实验五 食品中沙门氏菌的检验
实验五食品中沙门氏菌的检验
一、实验目的要求
1、了解食品的质量与沙门氏菌检验的意义。
2、掌握沙门氏菌的生物学特性。
3、掌握沙门氏菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。
4、掌握沙门氏菌属血清学试方法。
5、掌握食品中沙门氏菌检验的方法和技术。
二、原理
沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。种类繁多，少数只对人致病。其他对动物致病，偶尔可传染给人。主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。
食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。
三、试剂和仪器
（一）最先准备的器材
规格名称数量用途
1、500ml广口瓶1个稀释样品
2、500ml三角瓶1个制缓冲蛋白胨水
3、250ml三角瓶8个制增菌液、培养基
4、15×150mm试管18支制三糖铁培养基和PH7.2尿素
5、13×130mm试管30支制蛋白胨水等
6、1ml移液管5支
7、10ml移液管 2 支
8、直径为90 mm平皿12套制BS、SS平板
9、250ml量筒1支
（二）应灭菌的其它器材
剪刀1把不锈钢汤匙1把称量纸适量
（三）应准备的培养基和试剂
培养基总量所用容器
1.缓冲蛋白胨水(BP)：1瓶225ml/瓶500ml三角瓶
2.氯化镁孔雀绿(MM)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
3.亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
4.亚硫酸铋琼脂(BS)：4皿1瓶60ml/瓶250ml三角瓶
5.SS琼脂：6皿1瓶100ml/瓶250ml三角瓶
6.三糖铁琼脂：6支6ml/支 40 ml 15×150mm试管
7.尿素琼脂(pH7.2)：6支4ml/支 25 ml 15×150mm试管
8.蛋白胨水：6支2ml/支 20 ml 13×100mm试管
9.氰化钾(KCN)培养基：6支4ml/支 30 ml 13×130mm试管
10.氨基酸脱羧酶试验培养基（赖氨酸）：6支1ml/支 10 ml 13×130mm试管
11.氨基酸脱羧酶试验培养基（不含赖氨酸）：6支 1ml/支 10 ml 13×130mm试管
12.沙门氏菌因子血清：多价血清；11种因子血清。按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
四、实验内容
样品处理→→前增菌→→选择性增菌→→选择性平板分离→→生化学试验→→血清学试验鉴别→→结果报告
第一天样品处理和增菌培养
（一）样品处理
1、加工过的样品：
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。称取检样25g，加在装有225mL
缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内。固体食品可先应用均质器以8000～10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，备用。
2、未加工样品：
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。各取25g(25mL)加入灭菌生理盐水25mL，按前法做成检样匀液，备用。
（二）、前增菌和增菌
1、加工过的样品：
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
●接种操作：将混均匀的稀释样液放在36±1℃培养4h(干蛋品培养18～24h)；移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18～24h。同时，另取10mL，转种于100mL亚硒酸盐肮氨酸增菌液（SC）内。
●培养：于36±1℃培养18～24h。
2、未加工样品：
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
●接种操作：取25mL匀液，接种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫磺酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养24h；另取25mL接种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）内
●培养操作：于36±1℃培养18～24h。
第二天接种选择性平板进行分离培养
（一）分离培养
●接种操作：取前天增菌培养的增菌液1环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板（BS）和一个DHL琼脂平板(或HE琼脂平板、WS或SS琼脂平板)。两种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。
●培养操作：于36±1℃分别培养18～24h(DHL、HE、WS、SS)或40～48h(BS)，观察各个平板上生长的菌落。
第三天观察分离结果，从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂、蛋白陈水、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)和赖氨酸脱羧酶试验培养基
(一)、观察分离结果
典型的沙门氏菌菌落形态如下：
A、在HEKTOEN氏肠道菌（HE）琼脂上。
菌落呈兰绿至兰色，带或不带黑色中心。许多沙门氏菌培养物可呈现大的光泽黑色中心或几乎全部黑色的菌落。
B、亚硫酸铋（BS）琼脂上。
产硫化氢的菌落为黑色，有时带有金属光泽，呈褐色，灰色或黑色。菌落周围的培养基通常开始呈褐色，但伴随培养时间的延长而变为黑色，并有所谓的晕环效应。
C、SS琼脂上：
无色半透明；产硫化氢菌株，有的菌落中心带黑色。
（二）、五项生化试验
●接种操作：
1、接种三糖铁琼脂：从选择性琼脂平板上，直接挑取2个或更多个菌落，分别接种三糖铁琼脂。用一空白培养基作对照试验。
用灭菌接种针轻轻地接触每个菌落中心部位，接种TSI斜面，先在斜面上划线，再于底层穿刺。不需灼烧接种针，接种后面四项生化培养基。
2、接种蛋白陈水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和赖氨酸脱竣酶试验。各用一空白培养基作对照试验。
接种三糖铁琼脂的同时，再接种蛋白陈水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基及对照培养基各1管。
●培养操作：于36±1℃培养18～24h，必要时可延长至48h。
●革兰氏染色与镜检：从平板上挑取可疑菌落进行革兰氏染色与镜检
第四天观察五项生化试验结果，判断沙门氏菌属性，做血清学试验
（一）、观察五项生化试验结果
1、在三糖铁琼脂内，符合沙门氏菌属种的反应结果见表1。
在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢(H 2S)阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能。
2、符合沙门氏菌属的五项生化试
按表2判定结果，沙门氏菌属五项生化试的结果应符合A1、A2和B1，其他反应结果均可以排除。
表2 沙门氏菌属种生化反应初步鉴别表
符合反应序号A 1，为沙门氏菌属典型反应，判定为沙门氏菌属细菌。如尿素琼脂
(pH7.2)、氰化钾(KCN)
和赖氨酸脱羧酶试验三项中，有一项异常，按表3可判定沙门氏菌：
表3
（二）、血清学分型鉴定 1、抗原的准备
一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。
O 血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2.5%一3%)培养基上再检查；如果是由于Vi 抗原的存在而阻止了O 凝集反应时，可挑取菌苔于1mL 生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H 抗原发育不良时，将菌株接种在0.7%～0.8%半固体琼脂平板的中央，候菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1～2次，自远端取菌培养后再检查。
2、O 抗原的鉴定
操作：用A ～F 多价O 血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。
玻片凝集试验图
被A～F多价O血清凝集者，依次用O4；O3、10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集试验。根据试验结果，判定O群。被O3、10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集试验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应根据O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清进行核对。
不被A～F多价O血清凝集者，先用57种或163种沙门氏菌因子血清中的9种多价O 血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O 群。每种多价O血清所包括的O因子如下：
O 多价 1 A，B，C，D，E，F群(并包括6，14群)
O 多价 2 13，16，17，18，21群
O 多价 3 28，30，35，38，39群
O 多价 4 40，41，42，43群
O 多价 5 44，45，47，48群
O 多价 6 50，51，52，53群
O 多价 7 55，56，57，58群
O 多价 8 59，60，61，62群
O 多价 9 63，65，66，67群
五、思考题
1、如何提高沙门氏菌的检出率？
2、沙门氏菌在三糖铁培养基上的反应结果如何？解释这些现象？
3、沙门氏菌检验有哪5个基本步骤？
4、食品中能否允许有个别沙门氏菌存在？为什么？
沙门氏菌的检验过程
沙门氏菌的检验 因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。从食品中分离和鉴定沙门氏菌，当前通用的方法学分5个步骤： 1.前增菌-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。 2.选择性增菌-在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。 3.选择性平板分离-这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。 4.生物化学筛选-排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。 5.血清学技术提供了培养物菌种的鉴定。 这五个步骤代表理想状况。不过一个有经验的检验员，可能在一个或几个步骤中看出特性和差别。 目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。 三、从食品中分离沙门氏菌样品的制备 下面的方法是以25g样品为检测单位，样品：肉汤为1∶9的比例。除非另有说明，根据混合程度，加足够的肉汤保持1∶9的比例。对不需准确称量检测的样品，例如：田鸡腿，可参看特定方法说明。 1、干蛋黄、干蛋白、干全蛋、液奶（去脂牛奶，含2%脂肪牛奶，全脂奶，和脱脂奶）、粉状调制食品（蛋糕，甜饼，炸面圈，饼干和面包）、婴儿食品、口食或软管进食含蛋的食品：
检验前的冷冻样品最好不要解冻。如果冷冻样品必须软化以获取待检测部分，则尽可能迅速的解冻所需部分，使竞争菌数少增加或降低沙门氏菌的可能损伤。解冻需在45℃以下，有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min或在 2�5℃，18小时内解冻。无菌操作称取25g样品，放入灭菌带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其他合适的容器内。非粉状的样品，加入225mL灭菌乳糖肉汤。如果制品是粉状，加入约15mL灭菌乳糖肉汤，用灭菌玻璃棒，匙或灭菌压舌器搅拌，使成均匀悬液。再加3份乳糖肉汤10mL，10mL，190mL，使总量为 225mL。充分搅拌，直到样品完全悬浮没有团块为止。盖紧瓶盖在室温静置 60min。振摇使充分混匀，用试纸测定pH值。必要时用灭菌的1NNaOH或 1NHcl调节pH至6.8±0.2。在测定最终pH前要盖紧瓶盖并充分混匀。然后将瓶盖旋松约1/4圈，置35℃培养24±2小时。以下步骤按四，1-10进行。 2、蛋类： A、含壳蛋：用硬刷子在水流下刷洗蛋。把蛋在含0.1%十二烷酸磺酸钠（SDS）的200ppm氯离子溶液中浸泡30min。加8mL 5.25%次氯酸钠到含1g SDS的992mL蒸馏水中，制备200ppm cl-/0.1%SDS溶液。这种消毒剂需在使用前临时制备。无菌操作打开蛋，使用灭菌的蛋分离器，弃去蛋白。无菌操作称取25g蛋黄到灭菌的500mL锥型瓶或其他合适容器内。加225mL胰胳胨（胰化物）大豆肉汤（TSB），并振荡充分混匀。在室温下静置60分钟。振摇使其充分混匀，用试纸测定pH值。必要时调节pH值至6.8±0.2，置35℃培养24±2小时，以下步骤按四，1-10继续。 B、液全蛋（均状）：无菌操作称25g置于无菌的500mL锥形烧瓶或其它合适容器中。加225mLTSB并振荡充分混匀。按上面所述继续。 C、煮硬的蛋（鸡蛋，鸭蛋或其他蛋类）：目前，不知道蛋白中的沙门氏菌抑制因子是否具有热稳定性。因此，无菌操作分离蛋白和蛋黄。称取25g粉状蛋黄固体到无菌500mL锥型瓶或其他合适容器中。加225mLTSB并旋转充分混匀。按上面所述继续。 3、脱脂乳粉
沙门氏菌检验
实验六食品中沙门氏菌的检验 一、概述： 1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。 2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。 3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。 意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。 二、操作步骤： 1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。 2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。 3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。 4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。 5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。 主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。 三、实验过程： 1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。（样品液变浑浊即可）
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法 沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。 1. 培养分离 沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。 2. 生化检测 生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。 3. 血清学检测 血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。
4. 分子生物学方法 分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏 菌基因的特定片段，从而进行检测。核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。 总结： 沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。
沙门氏菌检验程序
沙门氏菌检验程序 沙门氏菌是一种常见的致病微生物，能引起人类和动物的感染疾病。 因此，在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。下面 我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。 1. 样品采集 对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。例如，食品样品 需要在加工、贮存和分配之前采集，以确保沙门氏菌检验的准确性。 样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。 2. 样品处理 根据不同的样品类型和特性，采用不同的处理方法。例如，对于牛奶、鸡蛋等液态食品，需要进行破坏性处理，以确保沙门氏菌的释放。对 于土壤、粪便等样品，需要进行外层细菌的去除处理。 3. 培养培养基 选择含有适当氧气和营养物质的培养基，如SS（Salmonella-Shigella）培养基、XLD（Xylose-Lysine-Desoxycholate）培养基等。将样品分
别接种到不同的培养基上。 4. 培养 将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。将温度设定为37°C至42°C，进行18小时至24小时的培养。在培养过程中观察样品的生长和变化。 5. 分离 取出培养好的样品进行观察。将预处理样品浸泡在缓冲液中，将溶液 过滤。过滤的溶液留下来，转移到盘子上。用肉眼观察菌落的形态， 观察不同菌落的特点。根据菌落的特点进行分离。 6. 鉴定 在鉴定步骤中，需要进行各种化学试剂处理，如氧化氢酶测试、葡萄 糖测试等。同时需要使用专业仪器，如API试剂盒、ELISA试剂盒等。通过这些鉴定手段，确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。 7. 结论 最后，根据检测结果得出客观和准确的结论，以便针对食品、水源或
沙门氏菌的检验方法与注意事项
沙门氏菌的检验方法与注意事项 在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在 每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培 养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！ 一、沙门氏菌检测的原因和意义 根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的 人是通过沙门氏菌造成的。人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就 会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副 伤寒。而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个 过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。 二、沙门氏菌的检验 （一）前增菌(无选择性) BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生 理状态。 （二）选择性增菌 TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够 对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养
基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒 沙门氏菌依旧可以生长。SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏 菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与 硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠 埃希氏菌的繁殖生长。 （三）分离培养基(选择性) ①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌 进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借 助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对 光可看到金属光泽。BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果 开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。 ②HE琼脂内的溴麝香草酚兰、胆盐、去氧胆酸钠等，可对革兰氏阳性菌繁殖 进行抑制；将檬酸铁铵与硫代硫酸钠运来检验H2S的形成，导致菌落中心为黑色；酸性复红及溴麝香草酚兰属于pH指示剂，发酵糖产酸的菌落表现橙黄色，不发 酵糖菌落表现蓝绿色。HE不可以高压灭菌，开水煮应在1分钟之内，通过水浴方 式冷却，可以储存24小时。 ③通常在对沙门氏菌进行快速筛选、分离时，采用沙门氏菌显色培养基。其 原理主要是通过沙门氏菌显色基团和特异性酶的独特反应，游离出色原，进而将 沙门氏菌于培养基上表现出相应的颜色，而其他肠道杆菌颜色则不一样。 三、沙门氏菌检验的注意事项 （一）前增菌和二次增菌必不可少 食物内含有的沙门氏菌通常不多，且会同时存在很多菌种，前增菌能够恢复 受损菌，而增菌能够对部分杂菌的繁殖进行有效抑制，因此通过前增菌及增菌实 施筛选、培养操作，能够提高后续培养分离的检出率。 （二）注意典型或可疑沙门氏菌菌落
沙门氏菌检验步骤
沙门氏菌检验步骤 引言： 沙门氏菌是一种常见的致病菌，可以通过食物、饮水、接触传播等途径引起人类感染。为了及时检测和预防沙门氏菌感染，科学家们开发了一系列的检验步骤。本文将介绍沙门氏菌检验的详细步骤，以帮助读者更好地了解和应对这一疾病。 一、样本采集： 沙门氏菌检验的第一步是采集样本。常见的样本来源包括食物、粪便、尿液、血液等。通过正确采集样本，可以保证后续检验的准确性。 二、样本处理： 采集到的样本需要进行处理，以提取潜在的沙门氏菌。处理的方法主要包括离心、过滤、稀释等。这一步的目的是将样本中的沙门氏菌浓缩到一个较小的体积中，方便后续的培养和检测。 三、培养： 处理后的样本需要进行培养，以使沙门氏菌得到生长。常用的培养基包括MacConkey琼脂、XLD琼脂等。将样本均匀涂布在琼脂培养基上，并在适宜的温度下孵育。沙门氏菌通常在37摄氏度下生长，因此需要将培养基放置在恒温箱中。
四、形态鉴定： 沙门氏菌在琼脂培养基上形成典型的菌落，通过观察菌落的形态特征可以初步判断是否为沙门氏菌。沙门氏菌的菌落通常呈现灰白色、凹陷的特点。此外，还可以通过显微镜观察菌体形态，沙门氏菌的形态为革兰氏阴性杆菌。 五、生化试验： 形态鉴定只能初步判断是否为沙门氏菌，为了进一步确诊，需要进行生化试验。常用的生化试验包括气体产物检测、酶反应检测等。通过观察沙门氏菌在不同培养基中的反应情况，可以准确判断是否为沙门氏菌。 六、分子检测： 生化试验可以初步确诊沙门氏菌感染，但为了提高检测的敏感性和准确性，科学家们还开发了分子检测方法。这些方法主要包括PCR、实时荧光PCR等。通过检测沙门氏菌特有的基因序列，可以快速准确地诊断沙门氏菌感染。 七、药敏试验： 沙门氏菌感染对抗生素的敏感性存在一定的差异，因此药敏试验是非常重要的一步。通过将沙门氏菌培养在含有不同抗生素的培养基中，观察菌落的生长情况，可以确定沙门氏菌对抗生素的敏感性，从而指导临床治疗。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析 沙门氏菌是一类常见的食源性病原微生物，引起的沙门氏菌感染会导致沙门氏菌病， 主要症状包括腹泻、发热、恶心呕吐等。为了确保食品安全，对食品中沙门氏菌的检验及 分析显得尤为重要。 沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。传统培养法是将食品样品 转移到含有适当营养物质的培养基上进行培养，通过观察形状、颜色及生长情况来鉴别沙 门氏菌的存在。分子生物学方法则是借助PCR技术，通过特定引物扩增沙门氏菌的DNA片段，进而进行检测与鉴定。 沙门氏菌的分析主要包括对菌株的鉴定与分型。鉴定主要通过形态学、生理特性及生 化试验等方法，确定该菌株是否为沙门氏菌。分型则是通过分子生物学方法，如多重引物 随机扩增多态性DNA分析（MLVA）、多重引物PCR分型（MLST）等，对沙门氏菌进行分型，进一步了解其遗传多样性及流行病学相关信息。 沙门氏菌的检验标准主要参考国家标准或行业标准，如《食品安全国家标准沙门氏菌检验》（GB 4789.4-2016）、《食品微生物学沙门氏菌检验方法 GB/T 4789.5-2013》等。这些标准明确了样品的采集方法、培养条件及检测指标等，确保了检验结果的准确性。 在食品安全监测中，沙门氏菌的检验通常应用于肉制品、蛋制品、禽肉及水产品等食 品中。在取样时，应注意避免污染或交叉感染，同时需确保样品代表性。样品取回后，应 尽快送达实验室进行检测，避免菌落生长过于旺盛，影响检验结果。 沙门氏菌的检验结果的解读需要参考相关标准。通常来说，如果样品中沙门氏菌的检 出数目超过规定标准，则判定为阳性，表示该样品存在沙门氏菌污染，不符合食品安全要求。反之，如果检测结果未能检出沙门氏菌，则判定为阴性，表示该样品符合食品安全要求。 沙门氏菌的检验与分析是确保食品安全的重要环节。通过合适的检验方法和分析技术，能够准确判断食品样品是否存在沙门氏菌污染，并提供科学依据来保障大众健康。
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌的检验步骤 沙门氏菌是一种常见的食物中毒细菌，它可以引起沙门氏菌属感染。 所谓的沙门氏菌属包括两个物种：Salmonella enterica和Salmonella bongori。这两个物种又包含了超过2,500种不同的血清型。 为了检测食物或其他样本中是否存在沙门氏菌，通常需要进行以下步骤： 1.样本收集：收集来自可疑食物或其他可能被污染的样品，如肉、蛋、奶制品、水果、蔬菜或动物粪便。确保采集样品的方法是无菌的，以避免 污染。 2.前处理：对样本进行适当的前处理，以提高沙门氏菌的检测效果。 这可能包括样品的预处理、样品的培养基中添加抑菌剂等。 3. 培养：将样品接种于适宜的培养基上，如XLD（Xylose Lysine Deo某ycholate Agar）或SS（Salmonella Shigella Agar）等。这些培 养基可以选择性地识别并培养Salmonella属的细菌。 4.孵育：将培养皿放入恒温培养箱，通常是在37℃左右，孵育时间 一般为24至48小时。 5.形态特征观察：观察培养基上菌落的形态特征，如形状、颜色、大 小等。沙门氏菌通常形成呈灰白色、圆形、凹陷的菌落。 6.血清型鉴定：对沙门氏菌进行血清学鉴定以确定其血清型。这通常 涉及到使用抗体和相应的血清反应，以确定菌株的亚型。 7.生化测试：对阳性菌落进行生化测试，如甲烷糖发酵试验和硫化氢 产生试验，以进一步确认其鉴定。
8.PCR检测：PCR是目前常用的沙门氏菌检测方法之一、它利用聚合酶链反应（PCR）技术，检测样品中的沙门氏菌DNA。 9.分子的子类型分析：通过分子生物学技术，如基因测序、脉冲场凝胶电泳（PFGE）或肽核酸类似程序分析（AFLP），确定沙门氏菌的亚型。 总之，沙门氏菌的检验步骤包括：样本收集、前处理、培养、孵育、形态特征观察、血清型鉴定、生化测试、PCR检测和分子的子类型分析。这些步骤的目的是确认样品中是否存在沙门氏菌，并确定其类型和亚型，以便采取相应的预防和控制措施。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析 沙门氏菌是一种常见的细菌，它是一种肠道中存在的病原菌，也是一种会引起食物中 毒的细菌。因此，对食品中是否含有沙门氏菌的检测显得尤为重要。本文将讨论沙门氏菌 的检验及分析。 一、沙门氏菌的检测方法 1、培养方法：沙门氏菌可以在常规的培养基上培养，最常用的是含有胆汁、钠氯和 肉汤的液体培养基。为了增强提取沙门氏菌的准确性和产出，一些特定的选择性平板可以 使用，例如MacConkey平板、SS平板或XLD平板。 2、分子生物学方法：PCR检测法是最常见的分子生物学方法之一，它能够检测出非常小的沙门氏菌种群，而不用传统的培养方法。PCR检测法在物质的检测、生命科学和分子 检测等方面发挥着巨大的作用，因此在沙门氏菌检测中也是一个十分重要的检测方法。 二、沙门氏菌的分析方法 1、食物检测法：针对某些食品如肉制品、低酸奶、蛋制品等，一般采用已经证实的 正式方法来进行检测。一些具有特异性和高敏感性的方法包括文化方法、免疫学方法和分 子生物学方法等。 2、环境检测法：针对食品制作过程中的环境样品进行检测。这些样品中可能包括牛 奶或鸡蛋残留的菌种和接触制造食品的各种人员的手、口腔及袍子等菌群。检测方法类似 于食物检测法，包括文化方法、免疫学方法和分子生物学方法。需要注意的是，一些细菌 可能不能够在环境样品中明显存在，这会使得结果有所偏差。 三、沙门氏菌的风险控制方法 1、仔细洗涤食品：消费者在购买食品时应仔细阅读标签，确保食品是新鲜的。同时，食品应洗涤干净以去除可能存在的菌群。 2、食品加热：食品加热是消灭沙门氏菌最常用的方法。保健专家建议将肉品煮至中 间部位温度达到160°F（71°C），这可确保煮熟并杀死存在的细菌。 3、储存要注意：沙门氏菌喜欢在潮湿、潮湿的环境中繁殖。所以，消费者最好将食 品储存在干燥的地方，并注意食品的过期日期。 结论：
沙门氏菌检测操作步骤
沙门氏菌检测操作步骤 沙门氏菌是一种常见的细菌，其存在于许多环境中，包括食物、水源和动物体内。由于沙门氏菌可能引起严重的食物中毒症状，因此对其进行检测和控制非常重要。在本文中，我将介绍沙门氏菌检测的操作步骤，以帮助您了解如何进行有效的沙门氏菌检测。 1. 选择适当的检测方法 在进行沙门氏菌检测之前，首先需要选择适当的检测方法。常见的检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。传统培养法需要将样品在富含营养物的培养基上培养并观察有无沙门氏菌生长。分子生物学方法利用PCR技术检测沙门氏菌的DNA，而免疫学方法则使用抗体来检测沙门氏菌的存在。根据您的需求和实验条件，选择合适的检测方法非常重要。 2. 样品采集 在进行沙门氏菌检测之前，需要采集样品。这些样品可以是食物、水源、表面物体或动物组织。确保在采集样品之前，正确消毒采样工具以避免任何污染。确保将样品收集到干净、密封的容器中，以避免污染和交叉感染。 3. 样品准备
收集样品后，需要进行适当的样品准备以便于后续的沙门氏菌检测。 对于食物样品，可以使用均匀悬浮液方法将样品与适当的缓冲液混合 均匀。对于水样或表面物体样品，可以使用封闭的容器直接收集样品。对于动物组织样品，需要先将样品进行处理，如挤压、切割或研磨， 以获得足够的样品量进行检测。 4. 样品分析 根据选择的检测方法，进行相应的样品分析。如果使用传统培养法， 可以将样品转移到含有适当培养基的培养皿中，并进行孵育。培养过 程中，需要注意培养皿的环境条件，如温度、pH值和氧气含量。如果使用分子生物学方法，可以提取样品中的DNA，并使用PCR技术进 行检测。如果使用免疫学方法，可以使用特定的抗体与样品中的沙门 氏菌结合，然后观察是否发生免疫反应。 5. 结果解读 根据样品分析的结果，进行结果解读。对于传统培养法，可以观察培 养皿中是否有沙门氏菌的典型形态或颜色变化。对于分子生物学方法，可以通过PCR扩增的产物的大小和带状图样来判断是否存在沙门氏菌的DNA。对于免疫学方法，可以观察样品中是否有与抗体结合的颜色变化或免疫反应发生。 总结： 沙门氏菌检测是一项重要的操作，可以帮助我们确保食物和环境的安
食品微生物检验技术W4304沙门氏菌检验-检验操作程序及要点-传统鉴定-5-微测试
《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微测试 一、单选题 1、沙门氏菌检验时，取BPW培养物1mL 接种到10mL的TTB中于（）℃±1℃培养18~24h？ A、36 B、28 C、41.5 D、42 参考答案：D 难度：低 2、沙门氏菌检验时需挑取（）个以上典型或可疑菌落接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基（） A．1 B．2 C．3 D．4 参考答案：B 难度：低 3、沙门氏菌检验时用到的色氨酸肉汤是来做哪个生化试验的？ A、三糖铁 B、赖氨酸脱羧酶 C、氰化钾 D、靛基质 参考答案：D 难度：中 二、多选题 1、沙门氏菌检验的5项生化试验包含以下哪几个？（）
A、三糖铁 B、靛基质 C、尿素 D、VP 参考答案：ABC 难度：中 三、判断题 1、沙门氏菌检验室将接种后的TTB增菌液和SC增菌液都置于36 ℃培养18 h～24 h。 参考答案：F 难度：中 2、沙门氏菌氰化钾试验时无需设置空白对照。 参考答案：F 难度：低 四、填空题 1、沙门氏菌的分离鉴定要在里的内进行。 参考答案：BSL-2实验室，生物安全柜 难度：中 2、沙门氏菌检验时，反应序号A1后三项全符合，直接判定沙门氏菌阳性，后三项指的是、、。 参考答案：赖氨酸脱羧酶、氰化钾、尿素 难度：中 五、问答题 1、沙门氏菌血清学鉴定的步骤有哪些？ 参考答案： （1）在玻片上划出两个区域，分别标记对照和O抗原，从营养琼脂上挑取 1 环待测菌，各放1/2 环于玻片上的每一区域上部， （2）在标记为O抗原的区域下部加 1 滴O抗血清（或H抗血清），在标记为对照区域的下部加入1 滴生理盐水，作为对照。
沙门氏菌检验
沙门氏菌检验 1.范围 本法适用于食品中沙门氏菌的检验。 2.设备和材料 处微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：冰箱：2℃～5℃。 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。 均质器。 振荡器。 电子天平：感量。 无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。 无菌吸管：1mL（具刻度）、10mL（具刻度）或微量移液器及吸头。无菌培养皿：直径90mm。 无菌试管：3mm×50mm、10mm×75mm。 无菌毛细管。 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 全自动微生物生化鉴定系统。 3.培养基和试剂 缓冲蛋白胨水（BPW）。 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液。 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液。 亚硫酸铋（BS）琼脂。 HE琼脂。 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂。 沙门氏菌属显色培养基。 三糖铁（TSI）琼脂。 蛋白胨水、靛基质试剂。 尿素琼脂（）。 氰化钾（KCN）培养基。 赖氨酸脱羧酶试验培养基。 糖发酵管。 邻硝基苯β-D-半乳糖苷（ONPG）培养基。 半固体琼脂。 丙二酸钠培养基。 沙门氏菌O和H诊断血清。 生化鉴定试剂盒。 4.检验程序 沙门氏菌检验程序见图1。
42℃±1℃，18h～24h 36℃±1℃，18h～24h 36℃±1℃，40h～48h 36℃±1℃，18h～24h 图1 沙门氏菌检验程序 5.操作步骤 前增菌 称取25g（mL）样品放入盛有225mL BPW 的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min 均质1min～2min，或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至±.无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h～18h。 如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。
食品微生物学检验沙门氏菌检验(三)
食品微生物学检验沙门氏菌检验（三） 5.5.1 抗原的预备普通采纳1.2%～1.5%琼脂培养物作为玻片凝集实 验用的抗原。O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2%～3%)培养基上再检查；假如是因为Vi抗原的存在而阻挡了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.55%～0.65%半固体琼脂平板的中心，俟菌落扩散生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有 0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1次～2次，自远端取菌培养后再检查。 5.5.2 多价菌体抗原(0)鉴定在玻片上划出2个约1cm×2cm的区域， 挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体(O)抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对比。再用无菌的接种环或针分离将两个区域内的菌落研成乳状液。 将玻片倾斜摇动混合1min,并对着黑暗背景举行观看，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。 5.5.3多价鞭毛抗原(H)鉴定同5.5.2。 5.5.4 血清学分型(选做项目) 5.5.4.1 0抗原的鉴定用A～F多价O血清做玻片凝集实验，同时用生理盐水做对比。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。被A～F多价O血清凝集者，依次用O4；O3、O10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集实验。按照实验结果，判定O 群。被O3、O10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集实验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应按照O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清举行核对。不被A～F多价O血清凝集者，先用9种多价O血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O群。每种多价O血清所包括的O因子如下： 5.5.4.2 H抗原的鉴定属于A～F各O群的常见菌型，依次用表6所述H因子血清检查第1相和第2相的H抗原。表6 A～F群常见菌型H抗原表不频繁的菌型，先用8种多价H血清检查，如有其中一种或两种血清凝集，则再用这一种或两种血清所包括的各种H因
沙门氏菌检测实验报告
沙门氏菌检测实验报告 沙门氏菌检测实验报告 一、引言 沙门氏菌是一种常见的细菌，可以引起人类和动物的食物中毒。为了确保食品安全，及时检测沙门氏菌的存在非常重要。本实验旨在通过检测食品样品中的沙门氏菌，探究食品安全的保障措施。 二、实验材料和方法 1. 实验材料： - 食品样品：我们选取了市场上常见的鸡蛋作为实验样品。 - 培养基：使用含有沙门氏菌生长所需营养物质的培养基。 - 实验器材：培养皿、移液管、显微镜等。 2. 实验方法： - 样品处理：将鸡蛋表面消毒后，取一部分样品涂抹在培养皿上。 - 培养：将培养皿置于恒温培养箱中，以适宜的温度孵育。 - 观察：观察培养皿上是否有沙门氏菌的生长。 - 显微镜观察：将培养皿中的细菌取出，放在显微镜下观察其形态特征。 三、实验结果 经过一段时间的培养，我们观察到培养皿上出现了一些类似沙门氏菌的菌落。为了确认这些菌落是否真的是沙门氏菌，我们进行了显微镜观察。结果显示，这些菌落具有沙门氏菌的典型形态特征，包括短而粗的杆状细胞和鞭毛等。 四、讨论 通过本实验，我们成功地检测出了食品样品中的沙门氏菌。这一结果表明，市
场上的鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。沙门氏菌是一种能够在人体内引起食物中毒的致病菌，因此，我们需要采取相应的措施来确保食品安全。 目前，食品安全已成为社会关注的焦点之一。为了减少沙门氏菌的污染，我们可以从以下几个方面入手： 1. 加强食品生产环节的卫生管理，包括饲养环境的清洁和规范、饲料的质量监控等。 2. 提高消费者的食品安全意识，教育大众正确处理和烹饪食品的方法，避免生食或未煮熟的食物。 3. 增加食品检测的频率和范围，加强对食品生产企业的监管，及时发现和处理存在问题的食品。 综上所述，沙门氏菌检测实验的结果表明鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。为了保障食品安全，我们需要加强对食品生产环节的管理和监督，提高消费者的食品安全意识，并加强食品检测的力度。只有通过全社会的共同努力，才能确保食品的安全和健康。
沙门氏菌的实验报告
沙门氏菌的实验报告 沙门氏菌的实验报告 引言： 沙门氏菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，尤其是在动物体内。它是引起人类食物中毒的主要病原菌之一。为了更好地了解沙门氏菌的特性和对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验。 实验一：沙门氏菌的分离与培养 我们从市场购买了一份新鲜鸡蛋，并在实验室中进行了分离与培养的操作。首先，我们将鸡蛋表面进行消毒处理，然后用无菌的工具将鸡蛋壳上的细菌刮取到培养基上。接着，我们将培养基置于恒温箱中，控制温度和湿度，以促进沙门氏菌的生长。经过一段时间的培养，我们成功地分离出了纯净的沙门氏菌菌落。 实验二：沙门氏菌的形态观察 为了观察沙门氏菌的形态特征，我们使用了光学显微镜对其进行了观察。在显微镜下，我们发现沙门氏菌呈杆状或球状，大小约为0.5至1.5微米。沙门氏菌具有鞭毛，使其能够在液体中快速移动。此外，我们还观察到沙门氏菌菌落呈灰白色或淡黄色，有时会形成粘液。 实验三：沙门氏菌的生长条件 为了确定沙门氏菌的适宜生长条件，我们进行了一系列的实验。首先，我们将沙门氏菌接种于不同温度的培养基上，发现其最适宜生长的温度为37摄氏度。此外，我们还研究了沙门氏菌在不同pH值下的生长情况，结果显示其最适宜生长的pH值为6.5至7.5。这些实验结果为控制沙门氏菌的生长提供了重要的
参考。 实验四：沙门氏菌的致病机制 为了研究沙门氏菌对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验来探索其致病 机制。首先，我们将沙门氏菌接种于小鼠体内，并观察其对小鼠的影响。结果 显示，被感染的小鼠出现了食欲不振、腹泻和发热等症状。进一步的实验表明，沙门氏菌通过侵入人体细胞并释放毒素来引起病症。这些实验结果为预防和治 疗沙门氏菌感染提供了重要的依据。 实验五：沙门氏菌的控制方法 为了控制沙门氏菌的传播和感染，我们进行了一些实验来研究其控制方法。首先，我们发现煮沸可以有效地杀死沙门氏菌，因此在食物加工过程中要确保充 分的加热。此外，我们还研究了一些抗生素对沙门氏菌的抑制作用，结果显示 某些抗生素可以有效地抑制其生长。然而，由于沙门氏菌对抗生素的耐药性逐 渐增加，我们需要进一步研究和开发新的控制方法。 结论： 通过一系列的实验，我们对沙门氏菌的特性和对人类健康的影响有了更深入的 了解。沙门氏菌是一种具有致病性的细菌，其致病机制复杂且多样。为了预防 和控制沙门氏菌感染，我们需要加强食品安全管理，提高公众的卫生意识，并 不断研究和开发新的控制方法。只有这样，我们才能有效地保护人类健康。
沙门氏菌方法验证报告
沙门氏菌方法验证报告 沙门氏菌是一种常见的细菌，它可以引起人体的食物中毒和感染。因此，在食品加工和生产过程中，需要对沙门氏菌进行检测和验证。本文将介绍沙门氏菌方法验证报告。 一、实验目的 本实验的主要目的是验证所使用的方法是否能够准确地检测出样品中的沙门氏菌，并确定该方法的灵敏度和特异性。 二、实验材料与仪器 1. 沙门氏菌标准品 2. 无菌生理盐水 3. 培养基：XLD培养基、SS培养基、EB培养基 4. 灭菌好的试管、移液管、显微镜等实验器材 三、实验步骤
1. 准备样品：从食品中取出适量样品，加入适量无菌生理盐水，混合 均匀。 2. 检测方法： (1) XLD培养基法：将混合好的样品涂布在XLD培养基上，放置在37℃恒温箱中培养24小时。观察培养基上是否有红色或黑色小斑点形成。 (2) SS培养基法：将混合好的样品涂布在SS培养基上，放置在37℃ 恒温箱中培养24小时。观察培养基上是否有黑色小斑点形成。 (3) EB培养基法：将混合好的样品涂布在EB培养基上，放置在37℃ 恒温箱中培养24小时。观察培养基上是否有蓝色或绿色小斑点形成。 3. 结果判断： (1) XLD培养基法：如果在XLD培养基上出现红色或黑色小斑点，则 说明样品中存在沙门氏菌。 (2) SS培养基法：如果在SS培养基上出现黑色小斑点，则说明样品中存在沙门氏菌。
(3) EB培养基法：如果在EB培养基上出现蓝色或绿色小斑点，则说明样品中存在沙门氏菌。 四、实验结果 经过实验验证，三种方法均能够准确地检测出样品中的沙门氏菌，并且具有较高的特异性和灵敏度。其中，XLD和EB两种方法对沙门氏菌的检测效果更为明显，能够更快地形成小斑点，因此在实际应用中更为常用。 五、实验结论 本实验采用的三种方法均可用于沙门氏菌的检测和验证，具有较高的特异性和灵敏度。在实际应用中，可以根据样品类型和检测要求选择合适的方法进行检测。同时，为了确保检测结果的准确性，应严格控制实验条件，并使用标准品进行对照验证。
实验五 食品中沙门氏菌的检验
实验五食品中沙门氏菌的检验 一、实验目的要求 1、了解食品的质量与沙门氏菌检验的意义。 2、掌握沙门氏菌的生物学特性。 3、掌握沙门氏菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。 4、掌握沙门氏菌属血清学试方法。 5、掌握食品中沙门氏菌检验的方法和技术。 二、原理 沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。种类繁多，少数只对人致病。其他对动物致病，偶尔可传染给人。主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。 食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。 三、试剂和仪器 （一）最先准备的器材 规格名称数量用途 1、500ml广口瓶1个稀释样品 2、500ml三角瓶1个制缓冲蛋白胨水 3、250ml三角瓶8个制增菌液、培养基 4、15×150mm试管18支制三糖铁培养基和PH7.2尿素 5、13×130mm试管30支制蛋白胨水等 6、1ml移液管5支 7、10ml移液管 2 支 8、直径为90 mm平皿12套制BS、SS平板 9、250ml量筒1支 （二）应灭菌的其它器材 剪刀1把不锈钢汤匙1把称量纸适量 （三）应准备的培养基和试剂 培养基总量所用容器 1.缓冲蛋白胨水(BP)：1瓶225ml/瓶500ml三角瓶 2.氯化镁孔雀绿(MM)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶 3.亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：1瓶100ml/瓶250ml三角瓶 4.亚硫酸铋琼脂(BS)：4皿1瓶60ml/瓶250ml三角瓶 5.SS琼脂：6皿1瓶100ml/瓶250ml三角瓶