交大医学院研究生现代免疫学基础和进展《免疫学原理》考试重点

免疫学

一、抗体的制备、种类和应用价值

答：1.单克隆抗体用A抗原免疫小鼠的脾细胞，产生针对不同表位的抗体，这些脾细胞与不产生抗体和HGPRT酶的骨髓瘤细胞混合，用PEG融合后，混合培养在HAT培养基上，筛选出融合的细胞。稀释到每孔单个细胞后，检测上清液的特异性，选择出能分泌抗表位1抗体的杂交瘤细胞，对此做克隆扩增，获取针对表位1的抗体。主要用于疾病的诊断、特异性抗原或蛋白质的检测、疾病的被动免疫治疗和生物靶向药物的制备。

2.多克隆抗体采用含有多个抗原表位的抗原物质，刺激多个B细胞克隆产生的针对多种抗原的抗体混合物。主要用来中和抗原，免疫调理，介导CDC、ADCC。

3.嵌合体抗体将完整抗体的C区置换为人源型，而保留轻重连的鼠源V区。用于减低鼠源性抗体引起的不良反应，提高疗效。

4.改型抗体利用基因工程技术，将鼠源CDR序列移植到人源抗体可变区，替代人源CDR，使人源抗体获得鼠单抗的抗原结合特异性，同时减少其异源性。

5.抗体片段及其衍生物包括双特异性抗体、Fab抗体、Fv抗体、单链抗体、最小识别单位等。

6.基因工程抗体：指利用重组DNA 及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配，经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。

二、经典HLA-I和HLA-II类分子的结构、功能、分布和调节

答：结构

HLA-1：是重链（α）和轻链（β）由非共价键结合而成的异二聚体。

α链由3个胞外结构域（α1、α2、α3）、跨膜区和胞质区组成。α3在T细胞表面是结合CD8+的部位。疏水性的跨膜区以α螺旋穿过细胞膜，亲水性的胞质区有数个磷酸化位置。

β链为β2微球蛋白，可溶性蛋白，不穿过细胞膜。主要作用是稳定I类分子使其有效的表达于细胞表面。

抗原结合槽I类分子的抗原结合槽由α1、α2组成，每个结构域折叠成1个α螺旋和4个β片层，其中2条α螺旋组成凹槽壁，8条β片层组成凹槽底，凹槽两端封闭。

HLA-II：是由α链和β链连接而成的异二聚体。α、β各自有两个胞外结构域（α1、2，β1、2），跨膜区、胞内段。Α2和β2是与T细胞表面的CD4分子结合的部分。Α1和β1组成抗原结合槽，与I类分子结合槽相似，几乎能重合。

分布

HLA-I 经典I类分子包括HLA-A/B/C,AB主要分布在除绒毛外滋养细胞外的有核细胞表面。C分布在包括绒毛外滋养细胞在内的所有有核细胞表面。

HLA-II 经典II类分子（DQ DR DP）主要分布在抗原提呈细胞如巨噬细胞、树突状细胞、成熟B淋巴细胞。此外激活的T细胞和单核细胞也表达经典的II类分子。

功能

1.作为抗原肽受体结合和提呈抗原肽

2.参与免疫调节

3.参与T细胞的发育和粘膜免疫

4.其他非免疫学作用

调控

HLA分子在细胞表面的表达受到多种分子在不同水平的调控，其中转录水平的调控最为关键。

转录水平调控：I类和II类分子的表达依赖于起始密码子ATG上游约250bp处的启动子区域的调节基序（顺式作用元件）和相应的转录调控因子（反式作用蛋白）之间的相互作用。非DNA结合蛋白：II类反式激活因子（CIITA）为非DNA结合蛋白，在HLA表达中发挥主导开关的作用。CIITA一旦以其羧基端结合MHC基因启动子区域的转录因子，即通过其氨基端启动对II类基因的表观遗传学调控。包括实施对组蛋白的乙酰化、DNA的甲基化、染色体重塑，最后通过通用转录复合体的组成开启基因的转录。

三、HLA基因的多态性、表达的共显性和个体性标志

HLA基因多态性：丰富的多态性是HLA基因最重要的一个特点，HLA复合体中很多基因座位的DNA在人群中存在许多变异体，称为等位基因。HLA复合体拥有庞大的等位基因数量，属于人类多态性最丰富的基因系统。

表达共显性：对每一个个体，任何HLA座位只能有两个等位基因，分别来自父母亲。这些基因均能得到充分的表达，称为共显性。

个体性标志：由于人类是随机婚配的杂合群体，从人群整个HLA基因库中获取两个等位基因应该是随机的，但是从众多的等位基因中任取两个，两个个体得到完全相同基因座位等位基因的概率已经很小，如果再加上多个HLA基因座的等位基因，经过排列组合，两个无亲缘关系的个体全部HLA相同的概率几乎为零。也使每一个个体所具有的HLA等位基因及其产物成为显示该个体独特性的生物学上的身份证，即个体性标志。

四、举例说明HLA和临床医学

HLA与器官移植：HLA分型是确定受检者个体抗原特异性或等位基因的拥有状态，可以用于器官移植供受者的选择，HLA分型和交叉配型对几乎所有器官移植的患者都是必须的。HLA与疾病的关系：与HLA-I类分子相关的是HLA-B27强直性脊柱炎，HLA-B51白塞病，HLA-Cw6牛皮癣。与HLA-II类分子相关的疾病是HLA-DR4类风湿关节炎，HLA-DQ2乳糜泻，HLA-DQ6发作性睡眠病，HLA-DR2、DQ6多发性硬化症。

HLA与疾病相关性研究进展不理想的原因：1.与HLA关联的疾病基本上都是多基因的复杂病变，环境因素在发病过程中起了重要作用。2.HLA区域各基因单体型的组合种类繁多切多处于不同水平的基因链锁不平衡状态中。

五、细胞因子的概念、分类和作用的共同特点

细胞因子：是一类由细胞产生的具有生物活性的小分子可溶性蛋白，能够影响这些或者其他细胞的生物学特征和行为。

在免疫系统中，细胞因子介导免疫细胞之间的相互作用、能调节细胞的生长发育，调节免疫应答，参与炎症反应和促进创伤的愈合。它们有以下共同特性：

1.一般特点：可溶性、高效性、小分子蛋白、可结合细胞表面受体、可被诱导产生、半衰期短、效应范围小。

2.分泌形式：大多以旁分泌、自分泌的形式，少数以内分泌的形式发挥作用，其分泌是一个短时自限性过程。

3.作用形式和功能：细胞因子能与细胞表面受体高亲和力结合，对靶细胞产生生物学作用

①诱导蛋白的表达；②促进细胞增殖；③释放效应分子。

4.生物学作用特点：多向性、多员性、协同性、拮抗性，细胞因子间以网络的形式发生相互调节。