关于优良生防菌株筛选的探讨
写出筛选生产疫苗用的菌毒种的原则_概述及说明
写出筛选生产疫苗用的菌毒种的原则概述及说明1. 引言1.1 概述随着疫苗的广泛应用，筛选合适的菌毒种成为了研发安全有效疫苗的关键步骤之一。
菌毒种作为生物制剂的主要成分，直接决定了疫苗的质量和效果。
本文将深入探讨筛选生产疫苗用的菌毒种的原则，并阐述各个方面的说明。
1.2 文章结构本文共分为五个部分，首先是引言部分，其次是筛选生产疫苗用菌毒种的原则和方法应用部分。
然后通过实际应用案例分析三种不同类型疫苗中相应菌毒种的筛选原则与实践情况。
最后，总结核心观点和主题陈述，并展望未来发展趋势和挑战。
1.3 目的本文旨在全面探讨筛选生产疫苗用菌毒种时所需遵循的原则与方法，并通过实际案例分析来加深读者对该领域相关知识的理解和应用能力。
同时，通过对未来发展趋势和挑战进行展望，帮助读者更好地把握疫苗研发的方向和可能面临的问题，推动相关领域的研究与发展。
2. 筛选生产疫苗用的菌毒种的原则2.1 生物安全性要求在筛选生产疫苗用的菌毒种时，首要考虑的是其生物安全性。
菌毒种必须具备较低的毒力，以免造成接种人群的不良反应或疾病传播。
选择菌毒种时应确保其致病性较低，并且能够有效引起抗原刺激，触发免疫反应。
2.2 病原性能力评估菌毒种的病原性能力评估是筛选过程中的重要环节。
首先需要对该菌株进行基因组测序和表型分析，进而确定其致病特征和可能导致感染或疾病爆发的潜在风险。
这有助于减少使用具有高度传染性和致命性的菌株潜在危险。
同时，在评估过程中也需要考虑接种人群的特殊情况，比如儿童、孕妇、老年人和免疫系统受损个体等。
对于这些人群，选择相对弱毒或者修饰过的菌毒种可能更加安全和有效。
2.3 生物学特性分析除了病原性能力评估外，还需要对菌毒种进行生物学特性的分析。
这包括其生长特点、传播途径、抗原结构等方面。
生长速度和传播方式会影响疫苗的生产效率和传染程度。
对于疫苗制造商而言，选择具有较快生长速度且易于培养的菌株是十分重要的。
此外，了解菌毒种的抗原结构有助于确定其在引发免疫反应中的作用机制，并指导疫苗设计和制备过程。
土传真菌病害拮抗菌的筛选及其生防效果研究
土传真菌病害拮抗菌的筛选及其生防效果研究一、内容综述土传真菌病害是影响农作物产量和质量的重要因素，给农业生产带来了严重的经济损失。
传统的防治方法主要是化学农药的使用，但其存在一定的局限性，如对环境的污染、对人畜健康的潜在危害以及抗药性的产生等问题。
因此寻找一种安全、环保、高效的防治方法显得尤为重要。
近年来生物防治逐渐成为研究热点，其中拮抗菌在土传真菌病害防治中具有重要的应用价值。
本文将对土传真菌病害拮抗菌的筛选及其生防效果进行研究。
首先本文将对土传真菌病害的病原菌进行分类和鉴定，明确病害的主要病原菌种类及其特点。
然后通过文献调查和实验室实验，筛选出具有抗病作用的植物源或微生物源拮抗菌。
接着对筛选出的拮抗菌进行生物学特性的研究，包括拮抗菌对土传真菌病害的抑制作用、拮抗菌的安全性和稳定性等方面的评价。
此外本文还将探讨拮抗菌在田间应用的效果，包括拮抗菌的施用方式、用量、施用时间等因素对防治效果的影响。
通过对不同地区、不同作物类型的试验数据进行分析，总结拮抗菌的筛选规律和生防效果，为土传真菌病害的防治提供科学依据。
A. 研究背景和意义随着全球气候变化和人类活动对生态环境的影响，土传真菌病害在许多国家和地区呈现出日益严重的态势。
土传真菌病害不仅对农作物产量和质量造成严重影响，而且对人类健康和生态环境带来潜在风险。
因此研究和开发有效的拮抗菌以控制土传真菌病害具有重要的现实意义。
目前已有多种拮抗菌被广泛应用于农业生产，但由于土壤条件、作物种类和病原菌多样性等因素的影响，这些拮抗菌的防效往往不尽如人意。
因此筛选出具有良好生防效果且适应性强的拮抗菌显得尤为重要。
此外随着生物技术的发展，基因工程技术在植物病害防治领域的应用也日益广泛。
通过基因工程技术改良拮抗菌的抗性或提高其生防效果，将有助于实现对土传真菌病害的有效控制。
本研究旨在通过对不同来源的拮抗菌进行筛选，发掘具有良好生防效果的微生物资源，为农业生产提供高效、安全、环保的防治手段。
柑橘采后青霉病生防菌的筛选与鉴定
柑橘采后青霉病生防菌的筛选与鉴定
柑橘采后青霉病是柑橘果实在采摘后由于各种原因引起的真菌病害，严重影响柑橘的品质和市场价值。
为了防止柑橘采后青霉病的发生，需要筛选和鉴定一些生防菌，下面将从以下几个方面进行回答：
一、生防菌的筛选
1. 筛选菌株：可以从自然界中采集到一些具有抗青霉病能力的菌株，如链格孢、绿僵菌、白僵菌、木霉等。
也可以通过实验室筛选出具有生物防治潜力的菌株。
2. 筛选方法：通过对不同菌株进行对比试验，筛选出具有较高生物防治效果的菌株。
在试验中，可以采用不同的方法，如接种试验、涂片试验、土壤浸泡试验等。
3. 筛选指标：可以从菌株的生长速度、产孢量、致病菌的抑制率等方面进行评估，筛选出具有较高生物防治效果的菌株。
二、生防菌的鉴定
1. 鉴定方法：可以采用形态学、生理生化、分子生物学等多种方法进行鉴定。
其中，形态学鉴定是最基础的鉴定方法，通过观察菌落形态、产孢形态、孢子形
态等特征进行鉴定。
生理生化鉴定则是通过菌株的代谢特性、生长条件等方面进行鉴定。
分子生物学鉴定则是通过PCR扩增、DNA序列分析等方法进行鉴定。
2. 鉴定指标：可以从形态特征、生理生化特性、分子生物学特性等方面进行评估，鉴定出菌株的种属、亚种、菌株间的关系等信息。
以上是柑橘采后青霉病生防菌的筛选与鉴定的相关内容，需要注意的是，生防菌的筛选和鉴定需要进行科学合理的实验设计和严格的实验操作，确保结果的准确性和可靠性。
环保领域中土壤微生物菌株的筛选研究
环保领域中土壤微生物菌株的筛选研究土壤微生物菌株在环保领域中扮演着极为重要的角色，是一种有利于生态系统健康的重要组成部分，对于维持环境生态平衡发挥着十分重要的作用。
本文旨在探究土壤微生物菌株的筛选研究在环保领域中的应用及意义。
一、土壤微生物菌株的筛选传统的土壤微生物菌株筛选方法主要依靠培养基和生物学特性进行研究，然而这种方法的缺点在于对于一些难以培养的菌株无法得到很好的筛选。
因此，研究人员开始借助分子生物学等现代生物技术手段对土壤微生物菌株进行筛选，这种方法具有快速、准确、可重复性强、不受环境和培养基的限制等优势，是目前广泛采用的筛选方法。
二、土壤微生物菌株在环保领域中的应用1、土壤修复土壤修复是维护生态系统健康的一项重要措施，而土壤微生物菌株则可以通过其代谢产物对于土壤污染物进行分解、去除、转化等作用，从而促进土壤修复。
例如，亚硝酸盐可以通过硝化细菌、亚硝化细菌等微生物的转化作用被消除，如这些细菌的筛选及培养对于找到修复土壤中亚硝酸盐的生物菌株具有举足轻重的地位。
2、环境治理土壤微生物菌株可以通过吸附和生物降解等作用，对于土壤中污染物质进行吸收和降解等作用。
例如，利用细菌对于重金属的吸附、运输和沉淀等作用，可以从土壤中去除重金属污染。
在环境治理中，筛选和发现对于某些污染物具有降解作用的微生物将具有非常重要的作用。
3、农业生产土壤微生物菌株也在农业生产中扮演着重要的角色。
对于一些农业生产杀菌、抗病等问题，可以通过筛选和选育细菌来进行一方面的解决。
例如，枯草芽孢杆菌可有效抑制一些作物腐霉菌的生长，对于保障作物的生产具有不可替代的作用。
四、结论土壤微生物菌株的筛选工作可以帮助我们发现具有地域特征和环境适应能力的菌株，推动环境治理工作，有利于维护生态环境的健康，促进环境保护和可持续经济发展。
研究人员需要以有效的筛选方法和技术实现对于菌株的精准筛选，推动土壤菌株的发现、应用和推广。
1株生防细菌的筛选、鉴定及其抑菌特性的初步研究
番茄 灰霉 病 菌是 半 知 菌 亚 门真 菌 ， 要 危 害 主
番茄 花果 ， 亦发 病 于茎 、 叶部 位 ， 苗 染 病 较 重 且 幼
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
发病 迅速 ， 番茄 产 量 影 响 很 大 。如 何 有 效 控 制 对 番茄 灰 霉 病 的 发 作 ， 提 高 番 茄 产 量 意 义 重 对 大 引。本 文 主要 阐述 如 何 从 鲜 牛 奶 中筛 选 １株
Ｂａ ｔ ｒｕｍ ｎ ｔ ｎ ｂｉｏ ｙ Ｐｒ ｐｅ ｔｅ ｃｅ ｉ ａ ｄ Ｉｓ Ｉ ｈｉ ｔ ｒ ｏ ｒ ｉ ｓ
ＲＥＮ ｉ Ｊｅ．Ｌ Ｓ ｕ． ｉ Ｖ ｈ ｘ ａ
（ ｏ１ ｆＢｏ ｃ Ｃｌ ．ｏ ｉ．Ｓｉ Ｔｃｎ１。Ｓｅｙｎ ｇｉ ｎ． Ｓ ｅｙｎ １８ ６ １ ．＆ ｅｈ ｏ ． ｈｎ ａｇＡ ｒ ．Ｕ ｉ， ｈｎａ ｇｌ０ ６ ） ｃ
Ａ ｓｒｃ Ａ ｂ ｃ ｒ ｌ ｔ ｉ Ａ ａ ｉ ｌ ｅ ｏ ｅｈｍｉ ａ ｔ ｉｍ ａ ａ ｓ ｔ ｔ ｇ ｙｍ ｌｅ （ ｏ ｙｉ ｃ ｅｅ ） ｂ ｔａ ｔ ａ ｔ ｉ ｒ ｎ ９ｗ ｓ ｓ ａ ｄｆ ｍ ｆ ｓ ｌ ｂｃｅ ｕ ｇ ｉ ｔｏ ｏ ｒ ｉ ｗ Ｂ ｔ ｔ ｉ ｒ ｅ ａ ｓａ ｏ ｔ ｒ ｒ ｋ ｒ ｎ ｍａ ｅ ｄ ｒ ｓ ｎ ａ
任 杰 ，吕淑 霞 ‘
１０ ６ ） １８ ６
（ 阳农 业 大学 生 物 科 学 技 术学 院 ， 宁 沈 阳 沈 辽
摘 要 从 鲜 牛 奶 中 筛选 １ 对番 茄 灰 霉 病 菌 具 有 拮 抗 作 用 的 茵 株 Ａ ， １Ｓｒ Ｎ 序 列 分 析 ， 定 为 枯 草 株 ９ 经 ６ Ｄ Ａ 鉴 芽胞 杆 菌 （ ａｉｕ ｕｔｉ 。 抑 茵 特 性研 究表 明 ， 茵株 代 谢 产 物 会 造 成 番 茄 灰 霉 病 茵 茵 丝 畸 形 ， 时 抑 制 其 Ｂ ｃ ｌ ｓｂ ｌ） ｌｓ ｉｓ 该 同 孢 子 生 长 ， 孢 子 细 胞 壁 破 裂 ； 谢 粗 提 物 经 过 Ｄ Ａ －２离子 交 换 层 析 及 Ｓｐ ａｅ—５ 使 代 Ｅ Ｅ５ ｅｈ ｄｘＧ ０凝 胶 柱 层 析 后 ， 泳 电 检 测 到 具 有 抑 茵 活性 且 分子 量 约 为 １ ｕ的单 一 条 带 ， ７ｋ 经验 证 该 抑 茵 物 具 有 蛋 白酶 活性 。
玉米青枯病生防细菌的筛选
Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ｆｉ ｅ ｂｉ ｃ ｎｔ ｏ ａ ｔ ｒａ ｓ ｒ ｉ ｇａｎｓ ａｔ ｇ ｎｓ ｏ ｏ ｎ ｓ ａ ｋ ｒ ｒ ｅ ｅ ｔ ｄ ｆ ｏ ｖ ｏ ｏ ｒ ｌｂ ｃ ｅ ｉ ｔａ ｎｓ ａ ｉ ｔｐ ｈｏ ｅ ｆ ｃ ｒ ｔ ｌ ｏｔｗｅ ｅ ｓ ｌ ｃ ｅ ｒ ｍ １１ ３ ｂ ｃ ｅ ｉ ｔ ａｎｓ．ａ ｄ ｔ ｎ ｂ ｔｏｎ ｚ ｎｅ ｗｉ ｔ ａ ｅ ｃ ｏ ６— １ ９ ａ ｔ ｒａ ｓ ｒ ｉ ｎ ｈｅ ｉ ｈｉ ｉｉ ｏ ｄ ｈ ｃ ｎ ｒ ａ ｈ ｔ ６ｍｍ ． Ｇｒ ｅ ｅ ｎｈｏ ｓ ｏｔｅ — ｕ ｅｐ ｘ ｐ ｒｍｅ ｔ ｈｏ ｄ ｔ ｔ ｈｅ ｃ ｔ ｏ ｅ ｆ ｃ ｏ ｉ ｏ ｒ ｃ ｅ ｉ ８ — ａ ｌ ａ １ —９ ａ ｅ ｉ ｎ ｓ ｓ ｗｅ ｈａ ｔ ｏｎ ｒ ｌ ｆｅ ｔ ｆ ｂ ｏｃ ｎｔｏｌｂａ ｔ ｒａ Ｇ２ —６ ｓ ｗｅ ｌ ｓ Ｋ １’ ｎｄ Ｋ１ ８—５ ａ ａ ｎｓ ｇ ｉ ｔＦｕｓ ｉ ｍ ａｍｉ ａｒ ｍ ｓ ｍｏ ｅ ｔ ａ ｅ ｃ ｎｔ ｈｅ ｃ ｎｔｏ ｆｅ ｔ ｏ ｏｃ ｎ— ａｒ ｕ ｇｒ ｎｅ ｕ ｗａ ｒ ｈ ｎ ６６ ｐ ｒ ｅ ，ｔ ｏ ｒ ｌｅ ｆ ｃ ｆｂｉ ｏ
刀茵、 禾生腐 霉 、 囊腐 霉） 肿 具有 强抑制 作用 的拮 抗 茵 ， 茵 圈直 径达 到 ６ １ ｍｍ。 温 室盆栽 试验 抑 ～ ６ 结果表 明 ，当接种 病原 茵为 禾 谷镰 刀 菌 时 ， 防 茵 Ｇ ８—６ Ｋ１ 生 ２ 、 ｌ一９ Ｋ１ 、 ８—５的防 治 效 果都 达 到 ６ 以上 ； ６ 当病原 茵为禾 生腐霉 菌时 ， 生防 茵 Ｋ３—３的 防 治效 果达 到 ５ ． ９ ； ４ ２ ％ 当病 原 菌 为肿 囊腐
玉米青 枯病 （ 又名玉 米茎基 腐病 ） 是玉米 生产 上
高效微生物工程菌株的筛选及优化
高效微生物工程菌株的筛选及优化随着生物技术的不断发展，微生物在各行各业中的应用越来越广泛。
微生物工程菌株的筛选与优化是微生物工程领域中的重要环节，其目标是寻找到具有优异代谢能力、高度稳定性以及生长速度迅猛的微生物菌株。
此外，对于某些需要大量生产的生物工程产物而言，更是需要选出高效稳定的微生物菌株。
一、微生物工程菌株的筛选微生物工程菌株的筛选是一个关键的环节，它涉及到许多因素，如微生物菌株种类，抗菌素敏感性，特定基因的表达等等。
在筛选过程中，需要通过相应的技术手段，比如PCR、酶切和基因突变等分析手段，以确定微生物细胞中目标基因是否存在。
1. 过筛条件的选择在微生物工程菌株的筛选过程中，过筛条件的选择是至关重要的。
过筛条件的选择需要结合微生物菌株的基本特性以及生长环境的影响因素，比如温度、pH值、气体压力等等。
此外，也需要考虑筛选目标，如酶活性、代谢产物、结构蛋白等等。
因此，筛选条件的选择需要在实验室条件下进行优化，以取得尽可能高的筛选效果。
2. 筛选方法的选择在进行微生物工程菌株的筛选过程中，需要结合不同的筛选方法，如自然选择法、突变体筛选法、抗性筛选法等等。
自然选择法是指通过自然变异选择具有目标性状的微生物菌株，此方法适用于产物代谢能力的增强和酶的改变。
突变体筛选法适用于产物增加和酶的改进。
抗性筛选法是指利用抗生素、毒素等化合物筛选微生物菌株，此法用于筛选高抗菌素的微生物菌株。
3. 微生物菌株的生长条件在微生物工程菌株筛选过程中，对于微生物菌株的生长条件的控制也是至关重要的。
微生物菌株需要维持一系列合适的环境条件，包括适宜的pH值、维生素和氮源和细胞透明质酸等条件保证细胞的快速生长。
二、微生物工程菌株的优化在微生物菌株筛选过程中，一旦有了具备筛选条件的微生物菌株，接下来就是进行微生物菌株的优化。
针对微生物菌株的优化，主要是优化内部代谢道路的设计，以及优化生长环境的条件，以达到更好的菌株效率和产量。
关于优良生防菌株筛选的探讨
１ ． ２ ． ２各 试 验 菌 株 发 酵 液 的 制备
菌、 蜡 蚧 轮 枝 菌 等 菌 种 对 温 室 白粉 虱 和 桃 细菌 斜 面 培养 基 ： 牛肉膏０ ． ８ ｇ 、 酵 母膏 将 培 养 了 足 够 时 间 且 已 经 生 成 大 量 蚜的 高 毒 力 作 用 对 比筛 选 较少 Ｄ １ 。 本 文 选 取 ０ ． ５ ｇ 、 葡 萄糖 １ ． ０ ｇ 、 琼 脂粉 １ ． ２ ｇ 、 用 蒸馏 水 孢 子 或 芽孢 的 斜 面 菌 株 用 相 应 液 体 培 养
农 业 科 学
Ｓ Ｃ Ｊ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ ＆Ｔ Ｅ 优 良生 防 菌株 筛 选 的探 讨 ①
李娜 刘锦 霞 （ 甘肃省 科 学院 生物研究所 甘肃兰 州 ７ ３ ０ ０ ０ ０ ） 摘 要： 目的 ： 洲定７ 种生防微 生物 茼种 室 内 毒 力和比 较室外 小区防治 同翅 目昆虫温 室白粉 虱和桃蚜 。 方法 ： 首 先制备 各种 茵株 发酵液 ， 以 温室 白粉虱 和桃蚜 为研 究对 象 ， 测定各 种 茵株 发酵液对 温室 白粉 虱和桃 蚜这 两种害 虫的杀毒 能力。 结论 ： 蜡蚧 轮枝 茵Ｌ 一３ １ ， Ｌ －０ ５ 和粉 虱 座壳孢Ｆ － ８ ５ 在 离体条件下对温 室 白扮 虱和桃 蚜 均表现 出很 强的杀 灭毒 力， 校正 累计死亡率（ ％ ） 均在９ ０ ％ 左右， 与其 它茵种 问存在 显著 性差 异－ 粉虱座 壳孢对 两种害虫的毒 力较 高 ， 但室外防效 不理想 ； 苏云金 茅孢杆 茵Ｂ ｔ １ 、 Ｂ ｔ ２ 和球 孢 白僵 茼Ｑ－５ ５ 、 Ｑ －２ ７ 对温 室 白粉虱和桃蚜 的毒
对 同翅 目昆 虫 温 室 白粉 虱 和 桃 蚜 有 较 高 毒 定溶 至１ ０ ０ ｍｌ ， 调ｐ Ｈ值 为７ ． ０ 。 力的生防 菌种为研究 对象 ， 其 中 在 甘 肃 省 细 菌 发酵 培 养液 ： 蛋 白 胨５ ． ０ ｇ 、 酵母 膏 区防效试验 ， 在 甘 肃 省 榆 中 县 和 平 乡 进 行 水定 溶 至 １ ０ ０ ｍｌ ， ｐ Ｈ值为 ７ ． ０ 。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
关于优良生防菌株筛选的探讨
摘要：目的：测定7种生防微生物菌种室内毒力和比较室外小区防治同翅目昆虫温室白粉虱和桃蚜。
方法：首先制备各种菌株发酵液，以温室白粉虱和桃蚜为研究对象，测定各种菌株发酵液对温室白粉虱和桃蚜这两种害虫的杀毒能力。
结论：蜡蚧轮枝菌L-31、L-05和粉虱座壳孢F-85在离体条件下对温室白粉虱和桃蚜均表现出很强的杀灭毒力，校正累计死亡率（%）均在90%左右，与其它菌种间存在显著性差异；粉虱座壳孢对两种害虫的毒力较高，但室外防效不理想；苏云金芽孢杆菌Bt1.Bt2和球孢白僵菌Q-55、Q-27对温室白粉虱和桃蚜的毒力较弱。
关键词：温室白粉虱桃蚜高毒力生防微生物
近年来，国外的研究主要集中于生物防治[1]，从植物病害防治的角度来讲，生物防治就是利用生物及其代谢产物防治植物病害，控制病原物的方法。
它的实质就是利用生物种间关系、种内关系，调节有害生物种群密度，即利用生物群防治生物群[2]。
而国内的科研人员也开始大力开展微生物农药，生防微生物菌种也开始被很多科研人员看重并作出了一些相关报道，但关于现在研究最多的苏云金芽孢杆菌、球孢白僵菌、蜡蚧轮枝菌等菌种对温室白粉虱和桃蚜的高毒力作用对比筛选较少[3]。
本文选取对同翅目昆虫温室白粉虱和桃蚜有较高毒力的生防菌种为研究对象，其中在甘肃省科学院生物实验基地进行温室白粉虱的小区防效试验，在甘肃省榆中县和平乡进行桃蚜的小
区防效试验，为拓宽生防微生物的抗虫谱和进一步生产应用提供科学依据。
1 试验材料与方法
1.1试验材料
1.1.1菌株
苏云金芽孢杆菌Btl和Bt2、球孢白僵菌Q-55、Q-27，粉虱座壳孢F-85、蜡蚧轮枝菌L-31和L-05均购于中国微生物菌种保藏中心，经实验室活化、虫体复壮后的保存菌株，灰霉病病原菌由实验室从一品红病叶上分离纯化而得。
1.1.2培养基
细菌斜面培养基：牛肉膏0.8g、酵母膏0.5g、葡萄糖1.0g、琼脂粉1.2g、用蒸馏水定溶至l00mL，调PH值为7.0。
细菌发酵培养液：蛋白胨 5.0g、酵母膏0.5g、葡萄糖 1.0g、Na2HPO4.1.lg、用蒸馏水定溶至100mL，PH值为7.0。
真菌斜面培养基：酵母膏l.0g、蛋白胨1.0g、葡萄糖4.0g、琼脂粉1.2g，用蒸馏水定溶至l00ml，调PH值为6.5。
真菌发酵培养液：酵母膏1.0g、蛋白胨1.0g、葡萄糖3.0g、麦芽提取物l.0g、KH2PO4 0.3g、MgSO4·7H2O 0.15g，用蒸馏水定溶至
l00ml，调PH值为6.5。
1. 2试验方法
1.2.1单菌斜面菌种的培养
将活化或复壮的原菌种转接于优选的单菌斜面培养基上，真菌25℃恒温培养15天。
细菌30℃恒温培养50小时备用。
1.2.2各试验菌株发酵液的制备
将培养了足够时间且已经生成大量孢子或芽孢的斜面菌株用相应液体培养基（5毫升/支）洗下，以7%接种量分别接于相应的液体发酵培养基中，发酵培养液装量为500ml锥形瓶中装l00ml发酵培养液，25±0.5℃恒温静止培养12天；细菌30℃恒温培养50小时。
取各菌株发酵液1ml测定其含孢量和含菌量，再各取200ml以6000转/分的转速离心，取其上清液后与剩余原发酵液一起保存备用。
1.2.3各试验菌株的室内杀虫毒力测定
（1）各试验菌株以温室白粉虱若龄幼虫为试虫的室内杀虫毒力测定将制备的各菌株的发酵液及其离心上清液各取l0ml，用1%吐温水溶液（无菌）稀释10倍后备用。
空白对照用1%吐温水溶液（无菌）。
从温室选取温室白粉虱危害严重，若龄幼虫比较集中的两年生一品红植株50盆供该实验用。
将带有温室白粉虱若龄幼虫较多的一品红叶片摘下（要求幼虫数在30个以上），记录其上的实际虫头数并将卵用小镊子轻轻剥离，然后用浸湿透的棉花团将叶柄包裹，外用保鲜膜包扎，置于铺有两层干滤纸的12cm平皿中，叶面向下，叶背向上，将准备好的各菌株稀释发酵液分别用小喷壶喷于备好的试验叶片上，每个备处理叶片分三次喷施，中间间隔1.5个小时，每次喷施药量约5-6ml，共用20ml。
处理完后将平皿用带微孔的保鲜膜封口，置于温箱中，每日光照10小时、黑暗14小时，25±0.5℃恒温培养，每处理药剂做5个重复。
24小时后每天用滴管滴入9-10滴无菌水（以保持小环境的适宜湿度确保一品红叶片新鲜和各生防菌萌发浸染）。
每种试验药剂包括对照均做5个重复。
每天记录死亡虫头数，连续7天。
记录累计死亡虫头数，计算校正累计死亡率，并对试验数据用D.B.Duncan新复极差法做统计分析，比较各试验菌株的毒力差异性。
（2）各试验菌株对桃蚜的室内杀虫毒力测定
将制备的菌株发酵液及其离心上清液各取l0ml，用1%吐温水溶液（无菌）稀释10倍后备用。
空白对照用1%吐温水溶液（无菌）。
在桃蚜危害较重的温室中，采集成蚜比较集中的菠菜叶以及新鲜无虫害的嫩叶适量（试虫和饲养用嫩叶的采集量视当日的实验量定，用多少采多少）带回实验室备用。
用软毛笔尖将桃蚜轻轻挑入垫有两层滤纸的直径12cm的培养皿中，每处理用桃蚜180头以上，将各试验菌株发酵液和对照，各取
100mL分五次（中间间隔30分钟）轻轻喷到培养皿中。
然后，用毛笔将处理后爬动自如的桃蚜轻轻挑入干净培养皿(直径7.5crn)的新鲜菠菜嫩叶上，每皿25头，每处理重复5次，然后将各个处理的小培养皿放入直径12cm的大培养皿中，大培养皿中盛适量无菌水用以保湿，各处理皿口用刺有小孔的保鲜膜覆盖，置22℃左右的敞亮房间中饲养。
每天观察1次，记录死亡虫头数并及时将若蚜移出，隔天更换大皿中的无菌水（保证小环境的相对无菌和适宜湿度），连续观察7d，记录累计死亡虫头数，计算校正累计死亡率，并对试验数据用
D.B.Duncan新复极差法做统计分析，比较各试验菌株的毒力差异性。
1.2.4各试验菌株发酵液对温室白粉虱的小区防效试验
将制备的菌株发酵液各取200ml，用1%吐温水溶液稀释10倍备用。
空白对照用1%吐温水溶液。
在栽培一品红的温室里，选取温室白粉虱危害比较严重的二年生且正要开花的一品红植株240株，平均分成8个长方形小区，7个为试验药品小区，1个为空白对照小区，各小区之间加保护行，每小区试验植株30株，随机取12株，每株选三片（从植株上、中、下三个位置选取）虫数较多的叶片记录基础虫数并挂牌标记，然后，同时喷施实验药品和清水．从叶片两面喷施，以叶片滴水为度。
施药后的前两天遮阴、保湿，并于施药后第3、5、7、15天观察记录标记叶片的活虫数及其有无药害。
计算虫校正虫口减退率。
并对试验数据用D．B．Duncan新复极差法进行统计分析，比较各试验菌株发酵液对
温室白粉虱田间防效的差异显著性。
1.2.5各试验菌株发酵液对桃蚜的小区防效试验
将寄主换为嫩菠菜，并在其上接种适量桃蚜若虫，10天后分小区进行试验，其余实验方法和数据记录分析同上。
2 结果与分析
2.1 各试验菌株的室内杀虫毒力
室内毒力测定结果显示，不同种类的生防菌种对温室白粉虱若龄幼虫和桃蚜的杀虫毒力有明显差异。
粉虱座壳孢和蜡蚧轮枝菌发酵液对两种害虫的毒力最强，七天后的校正累计死亡率(%)均在90%左右，与其它菌种间存在显著性差异。
而球孢白僵菌和苏云会芽孢杆菌发酵液相对较弱，七天后的校正累计死亡率(%)在80%-60%之间，其中苏云金芽孢杆菌对两种害虫的杀虫毒力最弱。
2.2 各试验菌株发酵液对温室白粉虱和桃蚜的小区防治效果
表2和表3的结果显示，七株生防菌株发酵液对温室白粉虱和桃蚜的防治效果基本一致，两株蜡蚧轮枝菌对两种害虫的小区防治效果
最强，防治高峰期的校正虫口减退率(%)均可达80%以上，与其它试验菌株之间差异显著。
3 讨论与总结
（1）通过室内毒力测定和室外小区防效试验比较可知，蜡蚧轮枝菌的两个菌株在离体条件下无论是发酵液还是代谢产物对同翅目昆虫温室白粉虱和桃蚜均表现出很强的杀灭毒力，而且能在非寄主作物上定殖而且对目标害虫表现出较好的防治效果，具有很高的开发应用潜力[3]。
（2）粉虱座壳孢对这两种害虫的毒力也很高，但室外防效不很理想，主要原因是菌株F-85本身的抗性较弱以及其代谢产物的毒力不足造成的，只要选对了菌株应该也是这两种害虫比较理想的生防菌。
（3）球孢白僵菌和苏云金芽孢杆菌对同翅目昆虫的毒力较弱，尤其苏云金芽孢杆菌对其基本无效，单独使用价值不高，但从它们的代谢产物毒力分析，与其它生防物质复配扩大其抗虫谱也是一种应用途径。
参考文献
[1]祝树德.园艺昆虫学[Ｍ]北京：中国农业科技出版社,1996:162-165
[2]徐汝梅.温室白粉虱对植物的喜好性[J]．北京师范大学学报（自然科学版），1994，30(1)：124-130．
[3]马瑞燕，孔维娜，郝利军．温室白粉虱对几种园艺植物的偏好性[J]．昆虫知识，2005，42(3)：301-304．
[4]花冬梅．冬季温室白粉虱的发生与防治[J]．植物医生，2003,16(6)：11-16.。