大鼠脊髓损伤动物模型的建立
脊髓造模大鼠实验报告
一、实验背景脊髓损伤（Spinal Cord Injury, SCI）是一种严重的神经系统损伤，可能导致截瘫、感觉丧失和膀胱功能障碍等一系列并发症。
为了深入研究脊髓损伤的病理生理机制，建立可靠的动物模型至关重要。
本研究旨在通过脊髓造模实验，探讨脊髓损伤后的病理变化，为后续治疗提供理论依据。
二、实验目的1. 建立大鼠脊髓损伤模型。
2. 观察脊髓损伤后的病理变化。
3. 探讨脊髓损伤的潜在治疗策略。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：健康成年SD大鼠40只，雌雄不限，体重200-250g。
2. 仪器：手术显微镜、手术器械、电生理记录仪、脊髓损伤评分系统等。
3. 试剂：氯化钠、葡萄糖、生理盐水、肝素等。
四、实验方法1. 分组：将40只大鼠随机分为4组，每组10只。
A组为正常对照组，B组为脊髓损伤模型组，C组为脊髓损伤治疗组，D组为脊髓损伤对照组。
2. 建立脊髓损伤模型：采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。
首先，对大鼠进行麻醉，然后暴露T10-T12节段脊髓。
使用显微器械在T11椎间隙向上剪开骨面，剔除脊髓正中上方的骨头，暴露脊髓。
接着，用重物坠击器从上方打击脊髓，造成脊髓损伤。
3. 观察指标：- 脊髓损伤评分：在损伤后第1、3、7、14天，对各组大鼠进行脊髓损伤评分，包括感觉功能、运动功能和膀胱功能。
- 脊髓病理学检查：在损伤后第1、3、7、14天，对各组大鼠进行脊髓病理学检查，包括脊髓组织学观察和免疫组化染色。
- 电生理检查：在损伤后第1、3、7、14天，对各组大鼠进行电生理检查，包括神经传导速度和神经肌肉电生理检查。
4. 治疗方法：C组大鼠在脊髓损伤后给予药物治疗，D组大鼠给予安慰剂治疗。
五、实验结果1. 脊髓损伤评分：与A组相比，B组大鼠在损伤后各时间点的脊髓损伤评分均显著升高，表明脊髓损伤模型建立成功。
C组大鼠在损伤后各时间点的脊髓损伤评分低于B组，表明药物治疗对脊髓损伤有一定的治疗作用。
2. 脊髓病理学检查：与A组相比，B组大鼠在损伤后各时间点的脊髓组织学观察和免疫组化染色均显示明显的病理改变，如神经元变性、胶质细胞增生等。
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立罗玉玉;李晓东;孔麟麟;张文成;江毅【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2007(13)4【摘要】目的:建立一种简便易行的挤压性脊髓损伤动物模型.方法:将大鼠随机分为3个实验组和1个对照组,3个实验组采用改良动脉夹置于椎管壁和硬脊膜之间横行压迫脊髓,分别持续5、15及30 s,对照组只暴露脊髓后缝合.测定各组手术损伤后即刻、7、14 d脊髓运动诱发电位(MEP)并进行改良Tarlov评分.结果:3个实验组手术损伤后MEP N1波潜伏期均明显延长,主波振幅显著降低或消失;改良Tarlov评分亦显著降低,随饲养时间延长MEP和改良Tarlov评分有不同程度恢复.结论:挤压5、15、30 s可分别复制出轻、中、重度脊髓损伤大鼠模型,此造模方法无需特殊实验仪器,简便易行,可重复性强,具一定推广价值.【总页数】3页(P576-578)【作者】罗玉玉;李晓东;孔麟麟;张文成;江毅【作者单位】武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;天津市第三中心医院;武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;天津市第三中心医院【正文语种】中文【中图分类】R744【相关文献】1.完全性骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠模型的建立及尿流动力学分析 [J], 许明;张泓;刘继生;张健;尹秀婷;张雨辰2.大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价 [J], 刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿3.延迟应用重组人促红细胞生成素治疗大鼠急性挤压性胸脊髓损伤 [J], 严鑫平;杨刘柱;吴波;陈仲;谭伟4.大鼠脊髓损伤模型建立及神经源性肠功能障碍的初步评价 [J], 韩芸峰;王振宇;于涛5.大鼠创伤性脊髓损伤模型的建立 [J], 顾兵;金建波;李华南;王烁宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价
大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿【期刊名称】《创伤外科杂志》【年(卷),期】2005(007)002【摘要】目的建立大鼠牵张性脊髓损伤的动物模型,探讨大鼠脊髓牵张性损伤的病理生理改变及临床意义.方法切除大鼠T13-L2双侧椎板,显露脊髓,用特制的脊柱撑开器放置在大鼠T12-L3椎体横突上,纵向牵张,同时用皮层体感诱发电位术中监测.随机分成空白对照组(A组)及实验(B、C、D组);皮层体感诱发电位P1-N1波幅下降30%组(B组)、50%组(C组)和70%组(D)组.观察波幅下降不同程度后,大鼠的神经行为学功能改变,应用HE、尼氏染色,光镜下观察脊髓组织形态结构,采用计算机图像分析系统进行定量分析.结果随着撑开距离的增加和时间的延长,波幅下降至术前波幅,B组与A组相比,CBS评分,神经元计数、神经元截面积及尼氏体密度的变化无显著差异.光镜下脊髓神经元体积稍小,尼氏体略减少;C组及D组,CBS评分、神经元计数,神经元截面积及尼氏体密度与A组比较有显著性差异(P<0.01),光镜观察神经元间隙增大,神经元退变,减少、溶解或坏死.尼氏体明显变浅或消失.脊髓结构破坏,出现片状出血灶,大量胶质细胞浸润.结论大鼠牵张性脊髓损伤动物模型具有可重复性,可定量且模拟临床,该模型的建立为进一步了解牵张性脊髓损伤的发病机理,筛选有效的预防治疗措施奠定了良好的基础.【总页数】4页(P106-109)【作者】刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿【作者单位】第三军医大学西南医院骨科,重庆,400038;四川大学华西医院骨科,四川,成都,610041;四川大学华西医院骨科,四川,成都,610041;第三军医大学西南医院骨科,重庆,400038【正文语种】中文【中图分类】R651.2【相关文献】1.碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓功能影响的研究 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿2.bFGF对大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓神经元影响的实验研究 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿3.大鼠牵张性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及意义 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿4.牵张性脊髓损伤动物模型制备及评价 [J], 吴岳;邹国耀5.碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响 [J], 刘雷;唐康来;许建中;李起鸿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠脊髓损伤模型建立及评价
大鼠脊髓损伤模型建立及评价[摘要] 脊髓损伤的治疗作为临床上的一大难题,建立良好的动物模型对于该项疾病的研究至关重要。
脊髓损伤的修复与再生成为研究重点,只有建立标准的、可重复性高的动物模型才能进行治疗方面的进一步研究。
本文旨在介绍大鼠脊髓损伤模型建立的方法,并对常用方法进行评价。
[关键词] 脊髓损伤模型建立引言脊髓损伤是目前临床上多发且致残率较高疾病,给患者家庭、社会带来沉重负担。
脊髓损伤患者生活质量明显低于正常人群[1]。
脊髓作为人体低级反射中枢,其损伤直接影响到人体各器官、组织的正常生理功能。
为此许多学者投入到了关于脊髓损伤的研究中,研究发现中枢神经损伤后仍具备一定的再生能力。
为了找寻更好的治疗方法,标准的、可重复性高的动物模型建立尤为重要。
近年来在脊髓损伤模型建立方面已有很大进展,在此回顾常用的脊髓损伤模型建立方法并进行相应评价。
Allen’s造模法早在1911年,Allen应用重物下落敲击的方法制备出脊髓损伤动物模型[2]。
实验过程中,可分别通过对重物重量、重物下落高度及损伤截断的调整而制作出不同程度、不同类型的损伤模型,由于该种方法具有最大限度的模拟现实损伤情况,不破坏硬脊膜以防止外源性物质进入脊髓内部形成干扰,避免手术过程中脊髓外露和脑脊液渗出等诸多优点[3],一直被沿用至今,但因该方法对于损伤程度、损伤位置等具有不定性,脊髓模型的严格标准性无法达到而存在着相应的不足。
随着研究的推进,相继出现了一些Allen’s造模法的改良方法。
1 将打击头置于硬膜上,打击头与重物连接,并用重锤线调节引导玻管后进行敲击[4]。
敲击过程中,由于引导玻管及重锤线的调节大大增加了中午落下时位置的准确度。
但是也有其不足之处。
首先打击头提前置于硬膜上,会造成脊髓实验预想之外的充血损伤;再者,打击头与重物相连接,之间的连接线会影响重物落于打击头的位置,从而出现偏差,易造成不同角度偏瘫;除此之外,此装置在敲击完成时不易做到迅速挪走重物,从而造成脊髓的进一步压迫性损伤。
脊髓继发性损伤大鼠动物模型的制作
脊髓继发性损伤大鼠动物模型的制作【摘要】目的观察继发性脊髓损伤大鼠。
方法用组织化学和电子显微镜投射方法观察大鼠脊髓前角运动神经原细胞的变化。
结果继发性脊髓损伤大鼠脊髓前角运动神经细胞化学组织染色的改变。
结论组织化学染色反应物减少及电子显微镜的超微改变证明脊髓继发损伤动物模型制作成功。
【关键词】继发性脊髓损伤；化学组织染色；大鼠急性脊髓损伤后开始时常为不完全性，最后结果常为两种损害机制引起：原发性脊髓损伤和继发性脊髓损伤(SSCI)。
继发性脊髓损伤为伤后几小时至几天发生的一系列损伤激活的自身破坏过程，使最初病灶周围原来完整的组织发生自身破坏性病变，周围神经功能损害逐渐发展。
所产生的脊髓损害远远超过了原发性损伤[1]。
1 材料与方法1.1 实验材料雄性SPF大鼠60只，电子显微镜，化学试剂。
1.2 实验动物分组本实验选用雄性健康SPF大鼠60只，体重260～300 g，正常对照组：20只。
动物模型组的组织化学染色：20只。
动物模型组的电子显微镜组：20只。
1.3 实验方法1.3.1 继发性脊髓损伤大鼠模型制备1%戊巴比妥钠腹腔麻醉动物(30 mg/kg)，俯卧位固定于立体定位仪上。
以T10为中心暴露上下位锥板，咬除椎板，保持硬脊膜完整。
在T10阶段节段脊髓表面垫一曲度与脊髓表面一致的3 mm×8 mm塑料片，用30 g重物垂直压迫T10节段脊髓10 min，逐层缝合肌肉皮肤。
符合以下条件的大鼠归入损伤组：压迫时身体痉挛性颤动、尾巴痉挛性摆动、双下肢及躯体回缩样扑动；压迫后硬脊膜内充血或水肿，双下肢呈迟缓性瘫痪，斜板实验测定最大角度＜30°。
对照组大鼠只暴露脊髓。
术后不同时间点处死动物，4％多聚甲醛灌注固定，无菌条件下取损伤节段脊髓组织约1.0 cm，液氮保存或石蜡包埋。
1.3.2 组织染色标本的取材对实验动物用1％戊巴比妥钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室70滴/min滴入1％肝素钠的生理盐水500 ml，同时剪开右心耳。
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
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挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
罗玉玉 李晓东 ， ， 孔麟麟 张文成 江 毅 ， ， （． １ 武警医学院病理生理学教研室 ， 天津 ３０６ ；． ０ １２ ２ 天津市第三中心医院）
［ 摘要】目的： 建立一种简便易行 的挤压性脊髓损伤动物模型。方 法： 将大 鼠随机分为 ３ 个实验组和 １ 个对 照组 ， 个 ３ 实验组采用改 良动脉夹置于椎管壁和硬脊膜之间横行压迫脊髓 ， 分别 持续 ５ １ 、５及 ３ ， 照组只暴露脊髓后缝合 。 ０Ｓ对
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第 １ 卷 ４期 ３
５６ ７
２０ ０ ７年 １ ２月
天 津 医 科 大 学 学 报
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大鼠脊髓慢性压迫损伤模型的建立
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肤 。 术 过 程 中大 鼠后 肢 不 出现 后 肢 弹 动 ， 捏 大 鼠尾 根 手 挤 部 可 引 出反 应 ， 明不 造 成 脊 髓 损 伤 。麻 醉 苏 醒 后观 察 ， 表
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２１ ０ １年 １ ０月 第 ８卷 第 ５期
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周 长 嵩 ’ 安 春 厚
大鼠脊髓损伤模型构建方法
大鼠脊髓损伤模型构建脊髓损伤 ( spinal cord injury，SCI) 是一种致残率高、后果严重的中枢神经系统性损伤，给个人、家庭、社会带来了沉重的负担。
建立理想的动物模型是开展脊髓损伤相关研究的首要问题。
国内外已经建立了脊髓挫伤、压迫损伤、横断损伤、缺血损伤、牵张损伤和化学损伤等多种脊髓损伤动物模型。
目前常采用小型动物（大鼠、小鼠），这是由于其大多遗传背景明确，体内微生物可控制，其性状显著稳定，质量和规格也可任意选择，并且价格低廉，易于获得，便于管理。
Allen 于 1911 年采用重物坠落撞击动物脊髓背侧，复制出脊髓损伤模型，开创了脊髓损伤的标准化实验研究。
此后很多研究者在此基础上进行了许多改进。
皮质撞击装置、空气撞击装置等能精确控制撞击力度，具有很好的可重复性，但是费用很好，限制了推广应用范围。
采用重物自由下落打击在放置于大鼠脊髓表面的垫片上, 从而造出损伤模型。
模型的特点是:①模拟人类脊髓受损的过程, 临床相似度高。
②可以人为调整致伤的部位和范围。
③硬膜具有完整性, 保证无外源性成分侵入, 防止脑脊液外漏。
麻醉后，将大鼠背部至腰部的毛剔除干净。
将大鼠俯卧固定在手术板上。
用手从大鼠的肋骨向脊柱摸动，确定第十三胸椎（与第十三肋骨连接）的位置。
再沿脊柱棘突向前，确定第十胸椎的位置。
用碘伏消毒液对背部进行消毒。
以第十胸椎为中点，纵向切一道2-3cm的切口，切开皮肤，即可看到脊椎。
再次确定第十胸椎，用剪刀沿棘突将左右两侧的肌肉与棘突分离，直到看到椎板为止。
用缝针穿过分别左右两侧肌肉往两侧牵拉，暴露棘突和椎板。
用剪刀剪去棘突与棘突之间的肌肉，将第十棘突从第九和第十一棘突间游离出来。
可以明显看到脊柱的连接处，从连接处的小口将剪刀轻轻伸入，先向大鼠右侧方向，沿椎板向内深入，剪断椎板，相同操作剪断左侧椎板。
若是能顺利剪断椎板，则用镊子提住棘突稍一用力即可将棘突处的椎骨完整取下，暴露脊髓。
该过程是操作中最麻烦也最重要的过程，伸入剪刀时，千万不能伤到脊髓。