第九章 维生素类药物的分析
9第九章 维生素类药物的分析new(药物分析)
淡黄色棱形结晶 57℃~58℃ (棕榈酸酯) 无定型或结晶 28℃～29℃
天然维生素A主要是全反式维生素A
尚有多种其它(多烯顺反)异构体
名 称 维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab 形 式 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 λmax（nm） 325 325.5 328 328 319 320.5 311 310.5 323 323 324 324
CH3
CH3
CH3
CH3
9
8
7
5
6 4
3
CH2OR
1
CH3
2
对酸不稳定，遇Lewis或无水氯化氢乙醇液，可发生脱水反应，生成 脱水维生素A：
酯较稳定。 密封在凉暗处保存外，还需充氮气或加入合适的抗氧剂。
紫外吸收特性 共轭多烯醇的侧链结构，λmax(nm): 325nm～328nm， 可鉴别和含量测定。 与三氯化锑呈色 在无水无醇氯仿中与三氯化锑试剂作用， 生成不稳定的碳正离子，显蓝色，渐变成紫红色。 鉴别、比色法含量测定。
Thiamine Hydrochloride 盐酸硫胺
氯化4-甲基-3[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)噻唑鎓盐酸盐
硫色素反应 噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨 基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素，后 者溶于正丁醇中呈蓝色荧光。
CH3 N N NH2 CH2 N ClS CH2CH2OH HCl CH3
Vit A及异构体：
E
1% 1cm
紫外吸收（乙醇）
相对生物 效价 （%）
100 75 24 15 21 24
维生素
第九章 维生素类药物分析练习思考题1.将维生素A溶于无水乙醇-盐酸溶液中，测定紫外吸收光谱，在326nm波长处有一吸收峰，而将此液置水浴上加热，冷却后，在300-400nm范围内出现3个吸收峰，这是为什么？2.用紫外分光光度法测定维生素A含量时，采用三点校正法的目的是什么？3.药典规定以什么表示维生素A的质量，它与重量关系如何？4.维生素A用紫外法测定含量时，要应用校正公式，此校正公式的推导有哪两种方法？分别说说每一种方法中λ2、λ3是怎样选择的？5.按照中国药典维生素A测定法测定时，什么情况下需应用校正公式？什么情况下需用第二法测定？6.紫外分光光度法测定维生素A中的换算因数1900的含义是什么？含量计算公式中的E1%cm与通常意义的E1%cm有何不同？7.维生素E具有怎样的结构特点和性质？8.维生素E中游离生育酚的检查原理是什么？9.中国药典、美国药典、日本药局方分别采用什么方法测定维生素E的含量？10.维生素B1具有怎样的性质？可用哪些方法进行鉴别？11.盐酸硫胺的特殊反应是什么？说明其原理。
12.重量法测定维生素B1时，为什么要加盐酸？硅钨酸量对含量测定有何影响？13.硅钨酸重量法测定维生素B1时，其重量换算因数0.1939是如何求得的？14.硅钨酸重量法测定维生素B1中，生成的沉淀为什么要依次用煮沸的盐酸溶液、水和丙酮洗涤？15.维生素B1除用硅钨酸重量法、非水碱量法测定含量外，还可采用什么方法测定含量？试举2～3例，并说明测定原理。
16.维生素C具有哪些鉴别反应？17.药典采用什么方法测定维生素C含量？该法测定时应注意什么问题？18.用2，6-二氯吲哚酚测定维生素C含量时，如何判断滴定终点？19.维生素D的含量测定中国药典采用HPLC法，该法所用的色谱柱和流动相与一般反相色谱法有何区别？药典收载了几种测定方法，分别用于什么情况下维生素D的含量测定？选择题一、最佳选择题1. 维生素A具有易被紫外光裂解、易被空气中氧或氧化剂氧化等性质，是由于分子中含有（ ）A、环已烯基B、2,6,6-三甲基环已烯基C、伯醇基D、乙醇基E、共轭多烯醇侧链2. 维生素C能与硝酸银试液反应生成去氢抗坏血酸和金属银黑色沉淀，是因为分子中含有（ ）A、环已烯基B、伯醇基C、仲醇基D、二烯醇基E、环氧基3. 维生素C一般表现为一元酸，是由于分子中（ ）A、C2上的羟基B、C3上的羟基C、C6上的羟基D、二烯醇基E、环氧基4.中国药典测定维生素E含量的方法为（ ）A、气相色谱法B、高效液相色谱法C、碘量法D、荧光分光光度法E、紫外分光光度法5.下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是（ ）A、维生素AB、维生素B1C、维生素CD、维生素DE、维生素E6.紫外法测定维生素A含量时，测得λmax在330nm，A/A328比值中有一个比值超过了规定值±0.02，应采用什么方法测定（ ）A、多波长测定B、取A328值直接计算C、用皂化法（第二法）D、用校正值计算E、比较校正值与未校正值的差值后再决定7.用碘量法测定维生素C的含量，已知维生素C的分子量为176.13，每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于维生素C的量为（ ）A、17.61mgB、8.806mgC、176.1mgD、88.06mgE、1.761mg3.需检查特殊杂质游离生育酚的药物是（ ）A、维生素AB、维生素B1C、维生素CD、维生素EE、维生素D9．重量法测定时，加入适量过量的沉淀剂，可使被测物沉淀更完全，这是利用（ ）A、盐效应B、酸效应C、络合效应D、溶剂化效应E、同离子效应10. 2.6－二氯靛酚法测定维生素C含量，终点时溶液（ ）A、由红色→无色B、由蓝色→无色C、由无色→红色D、由无色→蓝色E、由红色→蓝色11.硫色素荧光法测定维生素B1溶液，测得对照液荧光强度为45%（浓度2.0μg/mL），空白液荧光强度为5%；样品液荧光强度为55%，空白液荧光强度为5%。
维生素类药物分析(1)
医学ppt
24
含量测定
► 非水溶液滴定法 用于原料药测定 加醋酸汞消除盐酸干扰 1mol维生素B1与2mol高氯酸相当
► 紫外分光光度法 片剂、注射剂采用此法 以吸收系数法计算含量
► 硫色素荧光法 对照品对照法计算含量，方法专属，不受氧化产物 干扰
医学ppt
25
硅钨酸重量法
医学ppt
27
鉴别试验
►硝酸银反应——维生素C被氧化，银被还原成 黑色银沉淀
►使高锰酸钾、亚甲蓝褪色 ►与碱性酒石酸铜作用，产生红色氧化铜沉淀 ►二氯靛酚钠反应——二氯靛酚被还原成无色
医学ppt
28
糖类性质
►维生素C+HCl（三氯乙酸）→水解成戊糖→ 失水→糠醛+吡咯→蓝色
医学ppt
29
杂质检查
医学ppt
37
测定方法
►光照：使产生前维生素D3，反式维生素D3 ， 速甾醇D3 ，连同维生素D3 ，进行系统适用性 试验
►重复进样，维生素D3的峰值RSD≤2.0%
►分离度R>1.0
采用校正因子法计算维医生学ppt 素D总量
38
维生素E分析
►结构特征：具有苯并二氢吡喃结构，苯环上 有1个乙酰化的酚羟基，易被水解、氧化；为 脂溶性维生素。有四种异构体，其中α型活性 最强
► 澄清度与颜色——控制氧化变色产物，以测定一定 波长下吸光度控制有色杂质 原料——溶液应澄清无色，若有色，在420nm处测 定吸光度，不得过0.03 片剂——在440nm处测定吸光度，不得过0.07 注射剂——在420nm处测定吸光度，不得过0.06
► 铁、铜离子——采用原子吸收分光光度法测定
医学ppt
第九章维生素类药物分析
1、具紫外吸收 2、易氧化变质 3、能与三氯化锑呈色 4、水中不溶。
第一节 维生素A的分析
二、鉴别试验
1. 三氯化锑反应
VA 蓝色 → 紫红色 CHCl
SbCl3
3
2. 紫外吸收光谱
VA的无水乙醇溶液在328nm有最大吸收。 3、TLC
第一节 维生素A的分析
例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷—乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S. Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA棕榈酸酯 0.75
第一节 维生素A的分析
A300 A316 A328 A340 A360 ：0.354 ：0.561 ：0.628 ：0.523 ：0.216
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
Ai A 328
：0.555 ：0.907 ：1.000 ：0.811 ：0.299
换算因数
IU / g （纯品）
1% E1cm （纯品）
1IU=0.344g全反式维生素A醋酸酯 1g的维生素A醋酸酯就相当于
1,000,000 2,907 ,000 IU 0.344
% 1530（环己烷、 维生素A醋酸酯 E1cm
328 ）
第一节 维生素A的分析
2907000 换算因子 1900 1530
H3C N N NH2 CH2 N+ S CH2CH2OH
. Cl-.HCl
CH3
1、水中溶解 2、具紫外吸收 3、碱性中可被氧化 4、两个杂环与生物碱沉淀试剂反应
第二节 维生素B的分析
二、鉴别试验： 1、硫色素反应：
维生素B1 铁氰化钾 硫色素
《药物分析》第九章维生素类药物的分析 ppt课件
在max（620nm）处，测 定吸光度，标准曲线法定量
（三）高效液相色谱法 RP—HPLC法同时测定人血清
中维生素A和维生素E的含量。
例1. 维生素A含量用生物效价表示， 其效价单位是
A. IU B. g C. ml D. IU/g E. IU/ml
A328
否 A328
皂化
-15%
-3% 0
3%
（2）第二法 等吸光度法 皂化法，适用于维生素A醇。 溶剂：异丙醇
乙醇、KOH
乙醚
S 皂化
300nm
异丙醇
310nm 325nm 334nm 测定吸光度，
Sol
（9~15单位）
并确定最大吸收波长
• 判断max是否在323～327nm之间
是
否
• 计算 A300 A325
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
分类：
脂溶性 VitA、D、 E、K 等
水溶性 VitC、VitB族（B1、
B2、B6）、烟酰胺、泛酸钙、 叶酸、烟酸等
第一节 维生素A的分析
一、结构与性质
（一）结构
1. 维生素A的结构为具有共轭多烯
醇侧链的环己烯
CH3
CH3
CH3 CH3
CH3 CH2OR值在±3％，则仍不用校正公式计
算吸光度，而直接用A328代入公式中
求出 E11c%m
A32（8校正 ） A32810% 0
若
A328
所得的
数值在-15％～-3％之间，则需用校正
公式计算吸收度，即用A328（校正）代入 公式中求出 E11c%m
A32（8校正 ） A32810% 0
第九章 维生素类药物的分析.ppt
VitA VitA
醛 酸
△或有金属离子存在时更易氧化
2019-8-11
感谢你的欣赏
8
3、与三氯化锑发生呈色反应
VitA SbCl 3蓝色 紫红
CHCl3
4、溶解性
不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
2019-8-11
感谢你的欣赏
9
二、鉴别试验
1、三氯化锑反应
维生素A在饱和无水三氯化锑的无 醇氯仿溶液中呈现不稳定的蓝色，再变 为紫红色。
31
(一）结构与性质 1、溶解性 ① 易溶于水 ② 水溶液呈酸性
2019-8-11
感谢你的欣赏
32
2、酸性 一元酸
C3－OH的 pKa = 4.17
C2－OH的 pKa = 11.57
C6H2OH
H C OH 5 O
4
1O
32
HO
OH
2019-8-11
感谢你的欣赏
33
3、强还原性 二烯醇结构
CC OH OH
二烯醇结构
2019-8-11
O
CC
OO
二酮基结构
感谢你的欣赏
34
4、光学活性 手性C（C4、C5）
C6H2OH
H C OH
L(+)－抗坏血酸
*5 O
活性最强
*4
1O
2019-8-11
3
HO
感谢你的欣赏
2
OH
35
5、具糖的性质 结构与糖类相似
糖类的显色反应
பைடு நூலகம்
△H
脱水
糠
糠醛 醛衍生
2019-8-11
VitM
感谢你的欣赏
VitPP
第九章维生素类药物的分析
b
VitB1%
Ab Sd
W对 W样
稀释度 稀释度 100%
（3）特点 ①灵敏度高，线性范围宽 ②代谢产物不干扰，适用于体液分析
第三节 维生素C的分析
C6H2OH H C OH
5
O
4
1
O L－抗坏血酸
32
HO
OH
(一）结构与性质 1、溶解性 ① 易溶于水 ② 水溶液呈酸性
2、酸性 一元酸
H
还原型
3、与碱性酒石酸铜反应
USP
碱性酒石酸铜Vi tCCuO 红
4、与KMnO4反应
KMnO VitC Mn
5、糖类的反应
6、紫外分光光度法
（三）杂质检查（略） 1、溶液的澄清度与颜色检查 2、铁、铜离子的检查：原子吸收分光光度
（四）含量测定 1、碘量法
（1） 原理
CH2OH H C OH
O O
HO OH
[O]
CH2OH
H C OH O O
O
O
1、与AgNO3反应 (ChP2000)
AgNO VitC Ag 黑（银镜）
2、与2，6 - 二氯靛酚反应 (ChP2000)
2，6 二氯靛酚VitC 无色
氧化型
蓝色 OHHˉ
玫瑰红色
OH
5、具糖的性质 结构与糖类相似
糖类的显色反应
△H
脱水
糠
糠醛 醛衍生
物酚类
显
色
VitC H 脱 水糠醛5吡0 咯 ℃蓝色
6、UV特征
H max nm OH max nm
（二）鉴别试验
VitC [O]去氢抗坏血酸
(三)其他鉴别方法
小单元九 维生素类药物的分析 - 卫考在线-卫生行业考试辅导
小单元九维生素类药物的分析细目1 维生素B1及其制剂的分析要点(1)维生素B1的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素B1片、维生素B1注射液的含量测定方法细目2 维生素C及其制剂的分析要点(1)维生素C的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素C片、维生素C注射液的鉴别、检查和含量测定方法细目3 维生素E的分析要点维生素E物理常数的测定、鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法细目4 维生素K1及其制剂的分析要点(1)维生素K1物理常数的测定、鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素K1注射液的含量测定方法内容精要一、维生素B1及其制剂的分析1.结构、性质与分析方法的关系维生素B1 (又称盐酸硫胺)是由氨基嘧啶环通过亚甲基连接而成的季铵化合物，在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶；噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基为两个碱性基团，具有碱性，药物为其盐酸盐，可利用其碱性采用非水滴定法测定含量；含有共轭体系，具有紫外吸收，其盐酸溶液的最大吸收波长为246nm，可用于定性定量分析；含有氯离子，可发生氯化物的反应用于鉴别；在碱性溶液中，可被铁氰化钾等氧化剂氧化成硫色素，溶于正丁醇中呈蓝色荧光而用于鉴别。
结构如下：2.鉴别(1)硫色素反应硫色素反应属于维生素B1的专属鉴别试验。
鉴别试验名称、原理和方法。
(2)氯化物的鉴别维生素B1的氯化物的鉴别属于一般鉴别实验。
鉴别试验名称、原理和方法。
3.检查(1)硝酸盐特殊杂质名称、检查原理和方法。
(2)总氯量特殊杂质名称、检查原理和方法。
(3)其他酸度、溶液的澄清度与颜色、硫酸盐、干燥失重、炽灼残渣，铁盐和重金属等。
4.含量测定(1)维生素B1的含量测定采用非水溶液滴定法测定维生素B1含量的原理、方法、注意事项及计算。
采用非水溶液滴定法测定维生素B1含量(％)的计算公式如下：含量(%)=30()10100%(1%)V V T F W --⨯⨯⨯⨯-干燥失重式中，V 和V 0为样品测定和空白试验消耗滴定液的体积(ml)；T 为滴定度(mg/ml)；F 为浓度换算因数；W 为取样量(g)。
药物分析维生素类药物的分析
1g维生素Ａ醇相当于：
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇 换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
VA1: VA2:(去氢VA) VA3:(去水VA)
注意:在水中三氯化锑水解,必须在绝对无水中进行!
2、紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。
含量测定
测定波长
吸光度
吸光度比值
吸光度比值差
计算值
规定值
300
0.555
316
0.907
(326)
328
1.000
(329)
340
0.811
360
0.299
紫外UV（中国药典） VB1片：方法与片剂含量测定相同(246nm)
01
VB1注射液：与液剂相同。（246nm)
02
9.3 维生素C的分析 化学结构
D(-)-异抗坏血酸 L(+)-异抗坏血酸 L(+)-抗坏血酸 D(-)-抗坏血酸 具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是 L（+）-抗坏血酸
四、含量测定
1、铈量法（中国药典）
原理：VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄→灰紫 ，需作空白试验。
3、高效液相色谱法
日本药局方（JP13）
气相色谱法：Chp2005
Hale Waihona Puke 测定数据如下表，求：维生素A的标示百分含量。
由此可知，应该用测得的328nm处的吸收度计算。
添加标题
01
02
03
04
药物分析课件维生素类药物的分析
皂化法
A328(校正)
A328直接算
皂化法
-15%
-3%
0
+3%
• 算效价(IU/g)：
IU
/
g
E1% 1cm
1900
A328( 校正)－A328 A328
• 算VA醋酸酯胶丸占标示量的百分含量：
占标示量的百分含量%
AD1900W W100L标示量
100％
W 胶丸的平均内容物重量
W 内容物重量 D 稀释倍数 L 比色池厚度(cm)
CH 2CH 2OH
Cl HCl
CH 3
(2)
UV吸收 (mmax246nm)
(4)
(3)
碱性中遇氧化剂(铁氰化钾) 产生有荧光的硫色素
沉淀反应
碘化汞钾或硅钨 酸等反应生成
TLC
鉴别试验
离子选择性电极法
流动注射法(FIA)
制剂中VB1用铅离
子电极直接测定 示波极谱滴定法
8
9
7
非水碱量法
1
冰HAc和Hg(Ac)2
Vit E 含量=? (1) GC法
(3) HPLC法
(2) 铈量法
用硫酸加热回流，水解成生育 酚，用Ce(SO4)2定量地氧化为对 －生育醌，过量的Ce(SO4)2氧化 二苯胺指示剂而指示终点。
§4. Vitamin B1(硫胺Thiamine)
(1) 溶于水不 溶于乙醚
H3C
N
N
NH 2
S
CH 2 N
治疗脚气病、多发性 神经炎和胃肠道疾病
Vitamin C
参与机体代谢，可帮助酶 将胆固醇转化为胆酸而排 泄，减低毛细管的脆性， 增加机体的抵抗力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
A300 A316 A328 A340 A360
：0.374 ：0.592 ：0.663 ：0.553 ：0.228
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 ：0.893 ：1.000 ：0.834 ：0.344
求本品中维生素A占标示量的百分含量？
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 － ：0.893 － ：1.000 － ：0.834 － ：0.344 －
0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
= + 0.01 = －0.01 = 0 = + 0.02 = + 0.04
第一法
等波长差法
328 316 340 328
= 12nm
测定对象 VitA醋酸酯
第二法
等吸收比法
6 A1 A2 A3 7
1=325nm, 2=310nm, 3=334nm
测定对象
VitA醇
3. 测定法
（1）基本步骤: 第一步 A的选择
选择依据：
所选A值中杂质的干扰已基本消除
（3）第二法（等吸收比法） [ 皂化法、6/7A法 ]
适用于维生素A醇 第一法无法消除杂质干扰时用此法
脂溶性 VitA 醋酸酯 VitA 醇 KOH / 乙醇 S 皂化液 植物油 甘油和脂肪酸盐 水溶性
除去植物油的干扰 异丙醇
• 计算 A328（校正）
• 用A328计算
A328校正 3.522 A328 A316 A340
f
A 328(校正) A 328 A 328
100%
第二法
A 328校正
A 328
第二法
－15%
－3%
0
3%
讨论
1. VA 醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法 （即代数法）推导而来；VA醇的吸收度校正公式 是用相似三角形法（几何法或称6/7定位法）推导 而来。 2. 在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波 长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进 行测定。在测定前务必要校正波长。测定的样品 应不得少于两份。
优点 简便 快速
λmax 618nm～620nm 呈色不稳定 （5 ~ 10s内） H 2O 水分干扰 SbCl 3 SbOCl 缺点 与标准曲线温差≤1℃ 专属性差 返 回 三氯化锑有腐蚀性
第二节 维生素D
一、结构与性质
H CH3 H CH3 CH3 CH3 H CH2 HO H H CH3
概 维生素：
述
是维持人体正常代谢机能所 必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。
分类
按溶解度分
VitA、D2、D3、 E、K1 等
脂溶性
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12)
VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。
返 回
第一节 维生素A
R:
-H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
2．净化：供试液A经液相色谱分离，准确收集含有维 生素D及前维生素D混合物的全部流出液，制 备成供试液B。 固定相：ODS
流动相：甲醇-乙腈-水（50：50：2）
3．含量测定：取供试液B按第一法测定。
第三法：用于经第二法处理后仍有杂质的干扰的情况。 步骤如下： 1．制备供试液：取供试液A，净化，水浴加热，得供 试液C。 制备对照液：对照品储备液：稀释、加热。 2．含量测定：在第一法的色谱条件下，交替精密进样 对照液和供试液，按外标法定量。
( 328nm ) =
A328(校正)
100ms/D
=
0.637 100×0.1287/1250
= 61.87
E 1% ( 328nm ) ×1900 供试品中维生素A效价= 1cm
= 61.87 ×1900 =117553（IU/g ）
VA效价(IU/g) ×每丸内容物平均装量(g/丸) 标示量% = ×100% 标示量( IU/丸) 117553×0.07985 = ×100% = 93.9% 10000
A 300 A 316 A 328 A 340 A 360 A 328 A 328 A 328 A 328 A 328
规定值
0.555 0.907
差值
1.000 0 0.811 0.299
• 判断2 无超过 0.02
A328(校正) = 3.52 ( 2A328 - A316 - A340 )
=3.52 ( 2×0.663 – 0.592 – 0.553 )
=0.637
A328(校正) – A328(实测) A328(实测)
×100 =
0.637 – 0.663 0.663
×100
= -3.92
E
1% 1cm
维生素A醋酸酯
S 9～15IU / ml 溶液 分别于300、 、 、 、 nm 处测Ai 316 328 340 360
环己烷
• 判断 max是否在326～329nm之间
max在326～329nm之间
是 否
• 求算 Ai / A328
改用第二法
并与规定值比较
Ai / A328
第一法：用于无维生素A醇及其它杂质的干扰的情况， 步骤如下：
1．系统适用性试验：测定重复性和分离度。
Vit D3对照品 Vit D 3 HPLC 90℃ 冷却 环己烷 254nm 前Vit D 3 365nm 反式Vit D 1h 3 速甾醇D 3 RSD小于2.0%
Vit D 3 峰： 重复性
前Vit D 3 与反式Vit D 3 峰 Vit D 与速甾醇 D 3 峰 3 R大于1.0
效价（IU / g） 3330000 换算因数＝ % 1820 E1cm(纯)
6
1830
第四步：求标示量％
IU / 丸 标示量％＝ 100％ 标示量
IU / g 平均丸重 ＝ 100％ 标示量
A 换算因数 平均丸重 C 100％ 标示量
（2） 第一法 • 方法：
第九章
维生素类药物的 分析
基本要求 维生素A 概 述 维生素D 维生素E 维生素B1 维生素C
返回主目录
练习与思考
基本要求
一、掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关 系。 二、掌握维生素类药物的鉴别原理与方法。 三、掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与 计算方法。 四、掌握维生素D的HPLC含量测定法和维生素E的GC含量 测定法。 五、掌握维生素B1 非水溶液滴定法与维生素C碘量法的 测定原理、方法与注意事项。 六、熟悉本类药物其他的含量测定方法。 七、熟悉本类药物杂质检查方法。 八、了解维生素A三点校正法的推导过程。 返 回
维生素A3 环氧化物 维生素A醛
维生素A酸
三点校正法（法定方法）
1. 原理：
（1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波
长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
2. 波长的选择：
（1） 1 VitA的max（328nm）
（2） 2 3
分别在1的两侧各选一点
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A33
f
A 325(校正) A 325 A 325
100%
A325校正
－3%
A325
0
A325校正
3%
（二） （二） 三氯化锑比色法
标准曲线法 蓝色
VitA + SbCl 3
2．测定校正因子：
A S /m S f1 = -------A r /m r f2 =（A
S
m r - f1 m
S
A
r1）/（A r1
m S）
3．含量测定：
mi=（f1 Ai1+ f
2
A
i2）m S
/A
S
第二法：用于有杂质的干扰的情况，步骤如下：
1．皂化处理：皂化、乙醚提取、洗涤提取液、蒸除乙
醚、制备供试液A。
VitAD胶丸中VitA的含量测定
精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量 差异项下（平均装量0.07985g/丸）的内容物 0.1287g 至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量 转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度， 摇匀；精密量取2.0ml，置另一50 ml量瓶中， 用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空 白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列 波长处测得吸收度为
△或有金属离子存在时氧化↑
环氧化物
VitA醛
VitA酸
二、鉴别试验 （一） 三氯化锑反应
VitA 蓝色 紫红
CHCl3
SbCl 3
条件 无水无醇
+
CH 2
-
SbCl 5 RCOO
蓝色
+
CH 2
-
SbCl 5 RCOO
紫红
（二） UV法 （BP（2000））
VitA 去水VitA
一、 结构与性质 （一）为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯 具有UV吸收 存在多种立体异构化合物
易发生脱氢、脱水、聚合反应
VitA2
VitA3
鲸醇
（二） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 环氧化物
[O ] 紫外线、O 2、氧化剂
VitA 醛 VitA 酸