阿霉素耐药逆转研究

・研究进展・２００６年１２月第３卷第３５期

ＣＨＩＮＡＭＥＤＩＣＡＬＨＥＲＡＬＤ中国医药导报

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抗肿瘤药物产生多药耐药（ＭＤＲ）是导致肿瘤化疗达不到预期效果的主要原因之一。在众多抗癌药中，阿霉素是最具有代表性的药物，如何克服阿霉素的耐药行为是解决抗癌药ＭＤＲ的首要难题。目前有关抗癌药耐药逆转的报道甚多，笔者仅对阿霉素的耐药逆转情况作如下综述。１抗癌药多药耐药机理ＭＤＲ是指肿瘤细胞在反复多次应用某种药物后，不仅对初次应用的药物产生耐药，还会对作用机制不同、功能迥异、结构相差较大的其他抗癌药产生耐药。其耐药机理大致有：谷胱甘肽及其酶类的改变；Ｔｏｐｏａｓｅ－ＩＩ的降低和ＤＮＡ损伤修复能力的增强；ＭＲＰ表达的增加；ｍｄｒ－１基因及其产物Ｐ－ｇｐ（Ｐ糖蛋白）的过度表达［１，２］等均可导致细胞的ＭＤＲ出现。２抗癌药耐药逆转途径抗癌耐药表现为多药耐药，这种多药耐药临床体现为细胞内抗癌药的蓄积量降低，其逆转主要是通过增加细胞内药物蓄积，减少药物外排而实现。３阿霉素耐药逆转的研究ＭＤＲ逆转方式很多，目前已用于临床的有ＭＤＲ逆转剂如环孢霉素及类似物ＳＤＺＰＳＣ８３３、三氟拉嗪、三苯氧胺及抗癌药新剂型等［３］；联合用药；降低ｍｄｒ－１基因及其产物Ｐ－ｇｐ的表达；增强ＭＤＲ细胞对抗肿瘤药物的敏感性等；其中下调ｍｄｒ－１基因及其产物Ｐ－ｇｐ的表达是最为成熟的方式。３．１下调细胞ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ和Ｐ－ｇｐ的表达或抑制Ｐ－ｇｐ的功能杨晓葵等［４］在检测卵巢癌细胞株Ａ２７８０及阿霉素耐药株Ａ２７８０／ＡＤＭ多药耐药基因（ｍｄｒ－１）及其编码的Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的表达时，发现ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ和Ｐ－ｇｐ表达明显下降的Ａ２７８０／ＡＤＭ细胞对阿霉素（ＡＤＭ）的耐药性是Ａ２７８０细胞的８．４３倍，从而实现了在分子水平上逆转卵巢癌的多药耐药；魏虎来等［５］以多药耐药基因Ｐ－ｇｐ超表达的ｋ５６２／ＡＤＭ细胞为靶细胞，发现ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素呈高度耐药性，并与柔红霉素和鬼臼乙叉甙交叉耐药，但与ＣｓＡ无交叉耐药。ＣｓＡ和α－ＩＦＮ单独或联合应用均对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的耐药性有较强的抑制效应。流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析发现α－ＩＦＮ和ＣｓＡ单独或联合均不能下调细胞ｍｄｒｌ／Ｐ－ｇｐ的表达，反而应激性地刺激耐药细胞Ｐ－ｇｐ的合成

增加，但可抑制Ｐ－ｇｐ的功能，增加Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内阿霉素

的积聚。因而可确定α－ＩＦＮ和ＣｓＡ联合可协同逆转耐药白血病细胞的耐药性，其作用机制为抑制Ｐ－ｇｐ的功能而非下调ｍｄｒｌ／Ｐ－ｇｐ的表达水平；姬汴生等［６］研究发现ＣＪＸ１能剂量相关性地增加Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内罗丹明１２３（Ｒｈ１２３）的累计，明显抑制Ｐ－ｇｐ介导的Ｒｈ１２３外排，显著增强阿霉素对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的细胞毒作用，增加Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内阿霉

素水平，从而达到逆转阿霉素对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的多药耐药性。３．２阿霉素新剂型的应用

刘晓波等［７］将人肝癌特异性阿霉素白蛋白免疫毫微粒通过抗体介导而特异性内化进入人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞

阿霉素耐药逆转研究赵可新，王伟刚，沈国华，单靖珊，胡建平，高小曼（中国石油天然气集团公司中心医院，河北廊坊０６５０００）

［关键词］耐药逆转；阿霉素

７・研究进展・２００６年１２月第３卷第３５期

中国医药导报ＣＨＩＮＡＭＥＤＩＣＡＬＨＥＲＡＬＤ及其ＭＤＲ细胞，该免疫毫微粒能增强ＭＤＲ细胞对阿霉素杀伤的敏感性，有一定程度逆转ＭＤＲ作用；王坚成等［８］采用硫酸铵梯度法将阿霉素和维拉帕米药物同时包载到隐形脂质体内研制了新型阿霉素抗耐药性隐形脂质体（ＤＡＲＳＬｓ），体外细胞毒性实验证实该脂质体能够在体外有效地逆转肿瘤细胞耐药性，并导致耐药肿瘤细胞生长抑制；张奇等［９］将叶酸与青霉素酰化酶（ＰＧＡ）偶联，结果显示叶酸－ＰＧＡ的特异性靶向作用提高了阿霉素对ＨｅＬａ和ＳＫＯＶ３细胞的敏感性。３．３中药对ＭＤＲ逆转作用叶祖光等［１０］发现中药汉防己的有效成分汉防己甲素（ＴＴ）是一种钙离子拮抗剂，对耐药细胞株的ＭＣＦ－７／Ａｄ具有明显的选择性作用，而且基本上可以完全逆转ＭＣＦ－７／Ａｄ或ＫＢＶ２００对阿霉素或长春新碱的抗药性，可能是ＴＴ作用于Ｐ－糖蛋白从而表现出选择性抗癌作用和逆转抗药性作用。另外叶祖光等［１１］从汉防己甲素中获得另一种双苄基异喹啉化合物Ｙｓ－９６基本上能完全逆转ＭＣＦ－７／Ａｄ或ＫＢＶ２００对阿霉素或长春新碱的抗药性；谢长生等［１２］研究结果发现三根制剂可部分恢复Ｋ５６２／ＡＤＲ耐药细胞对阿霉素的敏感性，可增加Ｋ５６２／ＡＤＲ耐药细胞内阿霉素的积聚，并对外排阿霉素有一定影响；张炎等［１３］发现耐药株对姜黄素加阿霉素组的敏感性是阿霉素组的４倍（Ｐ＜０．０５），显示姜黄素能有效地逆转Ｐ－ｇｐ介导的ＭＤＲ；侯华新等［１４］发现阿霉素与板蓝根高级不饱和脂肪酸合用时，其细胞内阿霉素的含量较单独使用时明显增高，其逆转作用可能与降低Ｐ－ｇｐ药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关；韦长元等［１５］则发现板蓝根组酸活性单体－５ｂ能降低不同的肝癌耐药细胞对阿霉素的耐药性，细胞大量坏死，其细胞内阿霉素的含量明显增高，但细胞ＭＤＲ中Ｐ－ｇｐ的表达改变不明显，显示板蓝根组酸活性单体－５ｂ能逆转两种不同的肝癌耐药细胞对阿霉素的耐药性，其逆转作用可能与降低Ｐ－ｇｐ药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关；郭勇等［１６］用复方藤梨根制剂通过增加ＭＤＲ细胞内的阿霉素积聚及减少外排机制而实现对化疗的增敏作用；王树华等［１７］研究了茶多酚抑制ＭＤＡ的生成与阿霉素胞内蓄积的关系。结果表明，茶多酚对ＭＤＡ生成的抑制率与剂量成正相关。在ＯＨ诱导下，茶多酚达到一定浓度时，可明显增加阿霉素在小鼠肝组织细胞内的蓄积；黎丹戎等［１８］采用黄芩素在非细胞毒剂量时与阿霉素合用后能逆转Ａ２７８０／ＡＤＭ对阿霉素的耐药性，其逆转作用可能与降低Ｐ－ｇｐ药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关；胡军等［１９］采用ＭＴＴ法测定β－榄香烯（β－ＥＬＥ）对人乳腺癌ＭＣＦ－７／ＡＤＭ细胞药物敏感性的影响，结果显示β－ＥＬＥ可部分逆转ＭＣＦ－７／ＡＤＭ细胞的耐药性。逆转机制与增加细胞内药物积累及降低ｂｃｌ－２的表达有关。３．４ＭＤＲ逆转剂王秀丽等［２０］以荧光分光光度计测定细胞内药物浓度的改变，明确Ａｓ２Ｏ３对ＭＣＦ－７／ＡＤＭ的逆转作用，进而判断Ａｓ２Ｏ３可部分逆转人乳腺癌ＭＣＦ－７／ＡＤＭ细胞对阿霉素的耐药性，其逆转机制可能与细胞内ＧＳＴ－π的改变有关；谷贵

山等［２１］测定了异搏定与阿霉素共同作用后骨肉瘤细胞的细胞活性，发现１μｇ阿霉素单独作用２４ｈ，骨肉瘤细胞的细胞活性在９０％左右，抑制率为１０％，４８ｈ抑制率为５０％左右，而加入异搏定后，骨肉瘤的细胞活性明显降低，特别是在１μｇ／ｍｌ细胞悬液浓度时抑制率最高，２４ｈ细胞抑制率大概５０％左右，可知异搏定体外可逆转骨肉瘤多药耐药；魏志霞等［２２］发现α－干扰素可提高细胞ＳＭＭＣ－７２２１／ＡＤＭ细胞内化疗药物的浓度，增加阿霉素等化疗药物对ＳＭＭＣ－７２２１／ＡＤＭ的毒性作用，因而可逆转人肝癌多药耐药株ＳＭＭＣ－

７２２１／ＡＤ；周京红等［２３］

应用ＭＴＴ法测定不同浓度氟哌啶醇处

理的瘤细胞对０～２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素的敏感性的影响，显示氟哌啶醇具有较强的逆转Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞ＭＤＲ的作用，其逆转机制为多种途径，包括相关基因ｍＲＮＡ的表达下调，增加细胞内药物蓄积，增强阿霉素对Ｋ５６２／ＡＤＭ在Ｇ２／Ｍ期的阻

滞作用。３．５阿霉素纳米技术的应用

张炎等［２４］研究结果显示阿霉素耐药株对阿霉素纳米较对阿霉素敏感４．５倍（Ｐ＜０．０５），细胞内阿霉素浓度显著增高为其机制，因而可认为阿霉素纳米可有效逆转Ｐ－ｇｐ介导的ＭＤＲ；王良才等［２５］

也发现阿霉素纳米粒和阿霉素对Ｋ５６２细

胞细胞毒作用相似，Ｋ５６２／ＡＤＲ对阿霉素纳米粒较阿霉素敏

感２．６３倍，细胞内阿霉素浓度显著增加可能是关键因素，阿霉素纳米粒通过增加耐药细胞内阿霉素浓度有效地逆转了多药耐药。３．６特殊处理方法的应用