反复种植失败的母体因素及治疗策略的研究进展
反复种植失败患者子宫内膜免疫关键基因筛选及免疫浸润分析
反复种植失败患者子宫内膜免疫关键基因筛选及免疫浸润分析反复种植失败患者子宫内膜免疫关键基因筛选及免疫浸润分析概述：辅助生殖技术，如体外受精-胚胎移植已成为不孕不育患者实现生育的一种重要选择。
然而，部分患者经历了多次胚胎移植循环后仍未能成功妊娠，这可能与子宫内膜免疫异常相关。
本文旨在通过筛选反复种植失败患者子宫内膜中的免疫关键基因，并对免疫细胞浸润情况进行分析，以期探索其对妊娠成功的影响。
方法：患者选择：纳入近年来经历多次胚胎移植循环但未能成功妊娠的患者，共计50例。
组织采集：在子宫内膜脱落期，经经验医生操作，取得子宫内膜组织，分别对病变部位和正常部位进行采集。
总RNA提取与定量：使用RNA提取试剂盒将组织样本中的总RNA提取出来，并通过纳米比色计测定RNA的浓度。
逆转录与实时荧光定量PCR：使用逆转录试剂将总RNA逆转录为cDNA，然后，通过实时荧光PCR仪检测免疫关键基因表达水平。
组织免疫组化：免疫组织化学染色法使用抗体标记免疫细胞，观察其在子宫内膜中的分布与数量。
统计分析：通过SPSS软件对实验数据进行统计分析，采用t检验或方差分析进行差异比较，以p<0.05为统计学差异的显著性水平。
结果：1. 免疫关键基因筛选：根据实时荧光定量PCR结果，筛选出一批显著差异表达的免疫关键基因，如调节T细胞活化的CTLA-4和FOXP3基因、细胞毒T淋巴细胞标记物Granzyme B 基因等。
2. 免疫细胞浸润分析：免疫组织化学染色结果显示，在反复种植失败患者的子宫内膜中，T淋巴细胞、自然杀伤细胞、单核细胞等免疫细胞的浸润量较正常部位增加。
讨论：通过筛选反复种植失败患者子宫内膜中的免疫关键基因和免疫细胞浸润情况，我们发现在失败的胚胎移植过程中，子宫内膜的免疫功能可能发生异常。
特别是调节T细胞活化的CTLA-4和FOXP3基因在反复种植失败患者子宫内膜中表达下调，而细胞毒T淋巴细胞标记物Granzyme B基因表达上调，提示免疫失调与胚胎着床障碍相关。
胚胎反复移植失败的中西医病因研究进展
胚胎反复移植失败的中西医病因研究进展摘要】体外受精-胚胎移植（IVF-ET）目前广泛应用于不孕症患者的治疗，尤其是对于35岁以下的女性成功率较高，但目前总体妊娠率在34％～42％之间。
胚胎反复移植失败（repeated implantation failure，RIF）病因繁杂，目前有10%的女性在IVF治疗过程中出现RIF，本文将对 RIF的定义、病因及治疗措施的中西医进展作一综述。
【关键词】体外受精-胚胎移植；胚胎反复移植失败；针刺【中图分类号】R711 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）07-0005-02Advances in research on the etiology of Chinese and Western medicine for repeated embryo transfer failureJing Wang1,Hua Yan21 Graduate School of Shanghai University of Traditional ChineseMedicine,Shanghai 201203,China;2 Department of Reproductive Medicine,Shuguang Hospital Affiliated to Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China【Abstract】In vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) is currently widelyused in the treatment of infertility patients,especially for women under 35 years of age, but the overall pregnancy rate is between 34% and 42%.The causes of repeated implantation failure (RIF) are complicated.Currently,10% of women have RIF during IVF treatment. This article will review the definition, etiology and treatment of RIF in Chinese and Western medicine.【Key words】In Vitro Fertilization-embryo Transfer;Repeated Embryo Transfer Failure;Acupuncture近年来定义胚胎反复移植失败（Recurrent implantation failure，RIF）是指在40岁以下排除卵巢早衰的女性中，在至少三个新鲜或冷冻周期中移植至少四个优质胚胎后未能实现临床妊娠[1]。
反复种植失败的胚胎因素及对策
·６４ ·中国性科学 ２０２１年５月 第３０卷 第５期 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕｍａｎＳｅｘｕａｌｉｔｙ， Ｍａｙ２０２１， Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．５【基金项目】计划生育专项重点项目（１７ＪＳ００８）；桂林市科学研究与技术开发计划项目（２０１７０１０９ ３３）△【通讯作者】曾琼芳，Ｅ ｍａｉｌ：ｇｌｚｑｆ０１＠１６３ ｃｏｍＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２ １９９３．２０２１．０５．０１８·妇科与生殖医学·反复种植失败的胚胎因素及对策李为玉 段金良 曾琼芳△中国人民解放军联勤保障部队第九二四医院生殖中心，广西桂林５４１００２【摘要】 反复种植失败是指移植了多个优质胚胎却仍未获得胚胎种植，影响胚胎种植的重要因素包括胚胎自身和子宫内膜，同时这两个重要因素的协调对话也起至关重要的作用。
本研究将从胚胎因素探讨其在反复种植失败中扮演的角色，并从卵子质量、精子ＤＮＡ完整性、胚胎染色体异常、胚胎透明带硬化以及胚胎培养条件等方面进行综述。
【关键词】 反复种植失败；卵子质量；胚胎因素；染色体异常【中图分类号】 Ｒ７１４【文献标识码】 ＡＥｍｂｒｙｏｆａｃｔｏｒｓａｎｄｃｏｕｎｔｅｒｍｅａｓｕｒｅｓｏｆｒｅｐｅａｔｅｄｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅ ＬＩＷｅｉｙｕ，ＤＵＡＮＪｉｎｌｉａｎｇ，ＺＥＮＧＱｉｏｎｇｆａｎｇ△．ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｅｎｔｅｒ，ｔｈｅ９２４ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆｔｈｅＪｏｉｎｔＬｏｇｉｓｔｉｃｓＳｕｐｐｏｒｔＦｏｒｃｅｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＰｅｏｐｌｅ′ｓＬｉｂｅｒａｔｉｏｎＡｒｍｙ，Ｇｕｉｌｉｎ５４１００２，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｒｅｐｅａｔｅｄｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅｒｅｆｅｒｓｔｏｔｈａｔｍｕｌｔｉｐｌｅｈｉｇｈ ｑｕａｌｉｔｙｅｍｂｒｙｏｓｈａｖｅｂｅｅｎｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｂｕｔｓｔｉｌｌｎｏｅｍｂｒｙｏｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｈａｓｂｅｅｎｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅａｒｅｔｗｏｉｍｐｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒｓａｆｆｅｃｔｉｎｇｅｍｂｒｙｏｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｅｍｂｒｙｏｉｔｓｅｌｆａｎｄｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｒｅｃｅｐｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄｔｈｅｄｉａｌｏｇｕｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｓｅｔｗｏｉｍｐｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒｓａｌｓｏｐｌａｙｓａｃｒｕｃｉａｌｒｏｌｅ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｗｉｌｌｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅｒｏｌｅｏｆｅｍｂｒｙｏｆａｃｔｏｒｓｉｎｒｅｐｅａｔｅｄｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅ，ａｎｄｓｕｍｍａｒｉｚｅｅｇｇｑｕａｌｉｔｙ，ｓｐｅｒｍＤＮＡｉｎｔｅｇｒｉｔｙ，ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，ｚｏｎａｐｅｌｌｕｃｉｄａａｎｄｅｍｂｒｙｏｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｒｅｐｅａｔｅｄｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅ；Ｅｇｇｑｕａｌｉｔｙ；Ｅｍｂｒｙｏｆａｃｔｏｒ；Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ 不孕不育是现今社会面临的一项严重的生殖健康问题，全球的不孕症患病率约１５％，我国作为发展中国家，其患病率８％～１２％［１］。
反复着床失败的治疗现状与进展
反复着床失败的治疗现状与进展刘婧;宋亚丽;许茜亚;全松【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》【年(卷),期】2017(036)001【摘要】反复着床失败（repeated implantation failure，RIF）是指经历多个体外受精/胞浆内单精子注射（IVF/ICSI）周期并移植了多枚优质胚胎而出现的临床妊娠失败，其原因多而复杂，母体方面因素包括子宫解剖结构异常、子宫内膜容受性低及母胚免疫异常等多个方面，胚胎方面因素则包括胚胎遗传物质缺陷、胚胎孵化不良、胚胎培养环境不良、胚胎移植操作不当。
如何针对RIF的原因进行正确的干预是改善预后的关键，对于解剖结构异常可采用手术进行矫正，为提高子宫内膜容受性可采用增加内膜厚度、抑制频繁宫缩、改善凝血功能、调整免疫状态、刺激内膜应答等，胚胎方面则需要筛选优质胚胎、辅助胚胎孵化、改进移植技巧。
现就各种因素RIF的相应干预措施及进展进行归纳和综述。
【总页数】4页(P53-56)【作者】刘婧;宋亚丽;许茜亚;全松【作者单位】510515 广州，南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心;510515 广州，南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心;510515 广州，南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心;510515 广州，南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心【正文语种】中文【相关文献】1.阿托西班用于反复着床失败者胚胎移植治疗的系统评价 [J], 王家玉;陈琳2.反复着床失败患者淋巴细胞主动免疫治疗的临床结局 [J], 贾婉璐;王海燕3.抗生素治疗对胚胎反复着床失败合并子宫内膜炎患者妊娠结局的影响 [J], 李洁;肖卓妮;李雪瑶;丁锦丽;赵璟;管枫;杨亦青;杨菁4.反复着床失败患者预防性免疫治疗后妊娠结局评估 [J], 赵捷;李小雪;葛逸盟;马彩红;李蓉5.环孢素A用于治疗体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者原因不明反复着床失败(RIF)的临床观察 [J], 马玲;郑小挺;杨丽娟;李琳;梅金凤;范荷花因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
反复植入失败的实验室策略
Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ８ ６ ８ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５—１ ５ ５ ８ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ３ ． ０ １ ４
综述 ・
反 复植 入 失 败 的 实验 室 策 略
张力佳 罗 琛 罗轶 群 全 松
反 复植 入 失败 （ ｒ ｅ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ｍ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ， 胎 的代谢率 ， 提高胚胎的着床潜能 。然而 ， 由于共培
一
、
改善培养环境 的策略
完成 ， 理想的培养环境对于早期胚胎发育 、 提高胚胎 核 （ 同样 在第 ３ 天发 育到 ８ 一细 胞阶段 ） 的胚胎移 植人 降低着床率。因此 ， 出现了一些新的胚胎评估 质量和发育潜能具有重要意义 。因此 ， Ｒ Ｉ Ｆ 的实验室 子宫 ，
策略之一为优化 培养环境 。 １ ．单纯 培养 和序贯培 养 ：由于序贯培养 可 以满 方法和技术用来选择移植胚 胎 。
妇产与遗传（ 电子版） ２ ｏ １ ３ 年９ 月第 ３ 卷第 ３ 期 Ｏ ｂ ｓ ｔ ｅ ｔ ｒ ｉ ｃ ｓ － Ｇ ｙ ｎ ｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ａ ｎ ｄ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ． Ｓ ｅ ｐ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ， Ｎ ｏ ． ３
・５ ５・
１ ．胚胎植入前遗传学筛查及其衍生技术 ：Ｒ Ｉ Ｆ
足胚胎发育不同时期对培养液成分的不同要求 ， 有学 患者的染色体非整倍体率显著增高， 因此对胚胎进行 ｐ ｒ ｅ ｉ ｍ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ， 者认为序贯培养有助于提高妊娠率ｂ 。目 前大部分实 植 入前遗 传 学 筛查 （ Ｇ Ｓ ） 理论上是可行的 ］ 。近年来改进的Ｐ Ｇ Ｓ 技术 ， 基 验 室采 用序 贯培 养 。而 单一 培养 是否 也会 取得 好 的 Ｐ 效果 ， 还需要进一步的研究 。但最近有研究发现单纯 于芯片的全基因组扩增 ， 包括微阵列比较基因组杂交 ａ ｒ ｒ ａ ｙ — ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｇ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｈ ｙ ｂ ｒ ｉ ｄ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ａ Ｃ Ｇ Ｈ ） 、 单 培养与序贯培养的胚胎生长 睛况 、 植入率和１ 临 床妊娠 （ 率之间无明显差异 。对于Ｒ Ｉ Ｆ 患者 ， 更换培养基和 核苷酸 多态性（ ｓ ｉ ｎ ｇ ｌ ｅ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｏ ｔ ｉ ｄ ｅ ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ， Ｓ Ｎ Ｐ ） 芯 片的出现 ， 改进了传统 Ｐ Ｇ Ｓ 技术检测染色体数 目和基 培养方式可能有助于获得优质胚胎 ， 尤其是优质囊 因数量有限、 分辨率不高 ， 且无法检测嵌合体 ， 不能明 Ｃ Ｇ Ｈ具有直 观 、 敏 ２ ．共 培养 ：为了优化胚胎培养条件 ， 近年来研 显 提高妊 娠 率和 活产 率 的缺 点 。ａ 究人员研制 了不同的共培养体系。目前最热点的是 感 、 高效 的特 点ｎ 。 。 ］ ， 多用 于囊胚 染色体 核 型的检 测 ， 同源性黄体 中晚期子宫内膜上皮细胞共培养 ， 使Ｒ Ｉ Ｆ 可 以使 Ｒ Ｉ Ｆ 患者冷冻胚胎 移植 后临床妊娠 率达到 ３ ％， 着床 率达 到 ６ ７ ％［ １ 。Ｓ Ｎ Ｐ 芯 片可 以一次 性检 测 患者 临床 妊娠率达 到 ２ ６ ％（ ＜ ３ ５ 岁） 、 ９ ． ６ ％（ ＞ ４ ０ 岁） 陆 ］ 。 ８
试管婴儿为何反复种植失败
试管婴儿为何反复种植失败作者：罗勤来源：《家庭医学·下半月》2019年第03期随着试管婴儿技术日益成熟，成功率逐年提高，每个移植周期的临床妊娠率已经超过50%，预后良好的患者（年轻、卵巢功能正常的第一次试管婴儿患者）甚至可以达到70%-80%。
但仍有部分患者在经历三次甚至更多次试管婴儿助孕，仍然无法获得妊娠，医学上称之为“反复体外受精联合胚胎移植技术（IVF）失败”。
“反复体外受精联合胚胎移植技术失败”，是辅助生殖技术领域最突出的难题之一，包括因卵巢反應不良导致的治疗周期取消：因为卵巢低反应导致的治疗周期取消：取到了卵子但是受精失败，导致无胚胎可用的治疗周期取消：有胚胎，反复移植但是种植失败：怀孕了却反复发生流产……不同阶段的体外受精联合胚胎移植失败，有不同应对措施。
本文仅谈反复种植失败问题。
反复种植失败属于“反复体外受精联合胚胎移植技术失败”的一种。
目前其定义并无统一标准，过去认为重复IVF治疗超过3个移植周期：或者累计移植10个以上高评分胚胎未能怀孕者，即为反复种植失败。
近年来随着胚胎培养技术的提高和囊胚培养及单胚胎移植的普及，过去的标准显然已不再适用。
目前认为累计移植4-6枚高评分胚胎，或2-3枚囊胚仍然不能怀孕者，即可诊断为“反复种植失败”。
反复种植失败可能的原因主要有胚胎的发育潜能差，也就是说，这个种子（胚胎）很难发芽或者是长大：子宫内膜接受性下降或者胚胎和子宫内膜间“对话”出现异常，这样说比较绕口，通俗地说，这块孕育生命的土地出了问题。
但具体到某个患者，到底是什么原因？医生们往往难以判断，患者们更是既困惑又痛苦。
应该从哪些方面来考虑和处理这个棘手的问题呢？一般认为可以从以下几个方面着手。
胚胎因素1.胚胎形态学评分：目前广泛使用的胚胎质量评价标准，虽然方便实用，但并不能真正全面反映胚胎的质量和其种植的能力。
多次移植高评分卵裂期胚胎仍未能妊娠者，可以通过囊胚培养来进一步筛选胚胎（当然，囊胚培养的利弊不是一两句话能说得清是的，需要与生殖医生做深度的沟通再做决定）。
自然杀伤细胞与体外受精-胚胎移植反复种植失败
辅 助生 殖过 程 中 ， 常会发 现 许 多患 者 有优 质 经 的胚 胎 ， 内膜 形 态 正 常 ， 是 多 次 移植 胚 胎 无 法 着 但 床 ， 是反 复 的早期 流 产 ， 原 因 可能 与免 疫 有关 。 或 其 免 疫 学 研 究认 为 ， 娠 是一 种 同种 移 植 现象 ， 产 妊 流 是 移 植 排 斥 的结 果 ， 正 常 妊娠 过 程 中 ， 在 胚胎 作 为 维普资讯．１８ ６．
国际 健康 计划 生殖 ／ 生育杂 ０８ 月第２ 堂 塑 志２０年５ ７ 笙
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自然杀伤细胞 与体 外受精． 胚胎移植反复种植 失败
安 徽 医科 大学第一 附属 医院 生殖 中心 （３ ０ ２ 王 晶综述 丛 ２０３ ）
血 中主要 Ｃ ５ ￣。Ｌ ｋ ｓｅ Ｅ发现 了一类 特殊 的 Ｄ６ ｕ ａｓｎ等 １ ］
Ｎ Ｋ细 胞 亚群 Ｃ ５ ￣ Ｄ６ ， Ｃ ５￣ Ｎ 与 Ｄ６ Ｋ细胞 相 比 ，
绝大 部分 Ｃ ５ ￣ Ｄ６
Ｎ Ｋ细胞表 达 Ｃ ５ ａ Ｃ ５ ｂ Ｄ１８ ， Ｄ１８ ，
ＩＴ Ｌ ２和 Ｎ Ｇ Ａ。 Ｋ ２ 每一个 Ｎ Ｋ细胞 和 Ｎ Ｋ细胞 亚群根
据其功 能 ， 达唯一 的 Ｎ 表 Ｋ细胞受 体复合体 。 子宫 自 然杀伤 （Ｎ 细 胞位 于功 能层 与子 宫 内膜腺 体和腺 ｕ Ｋ） 腔上皮 相邻 。 膜 Ｎ 蜕 Ｋ细胞有 ２ ８个 基 因， 是 与外 ７ 这 周血 Ｎ Ｋ细胞相 比其独有 的特 征 ，可能 是进 人子 宫 的Ｎ Ｋ细 胞某些 基 因上调 ，或是蜕 膜化 和滋 养层 细
种半 同体组 织抗 原 却不 受母 体 排斥 而 存 活 ， 与 这
反复着床失败的中西医病因及治疗思路
世界最新医学信息文摘 2018年第18卷第51期 91·综述·0 引言体外受精—胚胎移植是治疗不孕病及反复妊娠失败的一项重要辅助生殖技术，但胚胎反复着床失败是制约其发展的一个瓶颈，在自然受孕条件下，胚胎的着床率约为30%，而IVF-ET胚胎着床率仅为10%-15%，胚胎质量、子宫内膜容受性及免疫因素是影响其着床的最关键因素，目前关于RIF尚无确切的诊断标准，2005年欧洲着床前遗传诊断学诊断协会将RIF定义为：经历>3次或多次移植或移植胚胎数>10枚仍未获得临床妊娠[1]。
一些学者提出了不同意见，Rinehart把RIF定义为：移植≧8个8细胞胚胎或≧5个囊胚而在HCG注射后12-14天测HCG未上升[2]。
目前被国内大多数学者认同的RIF定义为:移植优质胚胎3次且排除卵巢早衰而未妊娠。
中医病名中并未见记载相关病名，根据其症状可归属于 “无 子”、“断绪”、“胎元不固”等范畴。
有些医家认为根据其病因病机的特殊性可归属于“滑胎”，许多医家从不同角度分析反复种植失败的相关因素及治疗思路，在提高临床妊娠率方面取得了显著的成果。
1 西医病因1.1 种子是关键很多早起的自然流产，其实是自然界的一种优胜劣汰，但研究表明部分夫妇染色体或者是胚胎染色体确实存在异常。
高质量胚胎是移植成功与否的关键因素，染色体异常，基因异常以及胚胎发育异常均可能影响胚胎质量。
胚胎质量的评估显得尤为重要，胚胎质量的评估目前主要采用胚胎形态学评分。
1.2 土壤是基础宫腔是胚胎着床的环境，胚胎的顺利着床需要发育成熟的与之相适应的子宫内膜及良好的宫腔环境。
一些学者认为IVF-ET失败的原因，约2/3归因于子宫内膜容受性，当出现子宫异常，如宫腔粘连、子宫内膜息肉、子宫内膜下肌瘤、子宫内膜炎等引起的内膜损伤等各种病变时，均会影响子宫内膜容受性，从而引起着床失败。
1.3 免疫因素是中介因胚胎携带父系抗原，所以胚胎植入是一种复杂的半同种一直物的植入过程，一旦这种免疫平衡遭到破坏，将导致反复种植失败，妊娠是作为一种半同种移植过程，在该过程中胚胎能不被母体免疫系统排斥是妊娠能够建立的前提。
试管婴儿为啥反复种植失败
试管婴儿为啥反复种植失败作者：罗勤来源：《家庭医学·下半月》2020年第10期随着试管婴儿技术的日益成熟，成功率逐年提高，每个移植周期的临床妊娠率已经超过50%，预后良好的患者（年轻、卵巢功能正常的第一次接受试管婴儿治疗者）甚至可以达到70%～80%。
但仍有部分患者在经历三次甚至更多次的试管婴儿助孕，仍然无法获得妊娠，医学上称之为“反复体外受精联合胚胎移植技术（IVF）失败”。
“反复体外受精联合胚胎移植技术失败”是辅助生殖技术领域最为突出的难题之一，包括因卵巢反应不良导致的治疗周期取消;因为卵巢低反应导致的治疗周期取消;取到了卵子但是受精失败，导致无胚胎可用的治疗周期取消;有胚胎，反复移植但是种植失败;怀孕了却反复发生流产……不同阶段的体外受精联合胚胎移植失败，有不同应对措施。
本文只谈谈反复种植失败的问题。
目前对反复种植失败的定义并无统一标准。
过去认为重复IVF治疗超过 3个移植周期;或者累计移植10个以上高评分胚胎未能怀孕者，即为反复种植失败。
近年来随着胚胎培养技术的提高和囊胚培养及单胚胎移植的普及，过去的标准显然已不再适用。
目前认为累计移植4～6枚高评分胚胎，或2～3枚囊胚仍然不能怀孕者，即可诊断为反复种植失败。
反复种植失败可能的原因有兩个方面。
一是胚胎的发育潜能差，也就是说，这个种子（胚胎）很难发芽或者是长大;另外，子宫内膜接受性下降，或者胚胎和子宫内膜间“对话”出现异常，也会导致反复种植失败。
通俗地说，前者是“种子”的问题，后者是孕育生命的“土地”出了问题。
但具体到某个患者，到底是什么原因？医生们往往难以准确判断，患者更是既困惑又痛苦。
应该从哪些方面来考虑和处理这个棘手的问题呢？胚胎因素首先应当排除的是“种子”的问题。
一般来说，可以从以下几个方面予以排查。
1.胚胎形态学评分。
最广泛使用的胚胎质量评价标准，虽然方便实用，但并不能真正全面反映胚胎的质量和其种植的能力。
多次移植高评分卵裂期胚胎仍未能妊娠者，可以通过囊胚培养来进一步筛选胚胎（当然，囊胚培养的利弊不是一两句话能说得清是的，需要与生殖医生做深度的沟通再做决定）。
子宫内膜容受性分析拯救反复种植失败
子宫内膜容受性分析拯救反复种植失败正当对试管婴儿反复种植失败患者一筹莫展之时，西班牙一项基于基因组学大数据分析的子宫内膜容受性的新型评估方法，给我们带来惊喜。
该技术通过移植前子宫内膜转录组基因检测，生物信息学分析，判断精准的着床时间，选择移植的最佳时机，明显改善反复种植失败种植率。
子宫内膜容受性分析拯救反复种植失败人类的精卵结合发生之后的30小时左右，受精卵即随着输卵管蠕动和输卵管上皮纤毛的推动，向着子宫方向移动。
晚期胚胎植入子宫内膜的过程我们称之为受精卵着床（implantation）。
着床成功是妊娠过程的开始。
长久以来，我们都将受精卵作为着床舞台中的“明星”，而将子宫内膜作为“配角”。
往往只能通过子宫内膜的厚度评估着床的机会，而无法真正知道子宫内膜接受胚胎植入的能力——即子宫内膜容受性。
每个月经周期中，子宫内膜只有在特殊的时期才具备对胚胎的接受能力，并且受到多种因素的调节，如卵巢性激素、子宫内膜局部分子、胚胎以及分泌的胚胎性因子等。
以一个正常月经周期（28日）为例，子宫内膜通常在排卵之后6天开始，月经周期的20~24天，允许胚胎的植入，而这几天被称之为子宫内膜容受窗（WOI）。
1950年Noyes, Hertig和Rock三位病理学家创立了子宫内膜的组织学标准，通过对不同时相内膜的组织学特征，将子宫内膜分为增生期和分泌期。
这种标准被沿用至今。
但在进行试管婴儿等不孕不育治疗中，并非每个病人的子宫内膜都是按时间标准生长，每个病人的月经周期中也不可能依靠内膜组织学标准预测个体化的WOI，那么如何通过技术手段提高子宫内膜容受性判断的精准度呢？1超声评估：▪子宫内膜厚度：hCG日测量<8mm时，妊娠率降低▪子宫内膜类型：阴道B超提示为典型的三线型子宫内膜适合着床▪子宫内膜血流指数：搏动指数（PI）<2的时候，容受性最佳2形态特征法：通过电子显微镜观察内膜的胞饮突，但这是有创的检查，个体差异极大，电子显微镜检测的操作性也较低。
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广"#$ 2019年9月第41卷第
17
期
2239
综述反复种植失败的母体因素及治疗策略
的研究进展
邹志玲1陈雪梅
1邓智心
2冯珀霖
1
(1广东省东莞市第三人
民
医院
，东莞市
523326，电子邮箱：
980582033@qq.com；
2广东医科大学研究生学院,
湛江市
524023)
【提要】
反复种植失败的病因多而复杂，目前达成共识的病因分为母体因素和胚胎因素两个方面
。本文
就反复种植失败的母体病理因素及治疗策略的研究进展进行综述，
以期改善反复种植失败者的妊娠结局
%
【关键词】
反复种植失败;母体因素；治疗策略；综述
【中图分类号】R714 【文献标识码】A 【文章编号】0253氮304(2019
)17-2239-04
DOI：10.11675/j- Rsn.0253-4304.2019.17.25
体外受精-胚胎移植(
6i vitro fertilization-embos
transplantation, IVF-3T )
及其衍生技术现已成为不孕患
者的常用治疗手段，但目前临床妊娠率仍存在难以突 破的瓶颈，其中反复种植失败
(
repeated implantation
failure, RIP)
是影响临床妊娠结局的主要原因之一
&
反复种植失败目前较为认同的定义是,40岁以下的
不孕患者，至少经历3次新鲜或冻融胚胎移植周期且
累计至少移植了 4个优质胚胎而未能获得临床妊娠
者'1(&明确
RIF病因并找出相关对策已成为生殖医
学研究的热点和难点。RIP的发病机制尚不明确，目
前认为导致RIP的病因主要分为母体因素和胚胎因
素两个方面。近年来，随着单细胞组学技术的发展, 胚胎因素的研究取得了较大进展。但我们发现,在临
床实践中,即使移植了优质胚胎,
仍无法改善
RIP患
者的妊娠结局。因此,
RIP者母体的病理因素及相关
治疗措施的研究是改善妊娠结局的关键。
本文就
RIP的母体因素及治疗策略的研究进展进行综述。
1 RIP
的
母体因素
1.1解剖结构异常 临床研究发现，部分
RIP患者
存在生殖系统解剖结构异常。先天性解剖结构异常
主要包括单角子宫、残角子宫、双子宫、双角子宫、鞍
状子宫及纵隔子宫。
双子宫
、
鞍状子宫可能与不孕关
系并不密切，但双角子宫、单角子宫、
残角子宫以及纵
隔子宫可影响妊娠[2] &后天获得性解剖结构异常主
要包括子宫内膜息肉、子宫黏膜下肌瘤、子宫内膜炎、 宫腔粘连、子宫腺肌瘤、子宫内膜增生和输卵管积水
等&有学者对334例无临床症状的
RIP患者进行宫
腔镜检查，发现
37.1%的患者存在解剖结构异常，
其
中子宫内膜息肉64例,子宫内膜增生
20例,宫腔粘
连15例，子宫纵隔6例
，黏膜下肌瘤
1例[3] &此外,
输卵管积水返流至子宫可能冲走未植入的胚胎，亦可
能诱导生长因子、炎性细胞因子、血管活性因子等的
异常分泌,影响胚胎着床,从而导致妊娠失败&1-2薄型子宫内膜 适宜的子宫内膜厚度(8~14mm) 是胚胎种植于宫腔内的必备条件⑷&辅助生殖技术
(assisted reproductive technology, ART )
过程,在人绒毛
膜促性腺激素(
human chowonic gonadotropin, HCG)日
或给予黄体支持当天,B超下子宫内膜厚度
＜7 mm被
认为是薄型子宫内膜[5] & 一项
Meta分析对
22个临
床研究(共10 724个PF氮T周期)进行分析发现,
HCG 日 日 子 厚 薄( ＜7 mm) 的 者
胎种植率和临床妊娠率均低于子宫内膜厚度＞7 mm的
患者⑷&
1.3子宫收
缩过频 ART过程中
，不当的胚胎转移
操作及超生理剂量的雌激素使用可引发频繁的子宫 收缩，影响子宫内膜运动波形及频率,不仅可能将移
植的胚胎排出宫腔，还可使子宫内膜血流灌注减少,
从而导致胚胎着床失败&并且,随着子宫收缩频率的
增加，胚胎种植率、
临床妊娠率及累积妊娠率均呈下
降趋势[
7] &
1.4 血栓前状态 与正常育龄妇女相比，
RIP患者
血栓前状态(pre-thrombotic stair
, PTS )检出率更
高⑷& PTS患者胎盘血管微血栓形成可引起绒毛间
隙血液灌注不足，胚胎汲取营养和氧气受阻
，从而引
起胚胎种植失败&有研究发现,RIP患者
PF-T治
疗期间血清抗凝血酶皿活性下降，血清
D二聚体水
平及血小板聚集率升高，由此推测患者
PTS与胚胎
作者简介:邹志玲(1990 ~
),女，硕士研究生，住院医师，研究方向:妇科与生殖内分泌&
通信作者：陈雪梅(1969〜)，女，本科，主任医师，研究方向：生殖内分泌，电子邮箱：
2391090774@ qq. com,2240Guangit Medical Journal, Sep. 2019 , LZ. 41 ,No. 17RIP的发生有关⑼
&
1.5子宫内膜容受应答性低 子宫内膜容受性是指
子宫内膜对胚胎的接受能力& 一项多中心回顾性研 究采用子宫内膜容受性基因表达谱芯片对50例RIP 患者的子宫内膜进行分析，结果显示有12例患者的 子宫内膜处于低容受性状态［10］
&子宫内膜容受性建
立的机制极其复杂,排卵前足够的雌激素刺激和排卵
后孕激素对内膜的持续影响是子宫内膜容受性建立 的必要条件&此外,子宫内膜容受性还依赖于子宫内 膜和胚胎分泌的细胞因子、黏附分子等对其进行调
节&参与调节子宫内膜功能的细胞因子主要有白血 病抑制因子、
白细胞介素
(interleukin, IP )
-6和
IP-1
等，它们通过与细胞表面受体结合
，
在母体-胚胎间
起到信号转导的作用&整合素和选择素等在子宫内 膜上的表达有高度的时间和组织特异性，可以调节子
宫内膜的结构和黏附能力&这些细胞因子和黏附分 子如果比例失调会导致子宫内膜容受性降低,从而引 起胚胎着床失败［11］ &
1.6母胎界面同种免疫异常胚胎种植是一种半同
种异体移植,种植过程中胚胎与母体周围血及子宫内
膜中免疫细胞直接接触,胚胎不被母体免疫系统排斥 是妊娠能够建立的前提&母体周围血及子宫内膜中 免疫细胞主要包括自然杀伤细胞(natural 21x1 ,
NK)、巨噬细胞、T细胞和树突状细胞"
dendatic cell
,
DC)，
它们在种植窗期汇集，
共同为胚胎着床提供有
利的内分泌-免疫微环境
&大量的临床研究显示NK
细胞、
T细胞与
RIP相关&
NK
细胞不同亚群对胚胎
的作用不同,CD56唤hCD16 -细胞亚群对胚胎起免疫
防护和营养作用,CD56dim CD16
+细胞亚群对胚胎起
免疫杀伤和排斥作用［
12］
&还有研究显示,RIP患者
外周血NK细胞含量明显增加，
外周血呈活化状态,
细胞毒性增加［13］，且同为RIP患者，未孕女性外周血 及子宫内膜中活化CD56dimCD16+ NK细胞水平比妊
娠女性更高［14］ & NK细胞诱导免疫逃逸机制,T淋巴
细胞参与母体妊娠免疫耐受形成& T淋巴细胞
亚群 CD4
+/CD8 +、辅助性 T 细胞"T cell,Th)
1/Th2 及 Th17/调节性 T 细胞(1^口000叮 T celi,Treg)
在免疫应答过程中呈现动态平衡，当这种平衡被打 破,将引起免疫耐受失调，导致
RIF&研究显示RIP
患者外周血或子宫内膜表现为CD8
rT
细胞升高
，
Th1/Th2平衡偏向Thl
型的促炎反应,Th17/Treg平
衡向发挥免疫负向调节作用的Th17倾斜［
15-17
］o巨
噬细胞、DC细胞与RIP的相关性报道较少，有待更多
临床研究者关注。
1-7 子宫内膜种植窗偏移子宫内膜具有容受 性,种植窗是允许胚胎种植的最佳时间,
一般认为该
时间为正常月经周期的22 ~24 d,或促黄体生成素 (luteinizing hormona,LH)高峰形成后 7 d( LH +
7
d
)
或添加黄体酮(progesterona,P)第5天(P +5 d
)。传
统观点认为种植窗持续时间为3 ~5
d
,目前研究提示
种植窗可能仅有12 h~2
d
&且并非所有患者的种植
窗时间都相同,统一的胚胎移植时间可能导致子宫内
膜与胚胎发育不同步，从而引发RIF&
研究显示70%
的患者种植窗在LH+7d或P +5 d
,另30%患者种
植窗可能在LH+5 ~9 d或
P
+3 ~7
d
,表现为种植窗
时间偏移(提前、推后或缩短)，最终导致
RP的发
生［18］ &
2 RIF
母体因素的治疗策略
2.1纠正异常的解剖结构 临床研究显示宫腔镜检
查可提高RP患者再次胚胎移植的临床妊娠率，建议
将宫腔镜检查作为RP患者的常规检查'⑻&宫腔镜
检查可发现子宫内膜息肉、子宫内膜增生
、
黏膜下肌
瘤、子宫中隔、宫腔粘连等宫腔结构异常，
同时可在宫
腔镜下对上述病变予以对应处理，提高子宫内膜的容
受性，最终改善胚胎移植的临床结局&此外,输卵管
积液手术治疗后可提高患者的妊娠率,但术中要注意
保护卵巢功能&2.2增加薄型子宫内膜厚度 临床上常用大剂量雌 激素辅以改善局部微循环的药物来增加薄型子宫内 膜厚度&有研究显示在控制性超促排卵周期中应用
戊酸雌二醇后，子宫内膜厚度由(6.7 ±0.9 ) mm增至
(8.6 ±0.7 ) mm,同时妊娠率也增加［19］ &
一项前瞻性
研究显示，在枸椽酸氯米芬周期中，
从
月经第1天开
始应用低剂量阿司匹林(100 mg)的患者，其子宫
内膜形态呈明显三线征，且具有较高的妊娠率［20］
&
此外，枸椽酸西地那非、
颗粒细胞集落刺激因子
(granulxcyia colony-stimulating factOT, G氮SF )、维生
素E、
生长激素等均可增加子宫内膜厚度
，但治疗效
果不一，争议较大，应用前需结合具体临床情况考虑&
2.3抑制子宫收缩频率目前抑制子宫收缩的药物 主要有0受体阻滞剂、非笛体消炎药、毗罗昔康、阿托
西班等&其中,阿托西班是缩宫素受体拮抗剂,
能够有
效抑制子宫收缩,改善子宫的血液供给&
Moraloglu
等［21］的研究显示，阿托西班可以抑制子宫收缩频率,
提高胚胎种植率及妊娠率&另一项Meta
分析结果也
显示在胚胎移植日使用阿托西班有助于提高胚胎着 床率及临床妊娠率［22］
&