糖类物质的测定
实验八糖类的定量测定1
1
实验目的
1、了解3，5-二硝基水杨酸比色法测定糖的原 理。 2、掌握还原糖及总糖测定的操作方法。
糖类包括多糖、寡糖、单糖。还原糖是指含有 自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的单 糖和某些双糖（如乳糖和麦芽糖）。多糖和蔗 糖等为非还原性糖。 糖类的测定方法有物理方法和化学方法两类。 物理法是通过糖的折光率、比旋度的变化、比 重计进行测定。化学测定法主要是利用自由醛 基或酮基的还原性质，与试剂（氧化剂）进行 氧化还原反应作为测定基础。由于化学方法比 较精确，常常用于还原糖和总糖的测定。
（3）砷钼酸比色法（Somogyi铜试剂比色法） 还原糖将铜试剂还原生成氧化亚铜，在浓硫酸存在 下，砷钼酸试剂可与氧化亚铜生成蓝色复合物，蓝色 产物砷钼酸在560nm下的吸光度与还原糖含量呈正比关 系，适用于测定测定范围为25-200ug的还原糖含量。 （4）蒽酮比色法 糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，该衍生物 与蒽酮发生反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有 最大吸收。该法灵敏度高、简便快速，适用于测定动 物组织中糖原、葡萄糖的含量，也可用于测定植物材 料中可溶性糖的含量。 （5）3，5一二硝基水杨酸比色定糖法 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质干扰较 少，是糖定量测定的一种基本方法。
二、标准葡萄糖浓度梯度和样品待测液的测定
取10根25 ml比色刻度管，从0-9编号后，按下表顺序操作
空 白 管号 1mg/ml葡萄糖标 准液 样品待测液（ml） 蒸馏水（ml） DNS试剂 2.0 2.0 1.8 2.0 1.6 2.0 1.4 2.0 1.2 2.0 1.0 2.0 0 0 还原糖 （A） 5 1.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 6 7 总糖 （B2） 8 9
国标糖分测定实验报告
1. 熟悉并掌握国标法测定糖分的基本原理和操作步骤。
2. 通过实验，验证国标法测定糖分的准确性和可靠性。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理国标法测定糖分主要是通过滴定法，利用糖类物质在特定条件下与硫酸反应生成还原糖，再通过与标准氢氧化钠溶液反应，通过滴定计算出糖分含量。
本实验采用苯酚-硫酸法测定还原糖含量。
三、实验材料与仪器材料：1. 标准糖溶液（葡萄糖）2. 标准氢氧化钠溶液3. 苯酚溶液4. 硫酸溶液5. 蒸馏水6. 实验用糖样品仪器：1. 电子天平2. 滴定管3. 移液管4. 烧杯5. 试管6. 酒精灯7. 温度计1. 标准溶液的配制：- 准确称取一定量的标准糖溶液，用蒸馏水稀释至100 mL，配制成浓度为1 g/L的标准糖溶液。
2. 样品的预处理：- 准确称取一定量的糖样品，用蒸馏水溶解，定容至100 mL。
3. 苯酚-硫酸溶液的制备：- 称取苯酚10 g，溶于100 mL 95%乙醇中，加入少量硫酸，溶解后转移至棕色瓶中，备用。
4. 滴定：- 取5 mL样品溶液于试管中，加入2 mL苯酚-硫酸溶液，充分混合。
- 将试管置于沸水中加热5分钟，取出后迅速冷却至室温。
- 用标准氢氧化钠溶液滴定至溶液颜色变为浅红色，记录消耗的氢氧化钠溶液体积。
5. 计算：- 根据滴定结果，计算样品中糖分含量。
五、实验结果与分析1. 实验数据：- 样品1：糖分含量为5.2%- 样品2：糖分含量为4.8%- 样品3：糖分含量为5.5%2. 结果分析：- 通过实验测定，样品中的糖分含量与理论值基本相符，说明国标法测定糖分具有较高的准确性和可靠性。
六、实验结论本实验通过国标法测定糖分，结果表明该方法准确、可靠，可用于实际生产中糖分含量的测定。
七、实验注意事项1. 实验过程中应严格按照操作步骤进行，避免误差。
2. 实验用仪器应保持清洁，避免污染。
3. 实验过程中应注意安全，避免硫酸等腐蚀性物质的溅伤。
八、实验总结本次实验通过对国标法测定糖分的操作步骤进行学习和实践，掌握了该方法的基本原理和操作技巧，为今后的实验工作奠定了基础。
糖的测定
(一)提取液的制备
常用的提取剂有水和乙醇溶液，提取液的制备方 法要根据样品的性状而定，但应遵循以下原则： (1)取样量和稀释倍数的确定 (2)含脂肪的食品，通常需经脱脂后再以水进行提取。 一般以石油醚处理一次或几次，必要时可加热。每 次处理后，然后用水提取。 (3)含有大量淀粉和糊精的食品宜采用乙酵溶液提取。 乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀，通 常用70一75％的乙醇溶液，用乙醇溶液作提取剂 时，提取液不用除蛋白质，因为蛋白质不会溶解出 来。
(4)样品溶液测定 吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00mI，置于 250m1锥形瓶中，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入 比预测时样品溶液消耗总体积少1m1的样品溶 液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒 钟，趁热以每2秒1滴的速度继续滴加样液，直至 蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体 积。同法平行操作3份，取平均值。 4.结果计算
⑤碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混 合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下 会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度 降低。 ⑥滴定必须在沸腾条件下进行，其原因一是可以加 快还原糖与Cu+2的反应速度；二是次甲基蓝变色 反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又 会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳 定，易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防 止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而 增加耗糖量。
⑦滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从 热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。 ⑧样品溶液预测的目的；一是本法对样品溶液中还 原糖浓度有一定要求(0.1ml左右)，测定时样品溶 液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的 体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合 适，浓度过大或过小应加以调整，使预测时消耗 样液量在l0ml左右；二是通过预测可知道样液大 概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际 用量少1m1左右的样液，只留下1m1左右样液在 续滴定时加入，以保证在1分钟内完成续滴定工 作，提高测定的准确度。
饮料中糖含量的测定
饮料中糖含量的测定1. 引言饮料是人们日常生活中常见的饮品之一，而其中的糖含量对于健康具有重要的影响。
因此，准确测定饮料中的糖含量对于食品行业和消费者来说都是很有意义的。
本文将介绍几种常见的方法来测定饮料中的糖含量，并对每种方法的优缺点进行分析。
2. 理论背景2.1 光度法光度法是一种常用的测定糖含量的方法。
利用光的特性，通过测量物质溶液对光的吸收或透射度来确定物质的浓度。
在测定饮料中的糖含量时，可以将样品与某种试剂（如费林试剂或安培试剂）反应，产生有色化合物。
然后使用光度计测量样品溶液的吸光度，再根据已知浓度的标准溶液的吸光度与浓度之间的关系，推算出样品中糖的含量。
2.2 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种基于色谱分离原理的分析方法。
通过将样品溶液注入色谱柱中，在柱内通过流动相和静相的相互作用，分离出溶液中的不同组分。
HPLC可以快速、准确地测定饮料中糖类物质的含量。
在实际操作中，可以选择合适的色谱柱和检测器，调整流动相的组成和流速，以达到最佳的分离和检测效果。
2.3 化学分析法化学分析法是一种传统的测定糖含量的方法。
根据糖的特性，可以选择适当的化学试剂进行反应，通过观察反应产物的形成、颜色的变化或其他特性的变化来确定糖的含量。
例如，可以利用费林试剂的氧化性，将糖转化为有色化合物，再通过比色法确定糖的含量。
3. 实验方法3.1 光度法实验步骤：•准备标准糖溶液，即已知浓度的糖溶液，制备不同浓度的标准曲线。
•取一定量的饮料样品，使用适当试剂与之反应。
•使用光度计测量样品溶液的吸光度。
•根据标准曲线，确定样品中糖的含量。
3.2 HPLC实验步骤：•准备样品溶液，例如将饮料样品通过过滤膜滤除悬浮物，然后稀释到适当的浓度。
•调整HPLC的色谱柱和检测器，并设置合适的流动相和流速。
•注入样品溶液，进行色谱分离。
•使用HPLC检测器检测溶液中不同组分的峰值。
•通过峰面积和标准曲线，确定样品中糖的含量。
糖组分测定实验报告
一、实验目的1. 掌握糖组分测定的原理和方法。
2. 了解不同糖类物质的性质及特点。
3. 学会运用化学实验方法测定糖组分。
二、实验原理糖类物质是生物体内重要的营养物质，包括单糖、二糖和多糖等。
本实验采用比色法测定糖组分，通过观察不同糖类物质与特定试剂反应后的颜色变化，确定样品中各种糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、糖液样品、3，5-二硝基水杨酸、氢氧化钠、硫酸铜、硫酸锌、无水碳酸钠、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖标准溶液、蒸馏水等。
2. 实验仪器：可见分光光度计、电子天平、水浴锅、试管、滴管、移液器、容量瓶、烧杯等。
四、实验步骤1. 配制试剂：根据实验需要，配制3，5-二硝基水杨酸溶液、氢氧化钠溶液、硫酸铜溶液、硫酸锌溶液、无水碳酸钠溶液、苯酚溶液、亚硫酸钠溶液、酒石酸钾钠溶液等。
2. 样品处理：准确称取一定量的糖液样品，加入适量蒸馏水，搅拌均匀。
3. 比色测定：（1）葡萄糖：将处理好的样品与3，5-二硝基水杨酸溶液混合，置于水浴锅中加热煮沸，观察颜色变化，并与葡萄糖标准溶液进行比色。
（2）果糖：将处理好的样品与氢氧化钠溶液混合，置于水浴锅中加热煮沸，观察颜色变化，并与果糖标准溶液进行比色。
（3）蔗糖：将处理好的样品与硫酸铜溶液混合，观察颜色变化，并与蔗糖标准溶液进行比色。
（4）淀粉：将处理好的样品与硫酸锌溶液混合，观察颜色变化，并与淀粉标准溶液进行比色。
4. 数据处理：根据比色结果，计算样品中各种糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：（1）葡萄糖含量：X mg/mL（2）果糖含量：Y mg/mL（3）蔗糖含量：Z mg/mL（4）淀粉含量：W mg/mL2. 结果分析：（1）根据实验结果，分析样品中各种糖的含量。
（2）比较不同糖类物质的颜色变化，了解其性质及特点。
（3）讨论实验过程中可能出现的误差，并提出改进措施。
六、实验总结1. 本实验成功测定了样品中各种糖的含量，掌握了糖组分测定的原理和方法。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告
《总糖的测定实验报告》
实验目的：通过实验测定食品中的总糖含量，了解食品的营养成分，为人们合
理膳食提供参考。
实验原理：总糖是指在食品中以单糖、双糖和多糖形式存在的糖类物质的总和。
本实验采用酚硫酸法测定总糖含量，即将食品样品与酚和硫酸混合后，在高温
条件下发生酚酸反应，生成有色产物，通过比色计测定其吸光度，从而计算出
总糖的含量。
实验步骤：
1. 取适量食品样品，将其加入试管中；
2. 加入适量的酚溶液和硫酸，混合均匀；
3. 将试管放入沸水中加热，保持一定时间；
4. 冷却后，用比色计测定吸光度，并根据标准曲线计算出总糖含量。
实验结果：根据实验测定，我们得出了食品样品中总糖的含量为X%，这为我们
进一步了解食品的营养成分提供了重要的数据支持。
实验结论：通过本次实验，我们成功地测定了食品样品中总糖的含量，为人们
合理膳食提供了数据支持。
同时，也提醒大家在饮食中要适量摄入糖类，保持
身体健康。
总结：本次实验通过酚硫酸法测定了食品样品中总糖的含量，为我们提供了重
要的营养成分数据。
希望通过这样的实验，能够引起大家对于饮食营养的重视，合理搭配膳食，保持健康生活。
糖的测定方法有哪些
糖的测定方法有哪些糖作为一种重要的营养物质，在日常生活中具有重要的意义。
测定糖的含量和类型对于食品工业、医学研究、以及某些疾病的诊断有着重要的应用价值。
以下是关于糖的常见测定方法的详细介绍。
1. 比色法比色法是一种简单常见的测定糖含量的方法。
该方法根据糖的某种特定性质与某种指示剂反应后的颜色变化程度来反映糖的含量。
比色法适用于测定一定浓度范围内的糖，例如葡萄糖、果糖以及麦芽糖等。
2. 还原糖测定法还原糖是指具有还原性的糖类，例如蔗糖、麦芽糖等。
还原糖测定法利用还原性糖在酸性条件下能够还原某些化学物质(例如硝基硫酸铁)的特性进行测定。
该方法主要测定还原糖的含量，常见的方法包括费林试剂法、倍加龙试剂法等。
3. 高效液相色谱法(HPLC)HPLC是一种高效液相色谱方法，可以对多种糖进行精确分离和测定。
该方法通过样品中糖的组分在液体流动相和固体固定相交互作用的方式实现分离和测定。
HPLC测定方法准确性高，灵敏度好，应用范围广。
4. 毛细管电泳法(CE)毛细管电泳法是一种将样品中的糖分离并检测的方法。
该方法利用电场作用和毛细管的微小孔径，将样品中的糖分子按照电荷、大小等特性进行分离。
毛细管电泳法具有分离性能好、快速、高效、高分辨率等优点。
5. 酶法酶法是测定糖的一种常见方法，该方法主要是通过糖酶对糖分子的特异性识别和催化作用进行测定。
例如，葡萄糖氧化酶法可以测定血液中的葡萄糖含量，淀粉酶法可以测定淀粉含量等。
6. 红外光谱法红外光谱法是一种可以鉴定和测定糖的成分和结构的方法。
该方法利用红外光的吸收特性来识别和测量糖的分子振动。
红外光谱法具有非破坏性、快速、准确等特点。
7. 光旋转法光旋转法是一种可以测定糖的手性和纯度的方法。
该方法基于糖分子的旋光性质，通过测量糖溶液的旋光度来确定其纯度和光学活性。
光旋转法特别适用于测定不对称碳原子的手性糖。
8. 荧光法荧光法是一种可以测定糖的方法。
该方法利用某些糖类的特异荧光性质来测定糖的含量和特性。
香菇中糖类物质离与测定
香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。
用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。
气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。
关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。