大豆转基因检测
转基因耐除草剂大豆ZH10-6多重PCR检测方法的建立
转基因耐除草剂大豆 ZH10-6多重 PCR检测方法的建立摘要本研究通过利用多重PCR(multiplexPCR，MPCR)技术，检测ZH10-6的4个边界序列，建立其分子特征转化体特异性鉴定方法，为该转化体的生物安全评价研究以及知识产权保护和市场行政监管提供重要的基础技术支撑。
关键词：转基因耐除草剂大豆ZH10-6；多重PCR；检测方法1、材料与方法1.1材料转基因耐除草剂大豆(Glycinemax)ZH10-6，非转基因大豆受体ZH10，用于特异性测试的样品有：转基因玉米(Zeamays)混样(MON810，MON863，Bt11，Bt176，GA21，T25，NK603，TC1507，MON88017，3272，MON87427，MON87460，MIR162，MIR604，DAS40278-9，MON89034，4114，59122，5307，BVLA430101每种转化体含量分别为1%，以非转基因玉米作为填充物)；转基因大豆混样(MON87701，MON89788，GTS40-3-2，A2704-12，A5547-127，CV127，356043，305423，MON87769，MON87705，MON87708，FG72，DAS44406-6和SYHT0H2每种转化体含量分别为1%，以非转基因大豆作为填充物)；转基因油菜(Brassicanapus)混样(包括RT73，MS1，MS8，T45，RF1，RF2，Topas19/2，RF3，Oxy235，MON88302，每种转化体含量分别为1%，以非转基因油菜作为填充物)。
1.2仪器和主要试剂LEGENDMICRO21R高速冷冻离心机Ther‐mo；Nanodrop1000核酸定量仪NanoDrop；Veriti96WellPCR仪ABI；电泳仪BIO-RAD；C150凝胶成像系统AzureBiosys‐tems。
植物基因组DNA提取试剂盒DP305；PCR试剂2×GoTaqGreenMasterMix;DL1000DNAMarker;琼脂糖;SuperGelred10000×inwater；引物由GE‐NEWIZ合成。
国家级转基因大豆品种审定标准(试行)
国家级转基因大豆品种审定标准(试行)国家级转基因大豆品种审定标准(试行)全面评估与深度探讨一、引言转基因技术作为当今生物科技领域的热点之一，其在农业生产中的应用已经成为国际上广泛关注的话题。
在我国，转基因大豆作为重要的农产品之一，其品种审定标准更是备受关注。
本文将对国家级转基因大豆品种审定标准(试行)进行全面评估与深度探讨，为读者提供高质量、深度和广度兼具的中文文章，帮助读者更好地理解这一重要主题。
二、国家级转基因大豆品种审定标准(试行)的概述国家级转基因大豆品种审定标准(试行)是指导和规范转基因大豆品种审定工作的重要文件，它的实施对于促进我国转基因大豆品种的研发和推广具有重要意义。
该标准包括了转基因大豆品种的选育、审定、鉴定、申报和审批等方面的规定，对于提高转基因大豆品种的质量和安全性具有重要意义。
三、国家级转基因大豆品种审定标准(试行)的深度探讨1. 选育要求：国家级转基因大豆品种审定标准(试行)对转基因大豆品种的选育提出了一系列的要求，包括对材料的选择、品种的组配、遗传性状的表达等方面进行了详细的规定。
在这一部分，我认为需要更加重视对转基因大豆基因组的深度分析和评估，以确保选育出的品种具有良好的遗传背景和稳定的遗传性状。
2. 审定流程：国家级转基因大豆品种审定标准(试行)对转基因大豆品种的审定流程进行了详细的规定，包括申报、材料提交、鉴定、审批等环节。
在这一部分，我认为需要进一步强调对审定流程中各个环节的全面性和严谨性，确保审定工作的科学性和公正性。
3. 安全评估：国家级转基因大豆品种审定标准(试行)对转基因大豆品种的安全性评估进行了详细的要求，包括生物安全性、食品安全性等方面。
在这一部分，我认为需要加强对转基因大豆品种的安全性评估工作，特别是要关注对转基因大豆可能产生的环境影响和潜在食品安全风险的全面性评估。
四、总结与展望国家级转基因大豆品种审定标准(试行)是指导和规范转基因大豆品种审定工作的重要文件，它的实施对于促进我国转基因大豆品种的研发和推广具有重要意义。
转基因大豆及制品中转基因成分检测技术研究进展
随 着 转 基 因植 物 种 植 面 积 的 扩 大 ， 全 性 也 越 来 越 受 到 安
关 注 。１９ ９８年苏 格 兰 Ｒ ｗ ｔ研 究 所 的 Ｐ ｓｔ 教 授 发 现 幼 鼠 ｏｅ ｔ ｕｚ ｉ ａ
特异性强 ， 但需要转膜及杂交 ， 操作繁琐 、 费用高 ， 不适合大批
量 样 品 的 检 测 。 Ｐ Ｒ 技 术 即 聚 合 酶 链 反 应 技 术 既 可 做 定 性 Ｃ 又 可做 定 量 分 析 。定 性 Ｐ Ｒ 主要 有 多 重 Ｐ Ｒ， 式 和半 巢 式 Ｃ Ｃ 巢
中 图分 类 号 ： Ｓ ０ Ｔ ２７ 文献标志码 ： Ａ 文章 编 号 ： ０ １ ２—１０ （０ １ Ｏ ０４ ０ ０ ３ ２ ２ １ ）ｌ一 ３ ５— ４
．
转 基 因植 物 种 植 面 积 自 ２ ０世 纪 ９ 代 开始 进 行 商 业 化 ０年
种 植 以来 迅 速 增 长，９６ ２０ １９ － ０ ８年 ， 球 转 基 因 植 物 种 植 国 全 家 由 ６个增 加 到 ２ ５个 ， 植 面 积 由 １ ０ 种 ０万 ｈ 加 到 １２ ２ ｍ 增 ．５ 亿 ｈ 。 种 植 面 积 最 大 的 作 物 为 抗 除 草 剂 大 豆 ， ５８ ０ ｍ 。 ：， 达 ６
蒋 亦武 黄 明 ，王保 战 。 杭 宝建 何 ， ， ， 健 ，李 顺鹏
（ ． 业 部 农业 环境 微 生 物 重 点 开 放 实 验 室／ 京 农业 大学 生 命 科 学 学 院 ， 苏 南 京 ２ ０９ Ｉ农 南 江 １０ ５ ２ 南 京 农 业 大学 教 育部 肉 品加 工 与 质 量 控 制 重 点 开 放 实验 室 ， 苏 南 京 ２ ０ ９ ． 江 １０５）
地进 入 了我 国 的食 品生 产 与 消 费链 。
转基因大豆
背景
1996年春，美国伊利诺伊西部许多农场主种植了一种大豆新品种，这种大豆是移植了矮牵牛的一种基因。这 个新大豆品种可以抵抗杀草剂——草甘膦(毒滴混剂)。草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。
遗传工程有希望使粮食更有利于人健康、更可预测收获、少用合成杀虫剂和提高用水的效率。遗传工程取得 的成果称为“转基因”产品，首先上市的是小宗商品，像上超级市场保鲜番茄和干酪生产中使用的一种细菌生产 的酶。这种酶以前不得不以牛的胃中提取。转基因技术终于走出实验室和试验田，进入像玉米、大豆和棉花作物 的日常耕作。
谢谢观看
转基因作物释放到环境中，可能威胁到传统的野生物种，影响生物多样性。一方面，经过转基因技术改造的 生物体，由于它们在性状与品质上优越于其他自然生物体，按照达尔文的“物竟天择，适者生存”的生物进化论 与竞争机制，会消除生物群落中的野生种，并通过食物链间接影响生物群落的结构，威胁生物多样性。另一方面， 转基因作物的基因漂流到其他物种上，与其他物种杂交，产生比野生植物具有更强的特性的植物，也会影响生物 群落结构与生物多样性。
国家转基因玉米和大豆品种审定
国家转基因玉米和大豆品种审定
国家转基因玉米和大豆品种的审定是指国家对转基因玉米和大豆品种进行审查和批准的程序。
这个程序通常由相关政府机构或委员会负责进行。
审定的目的是确保转基因玉米和大豆品种的安全性、质量和性能符合国家相关的法规和标准。
在审定过程中，通常会对转基因玉米和大豆品种的基因构成、遗传稳定性、生长周期、耐逆性、产量等方面进行评估和测试。
审定的程序一般包括以下步骤：
1. 提交申请：种子公司或研究机构需要向相关政府机构提交转基因玉米和大豆品种审定的申请，同时提供相关的科学数据和试验结果。
2. 审查评估：相关政府机构或委员会会对申请材料进行审查和评估，同时可能会进行现场检查和实验验证。
3. 公示听证：审定结果可能会通过公示的方式向社会公众公示，同时可能会组织听证会，听取相关专家和公众的意见和建议。
4. 决策批准：根据审定评估结果和公众意见，相关政府机构或委员会会作出审定结果的决策，并进行品种批准。
转基因玉米和大豆品种的审定是一个复杂的过程，旨在确保转基因农作物的安全和监管。
不同国家和地区对于审定的要求和程序可能会有所不同。
DB12_T506-2014大豆转基因成分筛查方法
B 04ICS 65.020.01DB12大豆转基因成分筛查方法Screening method for genetically modified soybean天津市质量技术监督局发布前 言本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。
本标准由天津市质量技术监督局提出。
本标准起草单位：天津市东丽区产品质量监督检验所、天津市农业质量标准与检测技术研究所。
本标准主要起草人：黄凤军、陈杰、朱珠、李建、马强、赵新、龙起成、陈慧。
本标准2014年04月首次发布。
大豆转基因成分筛查方法1 范围本标准规定了大豆中转基因成分定性PCR筛查的术语和定义、检测方法、结果分析与表述。
本标准适用于大豆及其制品中Lectin内标准基因、CaMV35S启动子、NOS终止子、CP4-epsps基因、Bt基因和bar/pat基因的定性PCR筛查检测。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法NY/T 672 转基因植物及其产品检测通用要求农业部2031号公告—19—2013 转基因植物及其产品检测抽样农业部1485号公告—4—2010 转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1Lectin基因Lectin gene编码大豆凝集素的基因。
3.2CaMV 35S启动子 35S promoter from cauliflower mosaic virus （CaMV）来自花椰菜花叶病毒的35S启动子。
3.3NOS终止子terminator of nopaline synthase （NOS）gene来自胭脂碱合成酶基因NOS的终止子。
3.4CP4-epsps基因5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase gene derived from Agrobacterium sp. CP-4。
人民日报：进口转基因大豆均检验合格可放心吃。
人民日报：进口转基因大豆均检验合格可放心吃。
农业部日前批准3个转基因大豆进口安全证书的消息，一时在社会上引发民众对于食用其产品是否安全的关注。
尽管至今仍有人对此坚持质疑，但我国转基因专家指出，进口转基因大豆除输出国的检验合格外，我国也再次对其进行了严格检验，证明该产品是安全可靠的，民众对此无需过分担忧。
审批历时3年已获多国批准近日，中国农科院植物保护研究所研究员、农业转基因生物安全委员会副主任委员彭于发，对进口转基因大豆做出了详尽解释。
彭于发表示，我国本次审批的3个转基因大豆新品种，均严格按照法律法规要求进行，整个审批过程历时约3年。
彭于发说，根据我国《农业转基因生物安全管理条例》，输出国家或地区已经允许作为相应用途并投放市场，是我国申请进口用作加工原料的转基因生物安全证书的前提条件之一。
农业部近日批准的3个大豆品种除输出国已批准相同用途外，也在多个国家获得批准。
据悉，其中巴斯夫农化有限公司抗除草剂大豆CV127，已在美国、加拿大、日本、韩国、澳大利亚、新西兰、菲律宾、墨西哥、哥伦比亚、俄罗斯、南非、巴西、阿根廷等国家批准用于商业化种植或食用；孟山都远东有限公司抗虫大豆MON87701，已在美国、加拿大、日本、欧盟、墨西哥等地批准用于商业化种植或食用；抗虫耐除草剂大豆MON87701×MON89788已在欧盟、韩国、墨西哥、阿根廷、巴西、巴拉圭等地批准用于商业化种植或食用。
据悉，此次农业部批准的3个转基因大豆品种，在其他国家安全评价的基础上，又安排相关单位在国内也分别开展了环境安全和食用安全验证试验。
这3个品种都进行了生存竞争能力及对生物多样性影响的环境安全检测和抗营养成分检测及食用安全检测。
在验证结果安全的前提下，我国历时3年左右，才通过了该3种转基因大豆进口用作加工原料的安全证书申请。
转基因大豆油占据我国九成市场彭于发表示，发放安全证书只是说明该品种是安全的，可以进口。
我国进口大豆主要由国内需求决定，进口与否以及进口数量是市场行为，大豆进口没有配额等贸易措施限制。
进口大豆检测指标
进口大豆检测指标摘要：一、大豆检测的重要性1.大豆作为我国主要进口农产品2.确保进口大豆质量对我国农业和粮食安全的影响3.进口大豆检测指标的作用二、大豆检测指标概述1.检测项目2.检测标准3.检测方法三、大豆检测指标详解1.营养成分2.转基因成分3.农残和重金属4.黄曲霉素5.储存品质四、我国大豆检测现状及挑战1.检测技术的发展2.检测能力的提升3.面临的挑战和未来发展方向正文：一、大豆检测的重要性大豆是我国重要的进口农产品之一，主要用于食品、饲料和油脂生产。
因此，确保进口大豆的质量对我国农业和粮食安全具有重要意义。
进口大豆检测指标是评价大豆质量的重要依据，对指导我国大豆进口业务具有重要作用。
二、大豆检测指标概述进口大豆检测指标主要包括营养成分、转基因成分、农残和重金属、黄曲霉素以及储存品质等方面。
这些指标的检测有助于评价大豆的质量，保障我国进口大豆的安全。
三、大豆检测指标详解1.营养成分：主要包括蛋白质、脂肪、碳水化合物等成分，评价大豆的营养价值。
2.转基因成分：检测大豆中是否含有转基因成分，以满足市场需求和监管要求。
3.农残和重金属：检测大豆中的农药残留和重金属含量，确保大豆的安全性。
4.黄曲霉素：检测大豆中的黄曲霉素含量，防止对人体造成危害。
5.储存品质：评价大豆在储存过程中的品质变化，以保证大豆的食用品质。
四、我国大豆检测现状及挑战近年来，我国在大豆检测技术方面取得了显著进展，检测能力和水平不断提高。
然而，面对日益增长的进口大豆需求和复杂的检测任务，我国大豆检测还面临一些挑战。
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图二
第二次：
图三
实验结果分析
❖ 如图一：（1）提取出的大豆基因组成色较好。电泳条带
清晰。但颜色较淡，可能是点样的体积过少。
（2）跑电泳前使用氯仿/异戊醇擦拭电泳槽面检 测DNA的结果较好
图二：此为第一次跑PCR的电泳图。
图中有明亮且清晰的条带，但Maker跑的质量不是很好。 经分析可能是凝胶的质量不够好，或者是点样点的不好。
大豆转基因检测
❖ 本实验采用定性pcr方法检测大豆是否为转基 因。
Байду номын сангаас验结果
1.大豆基因组提取质量检测 1.1琼脂糖电泳：
图一 吸光值检测：DNA浓度=OD260/OD280=1.85 在1.7-2.0之间，符合PCR的标准。
❖ PCR结果：
由于第一次结果不是很好，本实验经过两次pcr结果。 第一次：
图三：为第二次PCR产物电泳，效果较好，有清晰明亮条带， 能看清。
讨论：
本次实验基本达成实验目的，有些地方需要注意。 （1）提取DNA的时候要仔细，DNA的质量高低影响后续实验。
比如蛋白质等物质需要除尽。 （2）使用RNArase需要注意，不然容易导致实验失败。 （3）在配制PCR体系的时候，发现配制母液再分装到各个管
时，导致最后一管的体积不够，导致之后影响PCR。 （4）跑电泳前 使用氯仿异戊醇擦拭电泳槽发现结果较好。 （5）本实验使用EB染色，但个人认为可以尝试核酸染料，感
觉本次实验染色不如以前使用核酸染料效果佳。
谢谢