上海交大医学院细胞生物学技术考试重点样本
一、显微镜技术1、分辨率( resolution) : 用于表示人眼和仪器, 能够辨别两点之间最小距离的标志, 是衡量显微镜性能的重要指标。
人眼的分辨率由人眼的生理结构决定。
光镜由光波波长和物镜数值孔径决定。
电镜由电子束半波长决定。
分辨率极限:人眼(0.1mm);光镜(0.2卩m); 电镜( 0.2nm) 。
显微镜技术优化核心是提高分辨率, 体现在两个方面: ( 1) 光源的采用( 2) 样品制备和信号呈现方法使信噪比提高。
2、显微镜分类:(1)光学显微镜:普通光学显微镜; 荧光显微镜( 激光扫描共聚焦显微镜、超高分辨率荧光显微镜、活细胞荧光工作站) ; 相差显微镜:观察活细胞; 微分干涉相差显微镜( DIC) :活细胞三维立体投影影像(2)电子显微镜:透射电子显微镜( TEM) ; 扫描电子显微镜( SEM) ; 分析电子显微镜; 高压电子显微镜; 冷冻电子显微镜(3 )扫描探针显微镜:原子力显微镜3、普通光学显微镜主要三部分:聚光镜、物镜、目镜; 光源:可见光样品制备5步:固定( 甲醛) ; 脱水( 乙醇) ; 包埋( 石蜡) ; 冰冻切片( 1-10 卩m);苏木精伊红染色(HE染色)4、荧光显微镜光源:高压汞灯、弧光灯荧光的来源: ( 1) 细胞和组织自发荧光( 2) 外源导入荧光蛋白:动态检测、活体检测、长时间检测、容易融合( 3) 荧光染料:吖啶橙染色DNA( 绿) 、RNA( 橙) ( 4) 荧光标记抗体:荧光染料与抗体共价结合( 5) 荧光探针:金属离子探针、细胞内pH值~、细胞内活性氧~、线粒体跨膜电位~。
5、荧光素( Fluorphore) :吸收能量后具有发光现象的物质, 一般为吸收短波长的能量后发散出长波长的光, 并随照射停止而消失。
荧光素发射光减弱( 光漂白) 或消失( 淬灭) 。
6、激光扫描共聚焦显微镜( LSCM):以激光作为激发光源, 采用光源针孔与检测针孔共聚焦技术,对样本进行断层扫描,以获得高分辨率光学切片的荧光显微镜系统。
7、简述激光扫描共聚焦显微镜的原理(光源点,物点,像点,三点共轭)以激光作为激发光源;结构上采用双针孔装置,形成物像共聚焦的独特设计;激光经过聚光镜焦平面上针孔形成点光源,再经物镜在焦平面对样品逐点扫描。
样品上每个照射点经反射镜在像焦平面的探测针孔处成像,被光电倍增管探测器接收,转为数字信号传输至计算机,最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面共聚焦图像。
&激光扫描共聚焦显微镜的功能:(1) 薄层断层扫描(光学切片)(2) 多通道同时扫描:激光共聚焦显微镜能够多激光多通道同时扫描(3) ZOOM成像:在不变换镜头的情况下,对某幅图片的局部放大,并进行精细逐点扫描成像,获得高分辨率图像。
(4) 多维度扫描:Z轴扫描(垂直)或T扫描(时间)(5) 荧光定量分析9、激光扫描共聚焦显微镜技术在医学及生物学研究中的应用(1) 静态:分子定位、定量分析、分子间相互作用(2) 动态:分子或细胞活动的动态变化:蛋白质的移位;蛋白质相互作用的研究(FRET);分子运动的测量(FRAP);离子浓度变化趋势的检测10、简述激光扫描共焦显微镜与荧光显微镜的差别。
LSCM勺优缺点。
LSCM勺优缺点:LSCM优点:(1) 高水平分辨率:0.18卩m( 2)高垂直分辨率:沿Z轴逐层扫描(3) 高灵敏度,信噪比良好(4)能定时、定位、定性、定量缺点:(1)分辨率极限:0.15卩m( 2)观测厚度:50-100卩m( 3)逐点扫描,成像速度慢(4)伪彩色11、LSCM和电子显微镜的区别12、超高分辨率荧光显微镜的原理:”突破”衍射极限,提高分辨率(50nm)(1) 基于点扩展函数调制:点扩展函数变小(2) 基于随机单分子定位:不会有两个靠的很近的点同时亮起来13、电子显微镜:以电子束为光源,电磁场为透镜,利用电子信号成像,具有高分辨率和放大倍数的显微镜,用于研究组织和细胞的超微结构。
14、电子束:又称电子射线,电子束带负电荷,具有光的波动性、可折射性,电镜利用电子束作为”光源”成像。
15、透射电子:当样品厚度小于100nm时,部分电子可穿透样品,将穿透样品的电子叫做透射电子,利用透射电子信息成像的称为透射电镜。
16、二次电子:在入射电子的轰击下,样品表面5-50 nm深度激发出来的电子称为二次电子,利用二次电子信息成像的称为扫描电镜。
17、TEM成像和工作原理:(1) 电子束投射在样品上,部分电子直接穿透样品产生透射电子(2) 带有样品信息的透射电子经成像系统放大,投射到荧光屏上(3) 透射电子多,荧光屏亮;反之荧光屏暗,荧光屏的亮暗程度与样品微细结构一一对应,产生具有一定反差的黑白影像18、超薄切片:将环氧树脂包埋的组织块切成100nm以下的薄切片称为超薄切片, 超薄切片经电子染色后在TEM 下观察组织细胞内部的超微结构。
19、血管灌注固定: 血管灌注固定是经过血管灌注适量的固定剂, 在动物体内把活细胞在原位及时固定。
血管灌注固定速度快, 固定均匀, 可减少离体或死亡后缺氧引起自发性的变化影响, 特别是对脑、心肌、肾脏等对缺氧比较敏感的组织尤为重要。
20、TEM 的样品制备( 1)超薄切片技术( 9 步) : 取材( 1 分钟内将新鲜标本放入固定液) ; 预固定(新鲜配制 2.5%戊二醛) ; 后固定( 1%锇酸) ; 脱水(乙醇和丙酮) ; 浸透; 包埋聚合(环氧树脂) ; 修块; 切片(半薄切片: 500nm; 超薄切片: 50-100nm) ; 染色(甲苯胺蓝)。
( 2)负染色技术: 经过重金属盐在样品四周堆积, 加强样品外周的电子密度, 衬托样品的形态和大小。
(染色液: 磷钨酸、醋酸双氧铀)( 3)免疫电镜技术: 是将免疫学方法与电子显微镜技术相结合, 利用抗原与抗体特异结合的特性, 在超微结构水平定位特异大分子的技术。
A、包埋前法:先免疫标记,后包埋,制备超薄切片;包埋后法:先包埋,制备超薄切片, 后免疫标记; 冷冻超薄切片法: 将标本直接切成超薄切片, 进行免疫反应, 电镜观察。
B、推荐固定液:3〜4 %多聚甲醛 + 0. 1 %〜0.5 %戊二醛;C、要求:免疫组化结果一定要好;固定液配制要新鲜;尽快处理标本。
21 、在样本制备过程中为什么要进行半薄切片定位?( 1)选取超薄切片的部位, 超薄切片的面积一般要小于0.5mm2, 要经过半薄切片来选取有意义的部位。
( 2)对同一部位进行光、电镜对比观察, 在较大范围内了解组织结构、病变部位和病理性质, 有利于更确切的认识超薄切片中的结构及其相互关系。
22、要了解细胞内部的超微结构变化, 选择哪种类型的电镜, 为保证生物样品良好的超微结构, 在样本取材及固定时应注意什么?了解细胞内部的超微结构变化应选择透射电子显微镜( TEM)为保证良好的超微结构, 在样本取材及固定时应注意做到快、小、轻、冷。
( 1) 快: 在1 分钟内固定组织, 尽可能保持其活体状态, 因为瞬间的拖延都会导致细胞超微结构的变化。
(2) 小:组织块必须切成1mm的小块,组织块过大其中央得不到及时固定会发生细胞自溶现象。
( 3) 轻:不要牵拉、锯、挤压组织。
要用锐利的刀片, 避免细胞受到损伤。
(4) 冷:低温操作,4 C保存,降低酶的活性,避免组织发生自溶。
23、在透射电镜样本取材时, 样本不可大于1mm3, 并在1 分钟以内完成固定。
请问如果组织块过大会出现什么后果? 没有及时固定的组织电镜下会出现何种改变?由于电镜固定液戊二醛对组织的穿透能力较弱, 如果组织块过大会造成组织中心得不到及时固定, 在电镜下没有得到及时固定组织细胞的细胞器会发生变性, 特别是对缺血乏氧十分敏感的线粒体会出现肿胀和空泡变性等改变。
24、如何描述一张电镜图片。
( 1) 细胞整体:大小、形状、细胞膜和突起以及细胞间的连接( 2) 细胞核:大小、形状、核仁、染色质等(3) 细胞质:各种细胞器的数量、分布、形状等(Mit、RER、Ri、Ly、Gol…)25、TEM 在医学领域的应用( 1) 细胞器、组织器官的超微结构( 2) 原核细胞、病毒的超微结构( 3) 超微病理变化( 病理诊断)( 4) 细胞成分定位( 5) 生物材料复合体26、扫描电镜的样品制备过程( 6 步) :取材( 充分暴露并保护观察面: 5x5mm); 清洗( 用生理盐水仔细漂洗观察面) ; 固定( 2.5%戊二醛和1%锇酸固定) ; 脱水( 丙酮逐级脱水, 醋酸异戊酯置换) ; 干燥: ( 临界点干燥) ; 镀膜( 离子溅射镀膜或真空镀膜)27、扫描电子显微镜在生物医学领域的应用:(1) 血细胞、细菌、培养细胞的整体形态、表面突起和细胞间相互关系(2) 消化道,呼吸道,血管等空腔组织的表面结构(3) 植物、昆虫等(4) 生物材料复合体28、扫描电镜用于观察组织表面结构,因此取材时必须要充分暴露组织表面结构,请问常见的方法和注意事项有哪些?在样品取材时必须保护好并充分暴露观察面,避免损伤要观察的部位,易卷曲的样品,如气管、胃、肠粘膜可固定在滤纸上展平,要将表面的血液、粘液用生理盐水或缓冲液仔细漂洗干净,对于粘稠附着物还能够使用酶消化法。
29、请从成像信号、样品制备、图象特点和应用几方面对TEM和SEM做以比较。
二、细胞化学技术1、原位观察化学成分,提供的信息:(1) 推测化学成分(大分子)的可能性(2) 观察生理、病理状态下大分子动态变化(3) 指示大分子所在的特异细胞,观察细胞在组织的分布2、细胞化学技术:在保持细胞结构完整的条件下,借助细胞中的化学反应在细胞原位确定化学成分的分布及这些成分在细胞活动中的动态变化的技术,用以阐明细胞化学成分、结构和功能的关系。
包括酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术、放射自显影技术和原位杂交等。
3、细胞化学技术特点:(1) 原位(保持组织细胞的天然结构)(2) 细胞化学反应及可见性(3) 细胞化学反应的观察:显微镜、流式4、细胞化学技术主要包括:(1) 酶细胞化学技术:1.酶+底物反应;2.显色反应。
显示酶在细胞内的分布及酶活性强弱。
(2) 免疫细胞化学技术:1.抗原+抗体反应;2.显色反应(3) 放射自显影:1.放射性同位素衰变和射线的释放反应;2.感光(4) 原位杂交技术等:1.核酸杂交反应;2.显色反应5、细胞化学技术通用流程:(1) 组织细胞固定(保持原位)(2) 石蜡包埋或冷冻(3) 切片(利于反应,利于观察)(4) 化学反应(5) 显色反应6 免疫组织化学、免疫细胞化学技术(IHC):把组织细胞中的特异分子作为抗原,利用抗原抗体特异性结合的特点,用显微镜下可见的标记物直接或间接标记抗体或抗原抗体复合物,使之在显微镜下可见,从而间接地显示抗原,达到在细胞或细胞器水平定位特异分子的目的。
医学细胞生物学解答题重点
1 细胞膜主要由哪些物质构成?它们在膜结构中各起什么作用?答:细胞膜的化学组成:脂类(磷脂、胆固醇、糖脂)、蛋白质、糖类磷脂--细胞膜的基本成分。
胆固醇的功能:调节细胞膜的流动性、稳固性。
糖脂的作用:位于质膜的非胞质面作为某些分子的受体,与细胞识别、信号传导有关。
膜蛋白功能:①转运分子进出细胞②接受周围环境中激素或其他化学物质信号,递到细胞内③支撑连接细胞骨架成分与细胞间质成分④与细胞分化和细胞间连接有关⑤结合于膜上的各种酶能催化细胞各种化学反应。
2 细胞膜中摸蛋白有何重要功能?膜蛋白以什么方式与脂双层结合?膜蛋白功能:①转运分子进出细胞②接受周围环境中激素或其他化学物质信号,递到细胞内③支撑连接细胞骨架成分与细胞间质成分④与细胞分化和细胞间连接有关⑤结合于膜上的各种酶能催化细胞各种化学反应。
膜蛋白分成三类:膜内在蛋白、膜外在蛋白、脂锚定蛋白结合方式:膜内在蛋白全部或部分插入细胞膜内,直接与脂双分子层的疏水区域相互作用。
膜外在蛋白:不直接与脂双层疏水部分相互连接,一般以非共价键附着在脂类分子头部极性区或跨膜蛋白亲水区的一侧,间接与膜结合。
脂锚定蛋白:一般通过共价键与脂双层内的脂类分子结合。
3、细胞膜有何特性?该特性对膜的功能有何作用?细胞膜的特性:不对称性(膜脂的不对称性、膜蛋白的不对称性、膜糖的不对称性)、流动性细胞膜的不对称性保证了膜功能的方向性和生命活动的高度有序性。
细胞膜的流动性是功能活动的保证。
4、举例说明细胞膜的不对称性与其功能(吸收、信号传导)得方向性相适应。
5、哪些因素影响膜的流动性?①脂肪酸链的饱和程度②脂肪酸链的长短③胆固醇的双重调节作用,当温度在相变温度以上时,限定膜的流动性,当温度在相变温度以下时,防止脂肪酸链相互凝集④卵磷脂与鞘磷脂的比值,比值越大,流动性越大⑤膜蛋白的影响,嵌入得蛋白越多,膜流动性越小⑥膜脂的极性基团、环境温度、PH、离子强度及金属离子等6 、以Na+-K+泵为例,说明细胞的主动运输。
上海市考研生物学复习资料细胞生物学核心概念总结
上海市考研生物学复习资料细胞生物学核心概念总结生物学作为一门学科,研究的是生命的起源、演化和机制等方面的知识。
在考研生物学的复习中,细胞生物学是一个非常重要的部分,因为细胞是生命的基本单位。
通过对细胞的结构、功能和基本概念的总结与理解,有助于我们更好地掌握细胞的本质和生命系统的运作。
下面是对细胞生物学核心概念的总结,希望对广大考研生物学考生有所帮助。
一、细胞结构与组成1. 细胞膜:由磷脂双层组成,起到控制物质的进出和细胞内外环境的分隔作用。
2. 细胞核:包含遗传物质DNA,控制细胞的生长和分裂。
3. 细胞质:包括细胞器(内质网、高尔基体、线粒体等)和细胞器外基质,提供细胞所需的能量和物质。
4. 线粒体:负责细胞的能量转换,产生ATP。
5. 内质网:参与蛋白质的合成和修饰。
6. 高尔基体:参与蛋白质的加工和分泌。
二、细胞的功能1. 能量转换:通过线粒体的呼吸作用,将有机物转化为能量(ATP),为细胞提供能量。
2. 分裂与增殖:细胞通过有丝分裂或无丝分裂的方式进行生长和繁殖。
3. 蛋白质合成:通过核糖体、内质网和高尔基体等细胞器参与蛋白质的合成和修饰。
4. 分泌与外排:细胞通过高尔基体和细胞膜等途径将合成好的物质分泌到细胞外。
5. 呼吸作用:将有机物氧化成二氧化碳和水,产生能量。
三、细胞生物学的核心概念1. 细胞周期:指细胞从一个分裂开始,再次分裂的过程。
包括有丝分裂的G1期、S期、G2期和M期,以及无丝分裂的G1期、S期和G2期。
2. 细胞凋亡:又称程序性死亡,是一种规范的细胞死亡过程,发生在细胞遭受到损伤或无法修复时。
3. 同源染色体:指来自于父本和母本的两条染色体,在有丝分裂中经过同源染色体的配对,实现交换基因片段来增加遗传多样性。
4. 细胞信号传导:细胞表面的受体接受外界信号,通过各种分子信号传递到细胞核或细胞质中,引发细胞内的生理反应。
5. 细胞分化:在发育过程中,经过基因调控使细胞的形态、结构和功能发生差异化,从而形成特定功能的细胞类型。
临床医学细胞生物学考试资料总结
细胞生物学名词解释:1、细胞生物学(cell biology):从分子、亚细胞、细胞和细胞社会的不同水平,用动态和系统的观点来探索和阐述生命这一基本单位的特征的科学。
2、细胞(cell):生物的形态结构和生命活动的基本单位。
3、生物膜(biological membran):在细胞中,除了质膜外,细胞内还有丰富的膜性结构。
由于这些膜与质膜在化学组成、分子结构和功能运作上具有很多共性,把质膜和细胞内各种膜相结构的膜统称为生物膜。
4、简单扩散(simple diffusion):小分子物质穿膜运输的最简单的方式。
不需要消耗细胞代谢能,不依靠专一膜蛋白分子,使物质顺浓度梯度从膜一侧转运到另一侧。
5、被动运输(passive transpor):物质顺着电化学梯度自发穿越细胞膜,不需消耗能量的转运。
6、主动运输(active transport):物质借助于膜转运蛋白,逆着电化学梯度穿越细胞膜,需消耗能量的转运。
7、胞吞作用(endocytosis):细胞表面发生内陷,由细胞膜将胞外大分子或颗粒物质包围成小泡,脱离细胞膜进入细胞内的运输过程。
8、吞噬作用(phagocytosis):指细胞内吞较大固体颗粒或分子复合物的过程,如细菌、细胞碎片、无机尘粒等。
9、胞饮作用(pinocytosis):指细胞内吞大分子溶液物质或极微小颗粒的活动。
10、受体介导的胞吞作用(receptor-mediated endocytosis):特异性很强的胞吞作用,大分子与质膜上的受体特异性结合,然后内陷成有被小窝,继之形成有被小泡,完成物质传送。
11、胞吐作用(exocytosis):细胞内某些物质由膜包围成小泡从细胞内部逐步移到质膜下方,与质膜融合,把物质排到细胞外的运输过程。
12、质膜循环:在细胞的内吞与外吐过程中伴随着膜的运动,质膜与细胞内膜之间不断地进行着移位、融合或重组,并处于一种动态平衡中,这一现象称质膜循环。
(完整版)细胞生物学知识点总结
细胞生物学目录第一章绪论第二章细胞生物的研究方法和技术第三章质膜的跨膜运输第四章细胞与环境的相互作用第五章细胞通讯第六章核糖体和核酶第七章线粒体和过氧化物酶体第八章叶绿体和光合作用第九章内质网,蛋白质分选,膜运输第十章细胞骨架,细胞运动第十一章细胞核和染色体第十二章细胞周期和细胞分裂第十三章胚胎发育和细胞分化第十四章细胞衰老和死亡第一章绪论1.原生质体:被质膜包裹在细胞内的所有的生活物质,包括细胞核和细胞质细胞质:细胞内除核以外的原生质,即细胞中细胞核以外和细胞膜以内的原生质部分原生质体:除去细胞壁的细胞2.结构域:生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域3.装配模型:模板组装,酶效应组装,自组装4.五级装配:第一级,小分子有机物的形成第二级,小分子有机物组装成生物大分子第三级,由生物大分子进一步组装成细胞的高级结构第四级,由生物大分子组装成具有空间结构和生物功能的细胞器第五级,由各种细胞器组装成完整细胞6.支原体:目前已知的最小的细胞第二章细胞生物的研究方法和技术1.显微镜技术:光镜标本制备技术、2.光镜标本制备技术步骤:样品固定、包埋与切片、染色3.电子显微镜种类:透射电子显微镜,扫描电镜,金属投影,冷冻断裂和冷冻石刻电镜,复染技术,扫描隧道显微镜4.细胞化学技术:酶细胞化学技术,免疫细胞化学技术,放射自显影5.细胞分选技术:流式细胞术6.分离技术:离心技术,层析技术,电泳技术第三章质膜的跨膜运输1.细胞功能:外界与通透性障碍,组织和功能定位,运输作用,细胞间通讯,信号检测2.膜化学组成:膜脂,膜糖,膜蛋白3.膜脂的三个种类:磷脂,糖脂,胆固醇4.脂质体用途:用作生物膜的研究模型,作为生物大分子与药物的运载体5.膜糖功能:细胞与环境的相互作用,接触抑制,信号转导,蛋白质分选,保护作用。
6.膜蛋白类型:整合蛋白,外周蛋白,脂锚定蛋白7.膜蛋白功能:运输蛋白,酶,连接蛋白,受体(信号接受和传递)8.不对称性的研究方法:冰冻断裂复型,冰冻蚀刻9.膜流动性研究方法:质膜融合,淋巴细胞的成斑成帽效应,荧光漂白恢复技术10.膜流动性的重要性:酶活性,信号转导,物质运输,能量转换,细胞周期11.影响膜脂流动性的因素:脂肪酸链,胆固醇,卵磷脂/鞘磷脂比值12.影响膜蛋白流动的因素:整合蛋白,膜骨架,细胞外基因,相邻细胞,细胞外配体、抗体、药物大分子13.膜骨架的主要蛋白:血影蛋白,肌动蛋白和原肌球蛋白,带4.1蛋白,锚定蛋白14.转运蛋白质包括:载体蛋白,通道蛋白15.协同运输的方向:同向协同,反向协同第四章细胞与环境的相互作用1.细胞表面结构:细胞外被、膜骨架、胞质溶胶2.细胞外被功能:连接,细胞保护,屏障3.糖萼:由细胞表面的碳水化合物形成的质膜保护层,又称为多糖包被。
医用细胞生物学知识点(完整版)
行生命活动的必须条件。膜是一个动态的结构,其流动性主要是指膜
脂的流动性和膜蛋白的运动性。
32. 膜脂分子的运动方式:侧向扩散、翻转运动、旋转运动、弯曲
运动、伸缩和震荡运动。
33. 影响膜脂流动性的因素:脂肪酸链的饱和程度、脂肪酸链的长
短、胆固醇的双重调节作用、卵磷脂与鞘磷脂的比值、膜蛋白的影
响。
34. 流动镶嵌模型 (fluid mosaic model)掌握流动镶嵌模型的绘图
医用细胞生物学知识点
By 小羊,小生(修整) 友情提示:知识点很多,重点加粗,书中的表格均有,有些重点需掌握 绘图(请查阅书本)。主要考点:名词解释,细胞的结构与功能。建议 系统总结一下内质网,高尔基复合体,溶酶体的标志酶和各自的功 能。
1. 细胞生物学(cell biology):细胞生物学是从细胞的显微,亚 显微和分子三个水平对细胞的各种生命活动开展研究的学科。 2. 对细胞概念理解的五个角度: ①细胞是构成有机体的基本单位; ②细胞是代谢与功能的基本单位; ③细胞是有机体生长与发育的基础; ④细胞是遗传的基本单位; ⑤没有细胞就没有完整的生命。 ⑥细胞具有全能性。 3. 生物界划分的三个类型:原核细胞、古核细胞和真核细胞。 4. 原核细胞与真核细胞的比较:p13表2-1
②膜整合蛋白质,如膜抗原、膜受体等; ③构成细胞器中的驻留蛋白,像定位于糙面内质网、光面内质
网、高尔基复合体、溶酶体等各种细胞器中的可溶性驻留蛋 白。 63. 信号肽:信号肽是指导蛋白多肽链在糙面内质网上合成与穿膜 转移的决定因素。 64. “伴侣”蛋白(chaperone protein)或“分子伴侣”(molecular chaperone):能够帮助多肽链转运、折叠和组装的结合蛋白。 65. 糖基化(glycosylation):是指单糖或者寡糖与蛋白质之间通 过共价键的结合形成糖蛋白的过程。 66. 信号斑与信号肽的区别: ①构成信号斑的氨基酸残基(或序列片段)往往相间排列存在于蛋 白质多肽链中,彼此相距较远; ②在完成蛋白质分拣、转运引导作用后通常不会被切除而得以保 留; ③信号斑可识别某些以特异性糖残基为标志的酶蛋白,并指导它们 的定向转运。 67. 光面内质网的功能: ①参与脂质的合成和转运; ②参与糖原的代谢; ③细胞解毒的主要场所; ④是肌细胞Ca+的储存场所; ⑤与胃酸、胆汁的合成与分泌密切相关。 68. 组成高尔基复合体的三种不同类型的膜性囊泡:扁平囊泡(潴 泡)、小囊泡(小泡)和大囊泡(液泡)。 69. 高尔基复合体的标志酶----糖基转移酶 高尔基复合体含有的重要酶类: ①包括NADH-细胞色素C还原酶和NADPH-细胞色素还原酶的氧化 还原酶; ②以5’-核苷酸酶、腺苷三磷酸酶、硫胺素焦磷酸酶为主体的磷酸酶
上海市考研生物学复习资料细胞生物学重要概念梳理
上海市考研生物学复习资料细胞生物学重要概念梳理细胞生物学是生物学的重要分支之一,研究生物体的最基本单位——细胞的结构、功能和生命活动。
对于准备参加上海市考研生物学专业的考生来说,熟悉和掌握细胞生物学的重要概念是必不可少的。
通过对细胞生物学的复习,考生们可以全面地了解和掌握细胞的各种结构、功能以及细胞生命活动的基本原理,为考试打下坚实的基础。
本文将对细胞生物学的几个重要概念进行梳理,帮助考生们更好地备考。
一、细胞的基本结构细胞是生物体的最基本单位,具有一定的结构特征。
细胞主要由细胞膜、细胞质和细胞核三部分组成。
细胞膜是细胞的外包层,能够保护细胞、控制物质的进出;细胞质是细胞内各种物质的总称,包括细胞器、细胞器官、细胞骨架等;细胞核是细胞的控制中心,其中包含了遗传信息的DNA。
二、细胞的功能细胞具有各种功能,包括营养摄取、物质转运、能量转换、细胞分裂等。
其中,营养摄取是维持细胞生命活动的基础,主要通过细胞膜实现。
物质转运是细胞内各种物质在不同部位之间的传递和交换过程。
能量转换是指细胞将化学能转化为生物能的过程,主要通过细胞线粒体参与。
细胞分裂是细胞自身繁殖的过程,包括有丝分裂和减数分裂两种形式。
三、细胞的生命活动细胞的生命活动主要包括代谢、生长、分化和凋亡等过程。
代谢是细胞在生物体内进行的一系列化学反应,包括物质合成和分解两个方面。
生长是细胞增加体积和数量的过程,主要通过细胞内的蛋白质合成实现。
分化是指细胞在形态结构和功能上的差异化,形成不同的细胞类型。
凋亡是指细胞死亡的过程,是维持细胞数量平衡的重要方式。
四、细胞生物学的研究方法细胞生物学的研究离不开一系列的实验技术和方法。
光学显微镜是最常用的观察和研究细胞的工具,它通过透射和反射光线来观察细胞的形态和结构。
电子显微镜则可以获得更高的分辨率,用于观察细胞的超微结构。
分子生物学技术包括PCR、蛋白质电泳等,用于研究细胞的基因表达和功能。
细胞培养技术是将细胞从生物体中分离出来进行体外培养,可以研究细胞的生命活动和功能。
上海交大细胞工程期末试题200951262307673
上海交大细胞工程期末试题2009512623076732006-2007学年第2学期《细胞工程》试卷A标准答案:一填空题(30分、每空0.5分):1细胞工程根据研究对象不同可以分为---------微生物细胞工程------------------、----植物细胞工程-------------------------、----动物细胞工程--------------;从研究水平来划分可以分为-------细胞-----------、------组织--------------、--------细胞器-------------和-------基因---------------几个研究层次。
细胞工程的应用主要可以归纳为以下三个方面:-----生物制品生产----、新品种培育----、---大规模繁殖---。
2植物组织培养的理论基础是---------细胞全能性----------------。
培养基中控制细胞分化的两种重要物质是-----------生长素------------与----------分裂素----------------。
植物再生有以下两条途径——器官再生途径---、胚状体发生途径--。
3人工种子制备的关键环节是——体细胞胚诱导——————。
水凝胶法是最常用的人工种子包埋方法,常用—褐藻酸钠——等水溶性凝胶经与Ca2+进行离子交换后凝固实现包埋。
4动植物组织获得分散的单细胞最有效的方法是——酶解方法————。
对于植物细胞常用的酶有--琼胶酶(果胶酶、纤维素酶)等,————愈伤组织诱导法---也是一个重要的制备但细胞的方法。
对于动物细胞常用的酶是—胰蛋白酶--。
植物细胞培养最早设计的两个化学培养基是——MS——、———B5———。
5动物细胞体外培养根据生长形态主要分为------帖附型--------------和-------非贴附型-----------两种形式,其中前者又可分为------成纤维细胞型------------------、-------上皮型细胞----------------、---------游走型细胞-----------------和--------多形型细胞------------------------四种类型细胞。
上海市考研生物学复习资料细胞生物学与遗传学核心知识点总结
上海市考研生物学复习资料细胞生物学与遗传学核心知识点总结上海市考研生物学复习资料:细胞生物学与遗传学核心知识点总结生物学是研究生命现象的科学,而细胞生物学与遗传学是生物学的两个重要分支。
在上海市考研生物学的复习过程中,细胞生物学与遗传学的核心知识点是不可或缺的。
本文将对这两个学科的核心知识点进行总结。
一、细胞生物学核心知识点1. 细胞的结构与功能细胞是生命的基本单位,它具有许多特定的结构和功能。
细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体等是细胞的主要组成部分,它们协同工作来维持细胞的生理活动。
2. 细胞生理学细胞生理学研究细胞的生命活动和代谢过程。
其中包括细胞的兴奋传导、物质运输、细胞凋亡、代谢调节等。
3. 细胞生命周期与细胞分裂细胞生命周期包括有丝分裂和无丝分裂两个阶段。
有丝分裂是细胞生命周期的核心环节,包括前期、中期、后期和末期。
无丝分裂是单细胞生物和某些生殖细胞的分裂方式。
4. 细胞遗传学细胞遗传学研究遗传物质的传递和表达。
其中包括DNA的结构与功能、DNA复制、转录、翻译等重要过程。
5. 细胞信号传导细胞之间的相互作用通过信号传导来实现。
细胞外信号分子通过细胞膜上的受体与细胞内信号转导通路相互作用,从而引发细胞内的生物反应。
二、遗传学核心知识点1. 遗传规律与遗传模式遗传学研究遗传规律和遗传模式。
其中最重要的遗传规律有孟德尔遗传规律(包括分离定律和自由组合定律)、染色体理论和基因互作。
2. 染色体与性别遗传人类染色体组为46条,其中一对性染色体决定了个体的性别。
遗传学研究性别的遗传方式和与性别相关的遗传疾病。
3. DNA的结构与功能DNA是遗传物质的载体,它具有双螺旋结构,并包含着基因信息。
DNA的结构与功能研究了DNA分子的信息储存和遗传信息的表达。
4. 基因组学与基因调控基因组学研究基因组的结构和功能,包括基因组的DNA序列和基因的组成。
而基因调控研究基因的表达和调控机制,包括转录因子、启动子和增强子等。
医学细胞生物学重点
名词解释题Cell theory细胞学说 1. 是;一切动植物都是由单发育而来;并由和产物所构成; 细胞是生物体结构和功能的基本单位..2新细胞是由已存在的而来;3生物的疾病是因为其失常p2Plasmid质粒质粒Plasmid是一类存在于细菌和真菌细胞中独立于DNA而自主复制的闭合、环状DNA分子其中质粒基因横向传递P11 Nucleoid拟核原始细胞结构简单;仅由细胞膜包绕;在细胞质内含有DNA区域;但无被膜包围..P11Small nuclear RNA; snRNA小核RNA在真核细胞的细胞核中存在一类特殊的RNA;它们的分子相对较小;约含有70—300个核苷酸..拷贝数最多..P21Molecular chaperon分子伴侣细胞核内能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素可延伸为“一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质;它们在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装;而且在组装完毕后与之分离;不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份Liposome脂质体为了避免双分子层两端疏水尾部与水接触;其游离端往往能自动闭合;形成充满液体的球状小泡P72Fluid mosaic model流动镶嵌模型膜中脂双层构成膜的连贯主体;具有晶体分子排列的有序性;又具有液体的流动性..膜中蛋白分子以各种镶嵌形式与脂双分子层相结合; 有的附在内; 有的全部或部分嵌入膜中; 有的贯穿膜的全层;..P81ion channel离子通道能够高效率转运构成生物膜核心部分的脂双层对带电物质的膜上的通道蛋白P90endocytosis胞吞作用又称内吞作用;它是质膜内陷;包围细胞外物质形成胞吞泡;脱离质膜进入细胞内的转运过程P93Active transport 主动运输是载体蛋白介导的物质逆电化学梯度;由低浓度一侧向高浓度一侧进行的穿膜转运方式P85.Endomembrane system内膜系统是指细胞质内那些在结构、功能及其发生上相互密切联系的膜性结构细胞器的总称;包括核膜、内质网、高尔基复合体、溶酶体以及各种转运小泡等功能结构..Signal recognition particle信号识别颗粒SRP在真核生物细胞质中一种小分子RNA和六种蛋白的信号识别颗粒复合体;此复合体能识别核糖体上新生肽末端的信号;顺序并与之结合;使肽合成停止;同时它又可和ER膜上的停泊蛋白识别和结合;从而将mRNA上的核糖体;带到膜上..SRP上有三个结合位点:信号肽识别结合位点;SRP受体蛋白结合位点;翻译暂停结构域Substrate-level phosphorylation底物水平磷酸化:.在底物被氧化的过程中;底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键或高能硫酯键;由此高能键提供能量使ADP或GDP磷化生成ATP或GTP的过程称为底物水平磷酸化..此过程与呼吸链的作用无关;以底物水平磷酸化方式只产生少量ATP..Electron transport respiratory chain;电子传递呼吸链呼吸链或电子传递链这一传递电子的酶体系是由一系列能够可逆的接受和释放H+和e-的化学物质所组成;它们在内膜上有序的排列成相互关联的链状;称为……ATPsynthaseATP合成酶 ATP合酶广泛存在于线粒体、叶绿体、原核藻、异养菌和光合细菌中;是生物体能量代谢的关键酶..该酶分别位于类囊体膜、质膜或线粒体内膜上;参与氧化磷酸化与光合磷酸化反应;在跨膜质子动力势的推动下催化合成生物体的能量“通货”——ATP.. Cytoskeleton细胞骨架是指真核细胞质中的蛋白质纤维网架体系;它对于细胞的形状、细胞的运动、细胞内物质的运输、细胞分裂时染色体的分离和胞质分裂等均起着重要的作用..Microtubule微管是真核细胞中普遍存在的细胞骨架成分之一 ;它是由微管蛋白和微管结合蛋白组成的中空圆柱状结构;在不同类型细胞中有相似结构..主要存在于细胞质中;控制着膜性细胞器的定位及胞内物质运输..motor protein马达蛋白是指介导细胞内物质沿细胞骨架运输的蛋白;微管参与细胞内物质运输的任务主要由它来完成Microfilament; MF微丝微丝又称肌动蛋白丝;是由肌动蛋白组成的细丝;普遍存在于真核细胞中;参与细胞形态维持以及细胞运动等生理功能..P163Intermediate filaments中间纤维介于肌肉细胞actin细丝与肌球蛋白粗丝之间;广泛存在与真核细胞中;在三类细胞骨架纤维中最为坚韧和持久..P169Nuclear pore complex; NPC核孔复合体核孔并非单纯由内外两层核膜融合形成的简单空洞;而是由多种蛋白质以特定方式排列形成的复合结构;称核孔复合体P182Nuclear lamina核纤层是位于内核膜内侧与染色质之间的一层由高电子密度纤维蛋白质组成的网络片层..在细胞分裂中对核膜的破裂和重建起调节作用P183kinetochore动粒是由多种蛋白质组成的存在于着丝粒两侧的圆盘状结构..在细胞分裂后期动粒起核心作用;控制着微管的装配和染色体的移动..P194Euchromatin常染色质间期核中处于伸展状态;螺旋化程度低;用碱性染料染色浅而均匀的染色质;具有转录活性..P191Ribosome核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒;主要由RNA和蛋白质构成;是合成蛋白质的机器..P221Signal transduction 信号转导由细胞分泌的、能够调节机体功能的生物活性物质通过与细胞膜上或胞内的受体特异性结合;将信号转换后传给相应的胞内系统;使细胞对外界做出适当的反应..P277Receptor受体是一类存在于胞膜或胞内的特殊蛋白质;能特异性识别应结合胞外信号分子;进而激活胞内一系列生物化学反应;使细胞对外界刺激产生相应的效应..P278G protein -coupled receptorG蛋白藕联受体是膜受体最大的家族;成员均为一条多肽构成的糖蛋白;分为胞外、胞膜、胞内三个区..受体介导的信号传导过程较慢;但灵活、敏捷;而且类型多样..P279Second messenger第二信使指受体被激活后在细胞内产生的、能介导信号转导的活性物质..重要的有cAMP、cGMP、二酯酰甘油DAG、三磷酸肌醇IP3、和钙离子等P282Protein Kinase 蛋白激酶为一类磷酸转移酶;作用是将ATP的磷酸基转移到底物特定氨基酸残基上.. P287Mitotic apparatus有丝分裂器在中期细胞中;由染色体、星体、中心粒及纺锤体所组成的结构..在染色体分离、染色体向两极的移动及平均分配到子代细胞等活动中发挥了关键作用..P302简答题1.以E.coli为例;简单说明原核细胞的基本结构..结构简单;仅由细胞膜包绕;含有核糖体;没有其他膜性细胞器;存在拟核..另一特点是细胞膜之外有一坚韧的细胞壁;主要成分是蛋白多糖和糖脂..2.简述原核细胞与真核细胞基本结构的区别第十三页图表2-13.生物膜的基本结构特性是什么生物膜的特征有流动性选择透过性不对称性4.说明Na+-K+泵的工作原理及其生物学意义工作原理:Na+-K+泵——实际上就是Na+-K+ATP酶;存在于动植物细胞质膜上;它有大小两个亚基;大亚基催化ATP水解;小亚基是一个糖蛋白.Na+-K+ATP酶通过磷酸化和去磷酸化过程发生构象的变化;导致与Na+;K+的亲和力发生变化.大亚基以亲Na+态结合Na+后;触发水解ATP.每水解一个ATP释放的能量输送3个Na+到胞外;同时摄取2个K+入胞;造成跨膜梯度和电位差;这对神经冲动传导尤其重要;Na+-K+泵造成的膜电位差约占整个神经膜电压的80%.若将纯化的Na+-K+泵装配在红细胞膜囊泡血影上;人为地增大膜两边的Na+;K+梯度到一定程度;当梯度所持有的能量大于ATP水解的化学能时;Na+;K+会反向顺浓差流过Na+-K+泵;同时合成ATP.生物学意义:调节渗透压维持恒定的细胞体积、保持膜电位、为某些物质的吸收提供驱动力和蛋白质的合成及代谢活动提供必要的离子浓度等5.以LDL为例;简述受体介导的细胞内吞的作用过程..1配体与膜受体结合形成一个小窝pit; 2小窝逐渐向内凹陷;然后同质膜脱离形成一个被膜小泡;3被膜小泡的外被很快解聚; 形成无被小泡;即初级内体; 4初级内体与溶酶体融合;吞噬的物质被溶酶体的酶水解6.指导分泌性蛋白在粗面内质网上合成需要哪些主要结构或因子它们如何协同作用完成肽链在内质网生的合成或简述信号肽假说需要的结构和因子有:N端信号序列、信号识别颗粒、停泊蛋白、易位分子、信号肽酶等..过程:信号肽和SRP结合SRP特异性结合DP使肽链锚定EP外膜而SRP 亦有打开转运通道蛋白能力随SRP脱出再次利用肽链穿入完成信号肽切除..7.蛋白质糖基化的基本类型、特征及生物学意义是什么类型:N-连接O-连接特征:在蛋白质合成的同时或合成后;酶催化下寡糖链被连接肽链特定糖基化位点形成糖蛋白意义1使蛋白质能够抵抗消化酶作用2赋予蛋白质传导信号作用3某些蛋白只有糖基化才能正确折叠8.简述溶酶体膜的特性..1溶酶体膜为一层磷脂双分子膜2溶酶体膜中富含有两种高度糖基化的穿膜整合蛋白lgpA和lgpB;分布于溶酶体膜腔面3溶酶体膜上镶嵌有质子泵9.根据溶酶体的不同发育阶段和生理状态;可以将溶酶体分为几类分为三级初级溶酶体:指通过其形成途径刚刚形成的溶酶体;次级溶酶体:当初级溶酶体经过成熟接受来自细胞内外的物质并与之发生作用时即成为次级溶酶体;三级溶酶体:是指次级溶酶体在完成对绝大部分作用底物的消化、分解作用后;尚有一些不能被消化、分解的物质残留其中;随溶酶体活性的逐渐降低以致消失;进入溶酶体生理功能作用的终末状态..10.为什么说线粒体是一个半自主性的细胞器线粒体自身有自己的遗传系统和蛋白质翻译系统;但不能自身构造与功能发挥依赖细胞核控制;具有部分的自主性..11.以葡萄糖为例;简述线粒体产生ATP的步骤及发生部位..有氧呼吸:第一阶段——在细胞质基质中发生-C6H12O6——2C3H6O3丙酮酸产生少量ATP;第二阶段——在内膜上发生-2C3H6O3 6H2O——6CO2 24〔H〕还原氢产生少量ATP;第三阶段——在基质内发生~24〔H〕 6O2——12H2O 产生大量ATP. 所有反应都有酶参加催化反应;12.简述三种细胞骨架的概念及在细胞内的分布特征..微管:由微管蛋白和微管结合蛋白组成的中空圆柱状结构;主要存在于细胞质中;微丝:是肌动蛋白组成的细丝;以束状、网状或散在等多种方式有序的在于细胞质的特定空间位置上;中间纤维:是一种坚韧、耐久直径为10nm的蛋白质纤维Ⅰ型Ⅱ型存在于上皮细胞;Ⅲ型中波型蛋白存在于间充质来源地细胞;结蛋白存在于骨骼肌、心肌、平滑肌;胶原纤维酸性蛋白特异分布于神经细胞;外周蛋白存在于中枢神经系统和外周神经系统感觉神经元;Ⅳ型神经纤维丝蛋白分布于脊椎动物神经元;Ⅴ型存在于核膜核纤层;Ⅵ型巢蛋白分布于神经干细胞..13.简述染色体包装的多级螺旋模型由DNA与组蛋白包装成核小体;在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构;在有组蛋白H1存在的情况下;由直径10nm的核小体串珠结构螺旋盘绕;每圈6个核小体;形成外径30nm;内径10nm;螺距11nm的螺线管..螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4um的圆筒状结构;称为超螺线管;超螺线管进一步折叠、压缩;形成长2-10um的染色单体..14电镜下核仁可分为几个部分请说明每个部分的组成和或意义三个部分..纤维中心:由直径为10nm的纤维构成是分布有rRNA基因的染色质区;致密纤维组分:由紧密排列的细纤维丝组成包含处于不同转录阶段的rRNA分子;颗粒组分:主要由rRNA和蛋白质组成的核糖核蛋白颗粒;为处于不同加个及成熟阶段的核糖体亚基前体15已知核糖体上有哪些活性部位他们在多肽合成中起什么作用(1)mRNA结合位点使mRNA与核糖体结合(2)P位是肽酰tRNA结合的位置(3)A位是氨酰tRNA结合的位置(4)转肽酶活性部位肽链延长时;催化进入核糖体的氨基酸之间形成肽键(5)参与蛋白质合成的因子的结合部位结合起始因子;延长因子和终止因子或释放因子的部位16.受体分为几种类型;每种类型的受体请最少举一个例子两种类型..膜受体和胞内受体膜受体:离子通道型受体;G蛋白耦连受体;酪氨酸蛋白激酶型受体胞内受体:胞浆受体;核受体17简述G蛋白的结构和作用机制是一类和GTP或结合的;位于细胞膜胞液面的;由α亚基;β亚基;γ亚基三个亚基组成..G蛋白有两种构象;一种以αβγ存在并与GDP结合;为非活化型;另一种构象是α亚基与GTP结合并导致βγ脱落;为活化型..(1)GS蛋白激活腺苷酸环化酶 2 Gi蛋白抑制腺苷酸环化酶 3 GP蛋白激活磷脂酰肌醇特异的18.什么是细胞周期细胞周期各时期主要变化是什么是指能持续的从一次结束后生长;再到下一次分裂结束的循环过程G1期是DNA复制的准备期;细胞体积显着增大;RNA聚合酶活性升高;使得rRNA;tRNA;mRNA不断产生;蛋白质含量迅速增加S期中完成DNA复制;期间DNA大量复制;同时也合成组蛋白和非组蛋白;最后完成染色体复制G2期是细胞分裂的准备期;期间细胞中大量合成RNA;ATP及一些与M期结构功能相关的蛋白质M期中细胞进行分裂;期间细胞形态结构发生显着性变化19.减数分裂前期I分为几期简述每个时期发生的主要事件..(1)细线期:期间完成复制的染色质开始凝集和同源染色体配对(2)偶线期:染色质进一步凝集;同源染色体联会(3)粗线期:同源染色体间出现染色体片段的交换及重组(4)双线期:此期染色体长度进一步变短;联会复合体因发生去组装而逐渐消失;紧密配对的同源染色体相互分开;非姊妹染色单体交叉(5)终变期:同源染色体进一步凝集;显着缩短;变粗成短棒状20.试分析细胞信号系统组成及作用由受体或其他可接受信号的分子以及细胞内的信号转导通路组成作用:调控细胞代谢;实现细胞功能;调节细胞周期;控制细胞分化;影响细胞存活。
医学细胞生物学重点整理
医学细胞生物学资料整理第三章细胞的分子基础生物小分子:1、无机化合物:水(游离水、结合水)无机盐:离子状态2、有机化合物:单糖、脂肪酸、氨基酸、核苷酸细胞大分子:细胞的蛋白质、核酸、多糖(由小分子亚基装配而成)蛋白质一级结构:多肽链仲氨基酸的种类、数目和排列顺序形成的线性结构,化学键主要是肽键蛋白质功能:①细胞的结构成分。
②运输和传导。
③收缩运动。
④免疫保护。
⑤催化作用—酶核酸:DNA:双螺旋结构RNA:信使RNA(Mrna)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)功能:1、携带和传递遗传信息。
2、复制。
3、转录。
第四章细胞生物学的研究技术第一节细胞形态结构的观察光学显微镜技术------显微结构的观察一、普通光学显微镜---染色标本二、荧光显微镜---(紫外线)细胞结构观察、细胞化学成分研究、DNA&RNA含量变化三、相差显微镜---(光的衍射和干涉效应)活细胞结构、活动观察四、微分干涉差显微镜 ---(平面偏振光的干涉)活细胞结构观察、细胞工程显微操作(三维立体投影)五、暗视野显微镜---(特殊的聚光器)观察活细胞外形六、激光共聚焦扫描显微境 ---(激光作光源)立体图像,组织光学切片;三维图像重建电子显微镜技术------亚微结构的观察分:透射、扫描、高压透射电子显微镜:电子束穿透样品而成像,观察细胞超显微结构,荧光屏上成像亚微结构观察---电子显微镜技术、扫描隧道显微镜光镜与电镜的区别第二节细胞的分离与培养一、细胞培养是指在体外适宜条件下使细胞继续生长、增殖的过程。
优点:1、容易在较短的时间内获得大量的细胞2、有利于研究单一类型的细胞3、通过人为控制培养条件,可以减少一些未知的因素影响细胞培养的条件培养基:氨基酸+糖+维生素血清支持物环境:无菌环境、适宜温度,pH值特性:贴壁生长接触抑制(肿瘤细胞没有)分类:原代培养 :直接来自于有机体的细胞培养称原代培养。
但常常也将第1代与传10代以内的细胞培养统称原代细胞培养。
