高中生物试验方法小结

高中生物实验方法小结

陕西省咸阳市旬邑中学燕亚军

在高中生物实验教学及探究性课题研究中，常常发现学生因常识欠缺，专业知识薄弱，经典方法、模式思维没有形成等因素，致使一个实验从探究、设计、操作到最后的结果分析往往是问题百出。为了规范操作，理清思路，形成模式，以便更好的用实验解决生物中的相关问题。笔者在从教的过程中对生物实验设计中的一些方面给予总结，仅供参考：

一．化学物质的检测方法

1、淀粉：碘液 (蓝色)。

2、还原性糖：斐林试剂\班氏试剂(沸水浴后生成砖红色沉淀) 。

3、CO2：Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)。

4、乳酸：pH试纸。

5、O2：余烬复然；无O2：火焰熄灭。

6、蛋白质：被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色)。

7、脂肪：苏丹Ⅲ染液 (橘黄色）、苏丹Ⅳ染液 (红色）。

8、DNA：二苯胺(沸水浴，蓝色)或甲基绿（染色后，呈绿色），也可用DNA酶。

9、RNA：吡罗红（呈红色）、苔黑酚乙醇溶液

10、染色体：龙胆紫溶液，醋酸洋红溶液。

二．实验条件的控制方法

1、隔绝气体：密封玻璃容器可用石蜡，隔绝空气与液体可用油膜；

排气或充气可依据升温或冷却。

2、增加水中氧气：泵入空气或吹气或放入绿色植物；

减少水中氧气：容器密封或油膜覆盖或用凉开水。

3、除去容器中CO2：NaOH溶液；增加容器中的CO2：NaHCO3溶液。

4、除去叶中原有淀粉：置于黑暗环境。

5、除去叶中叶绿素：酒精水浴加热。

6、析出或溶解物质：水溶性根据溶解度，脂溶性可用丙酮或酒精。

7、除去植物光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光；

8、如何得到单色光：棱镜色散或透明薄膜滤光。

9、实验中控制温度的方法：

①、还原糖，DNA鉴定：沸水浴加热。

②、酶促反应：水浴保温。

③、用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热。

④、细胞和组织培养以及微生物培养：恒温箱培养。

⑤、降温，冷却；升温，加热。

10、维持PH：缓冲溶液（HCO3-/H2CO3，HPO43-/H2PO42-）；降低加酸或生理酸性盐，升高加碱或生理碱性盐。

11、血液抗疑：加入柠檬酸钠（去掉血液中的Ca2+）。

12、线粒体提取：细胞匀浆离心。

13、动物细胞的处理：破裂用清水，细胞的失水用NaCl。注意搅拌。

14、骨无机盐的除去：盐酸溶液。

15、灭菌方法：培养基用高压蒸汽灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂冼净，擦干后用75%酒精消毒；实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌；整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。

16、消除叶片中脱落酸的影响：去除成熟的叶片；

17、消除植株本身的生长素：去掉生长旺盛的器官或组织（芽、生长点）；

18、补充植物激素的方法：涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体；

19、补充动物激素的方法：口服（饲喂）、注射；

20、阻断植物激素传递：插云母片法。

三．实验结果的显示方法

1、有无某物质的存在：有机物根据颜色反应或凝集，无机物根据变色或生成沉淀。

2、光合速度：O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。

①水生植物可依气泡的产生量或产生速率；

②离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；

③植物体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅；

④水绵可借助显微镜下好氧性菌的分布情况。

3、呼吸速度：O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量。

4、原子或分子转移途径：放射性同位素标记法或元素示踪法。

5、细胞液浓度大小：质壁分离或U型管+半透膜。

6、细胞吸水和吸收离子的关系：可用KNO3溶液质壁分离及其自动复原。

7、植物细胞是否死亡：质壁分离和复原或细胞质的流动。

8、甲状腺激素：动物耗氧量,发育速度等。

9、生长激素：生长速度(体重、体长变化)。

10、胰岛素作用：动物活动状态（是否出现低血糖症状──昏迷）。

11、血糖的含量：低血糖症状或尿糖是否出现。

12、胰高血糖素作用：尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀）

13、生长素作用及浓度高低的显示：可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断（弯曲、高度）

14、菌量的多少：菌落数，亚甲基蓝褪色程度。

15、菌种：菌落的形态、大小、边缘、高低、颜色、光泽等。

16、大肠杆菌：伊红—美蓝琼脂培养基。

四、实验中常用器材和药品的使用

1、NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH

2、Ca(OH)2：鉴定CO2

3、CaCl2：提高细菌细胞壁的通透性

4、HCl：解离（15%）或改变溶液的pH

5、NaHCO3：提供CO2、作为酸碱缓冲剂

6、酸碱缓冲剂（Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4）：用于调节溶液pH

7、NaCl：配制生理盐水（0．9%）或用于提取DNA（0．14M或2M)

8、琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基

9、酒精：用于消毒(75%)、提纯DNA（95%）、叶片脱色、配制解离液（95%的冷酒精）及洗去浮色（50%）

10、蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原

11、二苯胺：用于DNA的鉴定（沸水浴，蓝色）

12、甲基绿：检测DNA，呈绿色

13、吡罗红：检测RNA，呈红色

14、苔黑酚乙醇溶液：用于RNA的鉴定

15、斐林试剂（甲液0．1g/mL NaOH、乙液0．05g/mLCuSO4）/班氏试剂：鉴定可溶性还原性糖（沸水浴，砖红色沉淀）

16、双缩脲试剂：用于蛋白质的鉴定（紫色）

17、苏丹Ⅲ染液(橘黄色）和苏丹Ⅳ染液(红色）：用于脂肪鉴定

18、碘液：用于鉴定淀粉（变蓝色）

19、龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色

20、改良苯酚品红染液：检测染色体，红色

21、健那绿B：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色

22、重铬酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色

23、溴麝香酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄

24、吲哚酚试剂：用于维生素C的鉴定