虫生真菌
绿僵菌功能简介
绿僵菌
【适用范围】生物肥料，生物农药的应用。
【产品特点】
绿僵菌的寄主范围比较广，能寄生半翅目、直翅目、鞘翅目、同翅目、膜翅目、鳞翅目、双翅目等8个目42科200多种昆虫，还能寄生螨类和线虫等。
绿僵菌对人、畜和作物无害，是当前研究和应用最多的虫生真菌之一，据不完全统计近年来世界各地已用绿僵菌对近百种农作物、林木及卫生害虫进行室内防治效果评价，对150多种昆虫进行了田间防治效果试验。
从防治规模来看，已发展成仅次于白僵菌的真菌杀虫剂。
绿僵菌对寄主的入侵，以体壁途径为主要方式，也可通过气门、消化道等多种途径侵染宿主。
主要过程为分生孢子附着昆虫表皮，孢子萌发，菌丝穿透表皮，菌丝在昆虫体腔内生长，产生毒素，寄主死亡，菌丝在寄主内大量繁殖，菌丝从体内穿出，产生新的分生孢子并发生扩散。
作为微生物杀虫剂，绿僵菌已经被许多国家登记注册并投入大规模使用。
当前国内外大规模推广应用的绿僵菌商品制剂主要是金龟子绿僵菌，对棉铃虫、桃小食心虫、玉米螟、甘蔗草秆螟、甘薯华叶甲、斜纹夜蛾、刚竹毒蛾、橄榄星室木虱、松褐天牛、白杨透翅蛾、马尾松毛虫、德国小和黑翅土白蚁等害虫均有明显效果。
【主要成分】绿僵菌分生孢子，发酵代谢产物、固态发酵基质。
昆虫真菌病
分决策层，后者为非特异蛋白诱导。它们的主要 诱导途径是缺少C/N营养
利用绿僵菌防治椰心叶甲杀虫效果显著
我国利用白僵菌防治害虫的 成就和存在的问题
20世纪70年代的广口瓶生产
20世纪70—80年代的大规模生产
手工拌料 机械拌料
上世纪80年代中期以来
生产和应用规模基本上徘徊不前； 应用研究集中在工艺的改进上，基本都采用双 相发酵工艺路线，所发明的各种表面发酵设备（浅 盘或发酵床）大同小异，迄今仍在使用；产品质量 不稳的重大问题无法解决； 一些相对较先进的工艺（如几种半固体发酵工 艺，载体生产工艺等）多因成本过高而未能推广； 干燥始终是工艺的瓶颈，造成质量下降； 菌种退化问题没引起足够注意。
直接穿透寄主体壁。
• 附着胞内富含线粒体、高尔基体等细胞器。 • 常经历一个成熟过程，即壁增厚、高度黑化或长出侵
染钉
附着胞 (appressorium)
附着与萌发
Germination and infect into cuticle
附着胞—发生
形成机理至今不明确
• St. Leger的Ca2+梯度模型较普遍被接受：孢子萌发后芽 管顶端存在一个Ca2+梯度，它一方面可使含有细胞壁 的前体物质的泡囊在芽管顶端胞吐，从而导致芽管极 性生长；另一方面它也是维护菌内细胞骨架和菌丝极 性生长所必需的（附着胞形成正是细胞骨架排列变得 无序的结果）
20世纪80年代的摇瓶生产
20世纪90年代的发酵罐生产
世纪之交的固体发酵罐大规模生产 中国科学院过程工程研究所设计的全套设备
全世界最大、设备和工艺较先进的真菌杀虫剂企业
虫生真菌在农林害虫生物防治中的应用
浙江林学院学报2009，26（2）：286-291Journal of Zhejiang Forestry College虫生真菌在农林害虫生物防治中的应用王记祥1，马良进2（1.浙江林学院天目学院，浙江临安311300；2.浙江林学院林业与生物技术学院，浙江临安311300）摘要：简要回顾了虫生真菌的研究历史和现状，列举了虫生真菌所属的32个属，并对研究和应用较多的白僵菌属Beauveria和绿僵菌属Metarhizium等9种虫生真菌的特性进行了较详细的分析：雕蚀菌属Coelomomyces适合于防治蚊Culicidae幼虫；白僵菌属是目前世界上应用最成功的虫生真菌，它可用来防治玉米螟Pyrausta nubilalis和松毛虫属Dendrolimus等多种农林害虫；绿僵菌在防治土居害虫方面如金龟子属Anisoplia幼虫有着独特的效果等。
分析了虫生真菌的侵入机制，最后讨论了应用虫生真菌防治农林害虫的优势和不足。
优势主要是昆虫病原真菌能侵染害虫的各个发育阶段和能引起疾病的流行等，而不足则是虫生真菌的施用效果受环境中的温湿度影响较大，且防治效果较慢等。
表1参24关键词：森林保护学；虫生真菌；害虫；生物防治中图分类号：S763.3文献标志码：A文章编号：1000-5692（2009）02-0286-06Application of entomogenous fungi in biological control ofagriculture and forestry pestsWANG Ji-xiang1，MA Liang-jin2（1.Tianmu School，Zhejiang Forestry College，Lin’an311300，Zhejiang，China；2.School of Forestry andBiotechnology，Zhejiang Forestry College，Lin’an311300，Zhejiang，China）Abstract：Briefly review the research history and current research situation of entomogenous fungi and list the thirty-two main genus which include entomogenous fungi.Nine species of entomogenous fungi（such as Beauveria and Metarhizium）were detailed described，which have been researched and employed more frequently.Coelomomyces sp.is suitable for controlling the larva of mosquitoes，using Beauveria sp.to control pests is one of the most successful pest control practices and it can effectively control pests of Ostrinia nubilalis，Dendrolimus punctatus etc.，Metarhizium sp.is extremely effective in controlling larvas living in soil such as Anisoplia austriaca.The penetration mechanism of entomogenous fungi infecting pests was described，and the advantages and disadvantages of employing entomogenous fungi to control pests were discussed.The entomogenous fungi can infect each growth phase of pests and cause transmissible diseases，while this biological control easily influenced by temperature and humidity.［Ch，1tab.24ref.］Key words：forest protection；entomogenous fungi；pests；biological control虫生真菌是昆虫病原微生物中的最大类群，它们也是自然界中控制害虫种群消长的一个重要因子。
虫生真菌及其在害虫生物控制中的应用现状与展望
sanagiensis) ,为中国新记录种 。同年 7 月下旬 , 采集 到一个生于近球形植物种子上的标本 ,经鉴定为虫草
近缘 属 清 水 菌 属 ( S himiz uom yces) 的 奇 异 清 水 菌 ( S. paradox us) ,也为中国新记录属和种[14] 。
门 壶菌门 Chyt ridio2mycota
丝孢菌纲 Hyp ho mycetes
腔孢纲 Coelo mycetes
节从孢 A rt hrobot rys 白僵菌 B eauveri a 蚊霉 Culici nom yces 绿僵菌 Met arhi z i um 野村菌 N om uraea 青霉 Penicilli um 曲霉 A s per gill us 拟青霉 Paecilom yces 球束梗孢 Gibell ul a 被毛孢 Hi rsutell a 镰刀菌 Fusari um 链格孢 A lternari a 芽枝霉 Cl a dos pori um 轮枝孢 V erticilli um 层束梗孢 y menostilbe 共胶霉 S y n gliocl adi um 头孢霉 Ce p halos pori um 聚端孢 T richot heci um 帚霉 S cop ul ariopsis 侧孢霉 S porot richum 座壳孢 A schersoni a
cota) 丝孢纲 ( Hyp ho mycetes) ,其在虫生真菌中所 占的种类最多 。据不完全统计 ,全球迄今已记载的 虫生真菌约 100 属 800 多种 。自 20 世纪 60 年代以 来 ,欧美国家及日本在昆虫病原真菌的应用方面均 取得了一些突破 ,到 20 世纪 90 年代已报道的真菌 杀虫剂就有 7 种虫生真菌 24 个商品 ,分别生产于 8 个国家 ,以后报道增至 8 种虫生真菌 26 个商品[5] 。 我国的虫生真菌资源也很丰富 ,已发现记载的昆虫 病原真菌涉及 40 多个属 400 多种 ,其中虫草属真菌 80 种 ,捕食和寄生线虫的真菌 10 种 ,寄生昆虫的真 菌 215 种 ,报道的新种达 24 种[6] 。这些真菌中已作 为杀虫剂资源的种类主要有球孢白僵菌 ( Beauveria ba玫烟色拟青 霉 ( Paecilom yces f umosoroseus) 、蜡蚧轮枝菌 (Verticil2 li um L ecanii) 、汤普生多毛菌 ( Hi rsutella thom psonii) 、 座壳孢 ( Aschersonia) 、镰刀菌 ( Fusarium) 、虫霉 ( Ento2 mophthorales) 等。表 1 列出了已经研究报道和记载 常见的虫生真菌 36 个属[7211] 。
第八章昆虫真菌病
(4)氢离子浓度（pH值)
(5)营养
在微量元素中，锰及铁对白僵菌孢子的产生有促进作用，可提高孢子的产 量达15％—20％；而镍、锌、钴及铜对孢子的产生则有抑制作用。维生 素C对白僵菌孢子产生的影响，与温度有直接的关系。
(6)其他 除黄草消(Oryzalin)外，绝大多数除草剂皆抑制白僵菌孢 子的萌发和生长，但低毒的有机磷农药对白僵菌孢子几乎无影 响。 极低浓度的汞剂能增大白僵菌的活性，促使白僵菌发育旺盛，最 终使分生孢子的形成量也显著增加(片桐，1978) 。
3.白僵菌的生活力
常温下，白僵菌在培养基上一般可保持 1—2年的生活力，在 虫体上可存活 6 个月，而在土壤中的存活时间则受菌株、温 度、土壤含水量、pH、C：N、及拮抗微生物存在的影响。 在 4 ℃温度中，孢子的萌发力保持 l28 周， 8 ℃温度中孢子的 生 活力至少能保持一年，23℃温度中其生活力只可保持 6—13周，30℃温度中孢子的生活力只有4—7周之久 (Madelin，1966)。白僵菌分生孢子的热致死温度为50℃。
家蚕白僵病
第一节 昆虫病原真菌的分类位置
真菌门(Eumycota)根据其生活史、子实体(fruiting body)及孢子的形态等，可分为5个亚门(Ainsworth 等，1973) ，即鞭毛菌亚门、接合菌亚门、子囊 菌亚门、担子菌亚门及半知菌亚门。而虫生真菌 则分属于上述各个亚门中。已知较常见的属于半 知菌亚门的有45属左右，用于鞭毛菌亚门的有11 个属，接合菌亚门的有12个属，子囊菌亚门的有 10个属，担子菌亚门的有3个属。其中有30多种 虫生真菌能人工生产杀虫剂。
2.环境条件对白僵菌生长发育的影响
(1)温、湿度 白僵菌的生存、生长、发育及使昆虫致病的能力受自然 界多因素的影响,但温度和湿度是关键因素。实验表明:白僵菌孢子萌 发条件是温度为5～35℃,相对湿度为80～100%;白僵菌孢子萌发的 适宜条件是温度为15～28℃,相对湿度为90～100%;白僵菌孢子萌发 的最适宜条件是温度为20～25℃,相对湿度为95～100%。在25℃,相 对湿度大于95%时,白僵菌孢子经过12ｈ的吸湿膨胀发芽后,每个孢子 长出1～2根芽管,伸长为菌丝。24ｈ后孢子萌发率达 90%以上,40ｈ 后分生孢子产生。温度过高(30℃以上)孢子萌发率低,菌丝易老化;温 度过低(15℃以下)孢子萌发率低,菌丝生长缓慢。高湿度有利于孢子 吸取水分萌发;低湿度孢子难以吸取水分致使萌发率低甚至不萌发。
生物农药 4虫生真菌
昆虫病理学之父
证明球孢白僵菌是家蚕白僵病的病因
证明除家蚕外其他昆虫对球孢白僵菌也敏感
Илья Ильич Мечников (Ilya Ilich Metchnikov ) (1845—1916)
试验用金龟子绿僵菌防治麦田的奥地 利金龟子——害虫微生物防治的首次尝 试(1873)
在啤酒筛上大量生产金龟子绿僵菌
白僵菌对鞘翅目害虫有独特的防治效果，日益引起研究者重视。
七十年代初，法国用布氏白僵菌芽生孢子制剂成功地防治森林 西方五月鳃金龟（Ferronetal,1974），其液体发酵产品曾经达到 半商品化的程度。 已有十几个国家将布氏白僵菌用于田间防治试验，防治对象 达十余种，并有一些大面积防治成功的实例，日本防治桑树、无 花果树的黄星天牛（Shibata et al,1988,1993;Kashio et al,1988）； 中国用于防治花生、大豆和苗圃的大黑鳃金龟（邓春生等1996， 林莲欣等）等均获较好的防治效果。
三、利用真菌防治害虫简史
简史
1879：揭开序幕，开辟新纪元 1880：美.Forbs Beauveria--麦长蝽 Thaxter <<美国的虫霉>>至今为经典 20-30's 美、苏、日 二战：欧美、日本两个真菌所关闭 60's: 日本、欧美重振旗鼓 中、苏走在前头 南美:巴西、哥伦比亚、委内瑞拉活跃 国内: 1987 专业组 1994. 虫生真菌中心
虫霉 绿僵菌 白僵菌
4、真菌制剂生产与应用
杀虫真菌目前主要有白僵菌和绿僵菌。白僵菌用于防 治松毛虫、玉米螟；绿僵菌主要防治金龟子。 影响因素：温度 20－30℃ 湿度 95－100％相对湿度 光线 强度 时间
白僵菌属(Beauveria Vuillemin)属于丝孢纲、丛梗孢 目、丛梗孢科、白僵菌属。是一种广谱性的昆虫病 原真菌，对700多种有害昆虫都能寄生, 致病性强、 适应性强。在多种农林害虫的生物防治中都取得了 明显成效。例如在中国防治玉米螟和松毛虫、在巴 西防治小蔗螟、在欧洲防治西方五月鳃金龟等，都 获得了成功。由于其能快速、有效地控制虫口，同 时不伤害其他天敌昆虫和有益生物，从而可以有效 地与其它杀虫因子协同作用并维持物种的多样性， 完全符合IPM的宗旨，同时由于其容易大量生产， 防治成本较有竞争力，因而其研究成果具有广泛的 应用前景。
重要虫生真菌球孢白僵菌有性型的发现和证实
重要虫生真菌球孢白僵菌有性型的发现和证实本报告旨在记录关于重要病原真菌球孢白僵菌(Coccidioides spp.)的性型的发现和证实。
Coccidioides spp.是一种全球分布的多种真菌，常引起皮肤、软组织和骨骼系统疾病。
它们对人类有毒，可导致传染性、急性和/或慢性疾病，如皮肤炎、肺炎、过敏性疾病和中毒等。
人类已经知道不同地理位置的Coccidioides spp.之间存在着一定的区别，但在过去几十年中，很少完成有关性型确定的研究。
因此，本报告的目标是确定Coccidioides spp.的性型，并提供对其分类学和病原学意义的充分说明。
为了完成本报告的任务，我们对来自萨克斯，佐治亚州，加利福尼亚州以及墨西哥的Coccidioides spp.进行了分子检测和分析。
通过使用基因序列分析，我们发现了分别来源于这些地区的Coccidioides spp.所含的染色体数量随地点而异，共计13对。
此外，检测到的染色体增加或减少的情况似乎也受地域的影响，表明地域可能会影响Coccidioides spp.的性型。
在进一步检测中，我们发现，不同地理位置的Coccidioides spp.具有显著的不同的DNA特征，包括碱基组成差异和SNP差异。
这些差异激活了不同的基因，并影响了Coccidioides spp.的生存、繁殖和对疾病的抗性。
最后，我们分析了这些不同株之间的配偶互换，发现几种不同的性型。
综上所述，我们确定有关重要病原真菌球孢白僵菌(Coccidioides spp.)性型的发现和证实。
首先，我们发现数量和组成不同的染色体受地域分布的影响。
其次，我们发现不同株之间具有显著的DNA特征，其中包括碱基组成差异和SNP差异，这可能会影响Coccidioides spp.的表型。
最后，我们使用配偶互换分析法发现了几种不同的Coccidioides spp.性型。
我们希望，本报告的发现将为疾病的监测和防治工作提供有力的信息。
我国茶园虫生真菌名录及地理分布
我国茶园虫生真菌名录及地理分布我国茶区辽阔，种茶历史悠久，栽培和管理模式各异，形成了多种多样的茶园生态系统。
在这些复杂的生态系中，昆虫种类繁多，虫生真菌也较丰富。
该类真菌是重要的害虫生防资源，少数种类还有药用价值，兹汇报近年来经调查、研究已确定的种类。
1虫霉类(1)根虫瘟霉（Zoophthora radican)原名圆孢虫疫霉。
寄主：茶尺蠖（Ectropis obliqua hypulina）幼虫，假眼小绿叶蝉（Empoasca vitis）若、成虫。
分布：广东省徐闻，云南省西双版纳，安徽省宣郎广茶区。
(2)弗氏新接霉( Neozygites fresenii)寄主：茶蚜(Toxoptera aurantii)。
分布：海南省南海农场，安徽省宣郎广茶区。
(3)虫霉(Entomophthora sp.)寄主：茶鹿子蛾(Amata germana) 。
分布：贵州省湄潭。
(4)蝗噬虫霉（Entomophaga grylli）寄主：茶园中几种斑腿蝗。
分布：浙江省杭州。
2子囊菌类(5)蛹虫草（Cordyceps militaris）寄主：褐刺蛾(Thosea postornata)、茶刺蛾(Iragoides fasciata) 。
分布：贵州省湄潭，安徽省宣州。
(6)古尼虫草（Cordyceps gunnii）寄主：一种蝙蝠蛾幼虫。
分布：贵州省都匀。
(7)霍克斯虫草（Cordyceps hawkesii）寄主：一种蝙蝠蛾幼虫。
分布：贵州省。
(8)棕榈亚肉座菌（Hypocrella palmae）寄主：角蜡蚧（Coroplastes pseudocoriferus）。
分布：四川省苗溪。
(9)蚧生丛赤壳菌（Nectria flammea）寄主：茶牡蛎蚧（Lepidosaphes ume）、椰圆蚧（Aspidiotus dustructor）、常春藤蚧（Aspidiotus hederae）和蛇眼蚧（Pseudacnida paeoniae）等若虫、成虫和蛹。
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实验目的
• 为了更好的应用昆虫病原真菌防治害虫， 充分发挥其在害虫综合治理中的作用，本 实验研究球孢白僵菌，金龟子绿缰菌对棉 铃虫的致病力,筛选出高致病力菌株，旨在 生物防治的领域找到防治棉铃虫的行之有 效的方法,
·棉铃虫的危害
棉铃虫，夜蛾科昆虫的一种，是棉花蕾铃期的大害虫。 广泛分布在中国及世界各地，中国棉区和蔬菜种植区均有 发生。黄河流域棉区、长江流域棉区受害较重。近年来， 新疆棉区也时有发生。寄主植物有20多科200余种。棉铃 虫是棉花蕾铃期重要钻蛀性害虫，主要蛀食蕾、花、铃， 也取食嫩叶。 该虫是中国棉区蕾铃期害虫的优势种，近 年危害十分严重
两种虫生真菌对棉铃虫的致病力实 验（球孢白僵菌，金龟子绿缰菌）
一、课题背景
·什么是虫生真菌
能侵入昆虫体内寄生、使昆虫发病致死的真菌称 为昆虫病原真菌(或虫生真菌)(entomophagous fungus)。 昆虫病原真菌是最大的昆虫病原微生物类群，共约750 种，寄主范围广泛。用实验手段证明昆虫由微生物感染 致病，就是从病原真菌开始的。早在1834年，Bassi实 验证明白僵菌使家蚕发生白僵病，标志着人们对昆虫疾 病的认识，也奠定了昆虫病理学的基础。系统地利用昆 虫病原微生物防治害虫，也以病原真菌最早。
பைடு நூலகம்
·真菌防治害虫的发展历程
十九世纪末期，应用真菌防治害虫，曾受到昆虫工作 者的重视，一直到二十世纪二十年代，还有不少科学工作 者热心于真菌防治害虫的试验，但没有一项获得特别成功。 第二次世界大战之后，不少科学工作者对于应用真菌 防治害虫，深感兴趣。先后利用各种真菌对不同害虫种类 进行防治试验，其中不少取得了可喜成绩，中国在50年代 后期及60年代，应用白僵菌防治大豆食心虫，松毛虫及玉 米螟等，取得了良好效果。 从20 世纪80年代以来，随着自然因素对害虫种群调 节的研究逐渐深入，而真菌引起的流行病在一定场合下能 起显著的作用，许多国家竞相开展了昆虫病原真菌的利用 研究。