙素、生理盐水、香柏油等直接按照说明书使用;4.2.1.3.2.甲醇、冰醋酸、KCl、无水乙醇、Earle's液等使用时配制成工作液即可,其中Earle's液需4℃保存,固定液则须现用现配。

4.2.1.3.3.Giemsa粉、Tris-Base等应提前配制成贮存液,使用时按比例稀释即可。

4.2.2.仪器恒温培养箱,超净工作台,恒温水浴箱,恒温水浴锅,烤箱,水平离心CO2机,显微镜,染色体自动分析系统,冰箱,天平等。

4.3.质控程序4.3.1.对每批新进的培养基,对每个批号的培养基,必须做过预实验后方可使用,并做好记录;4.3.2.对每批新进的甲醇和冰醋酸,必须做过预实验后方可使用,并做好记录;4.3.3.对每批新进的秋水仙素,对每个批号的秋水仙素,必须做过预实验后方可使用,并做好记录;4.3.4.对每批新进的Giemsa粉,必须提前配好几批贮存液,分别做好预实验后使用,并做好记录。

4.4.操作步骤4.4.1.细胞培养针对不同的送检标本选择合适的培养方法,并在结束培养之前选择适当的秋水仙素处理方案。

4.4.2.收获细胞4.4.2.1.将培养完全的两瓶培养物倒入1个离心管内,以1500rpm离心10分钟,弃上清,留下细胞沉淀。

4.4.2.2.低渗:向离心管内加入37℃预温的0.075mol/L的KCL 8ml,用滴管反复吹打分散细胞,置37℃水浴箱中温浴25-30分钟。

4.4.2.3.预固定:向低渗后的细胞悬液内缓慢加入新鲜配制的固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)1ml到1.5ml,轻轻混匀后置37℃水浴箱中温浴5分钟,随后1500rpm离心10分钟,弃上清,留下细胞沉淀。

4.4.2.4.固定:沿管壁向上述沉淀细胞缓慢加入固定液8ml,轻轻混匀后37℃温浴静置30分钟,1500rpm离心10分钟,弃上清,再加入固定液6ml,轻轻混匀后盖上离心管盖,置冰箱2℃~8℃保存备用。

4.4.3.制片4.4.3.1.低位滴片法将备用的细胞悬液以1500rpm离心10分钟,弃上清,留下细胞沉淀,重新加入新配制的固定液,将悬液配制成乳清色(具体情况需参照沉淀物的量和制片后的细胞的分布情况),混匀后,在预备好的洁净冰玻片上方约1cm滴片,每张玻片滴2滴,均匀铺展后酒精灯火焰过火两次,自然干燥或烤箱烤干备用。

4.4.3.1.高位滴片法将备用的细胞悬液以1500rpm离心10分钟,弃上清,留下细胞沉淀,重新加入新配制的固定液,将悬液配制成稀牛奶状(具体情况需参照沉淀物的量和制片后的细胞的分布情况),混匀后,在预浸泡在25%酒精的玻片上方,至少30cm以上滴3滴悬液,迅速水平过火一次,接着倾斜玻片缓慢过火,使其着火,再连续水平过火数次,直到玻片被烤干。

4.4.4.显带与染色4.4.4.1.取适量的(由标本量而定)容积为50ml的白瓷立式染缸,倒入适量的pH6.5~6.8的Earle's溶液,加盖后置恒温水浴锅中加热至87.5℃。

4.4.4.2.将表面干燥的玻片标本放入预温87.5℃的Earle's溶液中温育,玻片之间应留有间隙。

4.4.4.3.标本温育60min后,每隔5~10min取出1~2张玻片,流水冲洗,温育时间约在60~120min之间。

4.4.4.4.消化后的片子用新鲜配置的10%Giemsa染色液染色8~10min,取出水洗,待干,镜检。

观察最初取出的标本上染色体的显带情况,有助于判断显带合适所需的时间。

4.5.参考值正常男性:46,XY;正常女性:46,XX。

4.6.临床意义4.6.1.与G带等显带技术一样,R带分析的主要目的在于发现体质性或克隆性核型异常。

同时,R带亦具有独自的特色:其一,带型和Q带、G带正好相反,即前者的阳性带相当于后者的阴性带,而前者的阴性带则相当于后者的阳性带,因而得名;其二,除Y染色体外,其余染色体末端均呈深带。

因此R带不但可代替Q带和G带作为常规显带技术应用,而且还有胜过Q带和G带之处:R带作为G带的互补带,有助于确定位于G带阴性区的染色体重排断裂点;R带对揭示涉及染色体末端的缺失和易位特别有价值。

自然R带也有它的短处,即它的带纹不如G带精细,因而其解象力有时逊于G 带,例如难以识别象inv(16)这样微小的异常。

4.6.2.R带在白血病中的应用优势较强。

这取决于骨髓的有丝分裂指数较低、分裂相较差,而G显带对片子的质量要求较高,显带和染色等步骤较难控制,很难较好地显带和着色,但R显带对片子质量并不十分苛刻,便弥补了这一不足。

另外,R显带处理的染色体一般不会弯曲、扭变,且着色比较稳定,末端条带多为深染。

在临床实际应用中,R带的显色流程比较简单、稳定,适合于大量标本的检测;同时条带较少并不一定是缺点,它可简化片子的后续分析,缩短检验周期,而无法分析出病变的标本,可采用FISH结合诊断。

4.7.注意事项4.7.1.和其它显带技术一样,分裂相量多质佳是植被优良R带标本的前提,这和培养以及收获细胞技术密切相关。

4.7.2.Earle's溶液配制时应采用1级纯水为佳(按美国国家临床试验标准委员会规定,最大每毫升菌落数10,pH6.0~7.0,电阻率10MΩ/cm,硅最大值0.05mg/L)。

4.7.3.Earle's溶液的pH和温育温度是显带成功与否的另外两个关键。

pH<6或>7,温度<80℃或>90℃,显带常失败。

在此范围内,标本温育时间和Earle's 溶液的pH成正比,而和温度成反比。

pH6.5、温度87.5℃为最佳显带条件。

4.7.4.陈旧的玻片标本或已经Giemsa染色的标本均可用于显带,但由于片龄的增加,显带时间需要缩短,即标本的老化时间与显带时间成反比。

4.7.5.来自外周血淋巴细胞培养的染色体标本显带所需时间比骨髓染色体标本稍短。

4.7.6.R带标本最好用相差显微镜观察,若用普通显微镜观察或显微摄影时,应加用绿色滤光片以增大反差。

C带是显带技术一、实验目的通过实验,初步掌握动、染色体C带分带技术。

二、实验原理C带是显带技术中最简单的一种带型。

使用这种技术,能使着丝粒型的异染色质着色,这种异染色质通常位于着丝粒周围并常含有高度重复序列的DNA。

因为通常都在着丝粒处出现,所以称之为C-带。

关于产生C带的机理,有人认为用氢氧化钡和盐类处理染色体,能从染色体中提取高达80%的DNA。

DNA被优先地从非C带区提出,结果染色体臂着色浅而着丝粒异染色质着色深。

有人研究表明,着丝粒异染色质仅与组蛋白结合,而常染色质含有大量非组蛋白蛋白质。

一般有这样的看法,活跃的染色质比遗传上不活跃的染色质更富以非组蛋白蛋白质。

这说明,仅与组蛋白结合的染色质比含有大量非组蛋白蛋白质的染色质,结构紧密得多。

也就是这种紧密的结构保护着丝粒的异染色质免受氢氧化钡和盐类的破坏,从而产生C带。

三、实验材料小白鼠骨髓细胞染色体制片不经染色留用的标本片,或采用酸处理压片法制备植物根尖细胞染色体的标本片。

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胸腔积液患者ADA、CRP和CEA水平检测及其临床意义

胸腔积液患者ADA、CRP和CEA水平检测及其临床意义
较 ,差 异 具 有 统 计 学 意 义 ( <00 )C A含 量 恶 性 胸 腔 积 液 组 明显 高 于 结 核 性 和 炎 性 胸 腔 积液 组 ,差 异 具 有 统 计 学 意 义 P .5 ; E
( <00 ) P .5 。结论 A A C P和 C A联合检测在胸腔积液的鉴别诊断中具有 较高的临床价值 。 D 、R E
C A水平进行 比较 。结果 AD E A在结核性和炎性胸腔积 液组 中明显升高 , 恶性 胸腔积液组 中不升高( <00 )结核性和 在 P . , 5
炎性胸腔积液组 之间差异无统计学意义 ( >O 5 ; R P . )C P含量在炎性组 和结核 组中均升高 , 0 恶性组升 高不 明显 , 与恶第8 2 1 0 卷 期
・ 临床 探 讨 ・
胸 腔积液患者A A C P E D 、R 和C A水平 检测及其临 床意义
肖志 卫 田海 生
( 湖南省安化县人 民医院呼吸内科 , 湖南安化 4 3 0 ) 1 5 0
【 摘要]目的 探讨腺苷脱氨酶 ( A)c反应蛋 白( R ) AD 、 C P 和癌胚抗原 ( E 水平检测在胸腔积液鉴别诊 断中的价值 。 C A) 方法 对 15例胸 腔积液 患者 ( 中恶 性 2 例 、 核性 8 、 性 1 2 其 1 结 8例 炎 6例 ) 的临床 资料进行 回顾性 分析 , 对各组 的 A A、 R 并 D C P和
Pl ur En. i e al us on
X/ AO t we T AN ih n Zf J I Ha s e g
De a t e o s ia oy M e ii e An ua p rm nt f Re pr tr dc n , h Co nt o es u y Pe pl’ Ho pt/ An a 41 5 s ia, hu 3 00,Ch n ia

C反应蛋白检测的临床意义

C反应蛋白检测的临床意义
当手术后伴有细菌感染,高值CRP会持续存在。连续定量地检测CRP比只在某一个时间点测定更有意义 期望值: 术后2~3天: 250~350mg/l 术后5~7天:<30mg/L
建议:血常规+CRP---手术科室
CRP的临床应用
3. 用于抗生素疗效观察的动态 对疑有败血症的新生儿 对细菌感染作抗生素治疗 在粒细胞缺乏症或机体免疫状态抑制
0.5~200mg/L 全程CRP=hsCRP+常规CRP (增强了临床高CRP标本的检测能力,同时也提高了低值的灵敏性,更利于动态监测)
三者检测血中相同的物质 (物质的唯一性,仅是检测方法和范围的差异)
CRP的临床应用
CRP与疾病的活动性及检测的临床意义
CRP与疾病的活动性
CRP检测的临床意义
hsCRP (mg/L) Risk <1 Low 1 to 3 Moderate >3 High
Ridker PM. Circulation. 2003;107:363-369.
0
2
4
6
8
Follow-up (years)
0.95
0.96
0.97
0.98
0.99
1.00
<1 mg/L
5. CRP 在呼吸道感染中的变化
CRP的临床应用
部分病毒感染时的CRP变化
流感病毒 A 或 B 无并发症 流感病毒 A 或 B 并发细菌感染 巨细胞病毒感染 单核细胞增多症 单核细胞增多症并发细菌感染
5. CRP 在呼吸道感染中的变化
CRP的临床应用
5. CRP 在呼吸道感染中的变化
一般:
例外:
影响因素
不受病人的个体差异、机体状态和治疗药物的影响

Rh血型抗C抗e的血清学检测及临床意义

Rh血型抗C抗e的血清学检测及临床意义

Rh血型抗C抗e的血清学检测及临床意义
顾玉花;张洪林;王桂东
【期刊名称】《山东医学高等专科学校学报》
【年(卷),期】2024(46)3
【摘要】目前,已发现的Rh抗原共有54个,其中D、E、C、c、e五种抗原在临床上具有十分重要的意义。

根据《临床输血技术规范》要求,输血前患者和献血者需行ABO及RhD抗原检测并同型输注,对有妊娠史、输血史的患者进行不规则抗体筛查,以保证输血安全[1]。

【总页数】3页(P37-39)
【作者】顾玉花;张洪林;王桂东
【作者单位】临沂市肿瘤医院;临沂市人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R331.1
【相关文献】
1.输血前抗—HIV、Rh血型检测及其临床意义
2.母儿Rh血型不合新生儿围产期抗-D抗体效价、血红蛋白、胆红素检测及临床意义
3.Rh血型抗-E抗体检测及临床意义
4.Rh血型抗C、抗D混合抗体的血清学检测及临床意义
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2型糖尿病肾病患者CRP与黏附分子水平的检测及其临床意义

2型糖尿病肾病患者CRP与黏附分子水平的检测及其临床意义

5 81) 1 16
【 要】目的 : 测 2型糖 尿病 肾病 患者 血 清 C 反 应 蛋 白 (R )P 选择 素 (—e) 细胞 间 黏附 分子一 ( A 1 的 摘 检 一 C P 、一 Ps 和 1 1I M一 ) C 含量 , 探讨 其 在 2型糖 尿病 肾病发 病 中 的作 用 。方法 : 用速 率散 射 比浊法 和 E IA法分 别检 测 2型糖 尿病 肾病 患 采 LS 者血 清 C P P sl I AM一 水 平 。结 果 : R 、—e和 C 1 2型糖 尿病 肾病 患者 血清 C 、 — e 和 I AM一 水 平 均显 著高 于糖 尿病 RP P sl C 1 无 肾病 患者 和正 常人 对 照组 , 尿病 无 肾病患 者高 于正 常人 ; 糖 治疗后 糖 尿病 肾病 患 者血 清 C 、 —e 和 IAM一 水 RP P sl C 1
【 中图分类号1 7 1 + 8. 4 R 6
【 文献标识码】B
f 文章编号】1 7 — 7 1 2 1 )8 a 一 0 — 3 6 4 4 2 (0 0 0 ( )1 2 0
De e m i a in f C -r a tv r t i nd a e i n o e uls i h te s t r n to O e c i e p o en a dh so m lc e n t e pa int wih y e di b tc n ph o t y a d isci ia i n fc n e t 2 t p a e i e r pa h n t ln c lsg i a c i
医学检验
20 8第7第2 0年 月 1 2 1 卷 期
2型糖尿病 肾病 患者 C RP与黏 附分子 水平 的 检 测 及 其 临床意 义

fr-crp临床意义-王菁菁

fr-crp临床意义-王菁菁

学龄前儿童,尤以3岁以下年龄组发病率最高。
• 病人和隐性感染者均为传染源,主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。主要症状表现为手、足、口 腔等部位的斑丘疹、疱疹。少数病例可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿、循环障碍等,多由EV71感染引 起,致死原因主要为脑干脑炎及神经源性肺水肿。
• 潜伏期:多为2-10天,平均3-5天。
细菌感染 (中性粒升高且CRP明显升高)
CRP的临床应用பைடு நூலகம்议
检测结果
临床应用建议
心血管评估 心血管评估 感染评估 感染评估 感染评估
—— 心血管疾病危险性评估为中度 —— 心血管疾病危险性评估为高度
1-3mg/L
>3mg/L 5-10mg/L 10~25mg/L >25mg/L
—— 如病程尚短,不能排除细菌感染及病毒感染,应在数小时后复查
理想状态下,我们期望术后2~3天CRP值在250~350mg/L;术后5~7天CRP值<30mg/L。
C临床应用-抗生素疗效动态观察、指导和监测治疗
图4:白血病病人并发感染的CRP水平统计 建议对患者进行连续的CRP测定,以监测是否有隐蔽性细菌感染并可了解抗生素疗效。 临床上,急性白血病病人在对输血或细胞毒治疗的反应过程中,CRP值不超过100mg/L
全程CRP hs-CRP和FR-CRP都不是新的一种蛋白质,其检测对象都是CRP,是 因为方法灵敏度或检测范围不同而命名;
C反应蛋白概述-临床应用
肺部感染(细菌性)、 肺结核、脓胸等 亚急性细菌性心内膜炎、心包炎、 心急梗塞等
胆囊炎、肝脓 肿、腹膜炎等
肾盂肾炎、膀胱炎、 肾周围脓肿等
其他:
胶原病、过敏性及自身免疫性疾病的活动期(风 恶性淋巴瘤、白血病等 湿热、SLE、类风湿等)、败血症等

pcr的临床意义及应用

pcr的临床意义及应用

pcr的临床意义及应用
PCR(聚合酶链式反应)是一种重要的分子生物学技术,其在医学
领域中有着广泛应用。

本文将从PCR的临床意义和应用两个方面展开
探讨。

首先,PCR在临床上有着极为重要的意义。

通过PCR技术,医生
们可以快速、准确地检测出一系列疾病。

例如,在感染性疾病的诊断中,PCR可以检测出病原体(如病毒、细菌等)的存在,有利于早期
发现和治疗。

此外,PCR还可以用于遗传病的基因检测,帮助人们了
解自己的基因情况,预防患病。

因此,PCR在临床诊断中具有不可替
代的地位。

其次,PCR技术在临床应用上也非常广泛。

在疾病预防和控制方面,PCR可以用于流行病学调查、疫情监测等工作。

同时,在肿瘤的诊断
和治疗中,PCR也扮演着重要的角色。

通过检测肿瘤细胞的特定基因
突变,可以帮助医生选择最佳的治疗方案,提高治疗效果。

此外,
PCR还可以用于药物敏感性检测、免疫学研究等多个领域,为医学研
究和临床实践提供强大支持。

综上所述,PCR的临床意义和应用远不止以上所述,随着科学技术
的不断进步,PCR技术在医学领域的应用前景将会更加广阔。

PCR的
发展使得疾病的诊断和治疗变得更加精准和高效,极大地提高了人们
的生活质量,为医学事业的发展贡献力量。

PCR技术的不断完善和创新,将为医学领域带来更多惊喜和突破,值得期待。

cr重要临床意义

CRP试验的临床意义及应用1、为什么叫CRP当人体受微生物等多种因子侵袭后,人体在几小时内,血中很快产生一种不正常的急性期反应蛋白,这种蛋白能与肺炎链球菌C-多糖起反应,1930年Tillett和Francis首次阐述命名为CRP。

2、CRP的合成部位血清中的CRP是在肝细胞中合成。

在炎症及侵袭因子作用下IL-1、IL-6、TNF-a、TGF-β及INF-r刺激后,CRP 6-12h后浓度开始增高。

24-48h后达到最大值。

反复的炎症刺激CRP水平可持续上升。

3、健康状况下的CRP正常范围临床上一般<8mg/L为正常,连续结果的前后比较更有意义。

4、急性时相蛋白在急性时相反应中的血清浓度的变化5、CRP水平的影响因素CRP半衰期为19h 。

正常每天的清除率为20-70%,即清除其一半的量需要1-3.5天。

清除的半衰期还与CRP是否继续合成有关6、CRP的结构和功能CRP由5个完全相同的亚基以共价键结合而成的环形五球体。

CRP的基本特性是:结合磷酸胆碱;激活补体和细胞受体。

可增加细菌易被吞噬性,并诱使吞噬细胞增多,加强炎症部位吞噬细胞的数量和功能。

酶抑制物能保护周围组织免受吞噬细胞所释放酶的破坏。

CRP 结合死亡细胞染色质和细胞碎片,并通过吞噬细胞排出血液循环。

还可阻止血小板聚集,减少血栓形成的可能性。

结合低密度脂蛋白(LDL),通过吞噬细胞表面受体将LDL清除出动脉粥样硬化的斑块区。

7、关于高敏CRP(hsCRP)近期市场关于高敏CRP(hsCRP)的宣传己有很多文章,其中有的已完全背离了高敏CRP(hsCRP)对临床辅助诊断管脉性心血管疾病临床价值的学术定位,被无限的放大和夸张,这是极不严肃的。

那么我们平时所讲的CRP和高敏CRP(hsCRP)究竟有什么不同呢?让我们从下面几点来分析:(1)、高敏CRP和普通CRP在理化性貭方面是完全一致的高敏CRP是指检测方法学的敏感性比传统分析方法有更高的敏感性,能测到极限浓度0.15mg/L的敏感性。

ER、PR、C-erbB-2、HMFG在乳腺癌组织中的表达及临床意义

表达 水平 , 旨在进 一步 探讨 乳腺 癌 的发生 机制 。
1 材 料与 方 法
根 据 阳性 细胞 数 和 阳性 强 度 评 级 : 细 胞 未见 着 色 瘤 为 阴性 ; 0 >5 %肿瘤 细胞 强 、 弥漫 着色判 为 阳性 。
13 统 计 学 方 法 . 采 用 S S 1. P S 3 0统 计 软件 , 白 蛋
表 达 明显高 于 对 照组 ( P<00 ) 余 指标 两 组 无 统 .5 ,
计 学差 异 。
2 2 E P C eb 一 、 MF 表 达 与乳 腺 癌 临 床 . R、 R、 — B 2 H G r
病 理特 征 的关 系 2 3 相 关性 分析 .
见 表 1 。 乳 腺癌组 织 中 E R表达 与 P R表
叶癌 8例 、 管原 位癌 6例 ; 润性 导管 癌组织 学 分 导 浸 级 ¨ 分 为高 分 化 8例 , 中分 化 2 6例 , 分化 1 低 0例 。
腋 窝淋 巴结 转移 3 0例 。主要试 剂 : MF H G抗体 购 自 福 州迈 新生 物技 术有 限公 司 , R、 R、 —rB 2购 自 E P C eb - 北 京 中杉金 桥 生物技 术 有 限公 司 。 12 E P C eb . 、 MF . R、 R、 .rB 2 H G表 达 检 测 采 用 免
率呈上升趋势。20 09年 1 ~ 0 1 9月 , 月 21 年 我们采 用 免 疫组 化 E Vs n法 检 测 5 n io i 8例 乳 腺 癌 组 织 中 雌 激 素 受体 ( R) 孕激 素受 体 ( R)人 表 皮生 长 因 子 E 、 P 、
受体 .( —rB2) 人 乳 脂 肪 球 膜 蛋 白 ( MF 的 2 Ce - 、 b H G)

PCR项目及临床意义

PCR检验室常规项目简介1. 乙型HBV-DNA定量HBV-DNA定量检测方法的出现从根本上突破了免疫学方法间接检测的局限性,通过直接检测病毒的核酸水平真实地反映病毒的情况从而对于HBV的准确诊断、有效治疗、精确预后及新药研制等各个方面具有重大意义:1)判断疾病的严重程度和传染性。

HBV-DNA是直接反映HBV复制状态及传染性的最佳指标。

2)PCR定量结果与血清免疫学结果的综合评价。

采用FQ-PCR定量检测乙肝病毒DNA,结合“二对半”检测结果,对于机体乙肝病毒感染状态尤其变异株发生和病人预后的评估更为科学。

3)观察抗病毒药物疗效,指导药物用量。

直接检测血清中的HBV-DNA是监控HBV 传染和观察抗病毒药物疗效的最可靠的方法。

根据《2000拉米夫定临床应用指导意见》,中国慢性乙型肝炎病人治疗的目的之一就是要降低血清HBV-DNA。

同时血清HBV-DNA滴度的动态变化还可在临床上对用药的剂量、用药时间是否需要联合用药以及用药的效果等提供参考。

4)献血员窗口期病毒核酸的筛查及早期诊断。

HBsAg在血清中的检出通常在乙肝病毒感染后的2-4月出现,平均为56天左右。

而HBV-DNA的检出可以将该所谓″窗口期″提前6-15天,对于早期诊断和提高输血安全有着重要的意义。

5)预测病情、判断预后。

通常HBV-DNA持续阳性超过6个月的会转为慢性肝炎。

抗-HBe阳性患者血清HBV-DNA持续阳性常提示肝损严重。

6)对阻断母婴传播的监测。

联合应用高价免疫球蛋白和乙肝疫苗有效地阻断母婴传播,但仍有5-10%婴儿对疫苗呈低反应,荧光定量PCR可对此进行监测。

7)器官移植中的作用。

肝脏器官移植是目前肝硬化晚期治疗的唯一方法,定量检测HBV-DNA为肝移植术后的跟踪观测具有较好的临床价值。

乙肝病毒定量相关检测还有:乙肝标志物定性,乙肝标志物定量,乙型HBV-DNA 定量,肝脏功能检测。

2. 乙型HBV-DNA定性HBV-DNA是乙肝病毒基因,其有无、多少是乙肝病毒存在及有无复制能力的直接标志。

C R R T 进 展 及 其 临 床 应 用


3. CRRT加快急性衰竭的恢复
IHD常导致低血压,加重肾损伤,延迟肾功能恢复,
而CRRT治疗很少引起低血压。 Manns等研究指出,危重ARF, IHD治疗CCr下降 25%,CRRT仅下 降 7 %;尿量前者下降50%,后者 10%;FNa 前者下降46%,后者 12%。 肾功能下降的原因主要是IHD中MAP下降,导致肾 脏低灌注,加 重肾脏缺血性损伤,延迟急性肾衰。 Linas指出,由于生物不相容性导致的中性粒细胞活 化并浸润到肾 实质中,对缺血的肾脏有明显的负面 影响,使GFR下降。 有作者用纤维素膜对可逆性鼠急性肾衰模型进行透析, 肾功能恢复明显慢于PAN膜透析,使死亡率增加。
C R R T 进 展 及 其 临 床 应 用
首都医科大学附属北京友谊医院肾内科
王 质 刚
一、连续性肾脏替代疗法与间歇性透析的差异
在IHD的基础上发展了CRRT;CRRT显示出比IHD明显的优越 性,CRRT被广泛地应用在治疗ARF和MODS。 1. CRRT血液 动力学稳定 IHD治疗中溶质和水分迅速变化,导致血浆渗透压骤然下降, 加重或诱发急性肺水肿和左心衰竭。 原有严重心功能不全、休克或严重低氧血症患者不能耐受IHD, 甚至加重病情,但可以进行CRRT。 在CRRT治疗中,由于应用未加温的置换液或透析液常使患者体 温下降,有利于提高末梢血管阻力,稳定血压。 低体温可减少细胞因子的产生,减弱全身炎症反应,有益于防止 发生MODS. 行CVVH比CAVH更有利于保护心功能。
5. CRRT 清除炎症介质
研究证实,CRRT能排除某些炎症介质,还能起到免疫调 节作用。作者发现 HF 可以从SIRS患者中排除 IL-1、 IL-8、C3a 碎片 和C5a碎片,但是不能排除IL-6和TNF。 在SIRS患者超滤液中含有混合性介质,它刺激PBMC和单 个核细胞产生TNF,还可促进淋巴细胞分泌IL-2和IL-6。 近来的资料表明,花生四烯酸衍生物可能出现在超滤液中。 临床研究发现,用纤维素膜透析炎症介质明显活化,使败 血症患者死亡率增加,用合成膜HF可以从患者血浆中排除 各种介质,有重要临床意义。 近来用等容HF能改善败血症动物MODS预后和提高严重 ARF患者存活率,从而支持上述观点。
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