海洋放线菌F-1013对几丁质的利用及其发酵液的优化
微生物制药复习题(1)
微生物制药一、名词解释1、微生物药物：微生物在生命活动过程中产生的具有生理活性（或药理活性）的次级代谢产物及其衍生物。
2、全化学合成法（化学合成法）：当某些微生物药物的化学结构已经明确且结构简单时，采用全化学的方法进行合成，制取微生物药物。
世界上第一个全化学合成的微生物药物--氯霉素。
3、生物合成法（微生物发酵法）：特定的微生物在一定的条件下生长繁殖，并在代谢过程中产生微生物药物。
利用微生物药物的特定理化性质，提取和精制发酵液中的微生物药物。
4、半化学合成法（半合成法）：利用化学方法改进生物合成的微生物药物，获得性能更优良的微生物药物。
5、富集培养：在目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适环境下快速生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变为人工环境下的优势种。
6抗生素：微生物产生的次级代谢产物，具有抑制它种微生物的生命活动甚至杀死它种微生物的作用。
7原生质体融合：用脱壁酶处理将微生物的细胞壁除去，制成原生质体，然后在高渗溶液的条件下采用物理，化学或生物的助溶条件，促进原生质体的融合，从而获得异核体或重组子技术。
8半合成药物：对本身是天然药物的结构进行修改而生成的新药就是半合成药物。
9前体：微生物从外界吸收或在代谢途径中形成，可被进一步转变为最终产物的化合物。
10初级代谢：具有明确的生理功能，对维持生命活动不可缺少的物质代谢过程11次级代谢：微生物在一定的生长时期（稳定生长期），以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动没有明确功能的物质的过程。
12生源说：次级代谢产物分子中构建单位的各种原子的起源。
（构建单位=前体）13次级代谢产物的生物合成：各种构建单位在多种酶的作用下合成次级代谢产物的过程。
14致死温度：杀死微生物的极限温度。
15致死时间：在致死温度杀死全部微生物的所用时间。
16热死时间：在规定温度下杀死一定比例的微生物菌体所用时间。
微生物考试试题及答案知识分享
微生物考试试题及答案◆一 1、溶菌酶作用机理是（ A ）A.切断肽聚糖中的β-1，4糖苷键；B.竞争合成壁过程中所需肽聚糖；C.干扰蛋白质的合成；D.破坏细胞壁的透性。
2、青霉菌的主要形态特征是（ D）A.菌丝无隔，产孢囊孢子；B.菌丝有隔，产孢囊孢子；C.菌丝无隔，产分生孢子；D.菌丝有隔，产分生孢子。
3、在筛选抗青霉素菌株时，须在培养基中加入青霉素，其作用是（ A ）A.筛选；B.诱变；C.既筛选又诱变；D.以上答案都不对。
6、用抗生素法淘汰野生型时，应在液体的（ A ）培养基中进行。
A.高渗基本B.低渗基本C.高渗完全D.低渗完全7、可造成移码突变的诱变剂是（ D ）A.NTGB.UVC.DESD.吖叮类8、在EMB鉴别培养基上，在反射光下大肠杆菌的菌落呈现的颜色为（C ）A.棕色；B.粉红色；C.绿色并带金属光泽；D.无色。
9、从土壤中采集分离筛选菌种时，应采用距地表（ B ）的土壤。
A.0~5厘米B.5~20厘米C.20~30厘米D.30~40厘米◆二 2、世界上第一次看到微生物形态的是下列那位（ B ）A.Antoni Van Leeunenhoek；B.Robert Hook；C.Robert Koch；D.Louis Pasteur3、常用来培养霉菌的合成培养基是（ A ）A.察氏培养基；B.营养肉汤培养基；C.伊红美兰培养基；D.高氏1号培养基。
4、根瘤菌能有效的保护固氮酶，是因为类菌体周膜上含有（ A ）A.豆血红蛋白；B.SOD；C.过氧化物酶；D.Fe-S蛋白Ⅱ5、在诱变育种中诱变的作用是（ D ）。
A.引起定向突变B.汰弱留强C.提高目的物产量D.增加选择机会6、以下那种孢子为有性孢子（ B ）。
A.孢子囊孢子B.子囊孢子C.分生孢子D.厚垣孢子时，用酵母菌发酵可得 7、以葡萄糖为原料，在培养基中加入3%的NaHSO3到（ C ）产物。
A.酒精B.柠檬酸C.甘油D.草酸8、通过缺陷性噬菌体为媒介，把供体菌的DNA片段携带到受体菌中，从而使后者获得前者的部分遗传形状的现象为（ A ）。
川农环境微生物学期末复习题及答案
川农环境微生物学期末复习题及答案环境微生物学复习题一、名词解释1、发酵作用—是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。
2、农药安全系数—3、硝化作用-氨基酸脱下的氨，在有氧的条件下，经亚硝化细菌和硝化细菌的作用转化为硝酸4、转导—通过吻合噬菌体的媒介作用，将供体细胞内特定的基因（DNA片段）携带至受体细胞中，从而使受体细胞获得供体细胞的部分遗传性状的现象。
5、培养基—根据各种微生物对营养的需要，包括水、碳源、能源、氮源、无机盐及生长因子等按一定的比例配置而成的，用以培养微生物的基质6、好氧活性污泥—是由多种多样的好氧微生物和兼性厌氧微生物（兼有少量的厌氧微生物）与污（废）水中有机和无机固体物质混凝交织在一起，形成的絮状体或称绒粒。
7、质粒-原核生物细胞中，一种独立于染色体外，能进行自主复制的环状DNA分子。
8、P/H指数—P代表光能自养型微生物，H代表异氧性微生物，两者的比值即P/H指数，该指数反映水体污染和自净程度。
9、活性污泥与菌胶团-是一种绒絮状小泥粒，由好氧菌为主体的微型生物群以及胶体、悬浮物等组成的微生物集团。
颗粒大小约为0.02-0.2mm，表面积为20-100cm2/ml，相对密度约为1.002-1.006。
外观呈黄褐色，有时亦呈深灰、灰褐、灰白等色。
静置时，能凝聚成较大的绒粒而沉降。
它具有很强的吸附及分解有机物的能力。
菌胶团—好氧活性污泥（绒粒）的结构和功能的中心是能起絮凝作用的细菌形成的细菌团块。
10、反硝化作用-兼性厌氧的硝酸盐还原细菌将硝酸盐还原为氮气。
11、转化—受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段，并把它整合到自己的基因组里，从而获得供体细胞部分遗传性状的现象。
12、化能自养微生物—生长需要无机物，在氧化无机物的过程中获取能源，同时，无机物有作为电子供体，使CO2还原为自身有机碳化物。
二、选择题1、根据其在水中的存在及数量情况，B、大肠杆菌可作为粪便污染的指示菌。
微生物几丁质酶的研究进展
酶条件 、 基因克隆与表达等相关研究 日渐增多， 其应用也逐 步扩大。 为此 ， 笔者综述了微生物几丁质酶的研究及其应用
ＷＡ Ｇ Ｗｅ ｘ （ ｅ ａ ｒ ｅ ｉ ｅ ｈ ｏ ｇ Ｊ ｎ ｓ ｒｖ ｃ， ｏ ｅ ｅ ａｉ ｕ ｉａ Ｉ ｔｕ Ｔ ｃ ｎ ｌ ｙ Ｌａ ｙ ｇｎ ， Ｎ ｉ ｉ ｅ ａ Ｋ ｙ ｂ Ｍａ ｎ ｍ ｅ ｎ ｌ ｙ ｉ ｇｕ ｏｉ ｅ Ｃ ｌ ｇ Ｍ ｒ ｅ ａ ｉｎ ｉ ｔ ｏ ｅ ｈ ｏ ｇ ， ｉ ｔ ａ ｇ －ａ ｔｌ Ｌ ｏ ｆ ｉ Ｂ ｏ ｏ ａ ｆ Ｐ ｎ ｌ ｏ ｆ ｎ Ｈ ｈ ｓｔ ｅ ｆ ｏ ｎ ｍ Ｊ ｎｓ ２０ ） ｉ ｇｕ ２０５ ａ ２
范围较大， 最适温度多在 ４ ．０ 温度较高或较低时 ， ０ ６ ℃， ． ． 酶活
力都较低 。 如嗜几丁质类芽孢杆菌（ ｎｂｃ ｌ ｉｎｌ ｉ ｓ ｉ ｉｕｃ ｔ ｏ ｔｕ） ａ ｌ ｓｈ ，０℃时酶活 Ｈ １ ０ １ 力只有最高酶活力 的 １ ０％，０℃时酶活力只有最高酶潘 ７
几丁 质 （ｈ ｉ） Ｎ 乙酰 书－ ｃｉｎ是 一 ｔ Ｄ 氨基 葡萄 糖 通 过 Ｂ １４ ．，． 糖 苷 键连 接起来 的直 链 多聚 物 ，是 自然界 中最丰 富 的天 然
等电点 ｐ 为 ３ ～ ． 许多金属离子对微生物几丁质酶活力 ｌ ．８。 ６ ６ 具有不同程度的影响。如 ｕ 、撙 正一价金属离子对 Ｂ 几 ＋ Ｎ ｔ 丁质酶没有影响 ； ｇ Ｂ 几丁质酶有激活作用 ， Ｍ埘 ｔ 其浓度低 于 ２ ｍ］ ｏＬ可使酶活力提高 ３ ％；ｅ Ｂ 几丁质酶有一 ｍ ／ ３ Ｆ 埘 ｔ 定的抑制作用 ， 在浓度 １ ｍ ｌ ２ ｏＬ时可使酶活下降 ５． １ ｍ ／ ４ ４ ６ ］ ｏ
海洋微生物
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• Aharon Oren 是以色列耶路撒冷大学教授， 是国际著名的海洋生物和嗜盐微生物研究专 家 。是FEMS Microbiology Letters 的主编 和ISJEM的编委。
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2. 泉生古菌门Crenarchaeota
最初发现于陆地温泉，海底热液喷口，但最近发现，海洋中到处都有 泉古菌成员存在，包括南极海水、海冰、深海水体，化能自养或化能异 养。
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2、种类： 具有形态多样性和遗传多样性。
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3、分布： 在海洋中的分布规律为： （1）水平分布为近岸密度高，远岸密度底；
垂直分布为随海水深度增加逐渐减少，在接 近海底的水层中密度又增大。 （2）海洋病毒在海水中的含量呈动态变化 （3）海洋病毒在海水中的密度高达106～109 个/ml海水。 （4）海洋病毒是海洋中丰度最高的生物群体， 总量是海洋细菌的5-25倍。
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海洋中所有的细菌门
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2. 新陈代谢类型
自养细菌：光能自养，化能自养 根据所需营养物质的性质
异养细菌：海洋细菌的最大类群
好氧细菌 根据对氧气的需要 兼性厌氧细菌
厌氧细菌
大多数海洋细菌是兼性厌氧细菌，专性好氧细菌和专性厌 氧细菌都比较少见。
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3 特性
（1）嗜盐性
（2）适冷性
（3）适压性 （4）低营养性
（5）趋化性与附着生长： 大多数海洋细菌具有运动能力
运动方式 ：swimming, swarming （6）发光性：少数海洋细菌具有发光特性
发光杆菌属（Photobacterium) 射光杆菌属（Lucibacterium)
环境微生物学2-3放线菌
图 2-33 钩端螺旋体
5
在废水活性污泥法处理中，出现过由诺卡氏菌属的某些种引 起的活性污泥丝状膨胀和起泡沫现象。
一、放线菌的个体形态、大小和结构
放线菌的菌体由纤细的、长短不一的菌丝组成，菌 丝分枝，为单细胞，在菌丝生长过程中，核物质不断复 制分裂，不形成横隔膜，也不分裂，无数分枝的菌丝组 成很细密的菌丝体。
一、放线菌的个体形态、大小和结构
三、放线菌的繁殖
放线菌的生活史包括孢子的萌发，菌丝的生长、发育及繁 殖等过程（图 2－28）。
放线菌是通过分生孢子或孢囊孢子繁殖，也可以一段营养 菌丝繁殖。
各种放线菌的菌落形态特征
链霉菌的生活史
图 2－28 链霉菌的生活史 A.孢子萌发 B.基内菌丝 C.气生菌丝
D.孢子丝 E.孢子丝分化为孢子
分布：在土壤、污水、垃圾、昆虫、脊椎动物及人体中。
三、衣原体
衣原体隶属于衣原体门（BXⅥ门）衣原体目衣原体科的 衣原体属（Chlamydia）见图 2-32。呈球形，直径0.2～ 1.5μm。为革兰氏染色阴性反应，细胞化学组分和结构与 革兰氏染色阴性细菌相似，其细胞壁为含胞壁酸的外膜， 含RNA和 DNA。
72～73
好氧
菌 丝 常 平 行 排 列 ， 彩 色 ， ⅡD 型 细 胞 壁 ， 在土壤和植物腐败物中生活，营养菌丝 发达，菌丝呈各种颜色，产生各种色素， 没有气生菌丝或不发达，在营养菌丝上 长出孢囊柄，在其尖端长孢子囊
直 径 0.5 ～ 2.0 ， 营养菌丝分枝无 气生菌丝体；形 成多腔孢囊
66～71
菌丝体分三类：
① 营养(基内)菌丝：摄取培养基内营养，菌丝宽度为 0.2μm～0.80μm，长度为50μm～600μm之间，有无色的、 有的产色素 (黄、橙、红、紫、蓝、绿、褐、黑)。
放线菌对植物病害的防治作用及应用
放线菌对植物病害的防治作用及应用贾雨;贾丽苑;黄建新【摘要】Actinomycetes are one of the most important bio - control micro - organisms which produce antibiotics and enzymes and are advantageous in the bio - control of plant diseases. This study addresses the bio - control of actinomycetes against plant diseases in terms of actinomycetes＇ action on phytopathogen and on the plants＇ disease resistance under the soil environ- ment. The paper also gives a brief introduction to the applications of actinomycetes in the bio - control of plant diseases, research hotspot and development trend.%放线菌是产生抗生素和酶的重要微生物资源之一，在防治植物病害中有很多优势．主要从放线菌与植物病原菌的作用和土壤环境中的放线菌对植物的抗病作用两方面，介绍了放线菌对植物病害的防治作用；简述目前放线菌在植病生防中的应用状况；以及研究热点和发展趋势．【期刊名称】《西安文理学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(015)003【总页数】5页(P6-10)【关键词】放线菌;植物病害;生防作用【作者】贾雨;贾丽苑;黄建新【作者单位】西北大学生命科学学院,西安710069;西北大学生命科学学院,西安710069;西北大学生命科学学院,西安710069【正文语种】中文【中图分类】Q939.13由于化学农药危害环境，而且其高毒性容易对人体造成伤害，开发新型生物农药成为人们关注的焦点.放线菌作为微生物源农药之一，在生物防治中具有很多优势.放线菌分布范围广、种类多，自从Cohn (1872)发现放线菌至今，已经报道的放线菌有69个属1687种;很多放线菌可产生多种抗生素和酶，在微生物产生的新生物活性物质中，放线菌产生的就占到了74%［1］;有些放线菌还可寄生于植物病原菌中;此外，在自然环境中放线菌可通过产生植物激素和植物生长抑制剂，调整土壤的微生态环境，对提高植物抗性和抑制土传植物病菌具有重要作用.因而，放线菌制剂成为替代化学农药的主要资源，广泛用于农业生产中.1 放线菌对植物病原菌的作用植物体的侵染性病害主要由细菌、真菌和病毒引发，放线菌对于这些病害具有十分明显的防治作用.其主要作用概括如下:1.1 抗生作用放线菌是产生抗生素的主要微生物来源.放线菌的抗生作用体现在次级代谢产物即抗生素对病原菌直接的抑制和致死作用.抗生素对病原菌细胞和大分子物质合成的影响表现在抑制蛋白质、核酸和质膜的合成，或者干扰病原菌的代谢系统，从而抑制其生长.对于抗生素作用于蛋白质合成系统的研究较多，如研究较早的放线菌酮和氯霉素，后来发现的中生菌素可抑制DL－［4，5－3H］亮氨酸掺入蛋白质［2］.有些抗生素如TS99可作用于病原菌细胞壁或细胞膜，使得菌体细胞破裂［3］.还有抗生素如万隆霉素可以抑制呼吸链中的NADN氧化酶活性，影响病原菌呼吸代谢［4］.放线菌还可使病毒粒子凝聚钝化失去侵袭力，来实现抑制病毒侵染［5］.1.2 重寄生作用重寄生指一些寄生病原菌又被其他微生物寄生的现象，往往由水解酶介导.放线菌重寄生在病原菌营养菌丝体，能使菌丝发生形态上的畸变，菌丝体破裂.这种相互作用包括放线菌产生附着胞缠绕在病原菌菌丝体上并侵入，菌丝在真菌内的分支使真菌菌体呈粒状、细胞质凝固和菌丝溶解.游动放线菌属的游动孢子也具有重寄生能力，靠趋化作用重寄生于病原菌的休眠孢子、有生长力的菌丝体或者卵菌纲真菌的休眠合子进行繁殖［6］.抗生作用和重寄生作用相辅相成，有些抗生素破坏宿主细胞细胞壁的完整性，使得放线菌通过重寄生作用侵入病原菌细胞［6］.1.3 铁载体的竞争作用铁载体(Siderophore)是由微生物在低铁条件下生成的一类小分子量(1～2 kDa)能特异螯合F3+e的螯合因子［7］.在低铁环境下，放线菌细胞内也可以产生铁载体，既可以与其他生物争夺环境中的铁离子来杀死或抑制病原菌，又可以将抗生素主动运输到与其有竞争性的生物中.另外有些铁载体，如去铁胺［8～9］还可以促进链霉菌的生长和发育.但铁载体的竞争作用往往协同其他作用机制，不单独表现，如Macagnan［10］等分离出的放线菌产生的铁载体，协同细胞裂解酶抑制可可丛枝病菌(Moniliophthora(ex Crinipellis)perniciosa)分生孢子的萌发，单独作用效果不突出.1.4 酶及抑制剂的酶解作用高等真菌的细胞壁主要由几丁质和β－1，3－葡萄糖构成，卵菌纲真菌的细胞壁由纤维素组成.放线菌可产生多种细胞壁降解酶，使病原菌发生质壁分离或细胞破裂，细胞内含物渗出，起溶菌作用.这些酶包括β－1，3－葡聚糖酶，β－1，6－葡聚糖酶，β－葡糖苷酶，纤维素酶，几丁质酶等.有些放线菌还可产生几丁质酶抑制剂来抑制真菌细胞壁合成，如从链霉菌AB2570中分离出的guanofosfocinA(I)［11］.经几丁质酶处理后，病原真菌的芽管生长速度变慢，芽管变细，孢子萌发率也会显著降低.但高必达等［12］发现几丁质酶的抑菌作用具有选择性，只有部分放线菌菌株几丁质酶活性与抑菌作用之间存在相关性.这说明抑菌作用是许多复杂的机制共同作用的结果，需要进一步研究.2 土壤环境中放线菌对植物的抗病作用从生态学角度看，植物病害发生的原因是植物、病原菌和周围微环境组成的微生态系统失衡.因此，利用生防放线菌来调节植物与病原菌以及微环境中的生物平衡，也可以达到防治病害的目的.2.1 诱导植物产生抗性生防放线菌本身和其代谢产物都可以诱导植物体防御酶系启动，表现在多酚氧化酶(polyphenoloxidase，PPO)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase，PAL)、过氧化物酶(peroxidase，POD)等含量增加.这些酶可以参与植保素(如木质素、类黄酮等)合成途径，或者参与特定氧化反应，抵抗病原菌的侵染，它们在植物体内含量的提高是植物抗性的指标.Hemant等［13］分离出的6种链霉菌还可诱导水杨酸(一个在系统中诱导抗性的信号分子)等6种酚类物质在番茄植物中的积累，提高对立枯丝核菌(Rhizoctonia Solani)的抗病能力.2.2 促进植物生长土壤中N、P元素是植物生长的必需元素，但大量的P在土壤中以不溶的金属螯合物存在.有些生防放线菌能产生磷酸酶，增溶土壤中的P元素，更好地促进植物吸收.Hamdali等［14］发现，将小单孢菌属和链霉菌属的两株放线菌接种在含磷酸岩的培养基上，能显著增加小麦植株N、P含量，又能有效减少腐霉菌(Pythium ultimum)对小麦种子的侵害.放线菌还可通过固氮作用，产生植物激素和生长促进剂直接促进植物生长，表现在植物干重和叶绿素含量增加，根系发育增强等.Khamna等［15］从柠檬草(Cymbopogon citratus)根系土壤中分离出的链霉菌CMU－H009产吲哚－3－乙酸(IAA)的活性非常高，对玉米根系的伸长和豇豆种子的萌发都有显著的促进作用.另外，放线菌还能诱导菌根(AM)中真菌的孢子萌发［16］，有利于菌根这一真菌－植物互惠共生体生长.2.3 调节土壤微生物区系李琼芳、田苗等［17～18］分别对麦冬和西洋参的连作现象进行了研究，发现了根系微生物区系的变化.土传病害逐渐严重伴随着微生物区系的失调，表现在真菌的增长幅度大，而细菌和放线菌的比例呈下降或小幅增长趋势，细菌性土壤变为真菌性土壤，结果造成土壤理化性质改变，增加了植物病虫害的侵染程度［17］.生防放线菌在维持土壤微生物平衡和改善土壤微生物比例中起着重要作用，主要是通过拮抗土传致病真菌来实现.邸宁等［19］发现，接种放线菌G－19后，其根际细菌和放线菌数量增加，真菌数量明显减少，与正常土壤的变化趋势相似，毛桃幼苗生长良好.喻国辉等［20］还发现放线菌可以分解作物自毒作用中产生的酚酸类物质，能有效缓解连作带来的植物病害.3 放线菌在防治植物病害中的应用目前，放线菌菌剂已经用于农作物、蔬菜瓜果和药用植物的生物防治中，可以防治棉花黄萎病(cotton Verticillium wilt)、烟草黑胫病(Phytophthora parasitica)，番茄青枯病(Ralstonia solanacearum)、人参根腐病(Fusarium solani)等多种植物病害.放线菌菌剂可以用于拌种，或者施于植物根系土壤中直接与病原菌作用.具有代表性的有Kemiraoy公司生产的放线菌产品Mycostop和我国在20世纪70年代推广使用的“5406”菌剂.前者由灰绿链霉菌(Streptomyces griseovidis)的孢子和菌丝制成，主要用于防治观赏植物和温室蔬菜上的镰刀菌引起的枯萎病［21］，后者由泾阳县的土壤中分离出的细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)制成，对多种植物病原真菌和细菌都有防治作用［22］.近年来，从土壤中分离出的一些拮抗放线菌也显示出了很大的生防潜力，已经用于生防菌剂开发.例如Yuan等［23］分离出的一株利迪链霉菌WYEC108，作为菌剂拌种或施于土壤中，有效地防治了真菌病害和种子腐烂，已经申请专利.Oliveira等［24］分离的内生链霉菌R18(6)，具有广谱抗菌能力，可产生IAA和铁载体，且显示出了良好的磷酸溶解性.放线菌最突出的次级代谢产物就是农用抗生素.链霉菌(Streptomyces)作为抗生素的重要生产菌，人们已从中筛选出了井冈霉素、春雷霉素、农抗120等.国外比较著名的有1958年日本研制成功的杀稻瘟菌素－S，于1961年投入稻瘟病的防治.近年来，我国开发了一批具有自主知识产权的农用抗生素，如广东省农业科学院开发的万隆霉素［4］，能有效防治卵菌和细菌病害.沈阳农业大学植物病理研究室筛选出的农用抗生素TS99［3］，对烟草赤星病菌、辣椒炭疽病菌等多种植物病原菌和一些革兰氏阴性细菌有较好的抑制作用.除了传统上从土壤中分离的放线菌，海洋中分离出的新抗生素也显示出了良好的生防效果.如中国科学院海洋研究所研发的中尼霉素，对番茄早疫病病菌有良好的抑制效果;上海市农药研究所研发的Bafilomycins类似物，可以防治瓜类白粉病等［25］.多种新型抗生素的研发为放线菌应用于生物防治提供了一个美好的前景.4 研究热点及发展趋势展望由于放线菌对植物病害防治作用突出，人们期望获得更多更高效的拮抗放线菌，其研究热点主要集中在以下两方面.4.1 放线菌新资源的开发近年来，针对现有抗生素活性低下，病原菌对其产生抗性的现状，人们逐渐将目光转移到了非土壤环境中的放线菌资源开发.一些在海洋环境中发现的放线菌资源，在植物病害的防治的应用中已经取得了良好效果.极端环境下如盐碱地、高寒地带等环境中的放线菌，由于生存环境特殊，代谢途径与常规放线菌不同，因而成为新的拮抗物质的重要来源.从植物中分离出的内生放线菌，是微生物源杀菌剂的新研究领域，如魏玉珍等［26］分离的内生链霉菌I07A－01824可产生抗霉素A18，对多种植物病原菌有良好抑制作用.有些药用植物如喜树等自身有杀菌功能，存在于这些植物中的内生放线菌，由于与药用植物的协同进化作用，可能产生新的基因及代谢产物，也是研究开发的一个重要方面［27］.4.2 放线菌现有资源的改造2002年天蓝色链霉菌A3(2)测序工作完成，利用基因工程手段改造放线菌的方法随之迅速发展，如沉默基因激活、抗生素合成基因的克隆与重组等，以期产生新抗生素或获得高产菌株.近年来，人们发现了具有调节功能的合成次级代谢产物的沉默基因.如余贞等［28］发现，中断了变铅青链霉素的nsdA基因，获得的突变株WQ2能够合成放线紫红素，但重新引入野生型的nsdA又失去合成抗生素的能力.这表明中断nsdA基因可以激活变铅青链霉素中沉默的放线紫红素合成基因簇的表达，故可以诱导沉默基因表达获得新抗生素.基于多种放线菌测序工作的展开，抗生素合成基因的克隆也被应用到了新抗生素的筛选工作中.把目的片段转入到特定的宿主细胞中使其表达，或者与原产抗生素菌株杂交重组，既可以筛选出高产菌株，也可以筛选出新的抗生素基因［29］.有些药用内生放线菌还含有编码抗生素的基因，如PKS I、PKS II和NRPS基因［27］，可以产生与寄主植物相同或相似的抗菌物质，成为工程菌研究开发的目标.在基因工程改造菌株的过程中，可以利用全基因组改组技术(Genome Shuffling)筛选高产链霉菌菌株，快速简便，比传统经过多次诱变进行重组的方法更有效［30］.目前，对放线菌作用于植物病害防治的研究已经取得了很大进展，但投入应用的过程中还存在一些问题.如有很多放线菌在实验室中生防效果良好，但在大田试验中不尽人意;单一农用抗生素的使用不可避免地使病原菌产生抗性;部分放线菌抗菌谱较窄，应用价值低等等.分子生物学、遗传学、核糖体工程、计算机建模预测等多种手段的应用，将会进一步明确放线菌的生防机制，进行菌种改良与高效筛选，使其更好地投入到农业生产实践中.［参考文献］［1］文孟良，李铭刚，李一青.从放线菌次生代谢产物创制生物农药［C］.第五届新农药创制交流会论文集.北京:中国化工学会，2003:146－147.［2］薛细良，谢德龄，倪楚芳，等.中生菌素的抗生作用［J］.植物病理学报，1997，27(2):133－138.［3］吴元华，文才艺，朱春玉，等.农抗TS99对烟草赤星病菌作用的研究［J］.中国烟草学报，2004，10(4):20－24.［4］陈念，高向阳，林壁润.万隆霉素抑制细菌的作用机理初探［J］.西北农林科技大学:自然科学版，2005，33(51):143－148.［5］陈力力，高必达.微生物抗植物病毒活性物的研究进展［J］.中国生物防治，2006，22(4):256－257.［6］ KHALED A E T，KRISHNAPILLAI S.Non－streptomycete actinomycetes as biocontrol agents of soil－borne fungal plant pathogens and as plant growth promoters［J］.Soil Biology＆Biochemistry，2006，38:1505－1520.［7］ SHELLY M P.Detection，isolation and characterization of siderophores［J］.Methods in Enzymology，1994，235:329－344.［8］黄婷婷，林双君，邓子新.放线菌中铁载体生物合成机制研究进展［J］.微生物学通报，2011，38(5):765－773.［9］ YAMANAKA K，OIKAWA H，OGAWA HO，et al.Desferrioxamine Eproduced by Streptomyces griseus stimulates growth and development of Streptomyces tanashiensis［J］.Microbiology，2005，151(Pt 9):2899－2905.［10］ DIRCEU M，REGINALDO D S R，ALAN W V P，et al，Production of lytic enzymes and siderophores，and inhibiton of germination of basidiospores of Moniliophthora(ex Crinipellis)perniciosa by phylloplane actinomycetes［J］.Biological Control，2008，47(3):309－314.［11］ YOSHIAKI I.Synthesis of Chemically Stable and Biologically Active Analogues of Guanofosfocins［D］.Tokyo:Keio University，1996.［12］高必达.转几丁质酶基因防植物病害研究:进展、问题与展望［J］.生物工程进展，1999，19(2):24.［13］ HERMANT J R，ALOK K S.Actinomycetes mediated biochemical responses in tomato(Solanum lycopersicum)enhances bioprotection against Rhizoctonia solani［J］.Crop protection，2011，30:1269－1273. ［14］ HANANE H，MOHAMED H，MARIE J V.Growth promotion and protection against damping－off of wheat by two rock phosphate solubilizing actinomycetes in a P－deficient soil under greenhouse conditions［J］.Applied Soil 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Applied microbiology，2011，111(3):671－682.。
豚鼠气单胞菌CB101中几丁质酶的纯化、鉴定及其基因克隆
的最大的微生物几丁质酶基 因之一 ， 命名为 ｃｉ， 白分子量为 ９ ．ｋ ａ 该酶含有 ４个保守 ｈ 蛋 ｌ １５Ｄ ．
结 构域 ， Ｎ端 开始依 次 为 Ｃ ｉ 从 ｈＮ结构 域 、 苷 水 解酶 家 族 １ 化 区 （ ａａ ｔ ｏ ｉ） 功 能 糖 ８催 Ｃ ｔｙｃｄｍａ 、 ｌｉ ｎ
未知区域 Ａ和几丁质结合区（ ｈ Ｄ， Ｃ Ｂ 包括两个串连重复的几丁质结合区） 几乎包含了几丁质 ， 酶中所有常见结构域 ， 为我们研究几丁质酶不同结构域的功能提供 了良好的材料． 此外该菌能 在仅含几丁质的矿物盐培养基 中生长 ， 产生并分泌多种分子量不同的几 丁质酶． Ｃ Ｉ １ 以 Ｂ Ｏ 粗
维普资讯
３期
庄 群川 ， 王风平 ： 鼠气单胞菌 Ｃ １ １中几 丁质酶的纯化 、 豚 Ｂ０ 鉴定 及其 基因克隆
・６ ３ ３・
高效几丁质降解菌 ， 根据已知几丁质酶基 因的 Ｄ Ａ保守序列 ， Ｎ 利用人工合成的简并 Ｐ Ｒ引物 Ｃ 和 Ｃ １１总 Ｄ Ａ， Ｂ０ Ｎ 扩增 出一个 ２ ６ ｂ的片段 并克 隆到 载体 上 ， ．Ｋ 序列 分析 表 明 ， 这是 目前 已克 隆
微生 物 的几 丁质 酶基 因被 克 隆出来 ． 从 细菌 方 面来 说 ， 隆 方法 一般 是 分 离纯 化 目标 酶 ， 单 克 通
过 Ｎ端测序得到部分氨基酸序列 ， 然后倒推出核苷酸序列 ， 计标记好 在胶体几丁质 、 可溶性糖几丁质或
小 片段荧光 分子标 记 （一 ｔｙ ｍｂｌｆｙ） ４Ｍｅ ｌ ｅｉｒ１的几 丁寡糖 上进 行 功能筛选 ． 同细 菌 所 产生 几 丁 ｈｕ ｌｅ 不 质酶 差异 较大 ， 同一 株菌 株所产 生 的几丁质 酶 的分 子量 也往 往不 同． 已研 究 的几丁 质酶 产生 细 菌 都可产 生多种 几 丁质酶 ． 根据 催化 区氨基 酸 序列 的相 似性 ， 丁 质酶可 以分 为相 对独 立 的两１ 分 ８和 １ ¨ ． 大 多数 细 菌 、 菌 、 ９ ］绝 真 动物 、 毒 、 物 病 植
厦大微生物考研习题题库
第一章：原核生物的形态、构造和功能1．名词解释：革兰氏染色、肽聚糖、磷壁酸、外膜、脂多糖、古生菌、假肽聚糖、L型细菌、球状体、异染颗粒、磁小体、羧酶体、菌胶团、栓菌试验、渗透调节皮层膨胀学说、孢囊、伴胞晶体、支原体、MLO、LPS、PHB、异形胞、立克次氏体、衣原体、放线菌。
2．比较革兰氏阳性菌与阴性菌细胞壁结构和化学组分的异同点。
3．试述革兰氏染色的机制以及影响染色结果的主要技术要点。
4．渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热的机制？如何区别芽孢杆菌和梭状芽孢杆菌?5．简述4类缺壁细菌的形成机制以及与生产实践的关系。
6．以细菌细胞壁为例，说明基础研究与生产应用的关系。
7．比较支原体、立克次氏体和衣原体三种特殊细菌形态特征和生物学特点的异同点。
8．比较G+与G－菌生物学特性的不同，并解释可能的机制。
9．比较真细菌和古细菌细胞壁结构和组分的主要差异。
10．试解释G+与G-菌对溶菌酶、青霉素、链霉素、碱性染料敏感性不同的原因。
11.为什么某些细菌的细胞周期中存在二套或多套的核质体？12.简述放线菌形态多样性以及与人类的关系。
13.有一不产孢的放线菌菌株，如何证明该菌株是放线菌而非细菌？14．放线菌的孢子的生物学特性与一般细菌的细胞有何不同？有哪些生态学意义？15.菌毛和性纤毛有何不同,主要功能分别是什么?16.简述细菌鞭毛的运动机制。
鞭毛的分布有几种类型，分别各指一种细菌为代表来加以说明。
17．糖被的成分有几种代表类型？简述糖被的主要生理功能。
18．在自然界中普遍存在着抑制G＋细菌的微生物次生代谢产物，但抗G－的却较少存在，这是为什么？第二章:真核微生物的形态、构造和功能1．名词解释假菌、“9＋2”型鞭毛结构、微体、膜边体、几丁质酶体、氢化酶体、芽体、单细胞蛋白、2μm质粒、节孢子、掷孢子、厚垣孢子、芽孢子、假菌丝、子囊、子囊孢子、菌丝体、假根、匍匐菌丝、吸器、菌核、子座、子实体、担子、担孢子、分生孢子器、分生孢子盘、分生孢子座、子囊果、闭囊壳、游动孢子、孢囊孢子、卵孢子、接合孢子、锁状联合2．细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物菌落特征有何不同，为什么？3．细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物液体培养特征主要有哪些不同？4．真菌主要的有性孢子有哪些？简述其发生过程及生态意义。
产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选
产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选张煜玲;张利平;石楠【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)012【摘要】[目的]筛选产抑菌活性物质的放线菌菌株.[方法]以金黄色葡萄球菌、对青霉素和头孢菌素类耐药的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片扩散法对300株放线菌的发酵产物进行抗菌活性筛选,通过最小抑菌浓度法(MIC)时筛选的阳性菌株进行抗菌活性测定.[结果]筛选到抗菌活性物质产生菌111株,抑菌率为37.0%;其中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和耐药金黄色葡萄球菌有抑制活性的菌株分别为111、10和47株.各菌株的最小抑菌浓度有很大差别,菌株174883对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,其发酵样品稀释到2048倍仍然表现出抑菌活性.用青霉素酶和头孢菌素酶作用于阳性菌株发酵产物,筛选到6株菌株代谢产物的抑菌活性变弱,菌株32349和kj0428的抑菌活性被抑制最明显.[结论]筛选得到的阳性放线菌菌株具有良好的抗菌活性,为新型抗生素的筛选提供了研究基础.【总页数】4页(P6971-6974)【作者】张煜玲;张利平;石楠【作者单位】河北大学生命科学学院,河北省微生物多样性研究与应用实验室,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北省微生物多样性研究与应用实验室,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北省微生物多样性研究与应用实验室,河北保定071002【正文语种】中文【中图分类】R978.1【相关文献】1.苦皮藤内生放线菌YDG17菌株产抑菌活性物质发酵条件优化 [J], 杨春平;谢津;陈华保;吴文君;龚国淑;张敏2.产几丁质酶真菌菌株的筛选及产酶抑菌活性的检测 [J], 张宇;贺丹;周鑫;田庄;郭亮;王丽3.筛选鉴定一株产生抑菌活性物质的海洋放线菌 [J], 伍国梁;李林;陈豪;钱冬萌;李荣贵;王斌4.放线菌F12产抑菌活性物质的初步研究 [J], 董美华;王坤;胡晓媛5.根结线虫拮抗放线菌的筛选及菌株HAL0002的鉴定与活性物质分析 [J], 曾庆飞;黄惠琴;朱军;鲍时翔因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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亚热带农业研究ＳｕｂｔｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈ第６卷第２期
２０１０年５月
海洋放线菌Ｆ－１０１３对几丁质的利用及其发酵液的优化林梅１，张绍升２（１．福建农林大学测试中心；２．福建农林大学植物保护学院，福建福州３５０００２）摘要：研究了分离自海洋虾壳的一株放线菌Ｆ一１０１３对几丁质的利用及其发酵液的优化。结果表明：该菌具有较高的几丁酶活力。通过对该菌发酵液的筛选和优化，认为该菌在ｐＨ８—９、５％的虾壳粉培养液中发酵５—７ｄ，甲壳低聚糖含量达到０．３ｍｇ·ｍＬ～，产菌量优于其他基质的培养基。
关键词：放线菌；几丁质；几丁酶；培养基中图分类号：￥４７６文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－０９２５（２０１０）０２－０１１１－０４
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｈｉｔｉｎａｎｄｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｌｉｑｕｏｒ
ｂｙｍａｒｉｎｅａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅＦ－１０１３
ＵＮＭｅｉｌ．ＺＨＡＮＧＳｈａｏ．ｓｈｅｎ９２
（１．ＴｅｓｔＣｅｎｔｒｅ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５０００２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｃｈｉｔｉｎｂｙｍａｒｉｎｅａｃｔｉｎｏｍｙｅｅｔｅＦ－１０１３ｗｈｉｃｈｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｓｈｅＵｏｆｓｈｒｉｍｐｗｅｒｅ
ａｎａｌｙｚｅｄ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＦ一１０１３ｈａｄｔｈｅｈＪ【ｇｈａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃｈｉｆｉｎａｓｅ．Ｂｙｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍａｎｄ
ｃｕｌｔｉｖａｔｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｒａｉｎ，ｉｔｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｈａｔｃｏｎｔｒａｓｔｉｎｇｗｉｔｈｏｔｈｅｒｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｌｉｑｕｏｒ，ｂｙａｄｊｕｓｔｉｎｇｐＨ８－９ａｎｄｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇ５—７ｄａｙｓ，ｔｈｅｓｈｒｉｍｐｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｈｑｕｏｒｗ蠲ｔｈｅｂｅｓｔｏｆａｌｌｉｎｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｒｏｄｕｃｉｎｇｇｅｒｍａｎｄｃｈｉｔｏｓａｎ，ｔｈｅ
ｓｏｌｕｂｌｅｃｈｉｔｏｓａｎ
ｃｅｎ行ａｔｉｏｎｃｏｕｌｄｒｅａｃｈ０．３ｍｇ·ｍＬ一．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｅｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ；ｃｈｉｔｉｎ；ｃｈｉｔｉｎａｓｅ；ｃｕｌｔｕｒｅ
ｍｅｄｉｕｍ
２０世纪８０年代以来，甲壳素酶和壳聚糖酶引起了人们的重视，研究发现，许多生物包括多种细菌、放线菌和真菌以及动植物，可产生几丁质酶¨］。几丁质酶和壳聚糖酶可以降解甲壳素和壳聚糖，进而制备相应的甲壳低聚糖，而甲壳五糖至甲壳九糖已被证明是很好的生物农药心Ｊ。目前，已发现３０多种专一性或非专一性酶可用于壳聚糖的降解反应，从而生成不同相对分子量的低聚壳聚糖。专一性降解酶如壳聚糖酶、几丁质酶（甲壳素酶），非专一性酶如纤维素酶等一Ｊ。海洋放线菌Ｆ一１０１３分离自虾壳废料，菌株的孢子丝呈螺旋状，孢子圆形、长圆形或卵圆形，表面光滑，基丝较直，平缓，有较多细小分枝，气生菌丝呈粉白色。本试验以发酵液中低聚壳聚糖的含量及菌量作为优化的指标，对该菌的发酵液进行筛选和优化。这对进一步利用该菌的发酵液进行抑茵、促生及诱导抗性等一系列生理活性的测定具有一定的指导作用。
ｌ材料与方法１．１试验材料（１）供试菌株：海洋放线菌Ｆ一１０１３。（２）发酵培养基：过１００目筛的纯虾粉，配制成５％的悬浮液，并高压灭菌，分别调酸碱度为６、７、９；不调酸碱度ｐＨ约为８．２～８．５。
收稿日期：２０１０一０４－２３基金项目：福建农林大学青年教师基金资助项目（０５Ａ１１）。作者简介：林梅（１９７４一）．女．实验师，硕士。研究方向：植物痨害生物防治。Ｅｔｒ面ｌ：］ｉｒｔｍｅｉｐｌｕｍ＠ｓｉｎａ．ＣＯＩｌｌ。通讯作者张绍升（１９５１一），男教授。研究方向：植物病理学。Ｅｍａｉｌ：ｓｈａｏｓｈｅｎｇｚｈａｎｇ＠１２６．ｃｏｍ。
万方数据·１１２·亚热带农业研究第６卷１．２主要仪器恒温发酵摇床；紫外分光光度计。１．３试验方法１．３．１虾壳粉中几丁质含量的粗测将已粉碎至１ｍｍ的虾壳粉高温干燥后，经ＮａＯＨ脱蛋白、ＨＣＩ脱钙及最终高温干燥，得粗制几丁质。１．３．２Ｆ－１０１３分解几丁质的粗测将Ｆ．１０１３的菌碟（直径０．８ＣｌＴＩ）接种于含有几丁质的培养基上，２８℃
恒温培养，从第３天起测定几丁质水解圈的大小。１．３．３Ｆ．１０１３的发酵培养每１００ｍＬ上述发酵培养液接Ｆ一１０１３菌液（孢子浓度约为３．２×１０５ｃｆｕ·
ｍＬ一）１ｍＬ，置于２８℃、１５０ｒ·ｍｉｎ。１恒温摇床中发酵培养。１．３．４不同酸碱度发酵液中糖分的检测方法采用３，５一二硝基水杨酸比色法Ｈ１，对不同酸碱度发酵液中壳聚糖的含量进行分析比较，随培养时间逐日分析。以未接菌的原虾壳粉培养液中壳聚糖的含量作为对照（ＣＫ）。Ｉ．３．５不同酸碱度发酵液产菌量的比较各酸碱度的虾壳粉培养液经发酵７ｄ后，将发酵液稀释１００倍，各取１００ｐ，Ｌ涂布平板进行菌量的粗略比较。
１．３．６Ｆ．１０１３发酵液的筛选以虾壳粉发酵液中活性成分低聚壳聚糖的含量及产菌量作为优化指标。
２结果与分析２．１虾壳粉中几丁质的含量经粗测，虾壳粉中几丁质的含量较高，约为４５％一５０％。用虾壳粉作为Ｆ一１０１３培养液成分，主要是利用其中的几丁质。２．２Ｆ－１０１３对几丁质的分解能力
几丁质酶测定表明，Ｆ一１０１３利用几丁质能力很强，说明它产生的几丁质酶活力强。接种３ｄ就出现明显的几丁质水解透明圈，８—９ｄ后水解圈不再增大，表明菌体老化，不再生长。３—５ｄ水解圈增大最快，表明菌体生长最好，产生几丁质酶能力最强（表１、图１）。表１不同时间内Ｆ．１０１３几丁质水解圈直径Ｔａｂｌｅ１Ｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｃｈｉｔｉｎｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇｃｙｃｌｅｏｆｔｈｅｓｔａｉｎ
Ｆ—１０ｌ３ｉｎｖａ．ｒ＇ｉｏｔｌｓｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇｔｉｍｅ
图ｌ几丁质水解圈Ｆｉｇ．１Ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇｃｙｃｌｅｏｆｃｈｉｔｉｎ
２．３培养期间发酵液中壳聚糖含量的变化对不同酸碱度虾壳粉发酵液中壳聚糖含量的测定（图２）表明，ｐＨ６—７的培养液在发酵初期糖分上升得较快，高于ｐＨ８—９的培养液，但在发酵中后期，由于菌体逐渐老化，其几丁质酶水解能力减弱，加之低分子质量的壳聚糖被菌体作为营养物质吸收利用，壳聚糖的浓度有缓慢降低的趋势。ｐＨ６—７的发酵液由于最先达到Ｆ一１０１３最适宜生长的酸碱度，故产糖量上升较快，随着发酵时间的延长，菌体提前出现老化。ｐＨ８—９的虾壳粉培养液由于碱性偏高，在菌体培养早期，壳聚糖上升趋势并不十分显著；但随着发
万方数据第２期林梅等：海洋放线菌Ｆ－１０１３对几丁质的利用及其发酵液的优化．１１３．
酵时间的延长，其缓冲体系逐渐向ｐＨ７附近靠拢，此
时产糖量大大提高，在菌体培养５—７ｄ时，达到一个高峰，超过ｐＨ６—７的发酵液；培养７—８ｄ后，菌体开始逐渐老化，几丁质酶活力不再上升，分解和利用水平减弱，壳聚糖含量基本持平。
２．４不同酸碱度虾壳粉发酵液产菌量的比较初步结果表明，ｐＨ６—７的发酵液在发酵后期，菌体老化，发生菌体自溶（图３Ａ）；ｐＨ８—９的发酵液培养５—７ｄ时，菌体生长较为旺盛（图３Ｂ）。因此，ｐＨ６—７的发酵液产生的菌量少（图３Ｃ、Ｄ），ｐＨ８．２—８．５发酵液的菌量大体相当或略少于ｐＨ９发酵液的菌量（图３Ｅ、Ｆ）。
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图２虾壳粉发酵液不同ｐＨ产糖趋势图Ｆｉｇ．２ＣｏｍｐａＩｉ∞ｎｏｆｃｈｉｔｏｓａｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｈｒｉｍｐｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐＨ
Ａ．ｐＨ为７的发酵液摇床７ｄ，菌体自溶；Ｂ．ｐＨ为９的发酵液摇床７ｄ，形成大量菌丝球；ｃ．ｐＨ为６的发酵液稀释涂布平板结果；Ｄ．ｐＨ为７的发酵液稀释涂布平板结果；Ｅ．ｐＨ为８．２—８．５的发酵液稀释涂布平板结果；Ｆ．ｐＨ为９的发酵液稀释涂布平板结果。图３不同ｐＨ虾壳粉发酵液产菌量比较
Ｆｉｇ．３ＣｏｍｐａｒｉｍｎｏｆｓｐｏｒｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｈｒｉｍｐｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐＨ
２．５Ｆ·１０１３发酵液的筛选和优化本试验结果表明，将ｐＨ８—９的虾壳粉培养液发酵５—７ｄ，产糖及产菌力最佳。由于５％虾壳粉培养液经高压灭菌后ｐＨ即达到８．２—８．５，笔者认为，为简化工艺步骤，可以不用调节酸碱度。３讨论海洋放线菌是海洋微生物中一类特殊的、具有重要经济价值的微生物。据不完全统计，近年来，５０％以上新发现的海洋微生物活性物质是由海洋放线菌这个庞大的分类群产生的１５Ｊ。许多放线菌的次生代谢产物具有医药和植物保护方面的用途，有些已被用作抗细菌、抗真菌和抗肿瘤的药物强。Ｊ。由于Ｆ．１０１３本身分离自虾壳，故以虾壳粉为基质的培养液很适于该菌生长。另外，该菌之所以在虾壳上生长旺盛，与其菌丝体内活性较高的几丁质酶有关。本试验结果表明，将高压灭菌后５％的虾壳粉培
养液接入Ｆ．１０１３后发酵５—７ｄ，产糖及产菌力均达到较高水平。刘大群Ｈ１等研究认为，同属于放线菌的玫瑰黄链霉菌Ｍｅｎ．ｍｙｃｏ－９３－６３及其发酵液对棉花黄萎菌菌丝生长具有强烈的抑制作用．可导致黄萎菌菌丝变形，并有溶菌作用出现；郭敬华一。等研究表明，该菌的发酵液除具有直接抑菌作用外，还可以诱导黄
瓜主要防御酶系活性的提高，而且这种诱导效应在病原菌侵染的作用下表现更为明显。杨文香等¨叫用３
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万方数据