4种重金属对发光菌的急性毒性和联合毒性研究[开题报告]
重金属对微生物毒性效应研究
武汉工业学院毕业论文论文题目：重金属对微生物毒性效应研究姓名学号院系化学与环境工程学院专业环境工程指导教师2010年5月15日目录中文摘要 (Ⅰ)英文摘要 (Ⅱ)1.前言 (1)1.1 重金属对微生物毒性研究现状 (1)1.2 本实验研究的目的和意义 (3)2．大肠杆菌、荧光假单胞菌和枯草芽孢杆菌的简介 (4)2.1 大肠杆菌的简介 (4)2.2 荧光假单胞菌的简介 (4)2.3 枯草芽孢杆菌的简介 (5)3．汞，铬，镉，铅对大肠杆菌，荧光假单胞菌，枯草芽孢杆菌毒性的实验研究 (7)3.1 细菌在重金属污染下存活数量 (7)3.1.1 实验材料和仪器 (7)3.1.2 实验步骤 (7)3.1.3 结果与分析 (7)3.2 细菌在受到重金属污染后在细胞水平上的研究 (9)3.2.1实验材料和仪器 (9)3.2.2 实验步骤 (9)3.2.3 结果与分析 (10)3.3 单细胞凝胶实验 (12)3.3.1 实验材料和仪器 (12)3.3.2 实验步骤 (12)3.3.3 结果与分析 (13)4．微生物和重金属相互作用的应用范围及发展前景 (15)4.1 微生物和重金属相互作用的应用范围 (15)4.1.1 重金属污染的微生物学评价 (15)4.1.2 微生物在环境保护中的应用 (15)4.2 重金属和微生物相互作用的发展前景...................．16 谢辞 (17)参考文献 (18)摘要微生物不仅种类繁多，数量极大，分布广泛，而且具有繁殖迅速，个体微小，比表面积大，对环境适应能力强等特点，因而成为人类最宝贵、最具开发潜力的资源库之一。
作为分解者，微生物在地球生态系统的物质循环过程中起着“天然环境卫士”的作用。
众所周知，重金属不能被微生物降解并且对它们有毒害作用，本次实验是以四种常见的重金属离子+2H g、+6Cd、+2P b对大肠杆菌、荧光假单Cr、+2胞菌、枯草芽孢杆菌三种细菌生长过程的毒性研究。
重金属与四环素类抗生素对发光菌的毒性研究
银淑铮，刘刚，方俊.重金属与四环素类抗生素对发光菌的毒性研究[J].农业环境科学学报,2023,42（11）：2422-2429.YIN S Z,LIU G,FANG J.Single and combined toxicity of heavy metals and tetracyclines to luminescent bacteria [J].Journal of Agro-Environment Science ,2023,42（11）：2422-2429.重金属与四环素类抗生素对发光菌的毒性研究银淑铮，刘刚，方俊*（湖南农业大学生物科学技术学院，长沙410028）Single and combined toxicity of heavy metals and tetracyclines to luminescent bacteriaYIN Shuzheng,LIU Gang,FANG Jun *（College of Biological Science and Technology,Hunan Agricultural University,Changsha 410028,China ）Abstract ：In this study,the acute single toxicity and combined toxicity of five heavy metals and tetracycline antibiotics on luminescent bacteria were studied by a luminescent test.The toxicity unit method was used to characterize the combined toxicity,and the concentration addition model and independent action model were used to predict the combined acute toxicity of the binary mixed system to luminescentbacteria.The results showed that the toxicity was in the order of Pb （NO 3）2>ZnSO 4·7H 2O>CdCl 2·2H 2O>oxytetracycline hydrochloride>chlortetracycline hydrochloride>doxycycline hydrochloride>tetracycline hydrochloride>CuSO 4·5H 2O>K 2Cr 2O 7.The combined toxicity of heavy metals was mainly manifested as a synergistic effect.The combined toxicity of heavy metals and tetracycline antibiotics was mainlymanifested as an additive and antagonistic effect,and the combined toxicity of tetracycline antibiotics was mainly manifested as an antagonistic effect.When heavy metals coexist with tetracycline antibiotics,they had different toxic effects on luminescent bacteria.Therefore,the combined toxic effects should be considered during the evaluation of combined environmental pollution.Keywords ：heavy metal;tetracycline antibiotics;toxicity unit method;concentration addition model;independent action model收稿日期：2023-06-28录用日期：2023-08-29作者简介：银淑铮（1998—），女，湖南邵阳人，硕士研究生，主要从事微生物研究。
镉、铜、锌对四种水生植物的毒性效应的开题报告
镉、铜、锌对四种水生植物的毒性效应的开题报告一、选题背景随着环境污染的加剧，水生植物受到了越来越大的威胁。
其中，重金属污染是一种严重的环境污染问题，具有高毒性、持久性和蓄积性等特点，会对水生生物造成严重危害。
镉、铜、锌是常见的重金属元素，在工业生产和人类活动中广泛使用，也是水环境中的常见污染物之一。
因此，深入研究镉、铜、锌对水生植物的毒性效应，具有重要的理论意义和实际应用价值。
二、研究目的本课题旨在研究镉、铜、锌对四种水生植物的毒性效应，并探究不同的处理浓度对其影响程度，为水生植物的保护和修复提供科学依据。
三、研究内容1. 确定研究对象：选取四种常见的水生植物作为研究对象，包括水葫芦、水藻、小杨花和水葱。
2. 确定处理浓度和处理时间：根据文献综述和实验条件，确定不同的处理浓度和处理时间。
3. 分析不同浓度下毒性效应的指标：使用不同的生物学指标，如形态指标、生长指标、光合作用等，分析不同浓度下毒性效应的指标。
4. 分析不同处理时间下毒性效应的指标：通过长期和短期的处理浓度，分析不同处理时间下毒性效应的指标。
5. 分析不同水生植物毒性效应的异同：通过对不同水生植物的处理结果进行比较，分析其毒性效应的异同。
四、研究意义通过研究水生植物对重金属污染的毒性效应，可以为水生植物的保护和修复提供参考和指导。
同时，该研究也可以为环境保护和重金属污染治理提供理论支撑。
五、研究方法主要采用实验研究的方法，根据实验设计，建立包括对照组和处理组的实验装置，进行实验操作和数据收集，并借助统计学方法进行数据分析和结果验证。
六、预期成果通过本次研究，预期可以获得镉、铜、锌对四种水生植物的毒性效应以及不同处理浓度和处理时间对其影响的实验数据，并综合分析这些数据，形成科学、可靠的研究结论。
同时，本次研究也将形成一份较为完整的实验报告，对相关学科领域和环境保护工作具有较强的指导和参考价值。
重金属对几种微生物的胁迫生理毒性研究报告
重金属对几种微生物的胁迫生理毒性研究我们生活的世界是一个微生物世界，人类就生活在微生物海洋里，其中土壤和水体是微生物种类和数量比较多的两个生活环境，随着社会的进步，工农业的发展，各种生产和生活废弃物的排放，人类生活的环境受到各种废弃物的严重污染，这些污染给环境带来了严重的影响，同时也影响了环境中的各种生物，微生物也不例外，微生物以其独有的特征成为环境污染监测中一个重要指标，如水体中生物监测的对象就主要是细菌。
一般情况下，环境中重金属的存在会对动、植物和微生物造成一定的毒害作用, 但是各种生物对重金属的敏感性有很大的差别。
微生物作为一类低等的单细胞的生物，外界环境对它作用具有均一性特征，更容易受到外界环境的影响，所以，微生物对各种污染物的敏感性是比较强的。
很多研究表明，微生物在受到重金属胁迫后，往往会在区系组成、生理生化、遗传等方面对重金属作出响应，根据以上指标的变化特点，分析不同重金属在不同浓度梯度下对几类典型微生物造成的影响，为环境中重金属污染状况进行评价提供理论依据，并为环境重金属污染的生物修复提供理论指导。
外界环境中存在的微生物主要有三大类：细菌(根据革兰氏染色可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)、真菌和放线菌，它们在结构、组成、形态和大小等方面都有各自的特征:革兰氏阳性菌：有细胞壁，构成的主要成分是肽聚糖，肽聚糖层较厚，细胞壁的其他成分是磷壁酸；细胞膜的构成与高等生物一样，成分是磷脂和蛋白质分子；细胞内有一核区，其成分有DNA、RNA和支架蛋白。
革兰氏阴性菌：与革兰氏阳性菌细胞壁的共有成分是肽聚糖，但是，革兰氏阴性菌肽聚糖层较薄，在其细胞壁外有有一层结构复杂的外膜，其主要成分是脂蛋白、脂多糖、孔蛋白等，其他结构成分与革兰氏阳性菌相同。
链霉菌：是放线菌中的一个大属，在土壤中分布广，种类多，属于原核微生物中的革兰氏阳性菌，结构为杆状或丝状。
酵母菌：是真核微生物中的一个大类群，它的特点是细胞中含有细胞核，细胞个体较大，细胞壁的成分多以几丁质为主。
部分除草剂与重金属混合物对发光菌的毒性
部分除草剂与重金属混合物对发光菌的毒性宋晓青;刘树深;刘海玲;葛会林【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2008(003)003【摘要】以5种不同类型除草剂和4种重金属为混合物组分,探索混合物毒性变化规律.应用微板毒性分析方法,测定了百草敌、磺草灵、西草净、除草定、环嗪酮、CdCl2·2.5H2O、Ni(NO3)2·6H2O、CoSO4·7H2O和ZnSO4·7H2O对淡水发光菌一青海弧菌Q67(Vibrio qinghaiensis sp.-Q67)的发光抑制毒性.应用非线性最小二乘拟合技术模拟实验剂量-效应数据.结果表明,5种除草剂与4种重金属化合物的剂量-效应曲线(DRC)均可用Weibull函数有效表征.为了全面考察各种不同浓度组成的混合物对Q67的毒性,设计了9个组分同时存在的3个等效应浓度比(EECR)混合物和10个均匀设计浓度比(UDCR)混合物.同样应用微板毒性分析方法测定了各个混合物对Q67的抑制毒性,并应用非线性最小二乘拟合技术模拟了其剂量-效应曲线.通过剂量加和(DA)与独立作用(IA)模型综合分析了各个混合物对发光菌的毒性变化规律.结果表明,不同类型除草剂与多种重金属的各种浓度组合的混合物毒性均可用DA模型进行预测和评估.【总页数】7页(P237-243)【作者】宋晓青;刘树深;刘海玲;葛会林【作者单位】桂林工学院材料与化学工程系,桂林,541004;同济大学环境科学与工程学院,长江水环境教育部重点实验室,上海,200092;同济大学环境科学与工程学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,上海,200092;同济大学环境科学与工程学院,长江水环境教育部重点实验室,上海,200092【正文语种】中文【中图分类】X592【相关文献】1.部分离子液体及其混合物对发光菌的毒性作用 [J], 刘芳;刘树深;刘海玲2.部分重金属化合物对淡水发光菌的毒性研究 [J], 邓辅财;刘树深;刘海玲;莫凌云3.应用淡水发光菌研究二元重金属混合物的联合毒性 [J], 高继军;张力平;马梅;王子健4.部分重金属与酚类混合物对淡水发光菌的毒性研究 [J], 邓辅财;窦容妮5.二元含Hg(Ⅱ)重金属混合物对发光细菌的联合毒性 [J], 吴淑杭;周德平;徐亚同;姜震方因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重金属对水生生物的毒理作用
重金属对水生生物的毒理作用摘要：随着社会的不断地发展，人类片面追求经济效益，致使我们生存的环境日益恶化。
尤其是近年来，环境污染问题成了全世界各国家最关注的问题。
工业生产排放的“三废”物质、农业中杀虫剂、农药的大量使用、城市生活的废弃物等等，使我们的水环境受到各种有机污染物、无机污染物、重金属离子和放射性物质的污染，致使水生生物生存受到威胁。
其中重金属作为一类主要的污染物对水生生物的毒害作用，也日益受到人们的关注。
不为水生生物所必需如汞、镉、铅等不具备任何生理功能相反影响生物生长，以及如铜、锌、镍等在高离子浓度下，具有明显毒性。
水体中的过量重金属除直接对水生生物造成毒害外，还能经由生物体富集和食物链传递，通过海产品进入人体并造成危害。
世界八公害里的日本水俣病、痛痛病都是由重金属所引起的群体性疾病。
关键词：重金属，水污染，疾病随着工、农业的日益发展，人类赖以生存的环境受到越来越严重的干扰和破坏，各种环境污染问题凸显。
尤其是工、农业废水的排放，造成水体环境中重金属污染日趋严重；此外，大气尘粒的沉降和雨水对地面的冲刷，都使重金属进入江河湖泊中造成水体污染，毒害到水生生物乃至对人类的健康造成极大威胁。
相应水域的重金属污染日趋严重，水生生物的生存环境面临极大隐患。
水生生物对重金属的富集和累积作用，超过它们的承受能力，从而给它们的繁殖、发育、生长、生理机能等方面带来毒性危害；同时还造成它们遗传基因发生变异和突变，面临生存、物种多样性、免疫抵抗力等方面的挑战，也会对水产养殖业造成很大损失；重金属在水生生物的富集和积累并通过食物链最终传递给人，给人们身体健康带来危害。
因此，研究重金属对水生生物的毒害作用已刻不容缓，研究重金属对水生生物的毒性作用有很大的理论价值和经济意义。
1 重金属的来源、形态和理化特征1.1 重金属的来源所谓重金属，就是指密度大于5g/Cm3的金属，对于生物体而言，有些对于它们是必须的，如铜、铁、锌、镁、锰等，有些是非必须的，如镉、汞、铬、铅、镉等。
发光细菌在环境毒性检测中的应用[文献综述]
![发光细菌在环境毒性检测中的应用[文献综述]](https://img.taocdn.com/s3/m/cb334439960590c69ec376a6.png)
文献综述发光细菌在环境毒性检测中的应用前言目前对环境毒性的检测主要是用物理仪器和化学分析相结合的方法。
这类方法的优点是能准确定性和定量，但是其仪器设备往往价格昂贵，技术要求和使用成本很高，只能在实验室里使用毫无疑问，上述检测方法不能预测对人体的影响尤其是中长期的影响。
要回答对人群健康的影响，即对生物毒性大小的判断，必须用生物医学的方法对污染的生物毒性进行分析。
目前较常用的是检测污染物毒性的方法是从医学物理学的方法引用过来的小鼠，鱼，或藻类毒性实验，但其有不可克服的缺点，如时间长，要有专门的人员操作，成本高，个体存在差异等。
而应用发光细菌来检测污染物毒性则能克服这些缺点，具有快速，灵敏且容易进行等优点[1-2]。
在有毒物质的筛选和环境污染物的生态风险评价等方面具有重要意义[3]就当前，对发光菌的研究已转向应用方面，尤其是在环境毒物的检测上，这方面的论文每年都发表很多，数量很多，最近也有将发光菌应用于食品安全方面。
正文随着工农业的发展，排放到环境中的污染物质越来越多。
故在环境中各种污染物不是单独存在的，而往往是以组合形式存在的多种污染物混合在一起所造成的复合污染日益受。
到人们的重视，其往往表现出相加、拮抗和协同作用[45]。
因此促进了联合作用研究方法的发展。
混合污染物联合毒性研究始于1939[6]年，经过近70年的发展，已经成功发展了TU(毒性单位)法[7]、AI（加和指数）法[8]、MTI(混合毒性指数)法[9]及λ（相似参数）法[10]。
这些方法都能根据实验和相应公式的计算结果简单判别混合物的联合作用方式为拮抗、独立、相加及协同。
随着混合污染物联合毒性研究的不断深入，污染物联合毒性已经由最初的定性研究阶段向定量研究阶段过渡。
这些方法都能根据实验和相应公式的计算结果简单判别混合物的联合作用方式为拮抗、独立、相加及协同。
发光细菌在环境检测中的应用主要有检测水体污染毒性（主要包括海水污染的毒性检测，河流污染的水质检测，河流水质状况的检测，对排污口水质毒性的检测，城市污水毒性的评估，对工业废水的生物毒性检测，检测重金属污染的水质毒性，多种重金属存在时对发光菌的联合毒性等），检测河流，湖泊沉积物或底泥的毒性，检测大气污染，检测土壤污染，检测工业固体废弃物的毒性，还包括食品保鲜包装物毒性检测，和食品安全检测中的应用。
4种喹诺酮类抗生素对发光菌毒性作用研究
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ: quinolones; Photobacterium phosphoreum; single toxicity; joint toxicity; toxicity analysis
tagonisms of various extents existed among the multi￣mixture systems. Mechanisms of joint toxicity were prelimi￣
nary analyzed by characteristics of quinolones molecular structure and interaction of different substituent. The fur￣
的拮抗作用ꎮ 结合分子结构特征和不同取代基相互作用ꎬ初步分析了联合毒性机理ꎬ进一步的毒性作用机制还需通过对生物
生理生化反应等进行深入研究ꎮ 本研究多种 QNs 混合体系呈现拮抗作用为主ꎬ揭示了此类医药品在环境中的联合使用可能
导致药效降低以及微生物耐药性的产生和传播ꎮ
关键词: 喹诺酮类抗生素ꎻ发光菌ꎻ单一毒性ꎻ联合毒性ꎻ毒性分析
基金项目:国家自然科学基金项目(21477001) ; 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目( DC201502070302)
４ 种喹诺酮类抗生素对发光菌毒性作用研究
汪皓琦ꎬ 董玉瑛 *ꎬ 汪灵伟ꎬ 高玮岐ꎬ 邹学军
大连民族大学环境与资源学院ꎬ大连 116600
收稿日期:2017￣01￣03 录用日期:2017￣02￣20
摘要: 分析了 4 种常见的喹诺酮类抗生素(QNs)对发光菌(Photobacterium phosphoreum)的单一毒性和等毒性比例下的联合毒
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毕业论文开题报告环境工程4种重金属对发光菌的急性毒性和联合毒性研究一、选题的背景、意义随着工业农业的发展，大量污染物进入环境。
而重金属对环境的影响是巨大的，会对生态系统和人类健康产生潜在的长远的危害[1]，当然对重金属进行研究与毒性的测定也是刻不容缓的事。
并且，有环境危险因素对生态系统和人类健康的有害效应并不是单一污染物作用的结果，而是各种污染物混合作用的结果。
待测生物暴露在混合污染物中时，由于混合物中各组分相互影响，会产生联合毒性[2]作用，表现为加和作用、协同作用和拮抗作用[3-4]。
（一）首先，要保护环境，其中第一步就是正确监测环境污染的情况。
目前主要是用物理仪器和化学分析相结合的方法。
这类方法的优点是能准确定性和定量，但是其仪器设备往往价格昂贵，技术要求和使用成本很高，只能在实验室里使用，即使不考虑这些仪器的昂贵价格及其他不便因素，仍然有一个重要问题：这样的毒物泄露到底对人类的健康有多大危害？尤其是中，远期危害，上述检验是无法直接回答这个问题的。
要回答对人群健康的影响，即对生物毒性大小的判断，必须用生物医学的方法对污染的生物毒性进行分析。
目前较常用的是检测污染物毒性的方法是从医学物理学的方法引用过来的小鼠，鱼，或藻类毒性实验，但其有不可克服的缺点，如时间长，要有专门的人员操作，成本大，个体存在差异等。
而应用发光细菌来检测污染物毒性则能克服这些缺点，具有方便、灵敏、高效进行等优点而被广泛应用[5-6]，化合物对发光菌的毒性与对其它生物的毒性数据有一定的相关性[7]在有毒物质的筛选和环境污染物的生态风险评价等方面具有重要意义[8]。
而淡水发光菌-青海弧菌[9]，和海洋型发光菌不同，具有更优越的性质，其不要Na存在有能生长发光良好，并且，新鲜培养的青海弧菌能在蒸馏水里能良好发光，且稳定发光课持续30min以上，因此，在淡水样品的检测中可以用蒸馏水做空白对照。
而淡水样品也不需要做任何额外添加物，直接将青海弧菌加进去就行了。
此外，该细菌对环境的pH有较宽的适应范围，因而一般不需要对样品的pH做调整即可检验。
（二）其次，对于4种重金属[10]对发光菌的急性毒性和联合毒性研究在方法的选取上，使用单位毒性法，Tu法是以浓度相加为基础模式，判别方法简单，是最早研究联合毒性的方法，方法较为成熟。
在判别相加作用时具有较好的可靠性，曾得到较为广泛的应用。
Tu 法还可判断有机混合物联合毒性的强弱。
（三）四种重金属的选择:水中金属毒物汞，镉，铜，锌对人体健康危害较大，可以对人体造成急性中毒。
所以选择以上四种重金属做为研究对象二、相关研究的最新成果及动态（一）我国发光菌研究概况20世纪50时年代，在我国首次有人做了相关研究。
山东大学的薛庭耀教授对我国的发光菌做了报道，之后其又陆续对发光菌的生理做了相关研究，因此薛庭耀教授可能是我国最先对我国的发光菌做出研究的人。
之后20世纪70年代华东师范大学的生物系的杨颐康教授和叶履平副教授开展了对我国发光菌的研究，从海洋生物中分离了10个发光菌细菌菌株。
在20世纪80年代，华东师范大学发光菌研究组从我国海域上分离得到上千发光细菌，经分别鉴定有六个种。
值得一提的事，在青海省发现了发光细菌，经五年详细的坚定之后，发现了一个新的菌种，而且不需要NaCl就能生长和发光，是一种罕见的淡水型发光细菌，就是青海弧菌，还有相关很多学者对此进行研究，对发光菌的研究取得了很大的进展。
纵观近10年来关于发光菌的研究，国内大部分已转向应用方面，尤其是在环境毒物的检测上，这方面的论文每年都发表很多，数量很多，最近也有将发光菌应用于食品安全方面。
（二）发光菌检测法的应用由于L . B .T 技术具有应用范围广，灵敏度高、相关性好，反应速度快等优点，因而被广泛应用在环境监测中。
吴自荣等利用L.B.T技术快速分析大气污染，发现汽车尾气、香烟烟雾、氨气等对细菌发光有不同程度的抑制作用，时间效应、剂量效应明显。
Winger等对美国乔治亚州抓碱厂污染土坡进行L.B.T技术分析发现，其中主要毒性来自甲基汞和多抓联苯。
顾宗镰的研究表明随着离排污口距离不断增加，津杭运河水中污染物毒性下降，发光细菌的发光程度随之恢复。
Thomulk等对水源中20余种化合物进行毒性分析，表明明亮发光杆菌是水中低浓度有机毒物的有效指示生物。
L. B. T 技术除了在空气、土壤、水的监测中发挥重要的作用外，还被用于其它污染物的分析。
Yates等利用L.B .T 技术对黄曲祥毒素B,、桔霉素等8种毒素测得的毒性次序与哺乳动物细胞毒性试验结果一致。
Mantel等应用Co及X射线照射明亮发光杆菌，发现细菌发光强度随照射时间的延长、照射强度的增加而下降，提出将发光细菌作为一种衡量放射性生物效应的指示生物。
（三）混合污染物联合毒性研究混合污染物联合毒性研究始于1939[11年，经过近70年的发展，已经成功发展了Tu[12] (毒性单位)法AI(加和指数)法[13]、MTI(混合毒性指数)法[14]及入(相似参数)法[15]。
这些方法都能根据实验和相应公式的计算结果简单判别混合物的联合作用方式为拮抗、独立、相加及协同。
然而，随着新化学品的不断问世及联合毒性的复杂性和多变性，越来越多科学研究者发现这些方法只能定性判断污染物的联合作用方式，并不能判断其作用的程度，因此，他们呼吁联合毒性的研究必须进入到定量研究阶段。
从20世纪90年代始，混合污染物联合毒性研究有了一定的进展，先后提出以Tu和入为参数的定量研究方法和混合化合物的定量结构一活性相关M—QSAR[15]法，初步建立了M—QSAR的理论框架，但如何建立一套能有效定量预测混合物的毒性目前还一直是国内外研究的焦点三、课题的研究内容及拟采取的研究方法（技术路线）、难点及预期达到的目标（一）发光菌的发光机理细菌发光是在发光酶(Luciferase)的催化下由氧将长链脂肪醛氧化成脂肪酸，还原型黄素单核苷酸氧化成脱氢型黄素单核苷酸，同时将化学反应中的一部分能量以光的形式释放出来，光辐射的强度与酶的含量及底物的浓度呈正比，可简单概述为以下模式FMN H2 + O2 + RCHO 细菌荧光酶RCOOH + FMN + H2O + hν（二）研究方法早在1939年，Bliss在“毒物联合使用的毒性”一文中最早提到化学毒物之间存在“拮抗、独立、相加和协同四类作用”。
这也是一直以来较为公认和普遍采用的术语。
目前，判别这四类联合作用的毒性指标主要有毒性单位(TU)、加和指数(AJ)、混合毒性指数(MTI)和相似参数(入)等。
本实验选取毒性单位法毒性单位法（Toxic Unit）毒性单位（TU）这一概念最早由Sprague和Ramsay于1965年提出，他们在研究铜锌混合物对大马哈幼鱼的联合毒性时首次用毒性单位来表示化合物的浓度。
1975年，Marking 和Dawson[10]将这一概念推广到混合物的相加作用。
规定：TU=Ci/IC 50i 其中： Ci 是混合物中i 组分的浓度，IC50i 是珠峰的IC50值。
对于一个n 组分的混合物来说n n ni i IC C IC C IC C TU M 50...502215011+++==∑= M0=M/(TUi)max 根据各组分毒性单位之和M 值来评价混合物的作用类型。
式(1)中，Ci 为化合物i 的浓度；IC 50i 为化合物i 的IC50或LC50埘。
运用此公式对混合物联合作用的判断标准为：若M =1(定义TU=ΣTUi)，那么化学物之间呈相加作用；若M>Mo,学物之间呈拮抗作用；若M<I ，化学物之间呈协同作用；若M=Mo ，化学物之间为独立作用；若Mo>M>1，化学物之间呈部分加和作用。
（三）实验1.实验目的：利用淡水发光菌Q67发光值的测定方法，采用联合毒性单位法，在测定几种重金属单一毒性EC50的基础上，对重金属二元混合物的联合毒性进行评价。
2.实验材料(1).菌种青海弧菌Q67(2.)培养液KH 2P04 13.6mg ，Na 2HP04·12H 2O 35.8mg ，MgS04·7H 20 0.25g ，MgCl 2·6H 2O 0.61g ，CaCl 2 33.0mg ，NaCl 1.5g ，酵母浸出液 5.0g ，胰蛋白胨 5.0g ，甘油 3.0g ，溶于1000mL 蒸馏水。
(3).培养基培养液（按上述配方） 1000mL琼酯粉 16gPH 7.0±0.5(4).菌种的培养将装有冻干粉的安培瓶先置于4℃冰箱内约10～15min ，在超净工作台中切开安培瓶，取已灭菌的蒸馏水100uL点在培养皿平板上，用接种针取一环菌种蘸去点的溶液在平板上划线，倒置放于恒温培养箱中于22℃培养24h；挑取单个菌落接种于斜面培养基上，于22℃培养24小时候后转接于斜面，将培养好的第3代斜面置4℃冰箱备用；将培养好的菌种接种到50mL液体培养基中，22℃振荡培养16～24h，待用。
重金属盐（盐酸盐），分析纯2.实验方案分单因子，双因子实验，双因子实验以二二自由组合，以及极差R来衡量他们在这一体系中共存时对发光细菌发光大小的影响。
3.测试方法（1）单一毒性的测定方法将待测金属的盐酸盐分别用蒸馏水配成0.1％~1％德溶液浓度备用，以重金属的重量计算溶液浓度。
用发光菌菌液4ml,加入1ml不同浓度的重金属离子溶液，对照以1ml蒸馏水水取代重金属离子溶液，充分混匀，每种不同浓度的重金属离子溶液设2组平行。
10min时用生物毒性测试仪测定发光强度。
用直线内插法求出相对发光率为50％时所对应的化合物质量浓度，即为该种化合物对发光菌半数发光抑制质量浓度EC50。
每组质量浓度梯度设2个平行实验，标准偏差低于10％。
（2）联合毒性测定根据单一毒性试验结果，将四种重金属按毒性比1∶1设置联合毒性试验的质量浓度梯度，各混合体系的EC50。
测定方法与单一体系相同。
每组质量浓度梯度设2个平行实验，标准偏差不超过10％。
溶液的配制采用等毒性混合的方法，即混合物中各组分的毒性比(TR)等于l，每种混合物设置5个质量浓度组，l组空白对照（蒸馏水），每组2个平行样本。
四．论文详细工作进度和安排2010.11．20—2010．12．10查找相关资料，写文献综述。
2010．12．10—2009.12，30写开题报告，翻译英文文献。
2011.2.15—2009.3.1开题报告答辩开题报告整改，最后定题；确定实验方案。
2011.3.2—2011.5.10完成实验，撰写毕业论文。
2011.5.11—2011.5.30指导教师修改，评阅，评阅教师评阅，并整改，定稿，并完成PPT 的制作，准备论文答辩。