高效液相色谱测定麦苗中阿魏酸含量
高效液相色谱法测定冠心康胶囊中阿魏酸的含量
局标准 YBZ06522009”，标准中只有对赤芍中芍药苷的含量控
制方法，没有对川芎的含量进行控制。查阅以往文献[3-6]，未见有
测定冠心康胶囊中阿魏酸含量的报道。本试验采用高效液相色
谱法测定该制剂中阿魏酸的含量，结果准确可靠，试验过程操作
简便，为冠心康胶囊的质量标准的提高提供依据。
阿魏酸对照品（1、阿魏酸）
2.2.4 阴性对照溶液：按样品处方及制备工艺制备不含川芎阴性 RSD 为 0.81%。
对照样品，按“2.2.3”项下供试品溶液制备方法制成缺川芎阴性 2.7 稳定性试验：取同一供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测
对照溶液。
定，每隔 4h 进样 1 次，共测定 7 次，阿魏酸峰面积的 RSD 为
2.3 方法专属性：分别将“2.2.2”项下对照品溶液、“2.2.3”项下供 0.49%，表明在 24h 内供试品溶液稳定性良好。
2.2.2 对照品溶液：精密量取“2.2.1”项下对照品储备液 0.2mL， 滤过。按“2.1”项下色谱条件测定，横坐标为进样量、纵坐标为峰
置 10mL 量瓶中，用 70%甲醇稀释至刻度，再摇匀，滤过。
面积进行线性回归：Y=64510.50X-13297.93（r=0.9999）。
2.2.3 供试品溶液：取样品内容物适量，混合均匀，取约 0.5g，精 2.5 精密度试验：取“2.2.2”项下对照品溶液，按“2.1”项下色谱条
图 1 阿魏酸对照品、样品、缺川芎阴性对照色谱图
醇约 80mL 使溶解，再用 70%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过。（阿 2.4 线性关系：精密量取“2.2.1”项下对照品储备液 0.1、0.2、0.4、
魏酸对照品浓度：112.000μg/mL）。
0.6、0.8mL，分置 10mL 量瓶中，用 70%甲醇稀释至刻度，摇匀，
高效液相色谱法测定活血止痛胶囊中阿魏酸含量
药物鉴 定
２｛ 年第 ｌ 卷第２ 期 ０７ ） ６ ２
高效液相色谱法测定活血止痛胶囊 中阿魏 酸含量
王明江
（ 浙江省舟 山存德 医药有 限公司 ， 浙江 定 海 ３６ ０ ） １０ ０
摘要 ： 目的 建 立 测 定 活 血 止 痛胶 囊 中阿魏 酸 含 量 的 高 效 液 相 色谱 （ Ｐ Ｃ 法 。 法 采 用 Ｄａ ｏｓ Ｃ ＨＬ） 方 ｉ ｎｉ 。 ｍ ｌ 色谱 柱 （ ５ ｎ ｘ ． ｍ， ｍ） ２ ０ｍ １ ４ ６ｍ ５ ， 以 甲 醇 一乙腈 一 ％ 冰 乙酸 溶液 （０：０： ０ 为 流动 相 ， 测 波 长 为３ ２ ａ 结 果 阿魏 酸 质 量 浓 度 在 ２７ ５ ． ￣ ｍ ２ ２ １ ７） 检 ２ ｍ。 ， ８～ ５６ｐ ／ Ｌ之 间 与峰 面积 线 ｇ
ｃ ｌｍｎ ａ ｕｅ ， ｈ ｍｏ ｉ ｈ ｓ ｗ ｓ ｍｅｈ ｎｌ ｃｔｎｔｉ ｏｕ ｗ ｓ ｓｄ Ｔ ｅ ｂｌ ｐ ａｅ ａ ｔａ ｏ —ａｅｏ ｉ ｌ ２ ｇａ ｉｌ ｃ ｔ ａｉ （ ０ ： ： ０） Ｔ ｅｄ ｔｃｉｎｗａｅｅ ｇｈｗ ｓ３ ２ｎ ｅ ｒｅ一 ％ ｌｃａ ａｅｉ ｃｄ ２ １ ７ 。 ｈ ｅｅ ｔ ｖ ｌｎ ｔ ａ ２ ｍ， ｃ ０ ｏ
Ｒ ｓ ｌ ｈ ｉ ａ ａ ｇ ｒｉ ｗ ｓ ２ ７ ５ ， ０￣ ／ Ｌ ｒ ０ ９ ９ ， ５ 。 ｈ ｖ ｒ ｅ ｒｃ ｖｒ ｒｔ ｗ ｓ ９ 。 １ ， Ｓ ０ ３ ％ （ ６ 。 ｅｕｔ Ｔ ｅ ｌ ｅ ｒｒｎ ｅ ｆ ｔ ａ ， ８— ５ ６ ｇ ｍ （ ： ， ９ ｎ＝ ） Ｔ ｅ ａ ｅａ ｅ ｏｅｙ ａ ａ ９ ２ ％ Ｒ Ｄ＝ ． ５ ｎ＝ ） ｓ ｎ ｏ ７ ｇ ｅ
活 血 止 痛 胶 囊 由 当归 、 七 、 香 （ ）冰 片 、 鳖 虫 、 三 乳 制 、 土 自然 铜 （ ） 煅 ６味 中 药 制 成 ， 活 血散 淤 、 肿 止痛 的 功 效 ， 具 消 ｌ 上用 于 治 临床 疗 跌 打损 伤 、 血 肿 痛 。 药 收 载 于《 生 部 药 品 标 准 ・ 淤 该 卫 中药 成 方 制剂 （ 十 二册 ） ， 准 中仅 规 定 通 过 胶 囊剂 常规 检 查 项 来 控 制 质 第 》标 量 ， 有定量方 法。 没 当归 是 处 方 中 主药 ， 活 血 、 痛 作 用 ， 魏 酸 具 止 阿 是 其 所含 的 主要 成 分 ， 为有 效 控 制该 药 品 质量 ， 者 以 阿 魏酸 作 为 笔
高效液相色谱法测定舒心通脉胶囊中阿魏酸的含量
（． ４ ６×２０ ｍ，５ ０ｍ ｍ）；以 乙腈 一 ０ ４ 磷 酸溶 液 （ ５７ ．％ ２ ：５） 为 流 动 相 ，流 速 １０ ／ ｎ ． ｍｌｍｉ，检 测 波 长 ３０ ｍ，柱 温 ３ ℃ 。 理 论 板 数 按 阿 魏 酸 峰 ２ｎ ０
计算不低于 ３ ０ ００。结果 ：阿魏酸在 ０ １ ０ ９ ｇ 围内线 性关 系 良好 ，ｒ为 ０ ９ ９ ８ ．６— ． ６ 范 ． ９ ９ ，平 均回收率 为 ９ ． ％，Ｒ Ｄ为 １６ 。结 论：本 方 ９２ Ｓ ．％ 法操作简便、快速、分离效果 好 、稳定性 高、重复性好 ，为全面控制舒心通脉胶囊质量提供了一个可靠的方法。
气滞 血瘀 引 起 的 胸 痹 ，症 见 胸 痹 ，胸 闷 ，心 悸 等 症 ，冠 心 病 ，心 绞 痛 见 上 述 证 候 者 … 。 川 芎 为 本 方 中 的 主 要 药 物 ，
３ 溶 液 的 制 备
ห้องสมุดไป่ตู้
３ １ 供试 品溶 液 的制 备 ．
取本 品 １ ０粒 的 内容 物 ，研 细 ，
品约 ００ ８０ ，置‘ Ｏ 量 瓶 中，加 甲醇溶 解并 稀 释至刻 ． ００ ｇ ｌ ｍｌ Ｏ
度 ，摇 匀 ， 即得 。再 分 别 精 密 吸取 此 溶 液 ２ 、６ 、１ 、 、４ 、８ ０
１ ｌ 照品溶液 ，注入液 相色谱 仪 ，按 上述 色谱条 件测定 ２ 对 色谱峰面积 ，以色谱 峰峰 面积 的积 分值 （ Ｙ）对 进样 质 量
刘 江 夏
昆瞑
伟 罗 艳 秋
６ ０ ２ ；２ 云 南 中 医学 院 ，云 南 ５２３ ． 昆明 ６０ ０ ５５０
１ 昆 明 总 医 院北 较 场病 区 药 械 科 ，云 南 ．
【 摘
高效液相色谱法测定慈航片中阿魏酸的含量
高效液相色谱法测定慈航片中阿魏酸的含量姜志远121.哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心(哈尔滨150076);2.黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心（哈尔滨150090)摘要目的:建立高效液相色谱法测定慈航片中阿魏酸的含量。
方法:采用DiamonsilC18色谱柱(150mmx4.6mm，5^im)，流动相为甲醇-0.1°/〇磷酸溶液(30:70)，流速为l.OmL•min—1,在320nm处检测。
结果:阿魏酸在0.0407 ~ 0.4068咫范围内线性关系良好，7=0.9999;平均回收率为98.27%(RSD=0.85%,n=6)。
结论:该方法简单、快速、准确，可用于慈航片的质量控制。
关键词：慈航片；阿魏酸•，高效液相色谱法中图分类号:R927.2 文献标识码:A文章编号:1006-2882(2018)01-007-04D O I：10.14035/kLhljyy.2018.01.003Determination of Ferulic Acid in Cihang Capsules by HPLCJiang Zhiyuan1,21.Research Center of L ife Sciences and Environmental Sciences,Harbin University of Commerce (Harbin 150076);2. Heilongjiang Province Agricultural Reclamation Administration of the Centersfor Disease Control and Prevention(Harbin 150090)(内文见下页)4.8在5%葡萄糖注射液中的稳定性试验取供试品(处方试验品)2支稀释于250ml5%葡萄糖注 射液中，每隔1小时取样1.25m l,置10m l量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，按含量测定方法测定含量，共6次，考察本品 在5%葡萄糖注射液中的稳定性，结果见表6,结论为本品在 5%葡萄糖注射液中的稳定性较好,6小时内含量基本不变。
反相高效液相色谱法测定不同溶媒川芎提取物中阿魏酸的含量
时 珍 国医 国 药 ２０ ０ ７年 第 １ 第 ７期 ８卷
Ｌ ＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ２０ Ｏ ．８ Ｏ７ Ｉ ＩＨ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ＩＡＲ ＳＡ Ｃ ０７ Ｌ１ ． Ｓ Ｖ Ｎ
稳定 。 取绿原酸对照品进行紫外扫描 （０ ４０ ｎ ， ２０— ０ ｍ） 结果在 ３７ ２． ２ ６ 重复性 实验 精 密量 取 同一样 品 （ 都市 湔江 制药 厂 ） ０ｎ ． 成 ３ ｍ波长处有最大吸收 ， 实验选择 ３７ｎ ２ ｍ作 为检测波长。 份 ， ２２ ２ 项 下操作 ， 照“ ．． ” 测得 含量平均值为 ８ ０ ｇ‘ 一， Ｓ ．３ｍ ｇ Ｒ Ｄ 本文参照银黄 １服 液的色谱条件进行检测 ， ３ 其流动相 中乙腈 为 ０ ６ （ ４ 表 明 本法 重 复 性 好 。 ． ％ ｎ＝ ） 的比例不得大于 １ ％， Ｏ 否则样 品色谱 图的分离效果差 。 ２ ７ 回收率实验 精密 称取 同一 已知含量 样品 （ ． 成都 市湔江制 由表 ２可 见 不 同厂 家 的 样 品 中绿 原 酸 的 含 量差 异 太 大 ， 现 而 药 厂 ） ０ ５ｇ ４份 ， 量 加 入 适 量 的绿 原 酸 对 照 品 ， “ ． ． 约 ． 共 定 照 ２２ 在对其含量没有统一 的限度标准 ， 作者建议今后在修改标准时应 ２ 项下操作 ， ” 并按上述色谱 条件测 定。结 果见表 １ 平均 回收率 ， 考虑增加含量 测定 项 ， 以确保 药 品 的质 量 ， 证 临床 用药 安 全 保
积 （ 进 行 线 性 回归 ， 回归 方 程 为 Ａ＝ ９ ２５７ ３０ ５２ ｒ 进 行 测 定 ， 果 见 表 ２ Ａ） 得 ６ ．８ Ｃ一 ．９ （ ： 结 。 １ｎ＝ ） ． ６ 。结果表明绿原酸在 ０ １４— ．８ ｇ・ ｌ 范围 内线 ．６ ０ ９ ４ ｍ 表 ２ 样 品 测 定 结 果 性 关 系 良好 。
麦苗中阿魏酸、抗坏血酸(VC)、总黄酮协同抗氧化能力分析
麦苗中阿魏酸、抗坏血酸(VC)、总黄酮协同抗氧化能力分析张志清;向建军;周利茗;蒲彪【摘要】The synergistic antioxidant activity of ferulic acid and vitamin C,ferulic acid and Flavonoids(Rutin),vitamin and Rutin,and the mixture of three components above are determined by the method of cleaming DPPH ·and ABTS ·.The result indicate that the combines above all are with synergistic antioxidant activity,and antioxidant capacity is positively correlated with any concentration of components.Among the combinations of the two components,the antioxidant capacity of the combination with ferulic acid and vitamin C is the bains with three is higher than the two combinations at the synergistic paring with the contribution to total antioxidant capacity,the total flavonoids is the first,ascorbic acid is the second,ferulic acid is the last.Wheat seeding contains abundant ferulic acid,ascorbic acid and flavonoids compounds,therefore its antioxidant activity is superior to the othels.%采用清除二苯代苦味肼基法和2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基法,研究了麦苗中阿魏酸、抗坏血酸、总黄酮之间的抗氧化活性.结果表明,它们之间均具有协同抗氧化作用,且抗氧化能力与其中任意组分的浓度呈正相关.两两复配的组合中,阿魏酸与抗坏血酸协同抗氧化能力最高.3种组分的协同抗氧化能力较两两复配的组合大,回归分析表明,芦丁对总抗氧化能力的贡献率最大,抗坏血酸次之,阿魏酸最小.麦苗含丰富的阿魏酸、抗坏血酸及黄酮类化合物,故麦苗具有较高的抗氧化活性.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2013(028)007【总页数】8页(P5-11,18)【关键词】麦苗;阿魏酸;抗坏血酸;总黄酮;协同抗氧化【作者】张志清;向建军;周利茗;蒲彪【作者单位】四川农业大学食品学院,四川雅安625014;四川农业大学食品学院,四川雅安625014;四川农业大学食品学院,四川雅安625014;四川农业大学食品学院,四川雅安625014【正文语种】中文【中图分类】R151.3麦苗作为一种中国传统的中草药，其功效在《本草纲目》《得配本草》《伤寒类要》等中国传统医学典籍中都有详细记载［1］。
HPLC法测定阜康阿魏根和叶中阿魏酸的含量
HPLC法测定阜康阿魏根和叶中阿魏酸的含量王东东;刘宏炳;宋海龙;杨卫星;贾晓光;田树革【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2012(35)9【摘要】目的建立阜康阿魏根和叶中阿魏酸含量的测定方法.方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定阜康阿魏根和叶中阿魏酸的含量.色谱条件:Kromasil C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸(15∶85),流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为35℃.结果阿魏酸峰面积与进样量在0.009 8～0.049 0 μg 范围内有良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为99.3%,RSD为0.79%(n=6).结论该方法快速、准确、可靠,可用于阿魏根和叶中阿魏酸含量的测定.【总页数】4页(P1139-1142)【作者】王东东;刘宏炳;宋海龙;杨卫星;贾晓光;田树革【作者单位】新疆医科大学中医学院,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学中医学院,乌鲁木齐,830011;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,乌鲁木齐,830002;新疆昌吉卫生学校,新疆,昌吉,831100;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,乌鲁木齐,830002;新疆医科大学中医学院,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R914【相关文献】1.RP-HPLC法测定保健食品中阿魏酸、异阿魏酸含量 [J], 张荣涛2.RP-HPLC法测定7种中药材中反式阿魏酸和顺式阿魏酸的含量 [J], 刘晓芳;刘养清;赵平;马春红;陈元元;仝永斌3.HPLC法测定不同厂家补中益气丸中阿魏酸和异阿魏酸的含量 [J], 柯雪红;陈为;陈锦富;花汝凤;杨小催4.HPLC法测定不同产地阿魏药材的阿魏酸含量 [J], 林君容;杨臣;池文杰;吴春敏;5.HPLC法测定阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠的含量 [J], 王冬梅;莫宗琪;苏勍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定欣康胶囊中阿魏酸的含量
量瓶 中 ， 加 甲醇 至 刻 度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 取 续 滤 液 作 为
供试 品溶 液 。
处 方 中川 芎 的主 要 成 分 阿魏 酸 采 用 高效 液 相 色 谱 （ ＨＰ Ｌ Ｃ ） 法进行定量分 析， 方 法简便易行 ， 可 以 作
为控 制该 制剂 质 量 的方 法 。
２ ． １ 色谱 条 件＿ 】 色谱 柱 ： Ｋ ｒ ｏ ｍａ ｓ ｉ ｌ Ｃ １ ８ 色谱柱 （ ２ ５ ０ ｍｍ ×４ ． ６ ｍｍ， ５ ｍ） ； 流动相 ： 甲醇一 ０ ． １ 磷 酸溶 液 （ ３ ０： ７ ０ ） ；
检测 波长 ： ３ ２ ０ ｎ ｍ； 柱温： 室温 ； 流 速 ：１ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ；
２ ． ４ 阴性对 照溶 液 的制备 按 处方 及制 备工 艺制 备不 含 川 芎 的 阴性样 品 ，
再 按供 试 品溶 液 的制 备方 法制 备 阴性对 照溶 液 。
２ ． ５ 检测 方法 按“ ２ ． １ ” 色谱 条 件， 吸取“ ２ ． ２ ” 对 照 品溶 液、 “ ２ ． ３ ” 供试 品溶 液 及 “ ２ ． ４ ” 阴性溶 液 各 １ Ｏ Ｌ， 分 别
行 回归处 理 ， 结 果 阿魏 酸 在 ０ ． ０ ５ ２ ～０ ． ３ １ ２ ｐ ． ｇ范 围
内， 回归 方程 为 Ｙ 一１ ． ８ １ ６ ×１ ０ Ｘ ＋ ３ ． ０ ５ ２ ×１ ０ 。 ，
进样量 ： １ ｏ Ｌ ； 理论塔板数 ： 以 阿 魏 酸 计 算 不 低 于
５ ０ ０ ０。
释至 刻度 ， 摇匀， 作 为对 照 品溶 液 （ ２ ０ ． ８ ｇ ｇ ／ ｍＬ ） 。 ２ ． ３ 供试 品溶液 的制 备ｌ ＿ ２
作 者单 位 ： ０ ５ ３ ０ ０ ０河 北 省 衡 水 市 食 品 药品 检 验 检 测 中 心 仪 器 设 备 与质 量 管 理 科 （ 庞红 霞） ， 食 品业务 办公 室（ 李 春
高效液相色谱法测定妇科十味片中阿魏酸的含量
高效液相色谱法测定妇科十味片中阿魏酸的含量【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定妇科十味片中阿魏酸的含量测定方法。
方法：色谱柱为Zorbaxl C18，流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液（17:83），检测波长316nm，流速为 1.0mL﹒min-1。
结果：阿魏酸进样量在 5.032～30.192μg.mL-1范围内线性关系良好（г=0.9998，n=6）。
阿魏酸的平均回收率为98.76%，RSD为1.09%（n=6）。
结论：本法简便、准确，重现性好，可作为妇科十味片的质量控制方法。
【Abstract】Objective ：To establish a method for the determination of ferulic acid in Fukeshiwei Tablets by HPLC. Method：HPLC was used Zorbaxl C18 column,mobile phase was composed of Acetonitrile-0.085%H3PO4(17：83),The flow rate was 1.0mL﹒min-1 with detection wavelength at 316nm.Result：The linear range of ferulic acid was from 5.032～30.192μg.mL-1 (г=0.9998,n=6).The average recoverery was 98.76%,and RSD was 1.09%(n=6) Conclusion：The method is simple,accurate and suitable.It can be used For the quality control of Fukeshiwei Tablets.【Key words】HPLC;Fukeshiwei Tablets;Ferulic Acid妇科十味片是由醋香附、当归、川芎、醋延胡索等十一味药组方，具有养血疏肝，调经止痛的功效，临床主要用于血虚肝郁所至月经不调、痛经、月经前后诸证。
高效液相色谱法测定肤痒颗粒中阿魏酸的含量
高效液相色谱法测定肤痒颗粒中阿魏酸的含量
徐志刚
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2006(18)3
【摘要】目的建立用高效液相色谱法测定肤痒颗粒中阿魏酸含量.方法采用Hypersil C18 ODS2(5μm,200mm×4.6mm)色谱柱,以甲醇-水-冰醋酸(24:76:0.2)为流动相,流速1.2mL·min-1,柱温为室温;紫外检测器于波长为313nm.结果阿魏酸在0.9900～49.50μg·mL-1线性关系良好(r=0.9996),最低检测限0.005μg·mL-1,测定阿魏酸的平均回收率为99.11%,RSD1.3%.结论该方法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,将为肤痒颗粒的定量质量控制提供科学依据.
【总页数】3页(P79-81)
【作者】徐志刚
【作者单位】福建中鹭医药有限公司,福州,350001
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定生化汤协定方代煎液中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量 [J], 汪怡
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江晓
5.高效液相色谱法测定阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠的含量 [J], 蒋艳霞;焦志斌;崔素梅;张慧兰
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高效液相色谱测定麦苗中阿魏酸含量
摘要：采用RP-HPLC法对麦苗中阿魏酸的含量进行测定，结合外标法绘制的标准曲线，确定
待测样品的阿魏酸含量，比较品种间阿魏酸含量的差异。此方法简便、快速、重现性好，适
用于麦苗中阿魏酸的定量分析。
关键词：阿魏酸；麦苗；RP-HPLC
The determination of ferulic acid in wheat seeding by RP-HPLC
Abstract: The determination the content of ferulic acid in wheat seeding by RP-HPLC, combined
with the external standard method to determine the standard curve drawing, which is being tested
samples of ferulic acid content, and compared the differences in ferulic acid content of varieties.
This method is simple, rapid and reproducible, and is suitable for the quantitative analysis on
ferulic acid in wheat seeding.
Keywords: ferulic acid, wheat seeding, RP-HPLC
阿魏酸是植物中普遍存在的一种有机酚酸，也是小麦苗皮中含量最高的酚酸(0.4％～
1.0％)，是木质素合成的中间产物，其化学名为：4一羟基一3一甲氧基肉桂酸(4-hydroxy
一3一methoxyphen1)，在麦苗中主要与细胞壁多糖和木质素交联构成细胞壁的一部分,是桂
皮酸的衍生物之一，有顺式和反式2种【1】。
目前关于阿魏酸的分析方法文献报道较多，如薄层扫描法、分光光度法、高效毛细管电
泳法和高效液相色谱法等【2】，本文采用高效液相色谱法测定了麦苗中阿魏酸的含量，结果
表明，该方法色谱分离效果良好、精密度高、重现性好、回收率高。
1、实验仪器与试剂：
1.1仪器：高效液相色谱仪；电子天平；纯水仪；超声波清洗机等。
1.2试剂：甲醇为色谱纯，水为超纯水，冰乙酸、乙醇以及盐酸为分析纯等；阿魏酸对照品
(sigma公司提供)。
2、实验方法与结果：
2.1样品前处理
称取10g烘干至恒重的小麦籽粒用粉碎机粉碎后，浸入100mL蒸馏水中加淀粉酶0.2g，
在55℃下，用4%NaOH调pH=8.0，于恒温水浴锅水浴1h（每10min定期振荡）,再用胃蛋白
酶0.1g在37℃下，用6 mol·L-1HCl溶液调pH =2，于恒温气浴摇床中再次震荡搅拌1h。
之后再用四层纱布过滤，取滤渣于105℃下烘干2h灭酶，得干沉淀，再次称重（记录实际
称量质量）。
干沉淀用体积比2∶1的碱醇（质量分数4%的NaOH、无水乙醇）溶液按料液比1∶12(w/v)
浸润，在40℃下加入0.3g无水Na2SO3,超声0.5h。用6mol·L-1HCL溶液调节pH =2，6000
rpm·min-1离心15min，去残渣。上清液于50℃旋转蒸发出其中的乙醇。将余液用流动相定
容至50mL，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过即可。
2.2实验操作
2.2.1开机、关机：a.平衡柱b.平衡检测器c.色谱柱保存d.PC→泵→柱箱→检测器
2.2.2流动相的配制：称量→溶解→调pH→混合→过滤→脱气
2.2.3过滤：采用溶剂过滤器
滤膜规格：0.22um,0.45um
滤膜类型：有机系（F）：过滤含有机溶剂的流动相
2.2.4脱气方法：a.超声波b.充He c.抽真空d.在线
2.2.5 pH：a.分离最佳pH b.色谱柱pH适用范围
2.2.6六通阀进样操作：
取样→load→插针→注入样品→inject→（1min后）拔针→洗针（超声水→蒸馏水→
甲醇→润洗）→取样
2.3色谱条件
色谱柱：Hyperclone BDS C18柱(150×4.60 mm，5um，phenomenex)；
流动相：甲醇-水-冰乙酸（30∶69∶1），pH=3；柱温30℃；流速1.0 mL·min-1，检测
波长320nm，进样量5ul。
2.4制作标准曲线
配制浓度为13.92ug/ml的标准样品，分别以1、2.5、5、7.5、10、15ul进样。分别
记录其保留时间和峰面积，绘制标准的回归方程。
2.5测定样品中的阿魏酸含量
将标号的样品依次按5ul进样，分别记录其保留时间和峰面积。利用制作好的标准曲线
计算各样品中阿魏酸的含量。进样量(ug):浓度×体积，y=ax+b（y：峰面积A ，x：进样量），
样品浓度=进样量/5ul。
2.6实验结果
2.6.1标准样品：
表1
进样体积(ul) 保留时间(min) 进样量(ug) 峰面积
2.5 8.015 34.80 179097.3
5 7.973 69.60 301510.1
7.5 7.907 104.4 503900.0
10 7.898 139.2 743989.5
15 7.840 208.8 1116428
图1 标准曲线
图表标题
y = 5561.9x - 50385
R2 = 0.9934
0
200000
400000
600000
800000
1000000
1200000
0100200300
峰面积
线性 (峰面积)
图2 标准样品的色谱图
2.6.2待测样品：
表2
文件名 进样体积ul 保留时间 进样量ug 峰面积 C ug/ul
1 5 7.832 64.01278 305647.7 12.80256
2 5 7.823 71.37663 346604.7 14.27533
3 5 7.798 54.23740 251278.0 10.84748
图3 待测样品1色谱图
图4 待测样品2色谱图
图5 待测样品3色谱图
可以计算得：样品1的含量为12.80256 ug/ul
样品2的含量为14.27533 ug/ul
样品3的含量为10.84748 ug/ul
由此可见，各样品中的阿魏酸含量有差别，样品2含量最多，样品3含量最少。
3、实验讨论
实验采用反相高效液相色谱法测定麦苗中阿魏酸的含量。所谓高效液相色谱法，是一
种以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、
缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，
从而实现对试样进行分析的方法【3】。根据所使用的流动相和固定相的极性程度，将其分为正
相分配色谱和反相分配色谱，因为阿魏酸是极性的，所以采用反相色谱，通过以水为流动相
的主体，加以甲醇和冰醋酸为调节剂，固定相则采用了化学键和固定相，即Hyperclone BDS
C18柱，这使得阿魏酸有较好的分离度。
从曲线上可以看出，基线开始不久会出现一个小峰，那是基线噪声，是无法避免的，而
样品曲线上在大峰后有一个小峰出现，是由于阿魏酸被分解造成的。
实验中还应注意以下几个方面：（1）过滤时使用有机系滤膜，若用水系滤膜过滤含少
量有机物质的溶液，滤膜会溶解，导致检测器谱线不稳，此时需要清洗整个管路才能解决问
题。且滤膜孔径越小，其过滤速度越慢；（2）需要脱气的原因：a.检测器b.色谱柱c.样品
氧化；（3）流动相pH一定要在色谱柱的PH适用范围内，若超出适用范围，则会导致相断裂。
且最好能满足样品的最佳分离pH；(4) 进样的准确性、出峰时间等。
本次试验中标准回归方程的R2值为0.9934，即说明其准确度比较高。本实验采用甲醇-
水-冰乙酸（30∶69∶1）作为流动相，色谱峰的保留时间、峰面积等都较适宜，方法简单、
分离效果较好、灵敏度较高。用高效液相色谱法比其他方法更准确、更科学，是值得推广的
测定麦苗中阿魏酸含量的方法。
参考文献：
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