肝癌的基因治疗
肝癌的基因治疗
肝癌的基因治疗肝癌是一种常见的恶性肿瘤，在我国的发病率和死亡率都十分高。
尽管现有的治疗手段包括手术、放疗、化疗等都有一定的疗效，但肝癌的复发率和转移率仍然较高。
随着科技的发展，基因治疗成为了治疗肝癌的一种新选择。
基因治疗是通过改变或增强人体内部的基因信息来治疗疾病的一种方法。
肝癌的基因治疗主要包括两种方式，一种是基因靶向治疗，另一种是基因免疫治疗。
基因靶向治疗是指通过靶向特定的基因或基因产物来干扰或抑制肝癌细胞的增殖、分化或凋亡，从而达到治疗的效果。
其中，常用的基因靶向药物有索拉非尼、利妥昔单抗等。
索拉非尼是一种多靶点的酪氨酸激酶抑制剂，可以干扰肿瘤细胞的增殖和血管生成。
利妥昔单抗是一种单克隆抗体，可以与肝癌细胞表面的HER2受体结合并抑制其信号转导，从而达到治疗的效果。
基因免疫治疗是指利用人体自身的免疫系统来攻击肝癌细胞，从而达到治疗的效果。
其中，最有代表性的基因免疫治疗是采用负载着各种基因的病毒载体，通过将其注射到体内，使它在肝癌细胞内部实现基因转移，依托于目标基因转移后产生的功能蛋白在肝癌细胞内部发挥抗肝癌的免疫作用。
目前，已经有一些基因免疫治疗相关的临床实验正在进行中，显示出了一定的疗效和潜力。
尽管基因治疗是一种新兴的治疗手段，但是它仍然存在一些不足之处。
首先，基因靶向治疗和基因免疫治疗都存在一定的耐药性和副作用。
其次，对于某些特定的肝癌患者，由于肿瘤细胞的基因突变或变异，基因治疗可能无法起到预期的治疗效果。
此外，由于基因治疗仍处于临床试验阶段，其安全性和有效性也需要经过更多的临床实验和验证。
总之，基因治疗成为了治疗肝癌的一种新选择，其疗效和潜力也正在逐渐被人们所认识。
然而，基因治疗仍然面临着一系列的挑战和困难，只有通过不断的实验和研究，才能更好地发挥其治疗的效果。
基因治疗在肝癌中的应用前景
基因治疗在肝癌中的应用前景肝癌是一种威胁人类健康的恶性肿瘤，随着科技的进步，基因治疗逐渐成为肝癌治疗的新方向。
本文将探讨基因治疗在肝癌中的应用前景，并就其在肝癌治疗中的潜力、挑战以及未来发展进行分析。
一、基因治疗的原理及应用基因治疗是一种通过改变患者体内基因表达来治疗疾病的方法。
在肝癌中，基因治疗主要通过以下方式应用：1. 基因替代治疗：通过引入正常的抑癌基因或修复失活基因，恢复细胞正常功能。
2. 基因靶向治疗：利用RNA干扰技术、CRISPR-Cas9等工具，靶向抑制肝癌细胞中的致瘤基因，从而达到抑制肿瘤生长的效果。
3. 肿瘤免疫治疗：通过激活或增强患者免疫系统，使其能够识别和攻击肝癌细胞。
二、基因治疗在肝癌治疗中的潜力基因治疗在肝癌治疗中具有以下潜力：1. 高效性：基因治疗可以精确靶向肝癌细胞，减少对正常细胞的损伤，提高治疗效果。
2. 长效性：与传统药物相比，基因治疗可以改变患者体内的基因表达，从而实现长期疗效。
3. 个体化治疗：基因治疗可以根据患者的基因特征进行个体化治疗，提高治疗的针对性和效果。
4. 组合治疗：基因治疗可以与其他治疗手段（如手术、放疗、化疗等）相结合，达到协同治疗的效果。
三、基因治疗在肝癌治疗中的挑战尽管基因治疗在肝癌治疗中具有潜力，但也面临一些挑战：1. 递送系统的选择：基因治疗需要有效的递送系统将基因药物送到肿瘤部位，但目前仍缺乏理想的递送系统。
2. 安全性及副作用：基因治疗可能引发免疫反应、基因毒性等不良反应，需要进一步研究和改进。
3. 治疗效果的可预测性：由于肝癌具有异质性，不同患者对基因治疗的效果存在差异，需要进一步研究预测治疗效果的指标和方法。
四、基因治疗在肝癌治疗中的未来发展为了克服基因治疗面临的挑战，需要进一步加强研究和探索，包括：1. 发展更有效的递送系统：研究人员可以探索纳米技术和基因克隆技术等新递送系统，提高基因药物的靶向性和递送效率。
2. 加强基因治疗的安全性研究：通过研究不同基因治疗方案的安全性和副作用，优化治疗方案，降低不良反应发生的风险。
肝癌的基因治疗新突破
肝癌的基因治疗新突破肝癌是全球常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率一直居高不下。
传统的治疗方法如手术切除、化疗和放疗，虽然在一定程度上可以有效控制肿瘤的生长和扩散，但是仍存在许多局限性和副作用。
近年来，基因治疗作为新兴的治疗策略，为肝癌患者带来了新的希望。
本文将介绍肝癌基因治疗的新突破。
一、基因治疗的原理与方法基因治疗是利用基因工程的技术手段，将治疗相关的基因导入患者体内，以改变其基因表达模式，从而实现治疗目的。
肝癌基因治疗的方法主要有基因替代、基因靶向药物和免疫基因治疗等。
1. 基因替代基因替代是将正常的基因导入体细胞中，修复或取代异常基因，从而恢复正常的生理功能。
肝癌的基因替代治疗主要针对一些已知的癌基因突变，如p53、Rb等。
这些基因的突变会导致肿瘤细胞异常增殖和转移能力的增强，通过基因替代可以恢复细胞的正常生长和分化状态。
2. 基因靶向药物基因靶向药物是指通过干扰肝癌细胞中特定的信号传导途径或表达异常的靶标分子，从而抑制肿瘤生长和扩散。
举例来说，肝癌细胞中常表达过度的肿瘤相关因子，如表皮生长因子受体（EGFR）和血管内皮生长因子受体（VEGFR）。
通过给予相应的抗体药物，可以针对性地抑制这些信号通路，减少肿瘤细胞的生长和扩散能力。
3. 免疫基因治疗免疫基因治疗是通过引入免疫细胞活化相关的基因，增强宿主的免疫反应，达到肿瘤杀伤效果。
肝癌患者常伴有免疫调节失衡的现象，通过导入免疫刺激分子的基因，可激活宿主的免疫系统，增强对肿瘤细胞的杀伤作用。
二、肝癌基因治疗的新突破随着基因治疗技术的不断发展，肝癌基因治疗在一些关键领域取得了新的突破，以下将介绍两个重要方面的进展。
1. 载体技术的创新基因治疗需要一种安全高效的载体将治疗基因导入体内。
近年来，针对肝癌基因治疗的载体技术取得了新的突破。
例如，腺相关病毒（adenovirus）作为一种广泛应用于基因治疗的载体，具有高转染率和传递效率，能够有效地将治疗基因导入肝癌细胞。
肝癌基因突变治疗方案
摘要：肝癌是全球范围内癌症死亡的主要原因之一，其发病机制复杂，其中基因突变在肝癌的发生发展中起着重要作用。
本文将探讨肝癌基因突变的治疗方案，包括靶向治疗、免疫治疗、化疗和基因治疗等，旨在为临床医生和患者提供参考。
一、引言肝癌是一种高度侵袭性的恶性肿瘤，其发病率和死亡率在全世界范围内呈上升趋势。
基因突变是肝癌发生发展的重要机制之一，研究发现，多种基因的突变与肝癌的发生密切相关。
因此，针对肝癌基因突变的治疗方案成为研究的热点。
二、肝癌基因突变治疗方案1. 靶向治疗靶向治疗是近年来肝癌治疗领域的一大突破，通过针对肝癌细胞中特定的基因或信号通路，抑制肿瘤的生长和扩散。
以下是一些常见的靶向治疗药物：（1）索拉非尼：索拉非尼是一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可抑制肝癌细胞中BRAF、EGFR、VEGF等信号通路，从而抑制肿瘤的生长和扩散。
（2）阿帕替尼：阿帕替尼是一种口服的小分子多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可抑制VEGFR2、PDGFRβ等信号通路，具有较好的抗肿瘤活性。
（3）仑伐替尼：仑伐替尼是一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可抑制VEGFR、FGFR、TIE2等信号通路，对晚期肝癌患者具有良好的治疗效果。
2. 免疫治疗免疫治疗是一种通过激活患者自身免疫系统来攻击肿瘤的治疗方法。
以下是一些常见的免疫治疗药物：（1）PD-1/PD-L1抑制剂：PD-1/PD-L1抑制剂可抑制肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用，从而恢复免疫细胞对肿瘤的杀伤能力。
（2）CTLA-4抑制剂：CTLA-4抑制剂可阻断CTLA-4与B7分子之间的相互作用，从而增强T细胞的活性。
3. 化疗化疗是一种通过使用化学药物抑制或杀死肿瘤细胞的治疗方法。
以下是一些常见的化疗药物：（1）多西他赛：多西他赛是一种常用的化疗药物，可抑制肿瘤细胞的DNA合成，从而抑制肿瘤的生长和扩散。
（2）奥沙利铂：奥沙利铂是一种常用的化疗药物，可抑制肿瘤细胞的DNA复制和转录，从而抑制肿瘤的生长和扩散。
肝癌的基因治疗
肝癌的基因治疗
肝癌是一种恶性肿瘤，基因治疗是一种新兴的治疗方法，
旨在通过干预患者的基因来治疗疾病。
在肝癌的基因治疗中，有以下几种常见的方法：
1. 基因靶向治疗：通过针对肝癌相关的特定基因进行治疗。
例如，某些肝癌患者的肿瘤细胞中常见的基因突变可以通
过靶向药物来抑制其活性，减缓肿瘤生长。
2. 基因转移治疗：采用介导体，如病毒载体等，将特定基
因引入肝癌细胞中，以抑制肿瘤生长。
这种方法可以通过
阻断癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡等方式实现治疗效果。
3. 基因编辑治疗：利用CRISPR-Cas9等基因编辑技术，将特定基因进行精确的编辑。
例如，研究人员可以编辑肝癌
细胞中的恶性基因，以抑制其活性，达到治疗目的。
然而，肝癌的基因治疗仍处于研究和实验阶段，尚未被广泛应用于临床实践中。
目前，常用的治疗方法仍然是手术切除、放疗、化疗等传统治疗方法。
对于肝癌患者，建议根据具体情况，在医生的指导下选择适当的治疗方案。
肝癌的基因治疗方法
肝癌的基因治疗方法肝癌作为一种高度恶性的肿瘤，一直以来都是医学界关注的焦点。
传统的治疗方法如手术切除、化疗和放疗在一定程度上能够控制肝癌的发展，但对于晚期肝癌患者而言，效果并不理想。
近年来，随着基因治疗技术的发展，肝癌的基因治疗方法逐渐成为一种备受期待的新型治疗手段。
1. 基因治疗的原理基因治疗是利用基因工程技术将特定的基因或基因片段导入到患者体内，通过调控或修复异常基因，达到治疗疾病的目的。
在肝癌的基因治疗中，主要包括基因靶向治疗、基因免疫治疗和基因修复治疗等。
2. 基因靶向治疗基因靶向治疗是通过干扰肿瘤细胞的特定基因表达或功能，抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
在肝癌中，常见的基因靶向治疗方法包括RNA干扰技术和CRISPR-Cas9基因编辑技术。
RNA干扰技术利用小干扰RNA(siRNA)或小核酸酶RNA(shRNA)靶向特定的癌基因，抑制其表达，从而抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。
例如，通过靶向抑制血管生成相关因子(VEGF)的表达，可以阻断肝癌的血液供应，达到治疗的效果。
CRISPR-Cas9基因编辑技术是近年来发展起来的一种基因治疗方法。
该技术通过设计特异性的引导RNA，将Cas9蛋白导入肝癌细胞内，使其与目标基因发生特异性结合，从而实现基因组的精确编辑。
通过CRISPR-Cas9技术，可以靶向修复或抑制与肝癌相关的基因，为肝癌的治疗提供新的思路。
3. 基因免疫治疗基因免疫治疗是通过激活患者自身的免疫系统，增强免疫细胞对肿瘤细胞的识别和攻击能力，达到治疗肝癌的效果。
免疫检查点抑制剂是基因免疫治疗中的重要手段之一。
该类药物可以阻断肿瘤细胞与免疫细胞之间的抑制信号，激活免疫细胞对肿瘤细胞的攻击能力。
在肝癌的治疗中，免疫检查点抑制剂已经取得了一定的临床疗效。
另外，CAR-T细胞疗法也是一种前沿的基因免疫治疗方法。
该技术通过提取患者自身的T细胞，经过基因工程改造，使其表达特异性的抗原受体(CAR)，然后再将改造后的T细胞重新注入患者体内。
肝癌的基因治疗方法及进展
肝癌的基因治疗方法及进展引言：肝癌是全球范围内常见的致死性恶性肿瘤之一。
传统的治疗方法对于晚期肝癌效果有限，因此，基因治疗成为了探索新途径来解决这一问题的关键。
本文将重点介绍肝癌的基因治疗方法及其当前的进展。
1. 免疫细胞相关基因治疗1.1 T细胞工程近年来，T细胞工程在实体肿瘤治疗中取得了显著进展。
CAR-T细胞代表着这一领域最具潜力的应用之一，它通过改造T细胞表面的抗原受体，使其能够针对特定抗原识别和杀伤恶性肿瘤细胞。
在肝癌领域，已经进行了早期临床试验，并取得了一些鼓舞人心的结果。
1.2 利用免疫检查点抑制剂增强免疫反应免疫检查点抑制剂通过阻断PD-1/PD-L1或CTLA-4等信号通路，恢复激活T细胞的能力，从而增强免疫反应。
这种治疗方法在肝癌中也取得了一些有希望的临床结果。
2. 肿瘤相关基因的靶向治疗2.1 第一代靶向药物第一代靶向药物主要针对肝癌细胞内的EGFR、VEGFR等信号通路进行干预。
然而，由于浸润性生长和多药耐药性的存在，这些药物在晚期肝癌中显示出限制性效果。
2.2 智能靶向纳米粒子智能靶向纳米粒子是近年来快速发展起来的治疗肿瘤的新方法。
通过改变纳米粒子表面的化学结构和形态，使其具有某种特定作用，在体内精确释放药物，并集中于肿瘤组织，最大程度地减少对正常组织的损伤。
3. 基因编辑技术3.1 CRISPR-Cas9系统CRISPR-Cas9系统是现今最为流行和有效的基因编辑技术之一。
它可以定点删除、插入或替换基因序列，用于治疗肝癌的潜在应用主要集中在靶向恶性细胞中的致瘤基因和抑癌基因。
4. 其他新兴的基因治疗方法4.1 RNA干扰（RNAi）技术RNA干扰技术可以通过介导RNA结合到特定mRNA上阻碍转录或诱导特异性降解来达到抑制靶标基因表达的目的。
它已经被广泛应用于肿瘤的治疗领域。
4.2 基因表达调控剂基因表达调控剂是一类可改变目标基因表达水平的化合物。
这些化合物通过与DNA或mRNA特异性结合从而发挥其作用。
肝癌基因治疗的研究进展
肝癌基因治疗的研究进展肝癌是常见的恶性肿瘤，因为早期无症状，约70%的病人被发现时肿瘤已经扩散到其他器官，治疗难度较大。
虽然利用现有的治疗手段，如手术、化疗、放疗等能够减轻病情，但往往治疗后病情会反弹，很难根治。
因此，针对这种疾病，基因治疗成为治疗新趋势，从而挽救生命，显得尤为重要。
一、肝癌基因治疗的原理肝癌的基因治疗可以分为两类：一类是针对癌细胞外基因表达的干预，另一类是针对癌细胞内基因表达的干预。
前者主要通过逆转录多肽酶抑制剂、核酸类似物、抗体等物质对癌细胞生长环境进行调控，使环境不利于细胞生长；后者则是利用RNA干扰技术或基因编辑技术，直接阻止致癌基因的表达，或者导入激活或增强肝细胞自我修复能力的基因，从而直接影响癌细胞的生长发育。
二、1.基因治疗案例目前，基因治疗在肝癌治疗方面有了可喜的进展。
比如，早期研究发现，在人体内，有一种天然存在的抗癌基因叫做p53，而这种基因的缺失和异常表达与肝癌的发生和发展密切相关。
目前，研究人员已经成功地将p53基因导入肝癌细胞中，并促使感染终止，并且治疗效果良好，奠定了先例。
2.利用CRISPR-Cas9技术治疗肝癌利用CRISPR-Cas9技术治疗肝癌也是最近研究重点之一。
该技术能够很准确地切割DNA分子，从而直接删减或更换致癌基因的序列，确保癌细胞的抑制和肝细胞的自我修复能力的激活。
CRISPR-Cas9治疗肝癌也取得了一定的成功，奠定了对于肝癌治疗的基因治疗的可能性。
3.腾讯王者荣耀等项目的基因治疗技术的引入不久前，腾讯公司在王者荣耀手游中通过基因检测等技术引入了定向基因治疗，首次将基因治疗技术运用于游戏行业中，大大提升了肝癌基因治疗技术引进国家治疗的可及性和随着游戏的用户量的增加，基因治疗技术的治疗能力也能够扩大，进一步提升了治愈率。
三、肝癌基因治疗存在的问题尽管肝癌基因治疗领域有了可喜的进展，但仍存在一些问题。
其中包括治疗效果不稳定、肝脏组织的大面积损伤、基因编辑技术对DNA分子造成的创伤以及难以掌握具体的剂量控制等技术上的在困难。
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中国现代普通外科进展Chin J Curr Adv G en Surg・前沿与进展・Current Situation and Advance・2004年6月 第7卷 第3期 J un.2004Vol.7No.3肝癌的基因治疗王建立 徐克森 寿楠海山东大学齐鲁医院普外科 (山东 济南 250012)【关键词】肝肿瘤・基因疗法【中图分类号】R735.7【文献标识码】A【文章编号】100929905(2004)0320133203 肝癌对化疗和放疗均不敏感,能手术根治仅占15%,其他的治疗效果也不理想。
近几年随着分子生物学技术的不断发展和人们对肿瘤发病机制的不断认识,基因治疗原发性肝细胞癌取得了很大进展,本文就此作一综述。
1 基因治疗的策略 1.1 免疫基因治疗 主要集中在细胞因子和共刺激因子这两类基因上。
细胞因子在肿瘤免疫基因治疗中占重要的地位,导入免疫反应相关的细胞因子基因,使其在目的细胞稳定表达,可使肿瘤细胞周围的细胞因子浓度提高,对肿瘤细胞产生直接的杀伤作用;另一方面这些细胞因子可以诱导和增强机体的抗肿瘤免疫反应。
目前用于抗肿瘤的细胞因子有四类:白介素(IL S),干扰素(IFN2αβγ),肿瘤坏死因子(TNF2αβ),集落刺激因子(CSF)。
He2P等以质粒PCDNA3作载体介导IL22基因治疗人的原发性肝癌取得了良好的效果1。
Barajas2M2等以腺病毒为载体介导IL22基因治疗鼠的原发性肝癌,2周后肿瘤完全消失。
干扰素调控因子1(IRF21)转染肝癌细胞后,能诱导IFN2B的分泌,通过上调MHCⅠ类和MHCⅡ类分子表达,增加免疫细胞对肿瘤的有效识别来抑制肿瘤生长3。
共刺激分子包括B7、ICAM21、L FA23、VCAM21等,诱导抗原特异性T细胞的活化和增殖需要抗原递呈细胞(APC)提供2个信号,一个是MHC递呈的抗原肽对T细胞受体(TCR)的刺激,另一个就是共刺激信号。
Nabel4等将人类HLA2B7基因用DNA脂质体复合物作为载体导入肿瘤部位,对晚期HLA2B7阴性的肿瘤患者进行临床研究,取得了良好的效果。
1.2 抑癌基因 又称抗癌基因,是正常组织细胞内存在的能抑制细胞转化和肿瘤发生的一类基因,已确定的抑癌基因有DCC、NF1、NF2、RB、P53、P16、VHL等,其中P53基因是与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因,P53基因的失活与肝癌的发生和发展密切相关。
某些肝癌含有突变的等位基因和一个正常的等位基因,另外一些肝癌含有一个突变的等位基因和一个缺失的等位基因,我国肝细胞癌的P53等位基因缺失率高,P53基因突变多位于249位密码子第三个核苷酸(ACG2 A GT),食物中黄曲霉素B1摄入量与该位点突变呈剂量相关性,低分化肝癌的P53突变率高,P53突变不仅丧失阻止细胞周期和DNA损伤时诱导凋亡作用,而且突变体有获得性功能,如激活PCNA、V EGF、EGFR、IGF1受体,激活C2 M YC、MDR基因等,P53突变导致化疗药物诱导细胞凋亡作用显著下降,用P53反义核酸治疗,可以抑制肿瘤的增殖,诱导凋亡,提高药物的敏感性。
1.3 反义基因治疗 反义基因治疗是利用反义基因转录和翻译水平阻断某些异常基因的表达,以期望阻断肿瘤细胞内异常信号的传导,使瘤细胞进入正常的轨道或引起肿瘤细胞的凋亡。
反义基因包括反义RNA、反义DNA和核酶三类。
根据碱基配对的原则,能与单链DNA或mRNA特异结合,抑制基因转录、表达和复制。
Laid5等将转化生长因子α(TGF2α)的反义表达载体导入能分泌TGF2α肝癌细胞株L E2,能使其在裸鼠内的致瘤性下降。
Liao6等用H2ras的反义寡核苷酸治疗裸鼠LCI2D20人肝癌模型的实验表明反义H2ras寡核苷酸抑制H2ras的表达,能诱导细胞凋亡,抑制LCI2D20细胞的生长。
1.4 多耐药基因治疗 肝癌的化疗经常伴有不同程度的骨髓造血细胞的抑制,成为制约化疗效果的重要因素。
研究表明,肿瘤细胞产生耐药与多耐药基因(MDR)编码产生的一种跨膜P2糖蛋白有关,该蛋白把药物从细胞内泵出,使细胞内的药物浓度降低从而产生耐药。
利用肿瘤细胞产生耐药现象的机制把多耐药基因导入肝癌病人的骨髓造血细胞内,以产生抗药性骨髓造血细胞,减少骨髓的受抑制程度,在此基础上可加大化疗药物的剂量,以提高化疗效果。
1.5 自杀基因的治疗 自杀基因治疗是指把某些病毒、细菌中特有的前药转换酶基因———自杀基因导入哺乳动物后,331产生的酶能将无毒或低毒的药物前体转化成细胞毒性代谢产物,从而杀死肿瘤细胞。
目前针对肝癌基因治疗研究的有单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷嘧啶激酶/戊环鸟苷系统(HSV2T K/ GCV)和胞嘧啶脱氨酶/5氟胞嘧啶(CD/5FC)系统,前者能催化无毒的药物gancilovir(GCV)磷酸化,产生具有明显细胞毒性的磷酸化产物,通过DNA聚合酶而抑止DNA的合成,后者能将无毒的52氟胞嘧啶(52Fc)生成毒性的(52Fu)。
Mawatari7等以AFP增强子2启动子为转录调控序列,调控HSV/T K基因的表达,以逆转录病毒为载体将HSV/T K基因导入表达AFP的肝癌细胞株,随后用GCV进行治疗,结果肝癌细胞株对GCV的敏感性提高。
Publmann8等报告了嘌呤核苷酸磷自杀基因治疗是某些病毒、细菌中特有的前药转换酶基因———自杀基因导入哺乳动物后,产生的酶将无毒或低毒的药物前体转化成细胞毒性代谢产物,从而杀死肿瘤细胞。
目前针对肝癌基因治疗研究的有单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷嘧啶激酶/戊环鸟苷系统(HSV2T K/GCV)和胞嘧啶脱氨酶/5氟胞嘧啶(CD/5Fc)系统,前者能催化无毒的药物gancilovir(GCV)磷酸化,产生具有明显细胞毒性的磷酸化产物,通过DNA聚合酶而抑止DNA的合成,后者能将无毒的52Fc生成毒性的52Fu。
酸化酶基因(PNP),可将无毒的前药62甲嘌呤核苷酸糖(6MPDR)转化成毒性产物62甲嘌呤,产生强烈的肿瘤杀伤作用。
1.6 肝癌抗血管生成的基因治疗 正常情况下,机体器官保持血管生成和抗血管生成的平衡,以维持血管生理所需要的量和速度。
促血管生成因子的增加和抗血管生成抑制剂均可改变血管生成的表型。
研究表明至少15种不同的蛋白质具有促血管生成特性,其中V EGF和bF GF与实体瘤血管生成的表型关系最密切。
目前抗血管生成的基因治疗主要集中针对V EGF和bF GF两种介质。
血管生成介质刺激新生血管生长的能力受体内血管生成内源性抑制剂的干扰,后者由肿瘤细胞或肿瘤内及其周围的间质细胞分泌,主要包括血小板反应素(TSP21)、血小板因子(PF4)、可溶性flt21、an2 giostatin和endostatin。
血管内皮细胞生长因子(V EGF)和成纤维细胞生长因子(F GFS)家族是生理性血管的主要调节因子,也是肿瘤血管生成的主要刺激因子。
通过干预血管生成因子作用能使动物的肿瘤退化,如用V EGF单抗、可溶性F GF受体中和已释放的血管生成因子,或通过降低F GF结合蛋白来阻止细胞外基质释放活性bF GF9。
Sun10等以pcDNA3B质粒为载体介导反义HIF封闭小鼠的肝癌模型的缺氧诱导因子基因,结果其下游的血管内皮生长因子(V EGF)明显下调,治疗组在基因注射1周后肿瘤快速萎缩,而对照组在14～17天肿瘤由0.1cm生长到1cm。
血管生成抑制剂阻止肿瘤血管生成的机理是:(1)抑制血管内皮细胞的增殖和迁移;(2)抑制血管基底膜和细胞外基质的降解和更新,抑制血管重建。
目前常用的血管生成抑制剂有Angiostatin和Endostatin,两者是目前作用最强、实验效果最好的肿瘤血管生成抑制剂。
Wang11等以逆转录病毒为载体介导人血管内皮抑素基因Endostatin来治疗人肝癌细胞的裸鼠的动物模型,注射该基因的裸鼠在肿瘤细胞在注射16天后才形成肿瘤,第22天肿瘤体积仅为26.8mm3;而对照组在肿瘤细胞注射后12天形成肿瘤,22天肿瘤生长至498.0mm3。
Endostatin同样具有在体外明显抑制血管内皮细胞生长的作用。
Xueying Sun12以腺相关病毒为载体介导Angiostatin基因通过门静脉注射治疗大鼠的原位和转移的肝癌的模型,结果Angiostatin注射2个月后在肝细胞中的浓度达到最高峰,在原位癌的模型中治疗组肿瘤较对照组缩小68%～72%,而在转移癌治疗组中肿瘤则缩小71%～72%。
血管生成抑制剂可反复用药而不产生耐药性。
1.7 联合基因治疗 Xueying Sun13等将抗血管生成基因Angiostin和B721联合应用,治疗EL24肿瘤模型,结果发现单纯用Angiostin只能轻微抑制肿瘤的生长,用B721也只能根除直径小于0.1cm的肿瘤模型,而两者联合应用能根除直径0.4cm的肿瘤。
Drozdzik14等研究了IL22基因与HSK2T K基因联合应用治疗鼠肝癌模型的作用,疗效明显好于单独应用IL22基因或HSK2T K基因。
2 载体的选择 基因治疗理想的载体应具有安全性好、转染的特异性强、转染率高和操作简便等特点。
目前在肝癌的基因治疗实验中使用最多的是病毒载体系统,包括腺病毒载体、逆转录病毒载体、腺相关病毒载体、SV40病毒载体等;非病毒载体系统主要是脂质体、质粒介导。
目前使用的载体各有其优缺点,尚无完美的理想载体。
腺病毒载体有许多优点,如运载的基因片段较大,可达36kb,其不仅可感染分裂期细胞,也可感染非分裂期的细胞,转染效率高表达稳定,它不需要整合到宿主细胞的基因中,因此不会导致宿主细胞恶变,具有较高的安全性,但外源基因只能瞬间表达。
但腺病毒在体内存在复制的可能,能引起程度强烈的炎症反应。
LUO15等以腺病毒为载体用内皮抑素预防裸鼠大肠癌术后肝转移,结果发现内皮抑素在体内特别是肝组织内高表达,外周血和肝静脉血在注射后第5天达到高峰,实验组较对照肝转移瘤数明显减少,并且转移瘤的血管密度较对照组明显减少。
重组逆转录病毒载体能将目的基因选择性的整合入增殖活跃的细胞的染色体中,而不整合到无分裂的细胞,特别适于肿瘤的治疗,但在体内可发生补体介导的病毒失活,影响目的基因的转染率。
腺相关病毒(AAV)是一类无囊膜的单链DNA 缺陷型病毒,腺相关病毒属细小病毒科,目前还未发现其对人体可产生任何病理后果。
是目前世界上最简单最小的动物病毒。
AAV载体最大的特点是AAV能够特异性整合到宿主细胞19号染色体DNA中;外源目的基因通过AAV的启动子激活而表达相应的产物;同时对人类无致病危险,无毒性,病毒颗粒比较稳定。
腺相关病毒载体对分裂和非分裂细胞均有感染作用,在不发生整合的情况下,AAV可表达插入其内的外源基因,可能有利于转染生长缓慢的肝癌细胞。