海洋放线菌.
海洋放线菌研究的新进展

海洋放线菌研究的新进展3刘妍 李志勇33(上海交通大学生命科学技术学院海洋生物技术实验室,上海 200240)摘 要: 海洋放线菌由于其独特的代谢途径和合成新颖抗生素的能力,已经广泛引起人们的关注。
本文就海洋放线菌在海洋环境中的分布、医药领域的应用及其相关研究方法进行了综述。
关键词: 海洋放线菌 分布 抗生素 研究方法N ew R esearch Progress of Marine Actinomycetes3Liu Yan Li Zhiyong 33(M arine B iotechnology L aboratory ,S chool of L i f e S cience and B iotechnolog y ,S hanghai J iao Tong Universit y ,S hanghai 200240)Abstract : Great attentions have been paid to marine actinomycetes for their particular metabolic pathway and the ability to synthesize new antibiotics.This review summarized new development on the distribution ,pharmaceuti 2cal application and research approach of marine actinomycetes.K ey words : Marine actinomycetes Distribution Antibiotics Research approach 放线菌(acti nom ycetes )是一类高(G +C )%的革兰氏阳性细菌。
自1875年Cohn 从人泪腺感染病灶中分离到一株链丝菌(st reptot hri x )以来,放线菌由于其拥有独特的合成多种结构复杂的次生代谢产物的能力引起了人们的广泛关注。
海洋放线菌Streptomyces sp. 124092中的细胞毒活性成分

甲酸( ) 其中化合物 1 2为两个含氮化合物 , 5. 和 均为新化合物. 对上述化合物进行细胞毒活性测试的
结 果表 明 ,化合 物 1~ 4对肝 癌细胞 (MMC72 ) S - 1 具有 不 同程 度 的生长抑 制活性 . 7
1 实验 部 分
1 1 仪器 与试剂 .
北京 泰克仪器 有 限公 司 x5型显 微熔 点 仪 ;H iop aooa 0 _ e lhLbrt- L和 He o hLbra40 d 2 i l aoo -00旋 转 dp t 蒸发仪 ;Pri le- 3型 自动旋 光 仪 ;V uopc30 eknEm r 4 3 G A tse-00型 质 谱 仪 ; rkrA 0 核磁 共 振 波谱 Bue V4 0 仪 , MS为 内标 .薄层 层析 硅胶 和柱层 析 硅 胶均 为 青 岛海 洋 化 工厂 产 品 ;Spae H-0为 Mec T ehdxL 2 r k公 司产 品 ;D -0 A2 1为上 海亚东 核级树 脂有 限公 司产 品 ; J10 E 发 酵罐 ( 海 联 环公 司) G一 B 0 上 ;四 甲基 偶 氮
资助.
联系人 简介 :戴好富,男 , 研究员 ,主要从 事天然产物化学研究.E m i fa 0 1 ao. o .n - al di 0 @yho cr c :h 2 n 洪 葵 , ,教授 , 女 主要从 事微生物学研究.Em i: 12 @1 3 nt —al k o2 6 . e
海洋放线菌及其生物活性的研究

海洋放线菌及其生物活性的研究唐婧媛薛永常唐婧媛,大连工业大学生物工程学院,116034,大连市甘井子区轻工苑1号。
薛永常(通讯作者),单位及通讯地址同第一作者。
收稿日期:2010-08-17放线菌(actinomycetes )是一类具有分枝状菌丝体的高(G+C )%/mol 的革兰氏阳性菌,因早期发现其类群的菌落呈放射状而得名。
放线菌广泛存在于不同的自然生态环境中,种类繁多、代谢功能各异,其特有形态和生物学特性是研究生物形态发育和分化的良好材料;许多放线菌能产生生物活性物质,是一类具有广泛实际用途和巨大经济价值的微生物资源[1]。
目前分离得到的放线菌绝大多数来源于土壤,陆生放线菌产生的抗生素占天然来源抗生素的70%以上。
但陆生放线菌中能分离出的先导化合物数量毕竟有限,近20年来人们把目光投向了海洋[2]。
海洋占地表面积的71%,海洋生物物种比陆地生物丰富和复杂,生活环境比陆地生物迥异,因此,具有一些特殊的结构和功能,以维持其生命活动。
海洋放线菌因其生活的高盐、高压、低温与低营养等特殊环境而产生其独特的代谢方式,这既确保了在极端环境中生存,也提供了产生抗生素的潜力。
海洋放线菌是新药开发和天然活性产物的重要来源,海洋放线菌的生物多样性是代谢产物功能多样性的基础,因此,研究可培养放线菌的生物多样性具有重要的意义。
1海洋放线菌的多样性海洋环境特殊多样,赋予海洋中的放线菌种类繁多,常见的包括诺卡菌属(Nocardia)、链霉菌属(Streptomycetes)、小单孢菌属(Micromonospora)、放线菌属(Actinoplanetes)等[3]。
据报道可分离到的海洋放线菌近乎分布于海洋各个角落,包括海水、海泥、海底沉积物、海洋动植物等。
Han 等(2003)从东海Amursky海湾的海水中分离得到3株海洋放线菌,其中一株经鉴定属于新分离的一个属,Salinibacterium 属,具有耐盐的作用[4]。
海洋放线菌(Salinispora arenicola)基因转移系统的建立

海洋放线菌(Salinispora arenicola)基因转移系统的建立马艳玲;李海贤;翁萍;刘泽璇;许小庆;曾荣【摘要】该实验旨在建立海洋放线菌Salinispora arenicola基因转移系统,以便基因敲除和外源基因表达等遗传操作.以整合型质粒pSET152和pIB139为出发质粒,通过接合转移构建了海洋放线菌Salinispora arenicola的基因转移系统.结果表明,25μg/mL阿泊拉霉素可有效筛选接合子,大肠杆菌与孢子的比例为8:1时可获得较多的转化子.经聚合酶链式反应(PCR)验证,质粒成功整合到菌株海洋放线菌S.arenicola基因组中,接合子经多次传代后,导入的质粒pSET 152和pIB139仍稳定整合于接合子基因组上.成功构建了海洋放线菌S.arenicola接合转移系统.%The objective of this study is to establish the gene transfer system of marine-derived actinomycetes Salinispora arenicola,which can be used for genetic manipulations such as gene knock-out and expression of foreign ing integrated plasmid pSET 152 with pIB 139 as original plasmid,the gene transfer system of actinomycetes S.arenicola was constructed by conjugating transfer.Results showed that 25 μg/ml apramycin may be used to efficiently screening conjugants,and more transformant can be acquired with Escherichia coli to spores ratio 8:1.PCR verification revealed that exogenous plasmid was successfully integrated in the chromosomal DNA of actinomycetes S.arenicola.After multiple generations of zygotes,the transformed plasmid pSET152 and pIB139 of conjugants were stably integrated in the zygote genome.The S.arenicola conjugational transfer system was successfully constructed.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2018(037)003【总页数】4页(P131-134)【关键词】海洋放线菌;Salinispora arenicola;接合转移;遗传稳定性【作者】马艳玲;李海贤;翁萍;刘泽璇;许小庆;曾荣【作者单位】佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231【正文语种】中文【中图分类】Q93-331天然药物的一个重要来源是海洋放线菌[1],其作为一类特殊菌群其可以产生多种生物活性物质,这些活性物质很多都具有成为新药先导化合物的研制潜能,如多肽、酶类、抗肿瘤物质和抗生素等[2-4]。
海洋新放线菌及其次级代谢产物研究进展

海洋新放线菌及其次级代谢产物研究进展【摘要】由于自身特殊的生存环境,海洋放线菌具有复杂独特的代谢途径,产生了诸多结构新颖、生物活性显著的次级代谢产物,这些活性代谢产物为新抗生素的发现提供了丰富的先导化合物,有些已经进入临床前研究。
本文简要介绍近十几年从海洋样品中分离到的放线菌新种属及其次级代谢产物研究概况。
【关键词】海洋放线菌;代谢产物; Salinispora; Verrucosispora;MarinisporaABSTRACT Due to the special living environment, marine-derived actinomycetes possess distinct and complex metabolic capabilities,resulting in wide persity of their secondary metabolites in chemical structure and biological activity. Among them, many valuable leading compounds were obtained for discovery of new antibiotics, and some had been selected for preclinical study. The research advances in discovery of new actinomycetes and their secondary metabolites were briefly reviewed in this paper.KEY WORDS Marine-derivedactinomycetes;Metabolites;Salinispora;Verrucosispora;Marinispora放线菌是一类高(G+C)%的革兰阳性细菌,与人类关系密切。
海洋放线菌CN5的分离与鉴定

L i a o n i n g 1 1 6 6 0 0 ,C h i n a )
Ab s t r a c t :I s o l a t i o n a n d s c r e e n i n g r a r e A c t i n o my c e t e wa s ma d e f o r A c t i n o pl a n e s f r o m s e a s e d i me n t f ro m Da l i a n s e a a r e a i n L i a o n i n g P r o v i n c e .Ag a r p l a t e d i l u t i o n me t h o d wa s u s e d t o c a r r y o u t i s o l a t i o n ,a n d t h e t a x o n o mi c p o s i t i o n w a s d e t e r mi n e d u s i n g a p o l y p h a s i c a p p r o a c h .On e ma r i n e a c t i n o my c e t e s t r a i n C N5 w a s i s o l a t e d f r o m ma in r e s e d i me n t i n D a l i a n , L i a o n i n g P r o v i n c e .S t r a i n C N5 g r e w w e l l o n mo s t me d i a t e s t e d ,t h e c o l o n i e s we r e o r a n g e ,b u t l a c k e d a e ia r l h y p h a e a n d r e d d i f f u s i b l e p i g me n t s we r e
大连海域海洋放线菌多样性及分类鉴定初探
c a n c e .I n t hi s e x p e r i me nt 30 s t r a i n s o f a c t i n o my c e t e s we r e s c r e e ne d f r o m t he Da l i a n s e a a r e a s ,c h a r a c t e r i z a t i o n o f t he i r mo r ph o l o g y,ph y s i o l o g y a n d b i o c h e mi s t r y, 1 6S r DNA s e q u e nc e s a n a l y s e s a n d t h e c o n s t r u c t i o n o f ph y l o g e n e t i c t r e e s u g g e s t s t ha t a mo ng t h e m 1 3 i s o l a t ed ma r i ne a e t i n o myc e t t s p e c i e s a n d s u bs p e c i e s o f t h e g e nu s o f
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 5—7 0 2 1 . 2 0 1 3 . 0 4. 0 0 7
Di v e r s i t y Cl a s s i ic f a t i o n a nd I de n t i ic f a t i o n 0 f Ma r i n e Ac t i n o my c e t e s f r o m Da l i a n S e a Ar e a
微 生物 学 杂 志 2 0 1 3 年8 月第 3 3 卷 第4 期
海洋放线菌分离方法
5 抑制剂
分离 海 洋 放 线 菌 一 般 都 需 要 使 用 抑 制 剂, 建 议 用 放 线 菌 酮 ( 100 或 50 mg / 1 000mL ) 或制霉菌素 ( 100m g /L ) 加萘啶酮酸 ( 20~ 25mg /1 000mL ) 。也可以用放线 菌酮 ( 100 或 50m g / 1 000mL ) 或制霉菌加利富平 5~ 10m g / 1 000m L。 参考文献
A3, En terocin, A ctp heno, l m a ltophilin, echinom ycin , anti m yc in A, sporav iridin A1 , ba filom ycins, filipin , lipom ycins , lagosin, aboyssom icins, ikarugam ycin, elalom ycin ,
*
国家 973项目 ( N o 2004CB719601 ) 国家自然科学基金项目 ( N o 30270004、 30560001 ) 通讯作者 Te: l 0871 5035263, Fax: 0871 5173878 , E m ai: l 收稿日期 : 2006 04 12, 修回日期 : 2006 05 19 lihxu@ ynu edu cn
[ 3] 7
。用这种方法可以分离到大量
4 培养基
( 1) M 1 培养基 : 淀粉 10g, 酵母膏 4g , 蛋白 胨 2g, 琼脂 18g 天然 海水定容 至 1 000 m L。
2006 年 33 ( 6)
微生物学通报
155
图 1 微囊化分离难培养放线菌流程图
( 2) M 2 培 养 基: 甘 油 6 m L, 精 氨酸 1g, K 2 H PO4 0 5g, K2 H PO4 0 5 g , M gSO4 0 5g, 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL。 ( 3) M 3 培养基 : 葡萄糖 6g , 几丁质 2g, 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL ( 4) M 4 培养基 : 几丁质 2g , 琼脂 18g , 天然海水定容至 1 000 mL ( 5) M 5 培养基 : 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL ( 6) 几丁质琼 脂: 几 丁质 2g , K2 H PO4 0 7g, KH 2 PO 4 0 3g , M gSO4 0 5g , 琼脂 20g , 天然海水定容至 1 000 mL ( 7) 海藻糖 - 脯氨酸培养基 : 海藻糖 5g , 脯氨酸 1g , ( NH 4 ) 2 SO4 1g , NaC l 1g, CaC l2 2g, K 2H PO4 1g , M gSO4 7 H 2 O 1g, 复合维生素 (维生素 B1 、核黄素、烟酸、维生 素 B6 、泛酸钙、肌醇、 p- 氨基苯甲酸各 0 5m g, 生物素 0 25m g) , 琼脂 20g , 天然海 水定容至 1 000 mL。 HV 培养基的分离效果也较好。
海洋中的微生物有哪些有哪些特殊性质
海洋中的微生物有哪些有哪些特殊性质海洋作为地球上最大的生态系统之一,其中微生物的丰富性、群落结构和生物地球化学过程具有重要的影响。
海洋中的微生物有着独特的物理和化学环境,在适应这些特殊条件的同时,也发展出一系列特殊性质。
本文将从不同类别的微生物角度分别介绍海洋中微生物的特殊性质。
1. 海洋中的细菌海洋中的细菌是海洋中最丰富的微生物群体之一,其数量可以达到每升海水数百万至数十亿个。
在面对洋流、潮汐、营养盐等不断变化的环境条件下,细菌可以表现出独特的特性。
首先,细菌的代谢途径多样,可以利用各种碳源和氮、磷、铁等微量元素充分生长。
其次,细菌具有出色的适应性和耐受性。
例如,海洋中的一些硫氧化细菌能够在硫化氢和氧气的存在下生长繁殖,而大多数细菌则对硫化氢产生毒性反应。
此外,细菌也能够克服高盐浓度、高氧压力和低温环境等压力,从而适应海洋中各种条件。
2. 海洋中的放线菌放线菌是一类特别的细菌,其通常生活在土壤中,然而已经发现它们也在海洋中生存。
放线菌的最大特点是其形成的菌丝类似于真菌。
实际上,人们之前把它们当作真菌拾取研究。
放线菌具有抗原性强,可产生多种抗生素等生物活性物质。
最著名的例子是厚壁链霉菌和链霉素。
而在海洋中,放线菌同样可以通过产生生物活性物质,对海洋中其它微生物群体产生一定的生物竞争。
3. 海洋中的古菌古菌是生命进化过程中的一类祖先真核生物,它们在高温、低温、高压、酸碱等极端环境下都有生存的能力。
同时,古菌还具有一些细胞结构特点和代谢途径等方面的特殊性质。
在海洋中,常见的古菌种类有:甲烷古菌、硫化古菌和嗜热古菌等。
这些微生物的代谢途径和生化反应能够参与沉积物的转化和有机碳的分解,从而对海洋的生态系统产生影响。
4. 海洋中的原生动物原生动物在海洋中是一种比较繁盛的生物群体,它们在海洋中承担着重要的生态角色,例如掠食微小生物、参与溶解有机物质等。
与其它类别的海洋微生物相比,原生动物的特殊性质表现为其防御机制的多样性和运动方式的独特性。
海洋放线菌BM-2菌株对黄瓜的促生作用和诱导抗性研究
为重要的生防资源被广泛应用于多种植物病害的生 物 防治 。国 内外 许多 学者 研究 了放 线菌 的抗 菌 防病
1 8 0 r / mi n振荡 培养 4 d , 即为种 子液 。
B M一 2菌 株 是 从 连 云港 海 域 海 泥 中分 离 获得 的
作者简介 : 暴增海 , 教授 , 研 究 方 向 为植 物病 害 生物 防 治
基金项 目: 江苏省 高校优势 学科建设工程 项 目; 江 苏省“ 六 大人才 高
关来 自海洋的 B M - 2 菌株对黄瓜枯萎病 的防治作用 及 其对 黄瓜 幼 苗 的促 生 作用 和 防御酶 活性 的诱 导研 究 尚未见 报道 。本研 究 用 B M- 2菌 株 的发 酵 液 处理 黄瓜 种子 , 测定 黄瓜 根 的伸 长和 须根数 , 以及 黄瓜 出
苗后 苯丙 氨酸 解氨 酶 ( P A L ) 、 过 氧化 物酶 ( P O D) 、 多 酚氧 化酶 ( P P O) 及 超 氧化 物歧 化酶 ( S O D) 等酶 的活 性变 化规 律 , 以期 为 B M一 2菌 株 的 开 发 利 用 和 防病 作 用 机理研 究 提供 理论 依据 。
峰” 项 目; 连 云 港 市科 技 局农 业 攻 关 项 目( C N 1 2 0 7 )
收 稿 日期 : 2 0 1 3— 0 4—2 5 ; 修 回 日期 : 2 0 1 3— 0 6—2 1
发酵 B M- 2菌 株在 5 L发 酵罐 中发 酵 , 每 罐装 3 L 发 酵培 养基 , 按3 % 的 接 种量 接 种 种 子液 , 在2 8 %、 初 始搅 拌 转 速 2 0 0 r / mi n ( 其后根 据溶氧需求 调整 ,
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Materials and Methods
2. Actinomycete Isolation
Sponges were transferred to plastic bags containing seawater and transported to the laboratory. Sponge specimens were rinsed in sterile seawater, cut into pieces of ca. 1 cm 3 , and then thoroughly homogenized in a sterile mortar with 10 volumes of sterile seawater. The supernatant was diluted in ten-fold series (10 -1 , 10 -2 , 10 -3 ) and subsequently plated out on agar plates. 10体积无菌 海水中磨碎 稀释涂布 分离
ability to produce new chemical entities with diverse
pharmacologtinomycetes in particular have yielded
numerous novel secondary metabolites
无菌海水中切 成1cm3
10-1
10-2
10-3
Materials and Methods
2. Actinomycete Isolation
Eight different media [M1 [19], ISP medium 2 [39], Oligotrophic medium (OLIGO) [40], M1 plus [14],Actinomycete Isolation Agar (AIA) [41], Marine Agar (MA) [42], Glycerol Asparagine Agar (GAA)[41] and R2A Agar [43]] were used for the isolation of actinobacteria. Inhibitors Artificial sea water Storage
inhibit the growth of human pathogens and parasites.
Materials and Methods
1. Sponge Collection
The first group of sponges (Aplysina aerophoba, Dysidea avara, D. tupha, Hemimycale culumella,Ircinia fasciculata) was collected by SCUBA diving at depths of 3–20 m in the Mediterranean Sea (Rovinj, Croatia, (GPS: 27˚47.655 N; 34˚12.904 W) in August 2008
All media were supplemented with 0.2 µ m pore size filtered cycloheximide(放线菌酮) (100 nalidixic acid (萘啶酸)(25 µ g/mL) to facilitate
Our aim is to isolate and culture actinomycetes from marine sponges and to characterize their potential to produce bioactive compounds,specifically those which
The second group (Amphimedon sp., Callyspongia sp., C. aff. implexa, Hyrtios erecta, Negombata magnifica, Spheciospongia vagabunda) was collected at a depth of 10 m in the Red Sea (Ras Mohamed, Sinai, Egypt; (GPS: 27˚47.655 N; 34˚12.904 W) in August 2006
Many sponges contain furthermore symbiotic microbial consortia(共生微
生物) within their mesohyl matrix that may amount up to nearly half of their biomass(生物量).
Introduction
Infectious disease is the number one cause of death in tropical countries accounting for approximately half of all fatalities. In addition, infectious disease mortality rates are also increasing in developed countries. Actinomycetes are of considerable interest owing to their
Contents CONTENTS
01
Introduction
02
03
Materials and Methods
Results and Discussion
Introduction
海绵动物
海绵动物是对一类多孔滤食性生物体的统称t
Microorganisms serve as food particles, which are retained from seawater in the choanocyte chambers(细胞环室), translocated into the mesohyl(中胶层) interior and digested by phagocytosis(吞噬作用).