实验五 食品中沙门氏菌的检验
沙门氏菌检测实验报告
沙门氏菌检测实验报告沙门氏菌检测实验报告一、引言沙门氏菌是一种常见的细菌，可以引起人类和动物的食物中毒。
为了确保食品安全，及时检测沙门氏菌的存在非常重要。
本实验旨在通过检测食品样品中的沙门氏菌，探究食品安全的保障措施。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 食品样品：我们选取了市场上常见的鸡蛋作为实验样品。
- 培养基：使用含有沙门氏菌生长所需营养物质的培养基。
- 实验器材：培养皿、移液管、显微镜等。
2. 实验方法：- 样品处理：将鸡蛋表面消毒后，取一部分样品涂抹在培养皿上。
- 培养：将培养皿置于恒温培养箱中，以适宜的温度孵育。
- 观察：观察培养皿上是否有沙门氏菌的生长。
- 显微镜观察：将培养皿中的细菌取出，放在显微镜下观察其形态特征。
三、实验结果经过一段时间的培养，我们观察到培养皿上出现了一些类似沙门氏菌的菌落。
为了确认这些菌落是否真的是沙门氏菌，我们进行了显微镜观察。
结果显示，这些菌落具有沙门氏菌的典型形态特征，包括短而粗的杆状细胞和鞭毛等。
四、讨论通过本实验，我们成功地检测出了食品样品中的沙门氏菌。
这一结果表明，市场上的鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
沙门氏菌是一种能够在人体内引起食物中毒的致病菌，因此，我们需要采取相应的措施来确保食品安全。
目前，食品安全已成为社会关注的焦点之一。
为了减少沙门氏菌的污染，我们可以从以下几个方面入手：1. 加强食品生产环节的卫生管理，包括饲养环境的清洁和规范、饲料的质量监控等。
2. 提高消费者的食品安全意识，教育大众正确处理和烹饪食品的方法，避免生食或未煮熟的食物。
3. 增加食品检测的频率和范围，加强对食品生产企业的监管，及时发现和处理存在问题的食品。
综上所述，沙门氏菌检测实验的结果表明鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
为了保障食品安全，我们需要加强对食品生产环节的管理和监督，提高消费者的食品安全意识，并加强食品检测的力度。
只有通过全社会的共同努力，才能确保食品的安全和健康。
简述沙门氏菌的检验流程
简述沙门氏菌的检验流程
当然可以，让我用更简单的话说说怎么检查沙门氏菌吧：
唤醒细菌：首先，从食物或者其他样本里取一点点（比如一小块肉或者一些蔬菜），放到一种能让细菌“醒过来”和长大的特殊水里。
然后，让它们在适合的温度下美美地“睡”上一晚。
帮好菌壮大多起来：第二天，从第一步得到的溶液里取点液体，转移到两种特别设计的“营养餐”里，一种是让沙门氏菌特别喜欢的，另一种是考验它们的。
接着，再让它们各自在一个暖暖的地方长一长。
找不同：等细菌长得差不多了，挑一点出来涂在几种颜色不一样的“细菌专属培养皿”上，这些盘子能帮助我们看清楚哪些是沙门氏菌。
确认身份：在培养皿上，我们会看到各种小点点，这些是细菌长出来的。
挑几个可疑的小点，做些小实验，看看它们的行为像不像沙门氏菌，甚至用专门的“血液测试”来确认是不是真的沙门氏菌家族的。
高科技快速验证（如果需要）：有时候，为了更快更准，我们会用一种叫做PCR的技术，直接检查细菌的DNA，就像用指纹一样确定它们的身份。
整个过程就像是在众多的细菌中找出沙门氏菌这个“嫌疑犯”，确保我们的食物安全，或者帮助医生诊断疾病。
食品中沙门氏菌检验
在酸性条件下菌落中心产生H2S(SS培养基）
医学ppt
9
• 生化反应
–乳糖（-），葡萄糖（+）/+，多数H2S+，动 力+，尿素（-）
• 抗原结构
–O抗原——特异性低、稳定、分群（组）
–H抗原——特异性高，不稳定，分型
–Vi抗原（毒力抗原）——不稳定，可阻止 “O”凝集
• 抵抗力 不强
医学ppt
对人类有致病性 ▪ 肠热症——伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、
肖氏沙门菌、希氏沙门菌 ▪ 食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、
肠炎沙门菌 ▪ 败血症——猪霍乱沙门菌最常见
医学ppt
2
生物学性状
形态染色
符合肠杆菌特点，革兰氏染色阴性短杆菌，无荚 膜，无芽胞，多数有鞭毛(周生毛菌)，有动力 （也有无动力的变种）。
增菌（血、骨髓）→EMB、SS→生化反应→血清 鉴定
医学ppt
15
血清学诊断——肥达反应（Widal）
• 原理 用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H 抗原，以及
引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝 集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效 价。（TO、TH、PA、PB）
• 方法：试管凝集法（定量） TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才 有意义
食品中肠道致病杆菌的检验
第一节 沙门氏菌检验
医学ppt
1
沙门氏菌（Salmonella）是肠杆菌科中最复杂的 菌属,1880年Eberth首先发现伤寒沙门氏菌，1885 年Salmon与Smith又分离出猪霍乱沙门氏菌，以后 取名Salmon氏之名为本菌属属名。已发现近2000 个血清型，我国已发现近200个血清型。
沙门氏菌检验
实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述：1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。
2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。
3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。
冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。
意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。
在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。
因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
二、操作步骤：1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。
5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。
主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。
三、实验过程：1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。
（样品液变浑浊即可）2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内，于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。
如果菌株生长过慢（TTB 培养基需现配现用，每组制备40ml增菌液，需加入816uL的碘液后再加入前增液）。
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。
2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。
3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。
5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。
需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析一、简介沙门氏菌是一种能引起人类和动物肠道感染的细菌，也可以引起食品中毒。
它主要通过食品、饮用水和接触感染物传播。
对于食品中的沙门氏菌进行检验和分析，对保障食品安全至关重要。
二、检验方法1.纳氏肠杆菌培养基法用纳氏肠杆菌培养基法检验食品中的沙门氏菌，是一种常用的方法。
它利用富含养分的培养基，使得沙门氏菌能够在培养基中迅速生长，并形成典型的菌落。
检验人员可以根据菌落的形态、颜色和大小等特征来识别沙门氏菌的存在。
2.血液平板培养法血液平板培养法是另一种常用的检验方法。
将待测样品涂抹在富含养分的血液平板上，再将平板置于恒温培养箱中培养一段时间，观察是否有典型的沙门氏菌菌落的产生。
3. PCR法PCR法是一种较为快速、敏感的检验方法。
通过PCR技术可以快速对样品中的沙门氏菌进行检测，结果准确可靠。
这种方法对实验条件和检验人员的要求较高，但可以提高检测的速度和准确性。
三、分析结果通过上述方法进行检验后，需要进行有关分析。
针对检验结果，进行有关的分析可以有效地判断食品中是否存在沙门氏菌污染，并确定污染的程度。
1. 菌落计数通过检验方法得到的菌落数可以反映食品中的沙门氏菌污染程度。
一般来说，菌落数越多，说明沙门氏菌污染越严重。
2. 菌株鉴定对分离出的菌株进行鉴定，可以确定其是否为沙门氏菌。
根据鉴定结果，可以进一步分析菌株的来源和特性。
3. 毒素检测有些沙门氏菌会产生毒素，对食品中的毒素进行检测，可以确定食品中是否存在具有毒素产生能力的沙门氏菌。
四、实验注意事项在进行沙门氏菌检验及分析时，有一些实验注意事项需要遵守。
1. 实验室操作检验和分析工作要在严格的实验室条件下进行，保证实验室内的环境洁净，避免交叉污染。
2. 操作规范操作人员要求严格遵守相关操作规程，使用消毒剂对实验仪器、培养基和工作台进行处理。
3. 实验安全在进行检验和分析实验时，要注意个人防护，避免因接触致病菌而导致感染。
五、应用领域沙门氏菌检验及分析在食品安全领域具有广泛的应用。
第五章沙门氏菌的检验ppt课件
血平板：中等大小、灰白色菌落。
生物学特性
生化反应：
不发酵乳糖和蔗糖，不产生吲 哚，不分解尿素，VP试验阴 性，大多产生硫化氢。发酵葡 萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤 寒杆菌产酸不产气外，其他沙 门氏菌均产酸产气。
ONPG －
沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验
非沙门氏菌
报告
沙门氏菌在BS平板上
沙门氏菌在HE平板上
沙门氏菌的TSI试验
三糖铁（TSI）琼脂试验
本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气（变黄）；产生硫化氢 （变黑）。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸 ，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物， 故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍 保持黄色。
商品化生化鉴定系统
API 20E API 20E 生化鉴定 是根据快速酶促反应 及代谢产物的检测技 术发展的一种细菌编 码鉴定法，广泛应用 于临床、食品中革兰 氏阴性杆菌的快速鉴定。
API 20E
第1位数
O AL N DD P HC G
第2位数 第3位数 第4位数 第5位数
O CI H U T
1、未接种 2、尿素酶阳性 3、尿素酶阴性
KCN生长试验
右：抑制生长
沙门氏菌在TSI和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的结果
斜面 底层 产气 硫化氢 赖氨酸脱羧酶 初步判断
K A ＋(－ ) ＋(－ )
＋
K A ＋(－ ) ＋(－ )
沙门氏菌的实验报告
沙门氏菌的实验报告沙门氏菌的实验报告引言：沙门氏菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，尤其是在动物体内。
它是引起人类食物中毒的主要病原菌之一。
为了更好地了解沙门氏菌的特性和对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验。
实验一：沙门氏菌的分离与培养我们从市场购买了一份新鲜鸡蛋，并在实验室中进行了分离与培养的操作。
首先，我们将鸡蛋表面进行消毒处理，然后用无菌的工具将鸡蛋壳上的细菌刮取到培养基上。
接着，我们将培养基置于恒温箱中，控制温度和湿度，以促进沙门氏菌的生长。
经过一段时间的培养，我们成功地分离出了纯净的沙门氏菌菌落。
实验二：沙门氏菌的形态观察为了观察沙门氏菌的形态特征，我们使用了光学显微镜对其进行了观察。
在显微镜下，我们发现沙门氏菌呈杆状或球状，大小约为0.5至1.5微米。
沙门氏菌具有鞭毛，使其能够在液体中快速移动。
此外，我们还观察到沙门氏菌菌落呈灰白色或淡黄色，有时会形成粘液。
实验三：沙门氏菌的生长条件为了确定沙门氏菌的适宜生长条件，我们进行了一系列的实验。
首先，我们将沙门氏菌接种于不同温度的培养基上，发现其最适宜生长的温度为37摄氏度。
此外，我们还研究了沙门氏菌在不同pH值下的生长情况，结果显示其最适宜生长的pH值为6.5至7.5。
这些实验结果为控制沙门氏菌的生长提供了重要的参考。
实验四：沙门氏菌的致病机制为了研究沙门氏菌对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验来探索其致病机制。
首先，我们将沙门氏菌接种于小鼠体内，并观察其对小鼠的影响。
结果显示，被感染的小鼠出现了食欲不振、腹泻和发热等症状。
进一步的实验表明，沙门氏菌通过侵入人体细胞并释放毒素来引起病症。
这些实验结果为预防和治疗沙门氏菌感染提供了重要的依据。
实验五：沙门氏菌的控制方法为了控制沙门氏菌的传播和感染，我们进行了一些实验来研究其控制方法。
首先，我们发现煮沸可以有效地杀死沙门氏菌，因此在食物加工过程中要确保充分的加热。
此外，我们还研究了一些抗生素对沙门氏菌的抑制作用，结果显示某些抗生素可以有效地抑制其生长。
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实验五食品中沙门氏菌的检验
一、实验目的要求
1、了解食品的质量与沙门氏菌检验的意义。
2、掌握沙门氏菌的生物学特性。
3、掌握沙门氏菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。
4、掌握沙门氏菌属血清学试方法。
5、掌握食品中沙门氏菌检验的方法和技术。
二、原理
沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。
种类繁多，少数只对人致病。
其他对动物致病，偶尔可传染给人。
主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。
在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。
食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。
目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。
三、试剂和仪器
（一）最先准备的器材
规格名称数量用途
1、500ml广口瓶1个稀释样品
2、500ml三角瓶1个制缓冲蛋白胨水
3、250ml三角瓶8个制增菌液、培养基
4、15×150mm试管18支制三糖铁培养基和PH7.2尿素
5、13×130mm试管30支制蛋白胨水等
6、1ml移液管5支
7、10ml移液管 2 支
8、直径为90 mm平皿12套制BS、SS平板
9、250ml量筒1支
（二）应灭菌的其它器材
剪刀1把不锈钢汤匙1把称量纸适量
（三）应准备的培养基和试剂
培养基总量所用容器
1.缓冲蛋白胨水(BP)：1瓶225ml/瓶500ml三角瓶
2.氯化镁孔雀绿(MM)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
3.亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
4.亚硫酸铋琼脂(BS)：4皿1瓶60ml/瓶250ml三角瓶
5.SS琼脂：6皿1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
6.三糖铁琼脂：6支6ml/支 40 ml 15×150mm试管
7.尿素琼脂(pH7.2)：6支4ml/支 25 ml 15×150mm试管
8.蛋白胨水：6支2ml/支 20 ml 13×100mm试管
9.氰化钾(KCN)培养基：6支4ml/支 30 ml 13×130mm试管
10.氨基酸脱羧酶试验培养基（赖氨酸）：6支1ml/支 10 ml 13×130mm试管
11.氨基酸脱羧酶试验培养基（不含赖氨酸）：6支 1ml/支 10 ml 13×130mm试管
12.沙门氏菌因子血清：多价血清；11种因子血清。
按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
四、实验内容
样品处理→→前增菌→→选择性增菌→→选择性平板分离→→生化学试验→→血清学试验鉴别→→结果报告
第一天样品处理和增菌培养
（一）样品处理
1、加工过的样品：
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
称取检样25g，加在装有225mL
缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000～10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，备用。
2、未加工样品：
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
各取25g(25mL)加入灭菌生理盐水25mL，按前法做成检样匀液，备用。
（二）、前增菌和增菌
1、加工过的样品：
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
●接种操作：将混均匀的稀释样液放在36±1℃培养4h(干蛋品培养18～24h)；移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18～24h。
同时，另取10mL，转种于100mL亚硒酸盐肮氨酸增菌液（SC）内。
●培养：于36±1℃培养18～24h。
2、未加工样品：
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
●接种操作：取25mL匀液，接种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫磺酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养24h；另取25mL接种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）内
●培养操作：于36±1℃培养18～24h。
第二天接种选择性平板进行分离培养
（一）分离培养
●接种操作：取前天增菌培养的增菌液1环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板（BS）和一个DHL琼脂平板(或HE琼脂平板、WS或SS琼脂平板)。
两种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。
●培养操作：于36±1℃分别培养18～24h(DHL、HE、WS、SS)或40～48h(BS)，观察各个平板上生长的菌落。
第三天观察分离结果，从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂、蛋白陈水、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)和赖氨酸脱羧酶试验培养基
(一)、观察分离结果
典型的沙门氏菌菌落形态如下：
A、在HEKTOEN氏肠道菌（HE）琼脂上。
菌落呈兰绿至兰色，带或不带黑色中心。
许多沙门氏菌培养物可呈现大的光泽黑色中心或几乎全部黑色的菌落。
B、亚硫酸铋（BS）琼脂上。
产硫化氢的菌落为黑色，有时带有金属光泽，呈褐色，灰色或黑色。
菌落周围的培养基通常开始呈褐色，但伴随培养时间的延长而变为黑色，并有所谓的晕环效应。
C、SS琼脂上：
无色半透明；产硫化氢菌株，有的菌落中心带黑色。
（二）、五项生化试验
●接种操作：
1、接种三糖铁琼脂：从选择性琼脂平板上，直接挑取2个或更多个菌落，分别接种三糖铁琼脂。
用一空白培养基作对照试验。
用灭菌接种针轻轻地接触每个菌落中心部位，接种TSI斜面，先在斜面上划线，再于底层穿刺。
不需灼烧接种针，接种后面四项生化培养基。
2、接种蛋白陈水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和赖氨酸脱竣酶试验。
各用一空白培养基作对照试验。
接种三糖铁琼脂的同时，再接种蛋白陈水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基及对照培养基各1管。
●培养操作：于36±1℃培养18～24h，必要时可延长至48h。
●革兰氏染色与镜检：从平板上挑取可疑菌落进行革兰氏染色与镜检
第四天观察五项生化试验结果，判断沙门氏菌属性，做血清学试验
（一）、观察五项生化试验结果
1、在三糖铁琼脂内，符合沙门氏菌属种的反应结果见表1。
在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢(H 2S)阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能。
2、符合沙门氏菌属的五项生化试
按表2判定结果，沙门氏菌属五项生化试的结果应符合A1、A2和B1，其他反应结果均可以排除。
表2 沙门氏菌属种生化反应初步鉴别表
符合反应序号A 1，为沙门氏菌属典型反应，判定为沙门氏菌属细菌。
如尿素琼脂
(pH7.2)、氰化钾(KCN)
和赖氨酸脱羧酶试验三项中，有一项异常，按表3可判定沙门氏菌：
表3
（二）、血清学分型鉴定 1、抗原的准备
一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。
O 血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2.5%一3%)培养基上再检查；如果是由于Vi 抗原的存在而阻止了O 凝集反应时，可挑取菌苔于1mL 生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。
H 抗原发育不良时，将菌株接种在0.7%～0.8%半固体琼脂平板的中央，候菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1～2次，自远端取菌培养后再检查。
2、O 抗原的鉴定
操作：用A ～F 多价O 血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。
在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。
玻片凝集试验图
被A～F多价O血清凝集者，依次用O4；O3、10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集试验。
根据试验结果，判定O群。
被O3、10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集试验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应根据O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清进行核对。
不被A～F多价O血清凝集者，先用57种或163种沙门氏菌因子血清中的9种多价O 血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O 群。
每种多价O血清所包括的O因子如下：
O 多价 1 A，B，C，D，E，F群(并包括6，14群)
O 多价 2 13，16，17，18，21群
O 多价 3 28，30，35，38，39群
O 多价 4 40，41，42，43群
O 多价 5 44，45，47，48群
O 多价 6 50，51，52，53群
O 多价 7 55，56，57，58群
O 多价 8 59，60，61，62群
O 多价 9 63，65，66，67群
五、思考题
1、如何提高沙门氏菌的检出率？
2、沙门氏菌在三糖铁培养基上的反应结果如何？解释这些现象？
3、沙门氏菌检验有哪5个基本步骤？
4、食品中能否允许有个别沙门氏菌存在？为什么？。