根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
植物根系活力的测定方法 ( TTC 法)
实验 5 植物根系活力的测定（ TTC 法）植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。
本实验练习测定根系活力的方法，为植物营养研究提供依据。
一、原理氯化三苯基四氮唑（ TTC ）是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲（ TTF ），生成的三苯甲（ TTF ）比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
（二）试剂1. 乙酸乙酯（分析纯）。
2. 次硫酸钠（ Na 2 S 2 O 4 ，分析纯），粉末。
3. 1 ％ TTC 溶液：准确称取 TTC 1.0 g ，溶于少量水中，定容到 100 mL 。
用时稀释至需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液（ 1/15 mol/L ， pH7.0 ）。
5. 1 mol/L 硫酸：用量筒取比重 1.84 的浓硫酸 55 mL ，边搅拌边加入盛有 500 mL 蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至 1000 mL 。
6. 0.4 mol/L 琥珀酸：称取琥珀酸 4.72 g ，溶于水中，定容至 100 mL 即成。
（三）仪器设备小烧杯 3 个，研钵 1 个，移液管： 0.5 mL 1 支、 10 mL 1 支、 5 mL 3 支，刻度试管 6 支，分光光度计，分析天平（感量 0.1 mg ），电子顶载天平（感量 0.1 g ），温箱，试管架，药勺，石英砂适量，滤纸。
三、实验步骤1. 定性测定（ 1 ）配制反应液把 1 ％ TTC 溶液、 0.4 mol ／ L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按 1:5:4 比例混合。
根活力测试实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解根活力测试的基本原理和方法。
2. 通过实验，掌握根活力测试的操作步骤和数据处理方法。
3. 分析不同处理条件下根活力的变化，为植物生长发育提供理论依据。
二、实验原理根活力是指植物根系对营养物质、水分和氧气等环境因素的吸收、转运和利用能力。
根活力测试是研究植物根系生理生态的重要手段之一。
常用的根活力测试方法有电导率法、过氧化氢酶活性法、丙二醛含量法等。
本实验采用电导率法测定根活力。
电导率法测定根活力的原理是：在一定条件下，植物根系在逆境条件下（如缺氧、干旱、盐害等）产生的电解质增多，导致根系细胞膜透性增加，电解质外渗，从而降低根系的电导率。
通过测定根系在逆境条件下的电导率变化，可以反映根活力的大小。
三、实验材料与方法1. 实验材料：小麦（Triticum aestivum L.）幼苗、蒸馏水、NaCl溶液、pH试纸、电导率仪等。
2. 实验方法：（1）选取生长状况良好、长势相近的小麦幼苗，随机分为对照组和实验组。
（2）对照组：将幼苗置于正常生长条件下培养。
实验组：将幼苗分别置于不同逆境条件下培养，包括干旱、盐害、缺氧等。
（3）培养一段时间后，取幼苗根系，分别用蒸馏水和NaCl溶液冲洗，去除根系表面污物。
（4）将根系放入电导率仪中，测定根系在蒸馏水和NaCl溶液中的电导率。
（5）计算根活力指数：根活力指数 = 根系在NaCl溶液中的电导率 / 根系在蒸馏水中的电导率。
四、实验结果与分析1. 对照组根活力指数为100%，说明根系在正常生长条件下具有较好的活力。
2. 实验组在不同逆境条件下，根活力指数有所下降，具体如下：（1）干旱条件下：根活力指数为75%，说明干旱对小麦根系活力有显著影响。
（2）盐害条件下：根活力指数为60%，说明盐害对小麦根系活力有显著影响。
（3）缺氧条件下：根活力指数为50%，说明缺氧对小麦根系活力有显著影响。
五、结论1. 根活力测试是一种有效的研究植物根系生理生态的方法。
植物根系活力的测定
实验三植物根系活力的测定——TTC法植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，跟的生长情况的活力水平直接影响地上部分的生长和营养状况及产量水平。
本实验练习测定根系活力的方法，为植物营养研究提供依据一、原理：氧化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙，生成的三苯甲腙比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到加强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
二、植物材料、仪器设备及试剂配制：（一）植物材料：完全液和铅溶液培养的黄瓜苗根系（二）仪器设备：电子天平、生化培养箱、分光光度计、剪刀、镊子、10mL离心管、10mL具塞刻度试管、研钵、漏斗、移液管或移液枪、滴管、小烧杯、玻璃棒等。
（三）配置试剂：1、乙酸乙酯（分析纯）2、次硫酸钠（Na2S2O4）3、1%TTC溶液：标准称TTC1.00g，溶于少量去离子水中，定容到100mL，用时稀释。
4、硫酸缓冲液（1/15mol/L，pH7）5、1mol/L硫酸：量取比重1.84的浓硫酸55mL，边搅拌边加入盛有500mL去离子水的烧杯中，冷却后稀释至1000mL三、实验步骤：1.TTC标准曲线的制作：取0.4%TTC溶液0.2mL放入10mL量瓶中，加少许Na2S2O4 粉末摇匀后立即产生红色的甲月替，再用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀。
然后分别取此液0.25mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL置于10mL刻度试管中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到甲月替25μg、50μg、100μg、150μg、200μg的标准比色系列，以空白作参比，在485nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
2.称取新鲜根尖0.5g，放入10mL离心管中，加入0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液5mL，把根充分浸没在溶液内，在37℃下暗保温1h，此后加入1mol/L硫酸1ml，以终止反应。
实验 植物根系活力的测定
实验植物根系活力的测定植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。
本实验学习测定根系吸收面积和活力的方法。
一、根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定【原理】根据植物矿质吸收的理论，植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性，并假定这时在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层，因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。
常用甲烯蓝作为被吸附物质，它的被吸附量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。
已知1mg甲烯蓝成单分子层时所占面积为1.1m2，据此即可求出根系的总吸收面积。
当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而继续吸附甲烯蓝。
从后一吸附量求出活跃吸收面积，可作为根系活力指标。
【仪器与用具】分光光度计1台；100ml烧杯3只；50或100ml量筒1个（依根系大小而定）；吸量管1ml 1支，10ml 1支；试管（15×150mm）10支；容量瓶1000ml 1个，100ml 1个；吸水纸适量；试管架1个。
【试剂】0.0002mol/L甲烯蓝溶液：精确称取74.8mg甲烯蓝（C16H18N3SCl·3H2O），加水溶解，定容至1000ml。
此溶液每ml含甲烯蓝0.0748mg。
0.010mg/ml的甲烯蓝溶液：用刻度吸管吸取0.0002mol/L甲烯蓝13.37ml定容至100ml，摇匀即成。
【方法】1．植物材料的准备本实验最好采用水培或砂培植物，以获得完整而无损伤的根系。
玉米根系发达，是较好的材料。
如无水培、砂培试材，也可用盆栽植物，用水将盆土仔细冲净后使用。
田间栽培的材料因不可能无损地挖出全部根系，最好避免在正式试验中使用。
2．甲烯蓝溶液标准曲线的制作取试管7支编号，按表14-1次序加入各溶液，即成甲烯蓝系列标准液。
表14-1 各试剂加入顺序试管号 1 2 3 4 5 6 70.01mg/ml甲烯蓝溶液(ml)蒸馏水(ml)甲烯蓝浓度mg/ml 010190.001280.002460.004640.006820.008100.01以第1管（水）为参比在分光光度计下比色，取波长660nm，读出光密度，以甲烯蓝浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘成标准曲线。
《植物生理学实验》实验05 根系活力的测定
实验步骤
定性测定 定量测定
定性测定
• 配置反应液 把1%TTC溶液，0.4moL/L琥珀酸钠和磷酸缓冲液按1︰5︰4比 例混合。
• 把根仔细洗净，把地上部分从茎基切除，将根放入三角瓶中，倒入反应液， 以浸没根为度，置37℃左右暗处放1h，以观察着色情况，新根尖端几毫米以 及细侧根都明显地变成红色，表明该处有脱氢酶存在。
• 生成的红色TTF越多，说明酶活性越强， 也表示根系活力越强
• TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强， 而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标
实验用品
材料：植物根系 仪器：分光光度计、恒温箱、容量瓶、烧杯、石英砂、研钵、
定量测定
•TTC标准曲线的制作
试管编号
1 2 34 5 6
空白 样品
取1mg/mL (即1%)的TTC 2mL于 100mL容量瓶中，加入2gNa2S2O4 摇匀，加入乙酸乙酯40mL左右剧烈
TTF溶液浓度 （ug/mL）
溶液中的TTC还原量 （ug）
0 2 4 6 8 10 0 20 40 60 80 100
2019-2020学年春季学期
植物生理学实验
红河学院 生命科学与技术学院 陶宏征
实验五 根系活力的测定
实验目的
掌握TTC法测定根系活力的原理和方法
实验原理
根系活力 TTC法测定根系活力的原理
根系活力
• 根系活力泛指跟的吸收与合成的能力，是衡 量根系活动能力强弱的重要指标，可以衡量 根系吸收水分或矿质元素的能力大小，甚至 可以反映地上部分的营养状况以及产量水平。
• 测定根系活力，可为植物营养研究提供依据。 • 在幼根中，脱氢酶活性的强弱与根系活力成
实验植物根系活力的测定
实验植物根系活力的测定植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。
本实验学习测定根系吸收面积和活力的方法。
一、根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定【原理】根据植物矿质吸收的理论，植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性，并假定这时在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层，因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。
常用甲烯蓝作为被吸附物质，它的被吸附量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。
已知1mg甲烯蓝成单分子层时所占面积为，据此即可求出根系的总吸收面积。
当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而继续吸附甲烯蓝。
从后一吸附量求出活跃吸收面积，可作为根系活力指标。
【仪器与用具】分光光度计1台；100ml烧杯3只；50或100ml量筒1个（依根系大小而定）；吸量管1ml 1支，10ml 1支；试管（15×150mm）10支；容量瓶1000ml 1个，100ml 1个；吸水纸适量；试管架1个。
【试剂】L甲烯蓝溶液：精确称取甲烯蓝（C16H18N3SCl·3H2O），加水溶解，定容至1000ml。
此溶液每ml含甲烯蓝。
ml的甲烯蓝溶液：用刻度吸管吸取L甲烯蓝定容至100ml，摇匀即成。
【方法】1．植物材料的准备本实验最好采用水培或砂培植物，以获得完整而无损伤的根系。
玉米根系发达，是较好的材料。
如无水培、砂培试材，也可用盆栽植物，用水将盆土仔细冲净后使用。
田间栽培的材料因不可能无损地挖出全部根系，最好避免在正式试验中使用。
2．甲烯蓝溶液标准曲线的制作取试管7支编号，按表14-1次序加入各溶液，即成甲烯蓝系列标准液。
表14-1 各试剂加入顺序试管号1234567ml甲烯蓝溶液(ml)蒸馏水(ml)甲烯蓝浓度mg/ml 010192846648210以第1管（水）为参比在分光光度计下比色，取波长660nm，读出光密度，以甲烯蓝浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘成标准曲线。
实验五+根系活力的测定
实验五根系活力的测定一、实验目的• 1、理解植物根系活力的内涵• 2、熟悉测定根系活力的方法及测定原理:•二、实验原理TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
在幼根中，脱氢酶活性的强弱与根系活力成正比。
所以，通过测定脱氢酶的活性，可由脱氢酶活性代表根系活力。
氯化三苯基四氮唑(TTC)溶于水中为无色溶液，还原后生成稳定、红色、不溶于水的三苯基甲腙 (TTF)。
生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化溶于乙酸乙酯，485nm有最高吸收峰三、实验材料及用品实验材料:水培1天葱的根系实验器皿:分光光度计、水浴锅、研钵、漏斗、移液管、比色皿、容量瓶、烧杯、滤纸实验溶液:乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸钠(Na2S2O4)、TTC、磷酸缓冲液、硫酸四、实验步骤1.制作TTC标准曲线将配制好的浓度为0,0.01%，0.02%，0.03%，0.04%的TCC溶液，各取5ml放入比色管中，在哥使馆中加入乙酸乙酯5ml和Na2S2O2粉末少量，摇匀?溶液分层，甲腙位于乙酸乙酯层?取上层乙酸乙酯?485nm比色?标准曲线?记录数据。
2.测定根系活力将根系洗净，搽干表面水分，取0.5g根尖样品(第1份加1mol/L硫酸2ml )?0.5,TTC溶液5ml?磷酸缓冲液5ml?37?下保温1h?第2份试管加入1mol/L硫酸2ml，以杀死根系作为空白对照?取出根，洗净，吸干水分?与4 ml乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎 ?红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml?空白试验作参比测485nm下吸光度?根据标准曲线，求四氮唑还原量。
五、实验现象和结果a、制作标准曲线(显示计算公式及R^2值)浓度(mg/ml) 0 1 2 3 4 OD值 0 0.157 0.418 0.820 1.187表一各浓度吸光度值记录表图一各浓度TTC溶液在485nm下的吸光度曲线图如图一所示,回归方程为y=303.7x – 0.0910, R^2=0.9735把样品吸光度0.021nm代入方程可得x=3.688x10^-4b、计算TTC还原强度和还原量=TTC浓度×提取液总体积(×稀释倍数) 四氮唑还原量(ug)=3.688 x 10^-4 x 25=9.22x 10^-3 ug四氮唑还原量(ug)四氮唑还原强度(ug/g(根鲜重)/h)= ———————————[根重(g)×时间(h)]= 9.22x10^3/(0.5x1)=1.844x10^-2六、分析和讨论1.在实验中，进行标准曲线制作步骤时，加入Na S O粉末摇匀后为出现红色，可能是由于溶液本身浓度有偏差和操作时加入的溶液有偏差。
实验 植物根系活力的测定
甲烯蓝量
(mg)
烧杯1
烧杯2
烧杯1＋2
烧杯3
根体积(ml)
根吸收
面积m2
总的
活跃的
活跃/总的(%)
比表面
总的
活跃的
5．从三个烧杯中各取1ml溶液加入试管，均稀释10倍，测得其光密度，查标准曲线，求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯蓝毫克数。
6．把结果记入表14-2，并以下式求出根的吸收面积：
总吸收面积（m2）=[(C1－C1ˊ)×V1]＋[(C2－C2ˊ)×V2]×1.1
0.010mg/ml的甲烯蓝溶液：用刻度吸管吸取0.0002mol/L甲烯蓝13.37ml定容至100ml，摇匀即成。
【方法】
1．植物材料的准备本实验最好采用水培或砂培植物，以获得完整而无损伤的根系。玉米根系发达，是较好的材料。如无水培、砂培试材，也可用盆栽植物，用水将盆土仔细冲净后使用。田间栽培的材料因不可能无损地挖出全部根系，最好避免在正式试验中使用。
2．甲烯蓝溶液标准曲线的制作取试管7支编号，按表14-1次序加入各溶液，即成甲烯蓝系列标准液。
表14-1 各试剂加入顺序
试管号
1
2
3
5
6
7
0.01mg/ml甲烯蓝溶液(ml)
蒸馏水(ml)
甲烯蓝浓度mg/ml
0
10
0
1
9
0.001
2
8
0.002
4
6
0.004
6
4
0.006
8
2
0.008
10
0
0.01
【仪器与用具】
分光光度计1台；100ml烧杯3只；50或100ml量筒1个（依根系大小而定）；吸量管1ml 1支，10ml 1支；试管（15×150mm）10支；容量瓶1000ml 1个，100ml 1个；吸水纸适量；试管架1个。
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根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
摘要：
根系活力是评估植物健康状况和生长能力的重要指标之一。
本实验综述报告将介绍一种常用的根系活力测定方法——三苯基氯化四唑(TTC)法，并重点介绍了该方法的原理、步骤和应用。
通过对多个实验研究的概述，我们可以了解到TTC法在根系活力测定中的优势和不足，并展望了未来在该领域的发展方向。
1. 引言
根系活力是植物根系生理功能的重要指标之一。
通过测定根系活力，可以评估植物吸收和利用养分的能力，以及应对环境胁迫和病原体的能力。
因此，测定根系活力对于研究植物生长发育、抗逆性和资源利用效率等具有重要意义。
2. TTC法的原理和步骤
TTC法是一种常用的根系活力测定方法，它利用三苯基氯化四
唑颜料的还原作用来反映根系活力。
其原理是，根系组织通过代谢产物还原三苯基氯化四唑，使其从无色变为红色。
实施TTC法的步骤主要包括：准备TTC溶液、处理根系样本、添加TTC溶液、孵育和测定根系活力。
3. TTC法的应用
TTC法广泛应用于不同植物根系的活力测定中。
它可以用于各
种实验条件下的根系活力研究，包括光照、温度、生长激素、缺水和盐胁迫等。
通过TTC法，我们可以了解不同处理对根系生理代谢的影响，评估植物在不同环境条件下的生长适应性。
4. TTC法的优势和不足
TTC法作为根系活力测定的常用方法，具有一些优势。
首先，
它操作简单、成本低廉、效果可靠。
其次，可以通过可视化的红色形成判断根系活力，评估根系的发育状况。
然而，TTC法也存在一些不足之处，如容易受到环境条件的干扰，结果的可视化程度受到主观因素的影响等。
5. 未来发展方向
在未来，TTC法可以与其他技术相结合，以提高根系活力测定的准确性和可靠性。
光学显微镜、分子生物学技术和高通量测定等新技术的应用，将进一步拓展我们对根系活力的认识。
此外，开展TTC法的标准化研究，建立更严格的操作规范，有助于提高测定结果的一致性和可比性。
结论:
总之，根系活力的测定是植物生理研究和农业生产中的重要环节，而TTC法作为一种常用的根系活力测定方法，具有简单易行、操作成本低廉的优势。
通过本综述报告，我们可以了解到TTC法的原理、步骤和应用，并展望了未来在该领域的发展方向。
希望该报告能够为根系活力测定提供参考，并促进相关研究的进一步发展
综合以上所述，TTC法作为一种常用的根系活力测定方法具有操作简单、成本低廉、效果可靠等优势。
然而，它也存在受环境条件干扰和结果可视化受主观因素影响的不足。
未来的发展方向可以通过与其他技术相结合提高准确性和可靠性，如光学显微镜、分子生物学技术和高通量测定等。
同时，标准化研究和建立严格的操作规范也有助于提高测定结果的一致性和可比性。
综上所述，TTC法在根系活力测定领域有着广阔的应用前景，将为植物生理研究和农业生产提供重要的支持和指导。