全国艾滋病检测技术规范
HIV-1抗原检测技术规范
HIV-1抗原检测技术规范1 范围本章规定了HIV-1P24抗原检测的方法和用途。
适用于对人血液标本和病毒培养上清液中HIV-1P24抗原的检测。
2 规范性引用文件NIAID，Virology Manual for HIV Laboratory, NIH Publication,No.97-3828, Jan 19973 HIV－1P24抗原检测的意义3.1 HIV-1感染窗口期、HIV抗体不确定或HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。
3.2 第四代HIV检测试剂的阳性结果的辅助诊断。
3.3 监测病程进展或抗病毒治疗效果。
3.4 HIV分离培养，病毒复制状况的监测。
4 实验室要求同HIV抗体检测。
5 检测方法及程序5.1 试剂：抗体夹心ELISA方法，应使用经国家药品监督管理局批准注册的试剂。
5.2 样品：血清、血浆或病毒培养上清液。
5.3 定性检测5.3.1 筛选试验按照试剂盒说明书提供的标准判断有反应或无反应。
5.3.2 确证试验是P24抗原的中和试验，用于排除筛选试验的假阳性。
待检样品先与中和剂（P24 抗原的抗体）共同孵育，如果样品中存在P24抗原，中和抗体将与之结合形成复合物，而不能与固相载体上的捕获抗体结合。
然后，用这样处理过的样品重复筛选实验的步骤，同时做一孔未中和的原始样品对照，将中和与未中和孔的OD值进行比较，如果中和孔的OD 值下降50 % 以上，认为样品中的P24 抗原是真正的阳性；如果中和孔没有出现OD值的下降，认为P24抗原的反应性可能是假阳性，需要做RNA检测或随访做进一步确证。
5.4 定量检测将 P24抗原的标准物质稀释成包含0.0和125pg/ml 二个浓度在内的六个不同浓度的系列标准，进行检测。
以横坐标为P24抗原的浓度（pg/ml ），纵坐标为OD值，绘制出标准曲线。
测出未知标本的OD值以后，在标准曲线上查出抗原的浓度。
如果未知标本的OD值超出标准曲线上最高抗原浓度的OD值，则需用正常人血清将标本稀释以后再行检测。
疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范
疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范为了加强对我县艾滋病检测工作的管理，规范检测技术，提高检测工作质量，根据《全国艾滋病检测技术规范》，特别制定本单位的艾滋病检测技术规范。
一、检测机构及人员由检验科承担检测任务，检测人员有：赵卫华（专职）李德顺.张力争.田雅莉均为兼职，主要承担HIV抗体检测初筛工作。
二.样品的采集和处理1血清样品的采集和处理用一次性注射器（或真空采血管）抽取约3ml静脉血，室温下放置1—2h，待血液凝固.血块收缩后，再用3000r/min离心15min,吸取血清备用。
2.抗凝血样品的采集和处理用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
3.采集样品注意事项采集样品时应注意安全，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作，应戴双层手套。
4样品的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（一周）内进行检测的样品可存放于2-8℃5样品的接收核对样品与送样单，检查样品管有无破损和遗漏。
如发现遗漏应立即将存留的样品移出，对样品管和盛器进行消毒。
同时报告有关领导和专家。
检查样品的状况，记录有无溶血，微生物污染，血脂过多以及黄疸等情况，如果污染过重或者认为样品不能接收，则应将样品完全废弃。
并将样品情况立即通知送样人。
打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物可能溅出，则应在安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩，防护眼镜，以防皮肤或黏膜污染。
6.接收样品时应填写样品接收单。
三.抗—HIV检测的方法和程序1.常用筛查方法是:酶联免疫吸附试验(ELISA)；原理:双抗原夹心法(略)实验准备: 实验开始前将试剂盒和样品放置在室温(18—23℃),按实验室SOP 做好试剂准备。
2.实验操作程序:1)设空白对照1孔,阴性对照3孔,阳性对照2孔。
2)加阴.阳性对照.待检血清，加样量均为50ul,混匀，封板，置37℃温育30分钟后，洗板5次，拍干板孔内洗涤液。
HIV检测规范
1 范围本章规定了HIV抗体的检测方法、结果报告及质量控制。
适用于各级各类医疗、疾病预防控制、检验检疫、采供血及卫生保健机构。
可作为对HIV感染者诊断和监测的实验室依据。
2 规范性文件引用《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》（中华人民共和国卫生行业标准，WS293-有效版本）。
Consolidated Guidelines on HIV Testing Services. WHO July 2015Statement from the Surveillance and Survey Working Group and the Laboratory Working Group to the Office of the Global AIDS Coordinator.26 Nov.2006.Guidelines for using HIV testing technologies in surveillance. UNAIDS/WHO.2009.《艾滋病病毒抗体快速检测技术手册》（中国疾病预防控制中心，2011年版）3 HIV抗体检测实验室要求应符合国家对实验室生物安全的有关要求。
实验室的质量控制按本规范相关章节规定执行。
4 HIV抗体检测的目的和要点4.1 HIV抗体检测的目的4.1.1 HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。
4.1.2 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。
4.1.3 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。
4.1.4 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。
4.2 HIV抗体检测的要点4.2.1 根据目的选择检测方法及检测策略。
4.2.2 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。
4.2.3 结果判定以试剂盒说明书为标准。
全国艾滋病检测技术规范2009解读郭晓黎
血浆：将采集的抗凝全血1500～3000r/min离心15min，上层即为血浆，吸出置于合适的容 器中，备用。
血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5～10ml静脉血，室温下自然放置 1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15min，吸出血清，置于合适 的容器中，备用。
HIV抗体检测实验室要求
应符合《全国艾滋病检测工作管理办法（ 2006）》中对实验室人员、建筑设施和设备 等条件的要求。
实验室的质量保证和实验室安全防护按本规 范相关章节规定执行。
HIV抗体检测的目的和要点
HIV抗体检测的目的
HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特
九个章节涉及样本采集、检测技术、生物安全等全面质量管理体系 ，合并了2004版第十章试剂评估的内容到质量管理章节。
第一章 样本的采集和处理
一、规范性引用文件
《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共 和国卫生行业标准 WS 293-2008
《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞 检测质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控制 中心，2006年2月）
核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢 漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时 报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。
检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过 多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受 ，应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。
全国艾滋病检测工作管理办法(卫疾控发〔2006〕218号)
全国艾滋病检测工作管理办法(卫疾控发〔2006〕218号)一、背景艾滋病是一种严重危害公共卫生的疾病，严重影响了人类的生命健康和社会经济发展。
由于病毒隐藏性强、病程长、潜伏期长等特点，易引起感染者的恐慌和社会的恐慌，严重侵犯了感染者和患者的基本人权。
在目前世界范围内，艾滋病疫情的传播仍然十分广泛，我国也不例外。
为了有效地防控艾滋病的传播，并保障感染者和患者的基本人权，中国国家卫生计生委于2006年颁布了《全国艾滋病检测工作管理办法》。
二、主要内容《全国艾滋病检测工作管理办法》主要包括以下内容：1. 检测机构的设置与管理为了确保检测结果的准确性和可靠性，文中规定了检测机构的设置原则，明确了设立检测机构的审批程序、机构类型、人员条件等规定。
此外，文件还对检测机构的质量管理、信息管理和医疗废物管理进行了详细规定。
2. 检测的范围和内容为了有效地防控艾滋病的传播，文中规定了对HIV感染的人员、艾滋病患者、重症肺结核患者等人群进行检测，检测内容主要包括血清学检测和核酸检测两部分。
3. 检测的程序与技术流程文中规定了艾滋病检测的程序和技术流程，以确保检测结果的准确性和可靠性。
具体包括检测前的知情告知与个人同意、检测方法的选择与技术操作、检测结果的分析与判定等环节。
4. 管理与服务为了加强对感染者和患者的管理和服务，文中规定了如何进行艾滋病检测工作的管理与监督，明确了通知、咨询、医疗服务、病例报告等方面的具体规定。
此外，文中还对感染者、患者的隐私保护、互助共享等健全服务体系进行了规定。
三、意义《全国艾滋病检测工作管理办法》的出台，标志着我国全面加强艾滋病防控工作，重视艾滋病的检测与诊治，为有效防控艾滋病的传播提供了有力的法律支持。
此外，文中还强调了检测机构必须保护被检测者的隐私，充分考虑了感染者和患者的基本人权和尊严，这是十分重要的一点。
《全国艾滋病检测工作管理办法》的出台有着非常重要的实际意义，对我国艾滋病的防治工作起到了积极的促进作用。
全国艾滋病检测技术指导规范
修改、增补和完善
(6) 完善了检测报告。 A: 抗体筛查和复检报告整合为 HIV抗体筛查检测报告 B: 增加HIV-1核酸检测报告,婴儿艾滋病感染早期诊断
检测报告 C: 取消了流行病检测HIV抗体检测报告单、艾滋病病毒
抗体检测数和阳性人数统计报表、艾滋病职业暴露 个案登记表和艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表
附表2
送检单位
送检样品
姓名 国籍
身份证号 现住址
户籍地址 检测方法
WB RIBA/LIA
其他 结论
检测者 检测单位（公章）
HIV抗体确证检测报告
全血□ 血浆□ 血清□ 口腔黏膜渗出液□ 尿□ 其它：_____
编号: 送检日期 年 月 日
送检人群
年龄
性别
职业
民族
婚姻 状况
文化 程度
□□□□□□□□□□□□□□□□□□
用于该检测策略的三种试剂，至少 有一种样品S/CO比值≥试剂说明书 中给出的特定阈值，可报告“HIV
抗体阳性”，无需再做免疫印迹试
验；否则，应进一步作免疫印迹试
验，结果按照免疫印迹试验报告的 要求进行，见图6。此流程也可用 于发光试剂试验
筛查阳性反应样品 酶免或发光试剂 根据S/CO值判断
高S/CO值 报告抗-HIV阳性
HIV核酸定性与定量、基因型检测和HIV-1分离培养。
尿液和口腔黏膜渗出液
尿液：推荐使用专用采尿管，保持尿液稳定。尿液样品可采集随机 尿，女性经期应取中段尿。 口腔黏膜渗出液：使用试剂盒提供的容器收集样品。存放时间和是 否冻存以试剂盒说明书为准。口腔黏膜渗出液应采集口腔渗出液,不 是唾液。
样品的采集和处理
特定条件的用于确证的三种酶联免疫、三种快速试验或酶联加快
全国艾滋病检测工作管理办法
全国艾滋病检测工作管理办法（卫生部卫疾控发〔2006〕218号2006年6月12日）第一章总则第一条为加强对全国艾滋病检测工作的监督管理，规范艾滋病检测实验室的设置和验收，确保艾滋病检测工作质量，依据《中华人民共和国传染病防治法》、《艾滋病防治条例》和国家相关法律、法规的规定，特制定本管理办法。
第二条卫生部主管全国艾滋病检测及其监督管理工作，县级以上地方卫生行政部门主管辖区内的艾滋病检测及其监督管理工作。
第三条中国疾病预防控制中心及各省、自治区、直辖市疾病预防控制中心承担艾滋病检测的日常管理工作。
各级疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等承担职责范围内的艾滋病检测工作，并接受中国疾病预防控制中心及省、自治区、直辖市疾病预防控制中心的业务指导。
第四条本管理办法适用于全国所有开展艾滋病检测工作的机构。
第二章艾滋病检测实验室的设置第五条省级以上卫生行政部门根据医疗卫生机构布局和艾滋病流行情况，统筹规划确定承担艾滋病检测工作的实验室。
第六条国家对艾滋病检测实验室实行分类管理，按照实验室的职能、开展检测工作的性质及范围共分三类实验室，分别是艾滋病参比实验室、艾滋病检测确证实验室、艾滋病检测筛查实验室。
（一）艾滋病参比实验室艾滋病参比实验室设在中国疾病预防控制中心。
其职能包括：1、承担全国艾滋病检测实验室网络建设的业务技术指导和评价工作。
2、建立全国艾滋病检测质量保证及质量控制体系，组织国家级实验室能力验证和艾滋病诊断试剂临床质量评估。
3、承担艾滋病检测疑难样品的分析和确证，对有争议的检测结果进行仲裁，出具最终检测报告。
4、开展应用性研究，承担与艾滋病防治相关的病原学鉴定、现场综合防治、调研、监测、临床治疗等工作中的相关检测任务。
5、建立国家艾滋病病毒毒种库、样品库、质控品库、基因库和细胞库。
6、为艾滋病确证中心实验室开展省级实验室质量管理、省级艾滋病诊断试剂临床质量评估和自愿咨询检测等工作提供技术支持和指导。
艾滋病初筛实验室检测技术规范
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③运输高致病性病原微生物菌毒株及样本 应经省级人民政府卫生主管部门批准。在省内 运输经省人民政府卫生主管部门批准，需要跨 省或运往国外的由出发地的省人民政府卫生主 管部门初审后，报国务院卫生主管部门批准。 通过民航运输的高致病性病原微生物菌毒株还 应当经国务院民航主管部门批准。
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4、运送感染性材料必须要有记录。
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四、样品的接收 1、必须由经过培训的、穿戴防护衣的工作
人员打开，用后的包裹应消毒。
2、核对样品送检单，检查样品管有无破损 和溢漏、有无严重溶血、微生物污染、血脂过 多以及黄疸等情况，如污染严重应将样品安全 废弃并告知送样人，打开标本应在生物安全柜 中进行并配以生物安全二级个人防护。
3、接收样品时应填写样品接收单。
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实验室管理
一、生物安全防护
1、艾滋病实验室操作，个体防护为 生物安全二级防护，其具体要求为：进入实 验室应穿隔离衣、戴(双层)手套、戴防护眼 镜（必要时），不用戴手套的手触摸暴露的 身体部分。
2、禁止采用口腔吸液管，工作完毕
要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%-
A级：当人或动物与之接触时能够导致永久性 的残疾、构成生命威胁或致死疾病的感染性物 质。
①UN2814（感染性物质对人感染），如：炭 疽杆菌培养物、埃博拉病毒、鼠杆菌培养物等。
②UN2900（感染性物质只对动物感染），如： 非洲猪热病毒、口蹄疫病毒、牛疫病毒等。
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B级：未达到A级的感染性物质划为B级。
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④、运输高致病性病原微生物菌毒株应当由 不少于2人专人护送，有关单位或者个人不得通 过公共电（汽）车和城市铁路运输高致病性病原 微生物菌毒株。需要通过铁路、公路、民用航空 等公共交通工具运输高致病性病原微生物菌毒株， 承运单位应当采取措施确保高致病性病原微生物 菌毒株的安全。
2全国艾滋病检测技术规范修订版共123页文档
样品的保存（四）
• 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样 品，无论确证结果如何，均应将剩余的样 品保存至少10年，特殊用途或专项项目的 样品根据具体要求确定保存时间。
样品的运送
• 应符合生物安全要求； • 要获得相应部门批准并由具有资质的人员
专程护送； • 应采用三层容器对样品进行包装，随样品
应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。 送检单应标明受检者姓名、样品种类等信 息，并应放置在第二层和第三层容器之间。
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。
样品的保存（二）
• 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进 行检测的可存放于4℃，3个月以内应存放 于-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。
样品的保存（三）
• 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样 品应及时送确证实验室，筛查阴性样品， 可根据具体需要决定保存时间，建议至少 保存1～2个月。特殊用途或专项项目的样 品根据具体要求确定保存时间。
② 在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和 化学发光法，进一步明确了不同情况下的 检测策略；
修订版（二）
③ 在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇 所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适 用于窗口期的集合核酸检测方法；
④ 根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药 检测；
解读全国艾滋病检测技术规范ppt课件
确证实验检测的流程
方法：免疫印迹试验（WB）条带免疫试验，放射免疫沉淀试 验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。 试剂选择：使用HIV-1/2混合型试剂进行检测。 结果：阴性反应，报告HIV抗体阴性（—） 阳性反应，报告HIV—1抗体阳性（+） 不是阴性反应，又不满足阳性判断标准，报告HIV抗体 不确定（±） 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展 或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报 告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续 随访到8周。如带型没有进展或称阴性反应则报告阴性；满足 HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视 情况决定是否继续随访。
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样品保存
用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下， 短期（1周）内进行检测的样品可存放于2－8℃。 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃ 以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置 于-80℃。 用于CD4+/ CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存， 样品采集时间超过48h则不可检测。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证 实验室，筛查阴性样品可根据具体需要决定保存时间，建 议至少保存1~2个月。特殊用途或专项项目的样品根据具 体要求确定保存时间。 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样品，无论确证结 果任何，均应将剩余的样品保存至少10年，特殊用途或专 项项目的样品根据具体要求确定保存时间。
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HIV抗体检测
目的 ： 监测、诊断、及血液筛查的HIV抗体检测 要点： 筛查试验阳性不能出阳性报告； 严格遵守实验室标准操作程序； 严格按照试剂盒说明书操作； 注意防止样品间交叉污染。 HIV抗体筛查试验的方法 ELISA 快速检测（RT）：明胶颗粒凝集试验（PA）； 斑点EIA或斑点ELISA（dot-EIA）； 斑点免疫胶体金（胶体硒）快速试验； 艾滋病唾液检测卡；其他。
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全国艾滋病检测技术规范第一章样品的采集和处理1 范围本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、血浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 规范性引用文件Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2001.16 UNAIDS/01.22E ISBN 9713-92-063-7.3 操作步骤3.1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下：3.1.1 血清样品采集和处理3.1.1.1 用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置12h，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血清备用。
3.1.1.2 如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤后，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
3.1.2 抗凝血样品采集和处理3.1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
3.1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
3.1.2.3 用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在48h内分离PBMC和血浆，否则应在2448h内分离血浆和血细胞。
病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2；CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。
3.1.3 采集样品注意事项3.1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒说明书有特殊要求除外）。
3.1.3.1 采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV 感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
3.2 样品的保存3.2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。
3.2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
3.2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不可检测。
3.3 样品的运送3.3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
3.3.2 应采用WHO提出的三级包装系统3.3.2.1 第一层容器：装样品，要求防渗漏。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。
3.3.2.2 第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。
3.3.2.3 第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。
在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。
3.3.3 血清和血浆样品应在28℃条件下由专人运送。
用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18?23℃运送。
每一包装的体积以不超过50ml为宜。
3.3.4 运送感染性材料必须有记录。
3.3.5 如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20℃以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。
3.3.6 特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。
3.4 样品的接收3.4.1 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
3.4.2 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。
如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。
> 3.4.3 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。
如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。
并要将样品情况立即通知送样人。
3.4.4 打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。
3.4.5 因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。
3.4.6 接收样品时应填写样品接收单。
第二章 HIV抗体检测1 范围本章规定了HIV抗体的检测方法、检测程序、检测报告及检测策略，适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。
可作为对HIV感染者/AIDS病人的诊断、报告和处理的实验室依据。
2 规范性引用文件Revised recommendations for the selection and use of HIV antibody tests. WHO/UNAIDS Revised version 2001.实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）。
3 HIV抗体检测实验室应符合《全国艾滋病检测工作规范（1997年版）》中对检测实验室人员、建筑设施和设备等条件的要求。
应符合《实验室生物安全通用要求》（GB 19489-2004）对II级生物安全实验室（BSL-2）的各项要求。
实验室的质量保证按本规范第八章规定执行。
实验室安全防护按本规范第七章规定执行。
4 HIV抗体检测的目的和要点4.1 HIV抗体检测的目的4.1.1 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查。
4.1.2 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
4.1.3 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。
4.1.4 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。
4.2 HIV抗体检测的要点4.2.1 筛查试验阳性不能出阳性报告。
4.2.2 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。
4.2.3 严格按照试剂盒说明书操作。
4.2.4 注意防止样品间交叉污染。
5 常规HIV抗体检测的方法和程序HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确认试验。
5.1 HIV抗体检测筛查试验5.1.1 筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。
推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。
5.1.2 筛查方法5.1.2.1 常用的筛查方法是酶联免疫试验（ELISA）目前国内外主要使用第三代（双抗原夹心法）试剂，少数使用第二代试剂。
血源筛查仍以第三代ELISA 为主，国际上有些国家和地区已将线性免疫酶测定（第四代ELISA试剂）用于血源筛查。
第四代ELISA试剂是最近发展起来的HIV抗原抗体联合测定试剂，可同时检测P24抗原和抗HIV-1/2抗体。
与第三代抗HIV-1/2试剂相比，检出时间提前了4~9.1d。
其优点在于能同时检测抗原抗体，降低血源筛查的残余危险度。
5.1.2.2 快速检测（RT）及其它检测随着对HIV感染者和AIDS病人抗逆转录病毒治疗的进展，及对无症状HIV感染者提供自愿咨询检测（VCT）的迫切需求，简便、快速的HIV检测方法被广泛应用。
常用的主要有以下几种：（1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。
当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。
PA试剂有两种，HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂（AFD HIV-1/2 PA），已经我国食品药品监督管理局（SFDA）注册批准；HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂（SERODIA-HIV-1/2）可初步区分HIV-1型和HIV-2型，目前我国尚未引进。
（2）斑点EIA或称斑点ELISA（dot-EIA）：以硝酸纤维膜为载体，将HIV抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。
加血清样品作用，以后步骤同ELISA。
阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。
反应时间在10 min以内，使用抗原量少。
（3）斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：与斑点EIA相似，也是以硝酸纤维膜为载体。
区别在于不用酶标记抗体，而代之以红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤法作为洗涤方法。
试剂稳定，可室温长期保存。
试验时不需任何设备，迅速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的ELISA，适用于应急检测、门诊急诊个体检测。
目前已有在国内被SFDA批准注册的国外进口试剂和国内产品。
一般可在10?30min内判读结果。
（4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶免疫间接法。
主要检测唾液中的HIV IgA与IgG抗体，敏感性特异性与ELISA 相近，可避免静脉穿刺。
但样品预处理时间长且售价较高。
以唾液为样品测定HIV抗体的ELISA、免疫印迹法（WB）试剂已经美国FDA批准。
（5）其它快速筛查试验方法：家庭HIV检测（Home Access System）等。
5.1.2.3 尿液HIV抗体检测1996年美国FDA首次批准HIV-1尿液ELISA试剂，我国也正在研制尿液HIV抗体检测试剂。
主要适用于静脉注射毒品（IDUs）人群和其它高危人群的大面积流行病学调查、监测。
筛查阳性者仍需采血做确认试验才能确定。
5.1.3 筛查试验根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛和重复检测（复检）。
5.1.3.1 初筛试验：以第三代ELISA（双抗原夹心法）为例。
（1）实验准备：试验开始前将试剂和样品放置在室温(18?23℃), 按实验室SOP做好试剂准备。
磷酸盐缓冲液：若液体内有结晶,应放置在37℃直至溶解，用蒸馏水1：25稀释浓缩液，4℃保存2周。
TMB底物液：使用前配制，TMB液和过氧化脲液等量混匀。
1M硫酸终止液：85 ml蒸馏水中加入5 ml浓硫酸。
备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血清后，按试剂盒说明书以及质控和安全防护要求进行筛查检测。