ANA检测的质量控制
ana谱检查报告怎么看
ana谱检查报告怎么看随着医疗技术的发展，人们对于自身的健康状况也越来越关注。
其中，ana谱检查是一种常见的检查方式，可以帮助医生在诊断患者病症时提供重要的辅助信息。
那么，ana谱检查报告中到底有哪些内容？又应该怎样去解读和理解呢？下面，本文将就此问题作出一些详细的介绍和解答。
一、ana谱检查的基本概念ana谱是一种抗核抗体组合检测方法，可以检测人体血清中存在的多种自身抗体。
这些抗体通常会对应着一些特定的疾病，比如红斑狼疮、硬皮病、结节性多动脉炎等等。
因此，ana谱检查可以帮助医生判断患者是否患有某种自身免疫性疾病，并且为后续的治疗提供一定的参考。
二、ana谱检查报告的基本内容一份完整的ana谱检查报告通常包含如下几个指标：1.抗核抗体（ANA）：ANA是指体内生成的抗核抗体的总和。
如果ANA检测结果为阳性，表明受检者体内存在自身免疫性问题。
2.滴度（TITER）：TITER是指检测过程中杂质被稀释的程度。
检查结果会根据稀释程度的不同而被划分为不同的等级。
一般情况下，抗核抗体的titer越高，说明体内抗体的含量越高。
3.抗体型号（PATTERN）：抗体类型是ANA检测报告中重要的一个指标。
它影响医生判断患者可能患有的疾病类型。
常见的抗体类型包括核环、核斑点、核纹理、间接荧光等等。
4.特异性指数（rati0）：特异性指数指在医学检查中，抗体检测结果与阳性标准的比值。
当特异性指数高于阳性标准值时，说明受检者体内存在某种自身免疫性问题。
三、ana谱检查报告的解读方法在解读ana谱检查报告时，需要注意以下几个问题：1.结果是否阳性：ana谱检查报告中最首要的指标就是抗核抗体是否为阳性。
如果检测结果为阳性，则需要进一步检查各项指标，找到具体的病因。
2.ana谱的抗体类型：不同的抗核抗体类型可能对应不同的疾病类型。
因此，医生在解读ana谱检查报告时，需要根据出现的抗体类型判断可能存在的疾病类型。
3.抗体滴度与特异性指数：抗体滴度越高，可能意味着体内抗体含量越高。
化学分析实验室检测结果的质量控制探析
化学分析实验室检测结果的质量控制探析化学分析实验室检测结果的质量控制是确保实验室检测结果准确可靠的必要手段。
质量控制包括实验前、实验中和实验后的一系列措施，目的是对实验过程进行监控，发现和排除可能导致误差的因素，并评估实验结果的准确性和可靠性。
在实验前，质量控制主要包括人员培训、设备校准和质控样品的准备。
实验室工作人员需要经过专业培训，掌握实验操作的正确方法和技巧，了解实验仪器的性能和使用方法。
实验仪器需要定期进行校准，确保其精度和准确度。
质控样品是已知组分和浓度的样品，用于验证实验方法的准确性和灵敏度，以及确保实验过程中没有出现任何偏差。
在实验中，质量控制需要对实验过程进行监控，包括样品的处理、试剂的配制、仪器的使用等。
样品的处理需要按照标准操作程序进行，遵循严格的操作规范。
试剂的配制需要准确称量和稀释，避免因误差导致实验结果的偏差。
仪器的使用需要按照操作手册进行，保持仪器的良好状态。
实验中还需进行空白试验和平行试验，以验证实验结果的准确性和重复性。
实验后的质量控制主要是对实验结果进行评估和分析。
对实验结果进行数据处理和计算，确保数据的准确性和可靠性。
然后，对实验结果进行质量评估，比较实验结果与质控样品的结果，检查是否存在偏差，并进行误差分析和校正。
生成实验报告，将实验结果反馈给用户或相关部门。
在质量控制中，还需要建立质量管理体系，包括标准操作程序、质量控制记录和纠正措施等。
标准操作程序明确实验操作的步骤和要求，保证实验过程的一致性和可控性。
质量控制记录用于记录实验过程中的各项数据和操作记录，便于回溯和审核。
纠正措施包括对出现偏差和错误的处理方法，以及改进实验方法和流程的措施。
ANA检测
54
细胞浆纤维型
EUROIMMUN
55
胞浆纤维型（1）： 抗肌动蛋白抗体类型
EURROOIIMMMUN
56
胞浆纤维型（2）： 抗波形蛋白抗体类型
EURROOIIMMMUN
57
胞浆纤维型（3）： 抗原肌球蛋白抗体类型
EURROOIIMMMUN
58
分裂期细胞阳性
EUROIMMUN
参与mRNA前体的剪切
硬化症:
5% - 10%
EUROIMMUN
39
核仁型（3）： PM-Scl类型
EURROOIIMMMUN
40
PM-Scl
抗原:
功能: 相关疾病:
几种多肽的复合物(分子量间于20-100kDa)，主 要的靶抗原为100 kDa
(与Scl-70不同)
不清楚
硬化症:
2% - 5%
19
nRNP和Sm
U1-nRNP结构模式图
蛋白成分
RNA 成分
U1
U2
U4
U5
U6
70K
70 kDa
◊
A
32 kDa
◊
A′
31 kDa
∗
B
26 kDa
+
+
+
+
+
B′
27 kDa
+
+
+
+
+
B′′
26.5 kDa
∗
C
18.5 kDa
◊
D
13 kDa
+
+
+
+
ana谱检查报告怎么看
ana谱检查报告怎么看ANA谱检查是自身免疫性疾病诊断的重要手段之一，通过检测人体内的抗核抗体水平，可以帮助医生判断是否存在自身免疫反应。
然而，对于大部分患者来说，ANA谱检查报告中的各项指标和所代表的意义往往让人感到困惑。
本文将尝试以通俗易懂的方式解读ANA谱检查报告，以帮助患者更好地理解自己的检查结果。
首先，我们需要了解ANA是什么。
ANA是抗核抗体的简称，是一种体内产生的抗体，特异性地与细胞核内的抗原结合。
正常情况下，人体会产生一定量的ANA，但如果其水平异常升高，就可能意味着存在某种自身免疫性疾病的可能。
在ANA谱检查报告中，最常见的指标是滴度和类型。
滴度指的是ANA阳性的程度，一般以1:40、1:80、1:160等表示，数值越高代表阳性程度越高。
而类型则表示抗核抗体对不同抗原的特异性。
常见的ANA类型包括抗dsDNA、抗Sm、抗RNP等等。
不同类型的抗体与不同的自身免疫性疾病相关联，因此对类型的分析有助于获取更具体的病情信息。
除了滴度和类型，ANA谱检查报告中还会标示抗体的荧光显示模式。
荧光显示技术是一种常用于ANA检测的方法，它通过荧光探针与抗体结合来展示抗体-抗原反应。
常见的荧光显示模式包括均质型、片块型、核膜型等等，不同的模式可以提供对不同自身免疫性疾病的提示。
在阅读ANA谱检查报告时，我们还需要关注一些辅助指标。
其中，补体水平是一项重要的指标。
正常情况下，补体是一种对细胞免疫反应具有重要作用的蛋白质。
而在自身免疫性疾病中，补体水平可能会降低。
因此，通过检测补体水平的变化，可以帮助确定自身免疫性疾病的可能性。
此外，还有一些其他指标如C反应蛋白（CRP）、沉积物等等也值得关注。
CRP是一种常见的急性炎症指标，它的升高可能与自身免疫性疾病的活动程度有关。
沉积物则是指通过离心沉淀后在尿液中的可见物，它与肾脏损伤等因素相关。
通过对这些辅助指标的观察，我们可以获取更多关于病情的线索。
需要注意的是，ANA谱检查结果仅仅是一个初步的筛查工具，不能单凭此结果作出诊断。
ANA的检测及临床应用
ANA的检测及临床应用ANA（Antinuclear Antibodies）的检测及临床应用一、简介1.1 ANA的定义和作用1.2 ANA的检测方法1.2.1 免疫荧光抗体法1.2.2 酶联免疫吸附试验法1.2.3 其他检测方法二、ANA的临床应用2.1 系统性红斑狼疮（SLE）的诊断2.1.1 ANA阳性和特异性抗体的检测2.1.2 ANA的亚型及其临床意义2.2 其他结缔组织病的诊断2.2.1 类风湿关节炎（RA）的诊断2.2.2 Sjögren综合症的诊断2.2.3 强直性脊柱炎的诊断2.3 非自身免疫性疾病的检测2.3.1 甲状腺疾病的检测2.3.2 肝炎感染的检测三、临床应用案例分析3.1 病例一、确诊SLE的ANA检测3.2 病例二、RA的ANA亚型分析四、结论ANA的检测对于自身免疫疾病的诊断和监测有着重要的意义。
不同的ANA亚型在不同疾病的临床应用中具有不同的特异性和敏感性，因此在临床实践中需要综合分析患者的临床症状、体征和其他实验室检验结果来进行综合判断。
附件：2、ANA检测操作流程指南法律名词及注释：1、免疫荧光抗体法：一种利用荧光标记的抗体来检测目标抗原的方法，常用于ANA的检测。
2、酶联免疫吸附试验法：一种将酶与抗原或抗体标记结合，通过酶的催化作用来检测目标抗原或抗体的方法，常用于ANA的检测。
3、特异性抗体的检测：针对某种特定抗原的抗体进行检测，可以帮助确定某种特定疾病的诊断。
4、ANA亚型：ANA的不同亚型具有不同的临床意义和特异性，可以帮助进一步确定疾病的类型和预后。
5、自身免疫性疾病：一类由于机体免疫系统异常产生的疾病，包括系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。
化学分析实验室检测结果的质量控制研究
化学分析实验室检测结果的质量控制研究化学分析实验室的质量控制是确保实验结果准确可靠的重要环节。
本文将对化学分析实验室检测结果的质量控制研究进行介绍和分析。
质量控制是指通过一系列的质量管理活动，以确保分析结果的准确性、可靠性和可再现性。
质量控制包括实验前、实验中和实验后的各个环节，主要目标是控制误差和提高分析结果的精确度和可靠性。
在实验前，质量控制主要包括校准、验证和标准物质的使用。
校准是通过标准溶液对仪器进行调整，以保证仪器的准确性和稳定性。
验证是对分析方法进行验证，确保方法的可靠性和适用性。
标准物质的使用是为了确认实验条件的准确性和实验结果的可靠性。
在实验中，质量控制主要包括实验操作的规范化和实验数据的采集和处理。
实验操作的规范化包括仪器操作的标准化、样品处理的标准化和实验条件的控制等，确保实验的可重复性和可比性。
实验数据的采集和处理包括对每个样品进行多次测定，计算平均值和标准差，评估结果的精确性和稳定性。
在实验后，质量控制主要包括结果的分析和报告的编制。
结果的分析主要是对检测数据进行统计学分析，判断实验结果的可靠性和合理性。
报告的编制主要是对实验结果进行整理和归档，确保实验数据的可追溯性和可重复性。
为了保证质量控制的有效性，化学分析实验室需要建立一个完善的质量管理体系。
这个体系包括质量目标的设定、质量控制的方案和程序的建立、人员的培训和考核、设备的维护和校准等。
通过持续改进，不断提高分析结果的准确性和可靠性。
化学分析实验室检测结果的质量控制研究是确保实验结果可靠的重要环节。
通过建立完善的质量管理体系，实施全面的质量控制措施，可以提高实验结果的准确性和可重复性，为科学研究和工业生产提供可靠的数据支持。
ANA、ANCA检测及临床应用
ANA、ANCA检测及临床应用ANA、ANCA检测及临床应用一、背景介绍1.1 自身免疫性疾病及其特点1.2 抗核抗体（ANA）检测1.3 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）检测二、ANA检测2.1 检测方法2.1.1 间接免疫荧光法（IIF）2.1.2 酶联免疫吸附试验（ELISA）2.1.3 其他方法2.2 检测结果解读2.2.1 异常阳性结果2.2.2 异常阴性结果2.3 临床应用2.3.1 系统性红斑狼疮2.3.2 混合性结缔组织病2.3.3 其他自身免疫性疾病三、ANCA检测3.1 检测方法3.1.1 间接免疫荧光法（IIF）3.1.2 酶联免疫吸附试验（ELISA） 3.1.3 其他方法3.2 检测结果解读3.2.1 异常阳性结果3.2.2 异常阴性结果3.3 临床应用3.3.1 小血管炎性肾病3.3.2 肺出血3.3.3 其他自身免疫性疾病四、附件五、法律名词及注释5.1 自身免疫性疾病：指机体免疫系统错误地攻击和破坏自身组织的疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。
5.2 抗核抗体（ANA）：指体液或组织细胞内存在的抗核抗体，是自身免疫性疾病的重要标志物。
5.3 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）：指血液中存在的抗中性粒细胞胞浆抗体，与多种自身免疫性疾病相关。
5.4 系统性红斑狼疮：一种以多系统损害为特征的自身免疫性疾病，常表现为皮肤损害、关节炎、肾脏损伤等。
5.5 混合性结缔组织病：一种以多系统受累为特点的自身免疫性疾病，包括系统性红斑狼疮、多发性肌炎、硬皮病等。
5.6 小血管炎性肾病：指血管壁的小动脉、小静脉和毛细血管发生炎症反应，导致肾脏损害的疾病。
5.7 肺出血：指肺组织内血管发生破裂，导致血液渗漏入肺泡或支气管，并引起咳嗽、咯血等症状。
为什么单项检测ANA易漏检
为什么单项检测ANA、ENA或抗ds-DNA抗体易漏检
1偶见ANA阴性而ENA阳性，结果是否有矛盾？
⑴原因所在：抗原的来源及检测对象的个体差异；ENA灵敏度比ANA较高。
ANA采用间接免疫荧光法，抗原为原汁原味的HEP-2细胞，可检测到100多种抗体，包括ENA抗体、抗ds-DNA抗体、核小体抗体（AnuA）等，如需细分，则要用纯化抗原。
HEP-2细胞其灵敏度较纯化抗原低。
标本弱阳性时易漏检，表现为：ANA阴性而ENA （SCL-70、JO-1、SSA或SSB抗体弱阳性）。
ENA采用酶免疫条带法，抗原为纯化抗原（亲和层析法提纯），高纯度、高浓度，其特异性、灵敏度较高，但只可检测RNP、Sm、SSA、SSB、SCL-70、JO-1抗体。
⑵建议：初诊患者特别是有临床症状者联合检测：ANA+ENA+ds-DNA+AnuA
更不宜单项检测ENA（只是ANA的一少部份抗体），至少要：ANA+ENA。
2 单项检测抗ds-DNA抗体是否满足需要？
抗ds-DNA抗体为SLE的特异性抗体，抗体滴度与疾病活动度存在相关性，因此抗体滴度的测定为监控治疗提供了有效的依据，但抗ds-DNA抗体阳性率偏低，且易受激素冲击治疗的影响。
阴性不能排除SLE的诊断。
而核小体抗体（AnuA）也是SLE的特异性抗体，目前认为核小体和核小体抗体（AnuA）在肾小球基底膜形成循环免疫复合物,是导致狼疮肾炎的又一途径，核小体抗体（AnuA）受激素冲击治疗的影响较少，可反映机体的免疫状况。
建议：监控治疗：抗ds-DNA抗体+核小体抗体（AnuA），
初诊患者：不宜单项检测抗ds-DNA抗体或AnuA。
ana谱检查报告怎么看
ana谱检查报告怎么看ANA（Anti-Nuclear Antibodies）谱检查报告是一种常用的血液检查，用于检测人体免疫系统是否产生了抗核抗体。
本文将介绍如何正确理解和解读ANA谱检查报告。
一、报告基本信息ANA谱检查报告通常包含以下几方面的基本信息：患者姓名、性别、年龄、检查日期、医院名称、医生签名等。
首先，我们可以根据患者个人信息了解到本次检查是属于哪位患者的，这对于后续的结果解读非常重要。
二、检测项目及结果1. 抗核抗体（ANA）定量结果ANA定量结果用于表示抗核抗体的浓度值，一般以降低或升高倍数的形式来表达。
正常情况下，ANA呈阴性，即未检测到抗核抗体的存在。
而如果结果为阳性，则意味着机体免疫系统可能存在异常活动。
2. 具体抗核抗体类型及水平ANA谱检查可以细分出多种抗核抗体的类型，如dsDNA、SSA、SSB等。
这些抗体的阳性结果可以与特定的自身免疫疾病相关联，如系统性红斑狼疮（SLE）多见于dsDNA抗体阳性，干燥综合征多见于SSA和SSB抗体阳性等。
阳性结果的水平（滴度）也可以提供一定程度的参考，但需要综合临床情况进行判断。
3. 抗核抗体染色模式ANA抗体的染色模式可以通过间接免疫荧光法进行观察。
常见的染色模式包括颗粒样、均匀样、独角兽样、斑点样等。
具体的染色模式与相关的自身免疫疾病之间也存在一定的关联。
通过观察染色模式，可以进一步了解患者免疫系统的异常情况。
三、结果解读与临床意义1. 阴性结果如果ANA谱检查结果均为阴性，通常表示不存在抗核抗体的异常产生，说明免疫系统较为正常。
但需要注意的是，某些自身免疫疾病可能在早期阶段抗体水平较低，此时阴性结果并不能完全排除相关疾病的可能性。
2. 单一阳性结果如果仅有某一种抗核抗体阳性，而其他类型均为阴性，建议进一步观察患者的临床表现和病史，以确定是否存在特定自身免疫疾病的可能性。
相应的专科医生应根据具体情况进行综合评估和诊断。
3. 多个阳性结果如果多种抗核抗体结果均为阳性，建议进一步详细了解患者的病史、体征及其他辅助检查结果，以确定是否存在系统性自身免疫疾病的可能。
ana谱检查报告怎么看
ana谱检查报告怎么看ANA(抗核抗体)是一种特殊的抗体，是人体免疫系统产生的抗体。
ANA检查用于诊断自身免疫性疾病，如红斑狼疮、系统性硬化症和类风湿性关节炎等等。
在此，我们就来了解一下ANA谱检查报告怎么看。
一、报告中的指标说明在ANA谱检查报告中，一般会包括以下指标：ANA、dsDNA、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、Sm等等，每个指标都代表了一个特定的抗体，与某些自身免疫性疾病有关。
二、报告中指标所代表的含义1. ANA(抗核抗体)ANA阴性表示没有抗体检测到，ANA阳性则表示检测到抗体。
但是ANA抗体阳性结果本身不能用于诊断特定疾病，需要结合其他指标、症状和病史来确定是否存在自身免疫性疾病。
2. dsDNA(双链DNA)dsDNA抗体阳性常见于系统性红斑狼疮(SLE)和其他自身免疫性疾病，是诊断SLE的重要指标之一。
3. SSA/SSBSSA和SSB抗体阳性常见于干燥综合征、系统性红斑狼疮和其他自身免疫性疾病。
4. Scl-70Scl-70抗体阳性常见于系统性硬化症(Systemic sclerosis)。
5. Jo-1Jo-1抗体阳性常见于多发性肌炎(MI)或周围血管疾病(PV)。
6. SmSm抗体阳性常见于系统性红斑狼疮。
三、ANA谱检查报告的诊断意义ANA谱检查报告的诊断意义在于帮助医生对某些自身免疫性疾病进行鉴别和诊断。
同时，对于病情评估和诊疗方案制定也有重要意义。
然而，就算ANA检测结果阳性，也不能轻易地诊断患者患有自身免疫性疾病。
实际上，大约5%健康人口中存在ANA阳性的情况，且随着年龄增加、感染或药物因素，全体健康人口ANA阳性率会逐渐升高。
因此，对于ANA阳性患者，需要针对其他症状和指标等进行全面的诊断分析，以明确是否存在自身免疫性疾病。
四、ANA检测注意事项1. ANA检测一般在空腹时进行。
2. 检测前应告知医师是否服用过免疫抑制剂、激素、抗生素、铬盐、黄原胶、抗组织胺等药物。
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11自身抗体检测的质量控制第二军医大学长征医院仲人前www.clinimmunchina.comrqzhong@yahoo.com21971年美国风湿病协会制定的SLE诊断标准
1. 脸颊红斑2. 盘状红斑3. 光敏型皮炎4. 口腔或鼻咽部溃疡5. 关节炎6. 浆膜炎：胸膜炎或心包炎7. 肾脏疾病（尿蛋白>0.5g/24h或+++ 持续，管型:红细胞、颗粒型）8. 神经系统异常：癫痫或精神病（除药物或其它原因）9. 血液异常（溶血型贫血或白细胞减少或淋巴细胞减少或血小板减少）
31982年美国风湿病协会制定的SLE诊断标准1. 脸颊红斑2. 盘状红斑3. 光敏型皮炎4. 口腔或鼻咽部溃疡5. 关节炎6. 浆膜炎：胸膜炎或心包炎7. 肾脏疾病（尿蛋白>0.5g/24h或+++ 持续，管型:红细胞、颗粒型）8. 神经系统异常：癫痫或精神病（除药物或其它原因）9. 血液异常（溶血型贫血或白细胞减少或淋巴细胞减少或血小板减少）10. 免疫学异常：dsDNA抗体阳性或LE细胞阳性或Sm抗体阳性或梅毒血清试验假阳性11. ANA阳性（无已知的药物诱导性狼疮）敏感度96.7% ；特异性96％41997年美国风湿病协会制定的SLE诊断标准
1. 脸颊红斑2. 盘状红斑3. 光敏型皮炎4. 口腔或鼻咽部溃疡5. 关节炎6. 浆膜炎：胸膜炎或心包炎7. 肾脏疾病（尿蛋白>0.5g/24h或+++ 持续，管型:红细胞、颗粒型）8. 神经系统异常：癫痫或精神病（除药物或其它原因）9. 血液异常（溶血型贫血或白细胞减少或淋巴细胞减少或血小板减少）
10. 免疫学异常：dsDNA抗体阳性或LE细胞阳性或Sm抗体阳性或磷脂抗体阳性(抗心磷脂抗体、或狼疮抗凝物、或梅毒血清试验假阳性) 11. ANA阳性（无已知的药物诱导性狼疮）
5Venus Williams1980.6.17185 cm, 75 kg43 champing titles597 win / 147 lostMichael Jackson1958.8.29 -2009.6.25180cm, 60kg2 times candidate for Nobel Peace62
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9自身抗体检测的质量控制—间接免疫荧光法（Hep2细胞）•初筛方法：间接免疫荧光法，底物是Hep2细胞。•在早期，自己制备Hep2细胞底物。现在已有商品化的产品，并得到标准化。•同样Hep2细胞，不同实验室检测结果不尽相同。10一、分析前的试剂和检测准备（一）HEp-2细胞¾玻片上细胞密度合适和分布均匀；¾有丝分裂细胞数：200倍高倍镜下每个视野至少有3-5个有丝分裂相细胞；¾形态学稳定；¾背景荧光
11注意：表达相关抗体的靶抗原；建议丙酮固定细胞（而不是甲醇或乙醇），从而保留足够的SSA(Ro)和nRNP抗原，以免洗涤时流失；•细胞含量多的：DNA, histones, Sm, nuclear RNP, and SS-B/La•细胞含量少的：SS-A/Ro, PCNA, RANA, and Ku antigens•以前ANA阴性SLE中常含SS-A/Ro抗体12（二）检测场所1.应有单独的区域进行检测操作和荧光显微镜观察；2.确保低水平的尘埃，这对免疫荧光实验室尤为重要；3.显微镜室至少能容纳二个人同时工作。带有高压汞灯的显微镜产热不少，故应通气良好；4.实验室计算机联网有利于简化工作程序和记录。LIMSEUROLabOfficeEUROPictureEUROStar II
DAS AP16 / 22IF-PS(Immunofluorescence Positioning System)3
13（三）标本采集和保存1.本实验用血清；2.血清保存在4◦C，72小时内可用；如保存于-20 ◦C或更低，可用时间则更长（不要反复冻融）一、分析前的试剂和检测准备14（四）抗人IgG荧光抗体用已知荧光图型和终点滴度的阳性血清进行连续稀释而确定工作稀释度工作稀释度30－60μg/ml特异抗体含量
≥0.1抗体/蛋白比值约3.0，比值增高可增加非特异性着染或滴度FITC/蛋白比值IgG特异性；亦可用多价结合物，但可检测到较多的无临床意义的抗体同种特异性
抗人IgG荧光抗体推荐特性
一、分析前的试剂和检测准备
15二、检测程序（一）标本处理1.分析前程序并非关键。但对溶血、脂血和黄疸应作记录，因有可能影响检测系统(增强非特异荧光背景)；2.分析过程必须按照厂方说明进行；3.孵育时间、标本稀释或缓冲系统的差异均能影响结果，故应对方法学进行确认。标本处理过程常在常温下进行（20-24◦C）。4.如同时用不同厂家产品，必须注意使用统一的玻片、缓冲系统及二抗等；165.注意过期日期及试剂的正确贮存条件。如二抗，贮存不当会导致自身抗体效价明显下降；6.建议实验室各自建立每种玻片的最佳容量并写入SOP中；7.每个孵育过程应放在潮湿箱内以防标本干燥；8.PBS稀释的血清加在单层HEp-2细胞上，绝不能溢出到邻近区域。孵育时间常为30分钟，随后用PBS洗涤三次，每次10分钟；
179.洗涤时，先用缓冲液冲洗玻片上每个反应区域以便去除所有的血清或二抗，然后再放在装有缓冲液的玻璃容器内洗涤；10.加二抗后，孵育30分钟，再洗涤。在FITC标记的二抗中加0.01 g/L Evans Blue有助于出现清晰的荧光信号；11.试验结束时，用PBS配制的80%甘油作为封固剂覆盖在玻片上；12.没必要对反应区域进行清洁或烘干；13.读片后，玻片置于冰箱，可保存24小时。如要保存更长时间，可将玻片密封包好置−20◦C 。18（二）血清稀释1.抗体筛查时常以厂商声明的最低稀释度稀释血清。多数试剂盒常将稀释度定在以下条件：即95%正常对照为阴性，但能检测出诊断性抗体；
2.阳性结果时，血清进行等比稀释。如操作和读片结果均正确时，滴度比厂商声明最低稀释度以上者具诊断意义。最低稀释度常视为分界线，多数情况在此滴度不具诊断特异性。4
19（三）质控品1.阳性和阴性质控品应如同标本一样进行相同的操作过程；每次试验应有一个弱阳性质控品(比Cut-off值高一个稀释度ANA阳性血清)；2.对于重要的荧光图型，每隔一定间隔，应采用疾病特异的自身抗体阳性质控品；3.阳性质控品有商品化的，也可实验室自己制备；4.理想化的是应用商品化或CDC的特定质控品；5.强力建议各实验室根据国家标准和指南，参加独立于供应商的室间质评，如http://www.ukneqas.org.uk。20（四）显微镜1.400倍高倍镜可对图型精确评价。首先判断荧光强度；应重视有丝分裂，以便明确荧光存在及基本图型；2.光强度不应低于50-watt汞灯。目前发光二极管（LED）常被用作光源。寿命为100-300小时的汞灯逐渐被能持续稳定发光10,000小时以上的LED所替代。更换灯泡后，应对显微镜作一定的调整；3.荧光强度的标准化还未成功。有关研究，如特定的灰色滤镜、标准化的荧光小珠、基于计算机的图像分析程序等还在进行过程中。
21（五）ANA参考物（标准品）WHO 66/233：1、均质型、IgG特异性ANA、100 IU/ml2、制备: 枸橼酸化血浆，加CaCl(0.01 mol/L) and 2 epsilon-amino-n-caproicacid (0.013 mol/L)，4C过夜，离心，0.50 mL分装、-70C保存、冰冻干燥、封口22三、结果的评价和解释1.HEp-2细胞含有多种检测抗原，常可检出胞核、胞浆和混合型抗体。检验报告中必须描述每个图型及其滴度；2. 有的图型具疾病相关性，也可提示做特异性免疫检测。如遇到图型不典型、意义不明确，也应在检验报告中有注解以便临床医师知晓；
233. 可将抗核抗体（ANA）分为几种基本图型，连续不同的稀释度可分清混合型抗体中单个抗体。检验报告应由资深人员出具，这些人员应经常性参加自身免疫诊断程序培训；4. 为提出诊断和鉴别诊断，抗体筛查后，应以高度纯化的抗原（天然或重组的）进行特异性免疫检测（放射、酶标、印迹等方法）；5. 诊断报告应包括可能的靶抗原、荧光图型及其滴度的描述。总之，应含有有助于诊断的信息，如对结果的评价，而不是简单的“ANA阳性”。6. 应建立自己的参考区间，以年龄40岁为界。24注意事项1.年龄和性别2.诱发ANA药物（phenytoinsodium, hydralazine等）
3.滴度与参考人群4.核型（不同稀释度时可有改变）5.癌症5
2526•Homogeneous or diffuse staining of the nucleus--histonesand deoxyribonucleoprotein
•Rim and fibrillarstaining of the nucleus--anti-DS DNA
•Speckled or particulate staining of the nucleus-Fine speckled pattern, chromosome-negative
-Course speckled pattern, chromosome—negative-Discrete speckled, chromosome (centromere
specificity)-positive•Nucleolarstaining•Unique patterns-Spindle fiber pattern, chromosome-positive
-Pseudocentromerepattern-Midbodypattern-Centriolepattern-Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) pattern-Antinuclear membrane (nuclear laminae)•Cytoplasmic-Mitochondrial (AMA) pattern
-Golgiapparatus pattern-Lysosomalpattern-Ribosomal pattern-Cytoskeletalpattern
27ANA属受控分析，可接受的结果为靶值＋2个稀释度；每批邮寄的5个样品中必须有4个为可接受结果。特异性ANA不是受控分析，可接受结果的标准由能力验证提供者制定能力验证实验室必须有一个现行有效的机制来发现、确认问题并采取相应纠正措施质量控制要求每年对每个人进行能力评估，包括试验操作、读片和报告结果能力评估本实验是高度复杂试验，条令规定参与本试验的最低要求：实验室主任（博士学位），技术主管（博士学位、硕士学位，或有经验的学士学位）；临床顾问、主管或技术人员（相关学历）人员美国有关本方法的条令要求28ANA检测流程疑有系统性自身免疫病如SLE、硬皮病、干燥综合征、多发性肌炎/皮肌炎时，特别是出现以下表现：关节炎胸膜炎或心包炎光敏性皮疹肾脏功能异常免疫性溶血性贫血血小板减少或中性粒细胞减少皮肤病变（硬皮病、皮肌炎、血管炎）肌炎的临床和实验室变化雷诺现象神经症状