昆虫保幼激素的生物测定方法
褐飞虱保幼激素
南京农业大学学报 1997,20(4):108～110J ou rna l of N anj ing A g ricu ltu ra l U n iversity稻褐飞虱保幼激素酯酶活性的测定Ξ戴华国 程 薇 吴晓毅 武淑文(南京农业大学植保系,农业部病虫监测与治理重点开放实验室,南京210095)D ETER M INAT I ON OF JUVEN I LE HOR MONE ESTERASE ACT IV IT Y INTHE BROW N PLANTHOPPER,N ilap a rva ta lug ens Sta lD ai H uaguo,Cheng W ei,W u X iaoyi and W u Shuw en(Key L ab of M on ito ring and M anagem en t of P lan t D isease and In sects,M in istryof A gricu ltu re;D ep t of P lan t P ro tecti on,N an jing A gric U n iv,N an jing210095)昆虫体内保幼激素(Juven ile ho rm one,JH)的测定,最早采用大蜡螟(Ga lleria m ellonel2 la)蛹或黄粉甲(T enebrio m oliter)蛹生测的方法。
随着现代分析仪器的出现,先后曾采用气相色谱(M S)、高分辨液相色谱(HRL C)、核磁共振(NM R)及放射免疫(R I A)等方法[1～3]。
近年来采用放射化学法(RC)测定保幼激素酯酶(Juven ile ho rm one esterase,JH E)的活性。
鉴于这种酯酶在JH代谢方面的专一性,故较能正确地反映昆虫体内保幼激素滴度(JH titre)的变化,并已在烟草天蛾(M and uca sex ta)、印度谷螟(P lod ia in terp unctella)、大蜡螟、粉纹夜蛾(T richop lusia n i)、马德拉蜚蠊(L eucop haea m ad erae)、蟋蟀(G ry llus rubens)等多种昆虫保幼激素酯酶测定中应用[4～8]。
用HPLC测定松墨天牛体内的保幼激素
用HPLC测定松墨天牛体内的保幼激素
钱明惠;范军祥;秦长生
【期刊名称】《广东林业科技》
【年(卷),期】2004(020)002
【摘要】用反相高效液相色谱法检测了松墨天牛1～5龄幼虫、蛹和成虫体内的保幼激素(JH)滴度,检测到JH3和JH2,未检测到JH1.松墨天牛体内的JH3及JH2滴度变化随虫龄的增大而呈下降趋势,5龄幼虫的滴度最小,与蛹和成虫含量接近.【总页数】3页(P51-53)
【作者】钱明惠;范军祥;秦长生
【作者单位】广东省林业科学研究院,广州,510520;华南农业大学昆虫学系;广东省林业科学研究院,广州,510520;广东省林业科学研究院,广州,510520
【正文语种】中文
【中图分类】S7
【相关文献】
1.松墨天牛成虫体内的松材线虫分布和速检研究 [J], 来燕学
2.松墨天牛纤维素酶的研究Ⅳ.取食条件对松墨天牛纤维素酶活性的影响 [J], 索风梅;王浩杰;丁中文;徐天森
3.松墨天牛纤维素酶的研究Ⅱ.离体条件下金属离子对松墨天牛纤维素酶活性的影响 [J], 索风梅;王浩杰;陈洪宝;徐天森
4.松墨天牛纤维素酶的研究Ⅲ. 活体条件下金属离子对松墨天牛纤维素酶活性的影响 [J], 王浩杰;索风梅;郭付新;徐天森;丁中文
5.防治松墨天牛的新病原——松墨天牛微粒子虫 [J], 张永安;张龙;王玉珠;秦启联;蒋平
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麦红吸浆虫保幼激素含量测定
西北农业学报 2006,15(4):73～75A cta A g riculturaeB oreali2occi dentalis S inica麦红吸浆虫保幼激素含量测定李英梅,仵均祥3,成卫宁,李怡萍,侯娟娟(植保资源与病虫害治理教育部重点实验室,西北农林科技大学植物保护学院,陕西杨凌 712100)摘 要:用气相色谱法对麦红吸浆虫S itodi plosis mosellna(G ehin)成虫、麦穗幼虫、秋季滞育幼虫、冬季滞育幼虫和翌年春季活动幼虫保幼激素滴度进行了检测。
结果显示,在麦红吸浆虫成虫和幼虫的不同阶段,都可检测到保幼激素Ⅲ的存在。
比较而言,成虫保幼激素Ⅲ的滴度高于麦穗幼虫和秋季滞育幼虫,但明显低于冬季滞育幼虫和翌年出土幼虫。
关键词:小麦吸浆虫;气相色谱;保幼激素中图分类号:S435.122+.1 文献标识码:A 文章编号:100421389(2006)0420073203Determination of Juvenile H ormone in Wheat BlossomMidge,Sitodi plosis mosell a na(G ehin)L I Y ing2mei,WU J un2xiang3,C H EN G Wei2ning,L I Y i2ping and HOU J uan2juan (Key Laboratory of Plant Protection Resources and Pest Management,Ministry of Education,College of PlantProtection,Nort hwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China)Abstract:The tit res of juvenile hormoneⅢ(J H3)in adult,wheat2ear2larva,over2aut umning2larva,o2 ver2wintering2larva and over2wintered larva of t he wheat blossom midge,S itodi plosis mosell ana(Ge2 hin)are detected by gas chromatograp hy.Result s showed t hat J HⅢcould be detected in bot h adult and larva of t he wheat blo ssom midge.The J HⅢtitre in adult is higher t han t hat in wheat2ear2larva and over2aut umning2larva,but it is obviously lower t han t hat in over2wintering2larva and over2win2 tered larva.A initial analysis on t he p henomenon is given.K ey w ords:Wheat blosso m midges;Gas chromatograp hy;J uvenile hormone 麦红吸浆虫S itodi plosis mosell ana(Gehin)是小麦生产中间歇性、团块不均匀性猖獗成灾的害虫,广泛分布于欧洲、亚洲与北美洲;美国、加拿大、英国、德国、芬兰等国家均有严重成灾的记录[1]。
小菜蛾保幼激素相关基因的鉴定、表达动态及对外源调节因子的反应
小菜蛾保幼激素相关基因的鉴定、表达动态及对外源调节因子的反应小菜蛾(Plutella xylostella(L.))(鳞翅目：菜蛾科；Lepidoptera:Plutellidae)繁殖力强、对农药抗性发展快,急需探寻新的防治思路。
保幼激素(juvenile hormone,JH)是昆虫体内最重要激素,已成为新农药开发的重要靶标。
本研究基于小菜蛾基因组数据(/DBM),鉴定了小菜蛾保幼激素合成、转运、代谢、受体的候选基因,考察了各基因的表达动态；研究了饥饿、短期高温、3-二辛硫基-1,1,1-三氟-2-丙酮(OTFP)、蚊蝇醚及其混合物对小菜蛾3龄幼虫存活及生长发育的影响、各基因的表达变化及保幼激素酯酶活性变化。
根据生物信息学分析结果,Px009591是小菜蛾保幼激素酸甲基转移酶(JHAMT)候选基因,Px010755和Px010760是分别是小菜蛾核保幼激素结合蛋白(nuclear JHBP)和血淋巴保幼激素结合蛋白(hJHBP)候选基因,Px016154是小菜蛾保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)候选基因,Px004734是小菜蛾保幼激素受体(Met)候选基因。
所有基因在试虫的卵、幼虫、蛹、成虫阶段均有表达,且在幼虫期,都是4龄幼虫的表达最高,4龄幼虫中脂肪体的表达量高于表皮和中肠。
饥饿处理48h 后,试虫死亡率显著上升、蜕皮率显著降低；JHE基因表达减少,JHE活性降低；nuclear JHBP和hJHBP基因表达显著下降；JHAMT基因和Met基因表达显著上升。
32℃处理试虫24h后,蜕皮率上升；JHE基因表达显著升高,JHE活性也显著上升；JHEBP基因、 nuclear JHBP基因、hJHBP基因表达也显著上升,但JHAMT 基因和Met基因表达下降。
OTFP处理后,小菜蛾3龄幼虫蜕皮、4龄幼虫化蛹均延迟,化蛹率下降,但蛹重显著增加；除JHEBP表达升高外,JHAMT、 nuclear JHBP 、hJHBP、 JHE、Met基因表达都降低。
蚊虫抗药性检测方法 生物测定法
蚊虫抗药性检测方法生物测定法1 范围本标准规定了测定蚊虫对有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等杀虫药剂抗药性的诊断剂量法和敏感基线法。
本标准适用于淡色库蚊、致倦库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊等蚊虫抗药性的生物测定。
2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
2.1敏感基线所测蚊虫的敏感品系对某种杀虫剂的毒力回归线。
2.2诊断剂由敏感品系的敏感基线计算得到的与死亡率99%或99.9%相对应的杀虫药剂剂量值(LC99或LC9⒐9),一般以2倍LC99或LC9⒐9值区别抗性和敏感种群。
2.3 F1代采集的样本繁殖后的第一代蚊虫。
3 试虫样本多点采集。
幼虫浸渍法采用F1代四龄幼虫。
成蚊接触筒法采用野外采集的幼虫或蛹羽化后,3d~5d 未吸血雌蚊。
4 试剂丙酮、乙醚、白油、杀虫剂原药等。
5 仪器蚊笼、滤纸、吸蚊器。
6 测试条件温度:25℃±1℃,光周期:⒕L:10D,相对湿度:60%~80%。
7 敏感基线法7.1 原理依据杀虫剂应用剂量和死亡机率值关系建立毒力回归方程,以敏感品系得到的杀虫剂毒力回归线作为敏感基线。
以待测昆虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比,来确定待测种群的抗性水平。
具体是比较两条毒力回归线的D 值变化以及回归线计箅得到的半数致死量的变化。
7.2 操作步骤7.2。
l 幼虫浸渍法每只烧杯量入149mL脱氯自来水。
待测药用丙酮等比例或等差稀释至一个系列浓度,通过预实验确定药剂浓度系列范围最低浓度时幼虫死亡率小于20%最高难度大于8O%,然后吸取1mL已配制好的药液滴入水面上，用玻璃棒搅匀，然后把另一杯中预先挑选的幼虫（30只）连同50mL%~80%的水全部注人烧杯内,合计200mL水溶液整个实验保持在25℃±1℃, 相对湿度60%~80%的温室内,24h后检查死亡数死亡率剂量取对数、将死亡率转换为概率单位进行回归，求出LD50值。
7.3 死亡判断7.3.1 幼虫浸渍法轻轻触动幼虫,以不能逃避剌激视7.4 结果表述结果用抗性倍数表述,抗性倍数=待测种群LC50值/敏感种群LC5°值。
昆虫保幼激素的研究方法
昆虫保幼激素是一类重要的生物活性物质，它们能够调节昆虫的生长发育过程。
研究昆虫保幼激素的方法通常包括以下几种：
化学合成：通过化学反应合成保幼激素，并进行纯化和鉴定。
分离纯化：从昆虫体内或体外分离保幼激素，并进行纯化和鉴定。
免疫学方法：使用免疫技术，如免疫印迹法或免疫流式细胞术，来检测保幼激素的存在和分布。
分子生物学方法：使用分子生物学技术，如转录组分析、蛋白质组分析和基因组学分析，来研究保幼激素的基因表达和调节。
功能分析：使用生物学和生理学实验，比如荧光共振能量转移实验、激素敏感性实验和生长发育实验，来研究保幼激素的生物学功能。
保幼激素3(JH3)检测
迪信泰检测平台
保幼激素3（JH3）检测
保幼激素3（Juvenile hormone Ⅲ, JHⅢ）是保幼激素的一种，是一类保持昆虫
幼虫性状和促进成虫卵巢发育的激素，昆虫在发育过程中由咽侧体所分泌而成。
具有保持幼虫的特征，维持前胸腺，提高卵巢成熟等作用。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和ELISA法，可高效、精准的检测保幼激素3的含量变化。
此外，我们还提供其他动物激素检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC和ELISA测定保幼激素3样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 保幼激素3含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
动物激素的几种常用实验方法
动物激素的几种常用实验方法动物激素是由动物体内特定细胞或腺体分泌的化学物质，它们可以通过体液传递，调节和控制动物体内的各种生理过程。
为了研究动物激素的功能和机制，科学家们使用了多种实验方法。
下面将介绍几种常用的动物激素实验方法。
1.激素测定法激素测定法是最常用的实验方法之一、通过测定动物体内的激素水平，可以了解激素的分泌情况和生物效应。
常用的激素测定方法有酶免疫分析法（ELISA）、放射免疫分析法（RIA）和高效液相色谱法（HPLC）等。
这些方法可以在血液、尿液、唾液和组织等样本中测定激素的浓度。
2.激素注射法激素注射法是一种直接向动物体内注射激素的方法，用于模拟激素分泌和调控过程，以研究激素对生理和行为的影响。
常用的注射方法有静脉注射、皮下注射和腹腔注射等。
通过注射不同剂量和种类的激素，可以观察其对动物行为、生长、发育和代谢等方面的影响。
3.激素拮抗法激素拮抗法是通过给予动物体内与激素相对应的抗体、拮抗剂或激素受体拮抗剂，以阻断或抑制激素的生物效应。
这种方法可以研究激素的作用机制和生理功能。
常用的拮抗剂有抗激素抗体、激素受体阻断剂和激素受体拮抗剂等。
通过拮抗特定的激素，可以观察其在生理和行为层面上的作用和变化。
4.基因沉默法基因沉默法是一种通过降低或抑制目标基因的表达水平来研究激素功能和生理过程的方法。
常用的基因沉默技术有RNA干扰（RNAi）和转基因敲除等。
通过干扰激素合成途径或激素受体基因的表达，可以研究激素对动物发育、行为和代谢的影响，以及相关信号通路的调控机制。
5.组织培养法组织培养法是一种将动物组织或器官体外培养，以研究激素的合成、释放和作用机制的方法。
通过给予不同浓度和类型的激素，可以观察组织或器官的生理响应和变化。
常用的组织培养方法有体外腺体培养、脾细胞培养和胚胎培养等。
这种方法可通过体外实验条件模拟和重现体内的生理过程，加深对激素功能和机制的理解。
综上所述，动物激素的研究需要多种方法的综合应用。
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昆虫保幼激素是一类特殊的激素，能够促进昆虫的生长发育和保护昆虫免受环境胁迫的影响。
昆虫保幼激素的生物测定方法主要包括生物试剂盒测定法、生物活体测定法和生物分子测定法。
1.生物试剂盒测定法：这种方法使用特殊的生物试剂盒，通过观察昆虫在该试剂盒中
的反应情况来测定昆虫保幼激素的含量。
2.生物活体测定法：这种方法使用昆虫的活体来测定昆虫保幼激素的含量。
通常使用
昆虫的体质量、体长、发育时间等生理指标作为参考，来评估昆虫保幼激素的含量。
3.生物分子测定法：这种方法通过对昆虫保幼激素的分子进行测定，来确定昆虫保幼
激素的含量。
常用的生物分子测定方法包括免疫测定法、质谱测定法等。