淋巴瘤基因克隆性重排检测
弥漫性大B细胞淋巴瘤bcl
弥漫性大B细胞淋巴瘤bcl蒋会勇，陈愉，张三泉，朱梅刚，赵彤【关键词】弥漫Correlation between bcl2/IgH gene rearrangement and GCB molecular subtype in diffuse large Bcell lymphoma【Abstract】AIM: To explore the correlation between bcl2/IgH gene rearrangement and germinal center Bcelllike (GCB) molecular subtype in diffuse large Bcell lymphoma (DLBCL). METHODS: Selfdesigned heminested PCR was used to detect bcl2/IgH gene rearrangement in 60 cases of DLBCL. Positive PCR products were cloned and sequenced. The tissue microarray of 60 specimens of DLBCL was prepared and the expressions of CD20, CD10, Bcl6 and MUM1 were investigated by immunohistochemical SP method. GCB and nongerminal center Bcelllike (nonGCB) were subclassified. RESULTS: Six of the 60 DLBCL were bcl2/IgH positive by conventional PCR method. Selfdesigned heminested PCR was used to amplify 6 positive cases again and bcl2/IgH gene was verified rearrangement in 5 cases by cloning and sequencing and 1 had the gene segment of BAC331191 of human chromosome 19. CD20 waspositive in the 60 DLBCL cases. Positive expression rates of CD10, Bcl6 and MUM1 were %, % and % respectively. 32 %) were GCB and 28 %) were nonGCB. Bcl2/IgH gene rearrangementpositive cases were all GCB subtypes, which were significantly correlated with the expression of CD10 (P= and not with Bcl6 and MUM1. CONCLUSION: Selfdesigned heminested PCR can improve the detection accuracy of bcl2/IgH gene rearrangement. Bcl2/IgH gene rearrangement detection helps the DLBCL determination of GCB subtypes.【Keywords】 lymphoma, Bcell, diffuse large；bcl2; gene rearrangement【摘要】目的: 探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）bcl2/IgH 基因重排与分子亚型生发中心样（GCB）的相关性. 方式:采纳自行设计的半巢式PCR对60例DLBCL的bcl2/IgH基因重排进行了检测，并对阳性产物进行克隆、测序. 同时采纳免疫组化SP法在组织微阵列上同步观测CD20，CD10，Bcl6，黑色素瘤相关抗原（突变体）1 (MUM1)的表达,进行GCB和非生发中心样(nonGCB)分子分类. 结果: 常常规法扩增bcl2/IgH，有6/60例DLBCL bcl2/IgH阳性；在6例阳性样本中,采纳本组设计的半巢式PCR扩增，经克隆及测序证明5例bcl2/IgH 基因重排阳性，1例为人类第19号染色体BAC 331191基因的片段. 60例DLBCL CD20表达全数阳性；CD10，Bcl6， MUM1的阳性表达率别离为%，%，%；GCB 32（%）例，nonGCB 28（%）例. bcl2/IgH基因重排阳性的病例均属GCB分子亚型, 且与CD10表达有显著性相关（P=），而与Bcl6及MUM1表达无相关性. 结论:利用本组设计的半巢式PCR 可提高bcl2/IgH基因重排检测的准确性. bcl2/IgH基因重排的检测可协助确信部份GCB分子亚型的DLBCL.【关键词】弥漫性大B细胞淋巴瘤； bcl2; 基因重排0引言弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large Bcell lymphoma, DLBCL）是最多见、高度恶性的非霍奇金淋巴瘤，但新近cDNA芯片的研究结果显示，该瘤存在生发中心样（germinal center Bcelllike，GCB）和非生发中心样（non germinal center Bcelllike, nonGCB）两种分子亚型，GCB的预后明显好于nonGCB类型［1-2］. Hans等［3］以cDNA 芯片为参照标准，发觉利用“套餐”式免疫标记物CD10，Bcl6，黑色素瘤相关抗原（突变体）1 ［melanoma associated antigen(mutated)1, MUM1］也能够对DLBCL进行分子分类. bcl2/IgH基因重排是人类恶性淋巴瘤最多见的染色体异样，存在bcl2基因重排的病例有较好的生存率. 咱们利用组织微阵列(tissue microarray, TMA)技术对60例DLBCL进行分子分类, 采纳PCR技术检测bcl2/IgH基因重排，探讨bcl2/IgH基因重排与分子亚型的相关性，旨在为临床判定DLBCL的预后提供更多的信息.1材料和方式1．1材料1999/2003年诊断明确资料齐全的DLBCL 60（男29，女31）例，中位年龄（16~91）岁，所有标本均为40 g/L中性甲醛固定, 常规石蜡切片HE染色. 由3名专门从事淋巴瘤研究的医师按新的WHO分类方式进行诊断. SP试剂盒购自北京中山生物技术; CD20购于福州Maxim公司；CD10购于美国Zymed公司；Bcl6购于美国Neomarker 公司； MUM1 mAb由意大利Perugia大学血液病研究所Dr. Falini馈赠.1．2方式1．IgH基因重排的检测DNA提取采纳我室成立的石蜡切片刮片法，每例切片1张，厚 3 μm，常规脱蜡、干燥. 用无菌刀片刮入Eppendorf管，加入50 μL消化液(10 mmol/L , 1 mmol/L EDTA, 200 mL/L Tween 20)，同时加入蛋白酶K（终浓度为200 mg/L），56℃水浴孵育留宿，充分消化后，98℃, 10 min灭活蛋白酶K，12 000 g离心10 min，分装上清液，用分光光度计检测DNA的浓度，将浓度调整至200～400 μg/L，-20℃保留备用.1．2．2半巢式PCR检测bcl2/IgH基因重排bcl2/IgH 基因重排的检测采纳半巢式PCR. 第一次扩增PCR引物为：上游:MBR 5′TTAGAGAGTTGCTTTACGTGGCCTG3′; 下游JH1: 5′ACCTGAGGAGACGGTGACC3′. 该对引物为检测bcl2/IgH 基因重排经常使用引物［4］. 利用专业的引物设计软件Primer premier, 咱们在MBR下游设计了第二重引物: Mbr1 5′CAACACAGACCCACCCAGAG3′与原下游引物JH1组成半巢式PCR反映的第二对引物. 反映体系为:10×PCR 缓冲液2 μL, 25 mmol/L MgCl2 μL, 10 mmol/L dNTP μL,上下游引物各μL,Taq DNA聚合酶μL，模板1 μL(浓度200~500 mg/L),三蒸水μL,总反映体系为20 μL. 半巢式PCR的反映体系为10×PCR缓冲液2 μL, 25 mmol/L MgCl2 μL, 10 mmol/L dNTP μL,上下游引物各1 μL, Taq DNA聚合酶μL，模板1 μL,三蒸水μ℃变性5 min，94℃变性30 s，57℃退火45 s, 72℃延伸45 s, 共35个循环，然后，72℃终末延伸10 min，4℃保留30 min. 半巢式PCR 模板为一步法的产物稀释100倍. 产物以20 g/L琼脂糖凝胶电泳, 溴化乙锭（EB）μL染色. 所有PCR操作进程中严格按PCR操作规程进行. 阳性对照采纳经测序证明为基因重排阳性的DNA，阴性对照为双蒸水. PCR阳性产物经TA克隆连于T载体，送上海博亚公司进行测序. 测序采纳3730测序仪，DNA测序技术要紧依据Sanger双脱氧链终止法. 测序结果在基因库中进行比对，以明确是不是为 bcl2/IgH 基因重排片段.制作第一对60例DLBCL蜡块组织的苏木精-伊红染色切片作形态学观看，选择有代表性的肿瘤区域，在相应位置进行标记；然后利用组织微阵列仪（Beecher Instruments, MTA1）制作受体蜡块并打孔，依照原有切片的标记部位，用供体针在蜡块相应部位取样，所用组织芯直径为 mm，将供体组织芯放入受体蜡块. 每例标本在标记区域内随机取2~4条组织芯. 在组织样本填入蜡孔时记录每一个样本在二维阵列中的具体位置，并在必然位置上标记出TMA的方位.免疫组化染色采纳SP法进行免疫组化染色. 以CD20染色来判定每一个组织点的肿瘤细胞数，每例标本以肿瘤细胞数最多的点作分析. 抗体的阳性判定标准为：CD20，CD10阳性定位于细胞膜，Bcl6，MUM1阳性定位于细胞核, >20%的肿瘤细胞染色判为阳性［3］. 采纳CD10， Bcl6和MUM1 3种抗体对DLBCL进行分类［3］. CD10， Bcl6作为生发中心细胞的标志物，CD10+或CD10+/Bcl6+为GCB类；CD10-/Bcl6-为nonGCB类；MUM1作为后生发中心细胞来源的标志物，假设CD10-/Bcl6+，那么用MUM1来分类：MUM1+为nonGCB类，MUM1-为GCB类.统计学处置: 利用SPSS 软件,对数据进行Fisher精准查验. 2结果2．1组织学分型依照WHO新分类方式对DLBCL进行分型，中心母细胞型(centroblastic，CB) 53例%)，免疫母细胞型（immunoblastic，IB）3例%)，间变性大B细胞型（anaplastic，AP) 2例%)，未分型2例%).2．2蛋白表达60例DLBCL患者的组织切片CD20表达全数阳性. CD10， Bcl6， MUM1的阳性表达率别离为%， %， %，其中CD10+ Bcl6+ 14例， CD10+/MUM1+ 13例，Bcl6+/MUM1+ 16例，CD10+/Bcl6+/MUM1+ 8例（图1）. 经统计学分析，年龄性别等因素与CD20, CD10, Bcl6表达无关（表1）.2．3DLBCL TMA分子分类60例DLBCL中， 32例（%）GCB，28例（%）nonGCB. 在32例GCB类中， 26例（%）CD10+，18例（%）Bcl6+，14例（%） CD10+/Bcl6+， 6例%) CD10-/Bcl6+. 在28例nonGCB类中，24例（%）MUM1+，8例（%） MUM1+/Bcl6+.A：细胞膜CD20+ ×100; B：细胞核Bcl6+ ×100; C: 细胞膜CD10+ ×200; D: 细胞核MUM1+ ×100.图1弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫组化染色SP2．4基因重排检测因bcl2/IgH基因断裂在不同病例略有不同，因此扩增出的片段为100～300 bp(图2). 经一步法扩增，发觉6例阳性，对阳性样本进行半巢式PCR扩增时发觉5例基因重排阳性，考虑一步法扩增有假阳性，经克隆及测序证明为人类第19号染色体BAC331191基因的片段，其序列为: TTAGAGAGTTGCTTTACGTGGCCTGCCTCTCTCACCTCCCAGGTGAACGGTGTGGACATGAAGCTGCCCGTGGTGCTGGCCAACGGCCAGATCCGTGCCTCCCAGCATGGTTCAGATGTTGTGATTGAGACCGACTTCGGCCTGCGTGTGGCCTACGACCTTGTGTACTATGTGCGGGTCACCGTCTCCTCAGGT, 因此bcl2/IgH基因重排为5例. 基因重排阳性的5例病例均为GCB亚类. CD10阳性及阴性病例bcl2/IgH基因重排的发生率别离为%(5/26)及0%(0/34)，有统计学不同（P=）(表1).表1弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫组化与临床资料及bcl2/IgH基因重排关系(略)图2PCR检测bcl2/IgH重排3讨论本组60例DLBCL，CD10的阳性率高于西方Hans等［3］的28%和Colomo等［4］的21%, 可能与本组选用的病例多为CB变型的B细胞淋巴瘤有关. CD10诊断GCB的灵敏性较低，经CD10和Bcl6联合应用，在GCB类中发觉了6例CD10阴性、Bcl6阳性，说明联合应用CD10及Bcl6可提高GCB亚类的检出率. 本组检测MUM1阳性率与文献报导（50%~77%）相近［5-6］. 咱们利用传统引物进行bcl2/IgH基因重排检测发觉的阳性样本，采纳本组设计的半巢式PCR扩增及克隆、测序证明有1例为人类第19号染色体BAC 331191基因的片段，该片段的上下游别离有9个碱基能与传统引物互补配对，因此进行PCR时可能将其扩增出来，而非真正的基因重排. 这可能是传统引物检测重排发生假阳性的分子生物学基础. 结果显示采纳咱们所设计的半巢式PCR 引物检测bcl2/IgH基因重排可有效的幸免假阳性的发生. 在咱们的研究中，所有存在bcl2基因重排的病例均表达CD10，统计学资料说明二者存在相关性，因此通过对bcl2基因重排的检测可确信部份GCB 类的DLBCL. 这部份DLBCL与其它类型的DLBCL相较可能有不同的发病机制，属不同的疾病亚型［7-8］. 正确的检测方式对这种疾病的正确诊断有着重要意义，咱们利用的半巢式PCR提高了诊断重排的准确性.本研究在进行免疫组化进程中，咱们采纳了TMA技术，由于所有标本均在一张切片上进行免疫组化染色，人为误差少，一致性更强，有助于在同一水平进行观看分析和比较研究，因此本研究的免疫组织化学染色结果是靠得住的.【参考文献】［1］ Rosenwald A, Wright G, Chan WC, et al. The use of molecular profiling to predict survival after chemotherapy for diffuse largeBcell lymphoma［J］. N Engl J Med,2002,346(25):1937-1947.［2］ Shipp MA, Ross KN, Tamayo P, et al. Diffuse large Bcell lymphoma outcome prediction by geneexpression profiling and supervised machine learning ［J］. Nat Med, 2002,8(1):68-74.［3］Hans CP, Weisenburger DD, Greiner TC, et al. Confirmation of the molecular classification of diffuse large Bcell lymphoma by immunohistochemistry using a tissue microarray ［J］. Blood, 2004,103(1):275-282.［4］ Colomo L, LopezGuillermo A, Perales M, et al. Clinical impact of the differentiation profile assessed by immunophenotyping in patients with diffuse large Bcell lymphoma ［J］. Blood, 2003,101(1):78-84.［5］Tsuboi K, Iida S, Inagaki H, et al. MUM1/IRF4 expression as a frequent event in mature lymphoid malignancies ［J］. Leukemia, 2000,14(3):449-456.［6］ Natkunam Y, Warnke RA, Montgomery K, et al. Analysis of MUM1/IRF4 protein expression using tissue microarrays and immunohistochemistry ［J］. Mod Pathol, 2001,14(7):686-694.［7］ Alizadeh AA, Eisen MB, Davis RE, et al. Distinct types of diffuse large Bcell lymphoma identified by gene expression profiling ［J］. Nature, 2000,403(6769):503-511.［8］ Huang JZ, Sanger WG, Greiner TC, et al. The t(14,18)defines a unique subset of diffuse large Bcell lymphoma with a germinal center Bcell gene expression profile ［J］. Blood, 2002,99(7):2285-2290.。
T细胞淋巴瘤的治疗
T细胞非霍奇金淋巴瘤诊疗进展山西医学科学院山西大医院张巧花侯淑玲T细胞非霍奇金淋巴瘤（T-NHL）是一种来源于T淋巴细胞的恶性克隆性增殖性疾病。
异质性强，病理诊断类型复杂，2008年WHO病理分20种类型，临床表现与治疗因不同发病部位、不同病理类型以及基因型而差异较大。
T-NHL的发病机制尚不清楚，近年来随着对T淋巴细胞作用机制以及T-NHL的生物学、细胞遗传学以及分子生物学研究的不断深入，T-NHL的诊治取得了瞩目的进展。
一、T-NHL的流行病及诊断与分型1.流行病因。
T-NHL的发病率远低于B-NHL,而且与地域分布有关，亚洲人群发病率高于欧美地区。
T-NHL在我国占非霍奇金淋巴瘤的34%，而在欧美国家仅占所有5%-15%。
亚洲地区以节外病变为主，如EB病毒相关的鼻部自然杀伤细胞（NK）淋巴瘤/T-NHL；在欧美地区主要是淋巴结内型，包括非特指型的外周T细胞淋巴瘤（PTCL-NOS）、间变型大B细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性T-NHL。
2.诊断WHO于2008年更新的NHL疾病分类中，在2001年基础上进行了更精细的分类，将T-NHL分为20种独立的疾病，每种独立的类型都有其各自的定义及相应的病理形态、免疫表型和遗传特点。
按照发病部位可分为：播散型、节内型、节外型和皮肤型。
原发性全身型ALCL中有分为ALK+和ALK-两个独立的亚型。
将皮肤脂膜炎样T-NHL仅限于表型为αβ。
原表型为γδ的皮肤脂膜炎样T-NHL由于预后较差，另外归类于原发性皮肤型PTCL。
原发皮肤侵袭性嗜表皮性CD8+细胞毒性T-NHL和原发性皮肤小/中CD4+T-NHL也归类在原发性皮肤型PTCL中。
蕈样霉菌病(MF)和sezary综合征分为不同两型。
增加了EB病毒相关的克隆性淋巴组织增殖性疾病（儿童）。
NCCN2009年制定的NHL分类中，T-NHL按照细胞形态分为间变性和非间变性两种。
非间变性又可分为：节内型、节外型和皮肤型。
淋巴瘤的诊断和治疗
淋巴瘤的诊断和治疗一、诊断淋巴瘤的诊断主要依靠临床表现、实验室检查、影像学检查、组织病理学和分子病理学检查。
组织病理学和分子病理学诊断是决定治疗原则和判断预后的重要依据，是淋巴瘤诊断的金标准。
(一)临床表现淋巴瘤可表现为局部症状和全身症状。
绝大多数HL患者以浅表淋巴结肿大为首发症状。
NHL患者大部分以浅表淋巴结肿大为首发症状，部分患者原发于结外淋巴组织或器官。
淋巴瘤常见的全身症状有发热、盗汗、体重减轻、皮肤瘙痒和乏力等。
以下3种情况中出现任何1种即可诊断为B症状：(1)不明原因发热>38℃，连续3 d以上，排除感染的原因；(2)夜间盗汗(可浸透衣物)；(3)体重于诊断前半年内下降>10%。
(二)体格检查体格检查时应注意浅表淋巴结、扁桃体、肝脾的检查以及有无骨骼压痛。
淋巴瘤患者的肿大淋巴结多数无痛、表面光滑、质韧饱满，早期大小不等、孤立或散在，后期互相融合、与皮肤粘连、固定或破溃。
(三)辅助检查1．实验室检查：患者在治疗前应行血常规、生化常规[包括肝肾功能、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、碱性磷酸酶、β2-微球蛋白、电解质等]、感染筛查[乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(hepatitis virus C, HCV)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和梅毒，异常者需行病毒载量或确诊实验]、血沉、免疫球蛋白、EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)、巨细胞病毒和骨髓检查等，若存在中枢神经系统(central nervous system, CNS)受侵危险因素，需行腰椎穿刺行脑脊液常规、脑脊液生化、脑脊液细胞学和墨汁染色检查。
对于胃淋巴瘤，应行幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori, Hp)检查；对于NK/T细胞淋巴瘤和其他EBV相关淋巴瘤，应行外周血EBV DNA定量检测。
76例头颈部淋巴瘤的临床病理回顾性分析
76例头颈部淋巴瘤的临床病理回顾性分析赵志国;孙寒雪;张力平【摘要】收集76例头颈部淋巴瘤患者的病历资料,对其临床资料进行回顾性研究,总结头颈部淋巴瘤发病情况、构成特点、临床检查及诊断方法 .头颈部淋巴瘤中,非霍奇金淋巴瘤发病多于霍奇金淋巴瘤,非霍奇金淋巴瘤中以弥漫大B细胞淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤多见.淋巴瘤发病率男高于女,起病部位以颈部淋巴结为多.头颈部淋巴瘤临床表现多样,确诊依靠病理学诊断,PET?CT是术前诊断淋巴瘤一项重要的影像学检查.【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2017(046)001【总页数】4页(P75-78)【关键词】淋巴瘤;头颈部;流行病学;回顾性分析【作者】赵志国;孙寒雪;张力平【作者单位】中国医科大学附属盛京医院口腔颌面外科,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院病理科,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院口腔颌面外科,沈阳 110004【正文语种】中文【中图分类】R739.91淋巴瘤是起源于淋巴结或其他器官中淋巴组织的血液系统恶性肿瘤，可发生于全身任何部位。
我国男性和女性淋巴瘤发病率分别为1.39/10万和0.84/10万［1］。
淋巴瘤是一大类疾病的统称，根据其病理特点将其分为霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤两大类，有数十种分型，各种分型的发病率、临床特征、治疗方法、预后有显著差异且该类疾病的首诊确诊率较低。
由于头颈部有丰富的淋巴组织和富含淋巴组织的器官，是淋巴瘤第二大好发部位，占全身淋巴瘤的8%～27%［2⁃3］。
近年来，头颈部淋巴瘤发病率上升较快，占头颈部肿瘤的3%［4］。
本研究收集中国医科大学附属盛京医院口腔颌面外科和耳鼻喉科2010年1月至2015年12月期间经病理确诊的76例头颈部淋巴瘤，分析其临床和病理学特征以及影响临床及病理诊断准确率的相关因素，总结头颈部淋巴瘤患者的临床流行病学相关内容，为临床诊治提供参考。
1.1 病历资料来源收集2010年1月至2015年12月中国医科大学附属盛京医院口腔颌面外科和耳鼻喉科收治的76例淋巴瘤患者的资料。
弥漫性大B细胞淋巴瘤临床病理分析
2008 年 10 月 � A C TA A C A D E M I A E M E D I C I N A E ZU N YI O c .2008
弥漫性大 杨
[摘
B
细胞 淋巴瘤临床病理分析
华，刘小丽， 刘华庆
要 ] 目的 按照 W H O 关于 B 细胞淋巴瘤的新分类， 对我省部分弥漫性大 B 细胞淋巴瘤 （D L B C L） 进行形态学, 收集 28 例弥漫性大 B
A T T A CT G -3/引物 2 5 / -A CC T G C A G A G G A G A C G G T G A C C-3/ ， T CR D 2 5/ -T CA T G G T G T A A C
2. 3 免疫表型特征 28 例 D LB CL CD 20 肿瘤细胞 A T T G T G G G G A C-3/ J 2 5/ -A G C A CC G T G A G C 均阳性 （1 00% ） （图 1 ） ，表现为细胞膜着色 � 所有 CT G G T G CC-3/ � 扩增条件：首次循环 9 4 5 ， � � � � D LB CL 肿瘤 细胞 均不表 达 CD 3 和 C D 1� 4 例 5 7 5 ， 72 5 � ， 进 入循 环 后 按 9 4 45 ， 57 A LCL 肿瘤细胞表达 CD 30 ( 1 4. 3% （图 ) 2 ） � 1例 CB 肿 5 0， 72 6 0 ，反应 35 个循环，最后 72 延伸 1 0分 瘤细胞表达 CD 5( 3. 5 %) �1例 T CR B CL 大量背景细胞 钟， 每批扩增均以无菌超纯水代替模板作阴性对照 � � � � � � � � 表 达 CD 5， 1例 T CR B CL 肿 瘤 细 胞 表 达 L 取 PCR 产物进行 2% 琼脂糖凝胶电泳观察 � （3. 5 %） （图 3 ） � 1 . 3 统计学处理 实验数据严格按照统计学要求收 2. 4 PCR 克隆性基因重排检测 28 例 D LB CL 中， 集, 整理， 建立数据库， 采用样本率的四格表 F � I H 重排阳性 9 例 （32. 1 %） ， 范围 1 00 1 5 0 ， 分别为 精确概率法检验� （F � ’ 2 2 ） ， �< 0. 05 （或 � <0. 01 ） 为对 比组间的差别具 有 显著性 （或非常显著性 ） 意义� � � � T CR - 重排阳性 1 0例 （35 . 7% ） ， 范围 5 0 95 ， 分 中心母细胞型 6 例 （6 7. 6%） ， 免疫母细胞型, 间变型 及富于 T 细胞或组织细胞型各 1例 （各占 1 1 . 1 %） � 别为中心母细胞型 6 例 （6 0% ） ， 免疫母细胞型 , 富于 T 细胞或组织细胞型各 1例 （分别占 1 0% ） ， 间变型 2
基因重排检测技术联合玻璃体液中IL-10和IL-6检测对PIOL的诊断价值
关键词：原发性眼内淋巴瘤；基因重排检测技术；细胞因
子；白介素-10；白介素-6 D01: 10.3980/j.issn.1672-5123.2021.7.05
1162
Analysis of the diagnostic value of gene rearrangement detection combined with vitreous fluid IL - 10 and IL-6 cytokine detection for primary intraocular lymphoma
were 71. 43% and 100. 00%. Patients with PIOL had significantly higher vitreous humor IL-10 and IL-10/IL- 6
levels than those with uveitis, but no statistically
淋巴造血系统疾病(讲义)
结节性
细胞异型性
淋巴瘤诊断常用辅助实验技术
1、免疫组化
淋巴组织非肿瘤性增生
CD20
CD3
B细胞性淋巴瘤
CD20
CD3
T细胞性淋巴瘤
CD20
CD3
2、多聚酶链反应（PCR）技术 基因克隆性重排检测
Ig基因单克隆重排： B细胞淋巴瘤
TCR基因单克隆重排： T细胞淋巴瘤
Negative Positive
非霍奇金淋巴瘤 (Non-Hodgkin Lymphoma，NHL) —— 80-90%
HL
NHL
霍奇金淋巴瘤 （Hodgkin Lymphoma，HL）
临床病理特点
约90%病例原发于淋巴结 形态独特的瘤巨细胞 瘤组织内含大量非肿瘤性炎症细胞
几种瘤细胞特点
R-S细胞：双核、多核或分叶核瘤巨细胞， 包涵体样嗜酸性核仁
前NK细胞
淋巴结
初级滤泡
Naïve B细胞
抗原
次级滤泡
套区
套细胞
生发中心
淋
巴
结
皮
质
B免疫母细胞
滤泡B母细胞 淋
巴
中心母细胞
结
髓 中心细胞 质
边缘区B细胞
浆细胞样淋巴细 胞
浆细胞
胸腺
原T细胞
前T细胞
胸腺T细胞
CD4＋T细胞
抗
CD8＋T细胞
原
活化 CD4＋T细胞
活化 CD8＋T细胞
发生于淋巴结及结外淋巴组织
淋巴结
结外组织
临床表现
早期：局限性、无痛性、进行性淋巴结肿 大，或淋巴结外局部肿块
晚期：肿瘤侵犯骨髓、肝、脾等重要器官
大体形态
慢性淋巴细胞白血病CLL的诊断和标准治疗
38
CD5-MCL
精选pptLiu Z, et Nhomakorabeaal. Am J Clin Pathol,2002,118,23916
Li et al Total
FCM/IHC
210/235 537/601
25(10.6) 64( 10.6)
精选ppt Liu Z, et al. Am J Clin Pathol,2002,118,21640
免疫表型特点：CD5，CD43，cyclin D1阳性，同时表达全 B细胞相关抗原CDl9、CD20、CD22和CD79a等，瘤细胞 表面lgM、IgD和FMC-7阳性，而CD10、CD23、BCL-6常 阴性，CD20和CD79b表达比CLL强，绝大多数CD23阴性， sIg、CD20及cyclin D1强阳性，可以和CLL相鉴别。
精选ppt
12
外周血液检查 (CLL vs MBL)
• CLL:
• 外周血B淋巴细胞计数5109/L，且3个月。B细胞 <5109/L，存在CLL细胞骨髓浸润所致血细胞减少， 也可诊断CLL
• 流式细胞术免疫分型证实为克隆性B细胞
• MBL = monoclonal B-lymphocytosis
21
MBL的免疫表型具有异质性
精选ppt
22
CLL-like MBL 最常见
精选ppt
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Are all MBL equal?
MBL的发病率至少是CLL的10~100倍，大部分的MBL都不会进展成为CLL MBL是B-LPD的前体，但可能自发消失，或保持稳定，或进展为CLL或其他B-CLPD
clinical MBL (cMBL)：伴有淋巴细胞增多的CLL-Like MBL