液相色谱_质谱联用法鉴定必特螺旋霉素中多组分
超高效液相色谱-串联质谱联用法同步检测抗生素生产废水中螺旋霉素与新螺旋霉素残留
超高效液相色谱-串联质谱联用法同步检测抗生素生产废水中螺旋霉素与新螺旋霉素残留白辉;贲伟伟;周维芝;强志民【摘要】采用超高效液相色谱-串联质谱法同步测定了抗生素生产废水中残留的螺旋霉素( SPM-Ⅰ)和新螺旋霉素(NSPM-Ⅰ).考察了萃取溶剂种类、水样pH值、萃取次数、水样与萃取溶剂的体积比等因素对目标物回收率的影响.以ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm ×2.1 mm i.d.,1.7 μm)为分析柱,0.1％甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度淋洗,流速0.2 mL/min,电喷雾正离子多重反应监测模式检测.标准曲线在0.02～1.00mg/L范围内线性关系良好,r2均大于0.999.方法回收率为70％～ 88％,相对标准偏差小于10％,检出限(S/N=3)分别为0.03 μg/L( SPM-Ⅰ)和0.06 μg/L( NSPM-Ⅰ).该方法应用于无锡市某制药厂抗生素生产废水中SPM-Ⅰ和NSPM-Ⅰ的检测,检出质量浓度分别为(115.6±2.7) mg/L和(5.3±0.4)mg/L.%An ultra performance liquid chromatog raphy - tandem mass spectrometric ( UPLC - MS/ MS) method was developed for the simultaneous determination of spiramycin ( e. G. Spiramycin I , SPM- I ) and neospiramycin ( e. G. Neospiramycin I , NSPM- I ) residues in antibiotic production wastewater. The factors influencing the recoveries of antibiotics, including organic extractant type, water sample pH value, extraction time and ratio of water sample to organic extractant, were investigated. The target compounds were separated on an ACQUITY UPLC BEH C18 column (100 mm X 2. 1 mm I. D. , 1. 7 μm) by gradient elution using 0. 1% formic acid(A) and acetonitrile( B) as mobile phases at a flow rate of 0. 2 mL/min. The qualification and quantification of target antibiotics were carried outby MS/MS with positive electrospray ionization under multiple reaction monitoring (MRM) mode. The calibration curves were linear over an antibiotic concentration range of 0. 02 -1.00 mg/L with correlation coefficients ( r2) more than 0.999. The recoveries of antibiotics ranged from 70% to 88% with relative standard deviations(RSD, n =6) less than 10% . The detection lim-its(S/N = 3) for SPM- I and NSPM- I were 0. 03 |xg/L and 0. 06 |xg/L, respectively. The developed method was applied in the determination of antibiotic production wastewater from a pharmaceutical manufacturing factory in Wuxi City, with SPM- I of (115. 6 ± 2. 7 ) mg/L and NSPM- I of (5.3 ±0.4) mg/L.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2012(031)001【总页数】6页(P90-95)【关键词】抗生素生产废水;螺旋霉素;新螺旋霉素;超高效液相色谱-串联质谱法【作者】白辉;贲伟伟;周维芝;强志民【作者单位】山东大学环境科学与工程学院,山东济南250100;中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室,北京100085;中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室,北京100085;山东大学环境科学与工程学院,山东济南250100;中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室,北京100085【正文语种】中文【中图分类】O657.63;S859.796抗生素生产废水是环境中抗生素污染的主要来源之一，废水中残留的抗生素药物成分排入环境中将导致具有抗药性的微生物产生［1］。
乙酰螺旋霉素标准品4个组分的百分含量总和商榷
乙酰螺旋霉素标准品4个组分的百分含量总和商榷
卢文斌
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2003(015)006
【摘要】目的采用高效液相色谱法测定乙酰螺旋霉素标准品4个组分的百分含量总和.方法采用ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-
0.1mol·L-1醋酸铵溶液(60∶40)用醋酸调节pH值至7.2±0.1;流速1.0mL·min-1,检测波长232nm;进样量10μL.结论用标准品在药典规定色谱条件下测定P1代入公式中计算样品P值与实际更接近,结果更准确.
【总页数】2页(P38-39)
【作者】卢文斌
【作者单位】泉州市药品检验所,泉州,362000
【正文语种】中文
【中图分类】R978.1
【相关文献】
1.关于乙酰螺旋霉素制剂四个组分总含量测定结果计算公式的修改建议 [J], 贺学锋;陈玉武
2.二组分纤维混纺产品组分含量百分率测量不确定度评定 [J], 金丽丽;陈素娟;陈晔
3.关于乙酰螺旋霉素片四组分含量的计算方法和限度的探讨 [J], 王铁军;狄永平
4.关于乙酰螺旋霉素片四组分含量的计算方法和限度的探讨 [J], 王铁军;狄永平
5.乙酰螺旋霉素标准品溶液的制备及贮藏实验 [J], 罗书香
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螺旋霉素生物合成中间代谢物的LC_ESI_MS定性分析
完成后用超声波脱气备用 。 流动相流速 : 0. 8 mL/ min ; 柱温 : 35 ℃; 检测波长 : 232 nm; 进样量 : 5
μL ; 梯度洗脱程序见表 1。
1. 2. 2 MS 条件 电离方式 API - ES; 碰撞诱导解离 (CID) 电压 70 V ; 干燥气 (N2) 流速 7. 0 L/ min ; 干 燥气 (N2) 温度 300 ℃; 喷雾电压 : 3. 45 Pa ; 扫描范围 : 55～1 000 m/ z 。 1. 3 实验方法
螺旋霉素属中谱抗生素 , 主要对葡萄球菌 、链球菌 、肺炎双球菌等革兰氏阳性菌及脑膜炎双球 菌等革兰氏阴性菌有高度敏感性 , 在现代生活中有着广泛的用途 。 它在临床应用 30 余年后的今天 , 对于感染性疾病治疗仍具有临床应用和推广价值 。 在个别领域 , 还具有进一步拓展的空间 [ 1 ]。 长 期以来对螺旋霉素的研究主要集中在对下游生产工艺的优化[ 2 ] , 近年来主要集中在进行上游基因工 程的改造 [ 3 ] , 而对螺旋霉素生物合成的代谢网络及其流量分布方面的研究很少 。 代谢工程的研究既 能对上游基因的改造进行指导 , 又是下游工艺优化的基础 , 对其进行研究具有理论和实践意义 。 但 在螺旋霉素生物合成的发酵液中 , 除了中间代谢物 、最终代谢物外 , 还有很多其它杂质 , 给分析工作 带来很大的困难 。
固相萃取—高效液相色谱—串联质谱测定水中5种大环内酯类抗生素
固相萃取—高效液相色谱—串联质谱测定水中5种大环内酯类抗生素作者：徐洁邓超鲜啟鸣来源：《中国测试》2017年第03期摘要：建立固相萃取（SPE）、高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）同时测定水中5种大环内酯类抗生素（罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、螺旋霉素和泰乐菌素）的分析方法。
水样中的抗生素通过Oasis HLB固相萃取小柱富集后，以C18反相色谱柱为分析柱，甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相，采用HPLC-MS/MS进行定量分析，检测方式为多反应监测模式（MRM），内标法定量。
5种大环内酯类抗生素的回收率在64.8%～90.8%之间，仪器检出限为0.012～0.085 μg/L，定量限为0.041～0.285 μg/L。
将建立的方法用于检测某化学工业园区周边地表水中5种目标分析物的残留，均未检测到泰乐菌素，其余4种抗生素均有不同程度检出，检出浓度在ng/L水平。
关键词：大环内酯类抗生素；固相萃取；高效液相色谱-串联质谱；水体文献标志码：A 文章编号：1674-5124（2017）03-0058-05Abstract： A method with solid phase extraction（SPE） and high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（HPLC-MS/MS） was developed for the determination of five macrolides （roxithromycin， clarithromycin， azithromycin， spiramycin and tylosin） in natural water samples. The macrolides were extracted from water samples using Oasis HLB cartridges and then separated on a reverse phase column using methanol and 0.1% formic acid as mobile phases. The macrolides were quantified with the internal standard method under multiple reaction monitoring （MRM） mode. The recoveries of the five macrolides ranged from 64.8% to 90.8%. The instrumental limits of detection and quantification are 0.012-0.085 μg/L and 0.041-0.285 μg/L respectively. Only Tylosin was not found by the proposed method in the studied rivers surrounding a Chemical Industry Park， while the other four macrolides were detected at the ng/L level.Keywords： macrolides antibiotics（MLs）； solid phase extraction（SPE）； high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（HPLC-MS/MS）； water0 引言抗生素作为当今重要的一类药物，被广泛应用于医药行业以及牲畜、水产养殖中。
高效液相色谱—串联质谱法同时测定化妆品中20种抗生素药物 含量的方法研究
高效液相色谱—串联质谱法同时测定化妆品中20种抗生素药物含量的方法研究作者：杨娜叶磊海叶佳明来源：《农产品加工·上》2019年第04期摘要：建立了化妆品中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、去甲基金霉素、甲烯土霉素、克霉唑、酮康唑、氟康唑、咪康唑、萘替芬、联苯苄唑、氟罗沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星等20种抗生素含量的高效液相色谱-串联质谱检测方法。
样品通过甲醇提取后，用液相色谱-串联质谱法分离测定。
20种抗生素在相应浓度范围内线性良好，相关系数大于0.995，添加0.05～2.00 μg/g时的加标回收率为71.5%～117.6%，相对标准偏差为1.7%～9.6%，方法检测限为0.01～0.50 μg/g。
该方法简便、快速、准确，可用于化妆品中上述20种抗生素药物的定性、定量分析。
关键词：高效液相色谱-串联质谱；化妆品；喹诺酮类；四环素类；咪唑类中图分类号：TQ658 文献标志码：A doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2019.04.015Simultaneous Determination of 20 Antibiotic Drugs in Cosmetices by High Performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry Method of Content StudyYANG Na1，2，YE Leihai1，2，YE Jiaming1，2，QIU Juntao1，2，YING Hansong1，2，HE Bin1，2，ZHONG Shihuan1，2，ZHAN Yuecheng1，2（1. Zhejiang Gongzhen Testing Center Co.，Ltd.，Hangzhou，Zhejiang 310009，China；2. Zanyu Technology Group Co.，Ltd.，Hangzhou，Zhejiang 310009，China）Abstract：A high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry（HPLC-MS/MS）method was established for the determination of 20 antibiotics including tetracycline，chlortetracyhcline，oxytetracyhcline，doxycycline，demeclocycline，methacycline，clotrimazole，ketoconazole，fluconazole，miconazole，naftifine，bifonazole，fleroxacin，ofloxacin，norfloxacin，pefloxacin，ciprofloxacin，enrofloxacin，sarafloxacin，difloxacin. After methanol extraction，the sample was separated and determined by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. The 20 antibiotics showed good linearity in the corresponding concentration range，and the correlation coefficient was greater than 0.995. When 0.05～2.00 μg/g was added，the standard recovery was 71.5%～117.6%，the relative standard deviation was 1.7%～9.6%，and the detection limit of the method was 0.01～0.50 μg/g. This method is simple，rapid and accurate，and can be used for the qualitative and quantitative analysis of the above 20 antibiotic drugs in cosmetics.Key words：high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry；cosmetics；quinolones；tetracyclines；imidazole抗菌藥物一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物，包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。
高效液相色谱_电喷雾串联质谱法_LC_ESI_MS_MS_检测人血浆中罗红霉素浓
摘要 目的: 建立人血浆中罗红霉素的高效液相色谱 - 电 喷雾串联 质谱 ( LC- ES I- M S /M S) 检测方 法。方法: 血浆样 品经乙
腈沉淀蛋白后, 反相液相色谱分离后进行质谱分析, 采用选择反 应监测 模式 ( SRM ) 进行检 测, 罗红霉 素和内标 物克拉 霉素的
检测离子对分别为 m /z 837 5 679 5和 m /z 748 5 158 1。结果: 罗红霉 素在 10~ 1, 000 ng mL- 1浓度范围 内线性 关系良
GUO Be i- ning1, YU Ji- cheng1, ZHANG J ing1, CAO Guo- ying1, SH I Y ao- guo1, L IU Fe i2
( 1. Inst itu te of A nt ib iot ics, H uashan H osp ita,l Fudan U n iversity, Shangha i 200040, Ch in a; 2. Therm o F isher S cien tif ic, Shanghai 201206, Ch ina)
* 上海市重点学科基金 ( B119)资助项目 第一作者 Te:l ( 021) 52888198; E - ma i:l gu obein ing@ yahoo. com. cn
# 1538 #
药 物分析杂志 Ch in J Pharm Ana l 2010, 30( 8)
要用于敏感菌引起的呼吸道感染包括鼻窦炎、中耳 炎、支气管炎及肺炎、皮肤软组织感染以及衣原体所
致的泌尿生殖道感染。本文建立了血浆中罗红霉素
的高效液相色谱 - 串联质谱 ( LC- M S /M S) 测定法, 方法简单、灵敏, 血样需要量及进样量少, 分析时间 短, 实用性强, 可用于临床药代动力学等研究。 1 仪器、试剂和材料
超高效液相色谱-串联质谱联用法同步检测抗生素生产废水中螺旋霉素与新螺旋霉素残留
Ｌ ａ ｄ０ ０ ｎ ． ６
Ｌ，ｒｓｅｔ ｅｙ ｈ ｅｅ－ ｅｐ ｃ ｖｌ．Ｔ ｅｄ ｖｌ ｉ
ｏ ｅ ｔ ｏ ｓ ａ ｐ ｉｄ ｉ ｈ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆａ ｔ ｏ ｉ ｒ ｄ ｃ ｉｎ ｗａ ｔ ｗａ ｅ ｒ ｍ ｈ ｒ ｃ ｕ ｉ ｐ ｄ ｍｅ ｈ ｄ ｗａ ｐ ｌｅ ｎ ｔ ｅ ｄｅｅ ｍｉａ ｉｎ ｏ ｎ ｉ ｔｃ ｐ ｏ ｕ ｔ ｓｅ ｔｒｆｏ ａ ｐ ａ ｍａ ｅ ｔ— ｂｉ ｏ
（ Ｍ ）ｍｏ ｅ Ｔ ｅｃｌ ｒｔ ｎ ｃｒｅ ｗ ｒ ｎ ａ ｖｒａ ｎｉｉ ｉ ｃｎ ｅｔ ｔ ｎ ｒｎ ｅｏ ． ２— ＭＲ ｄ ． ｈ ａ ｂａ ｏ ｕｖｓ ｅｅｌ ｅｒｏｅ ｎ ａ ｔ ｏ ｃ ｏｃｎｒ ｉ ａｇ ｆ ０ ｉ ｉ ｉ ｂ ｔ ａｏ ０
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ｃｌ ａ ｕａｔｒ ｇｆｃｏｙｉ ｘ Ｃｔ ，ｗｔ Ｐ Ｉ ｆ（ １． ４ ． ａ ｍ ｎ ｆｃ ｉ ａｔ ｎ Ｗｕ ｉ ｉ ｕｎ ｒ ｙ ｉ Ｓ Ｍ— ｏ １５ ６－２ ７）ｍ ／ ｎ Ｓ Ｍ— ｏ ｈ － ｇ Ｌａｄ Ｎ Ｐ Ｉ ｆ
高效液相色谱法测定必特螺旋霉素发酵液中有机酸
高效液相色谱法测定必特螺旋霉素发酵液中有机酸刘健;王永红;庄英萍;付启伟;储炬;张嗣良【期刊名称】《工业微生物》【年(卷),期】2009(0)2【摘要】必特螺旋霉素是运用基因工程技术获得的工程菌产生的一组以异戊酰螺旋霉素为主要成分的多组分新型抗生素,其前体为乙酸、丙酸、丁酸和异戊酸等有机酸.本研究利用高效液相色谱法以0.01 mol/L磷酸缓冲液(pH2.3)和甲醇为流动相,分别在反相C8(α-酮戊二酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸)和C18(丁酸、异戊酸)柱上定量测定了必特螺旋霉素前体酸和三羧酸循环相关有机酸.所建立的测定方法的相对标准偏差为0.10%～0.42%,回收率为93.19%～102.08%.【总页数】4页(P59-62)【作者】刘健;王永红;庄英萍;付启伟;储炬;张嗣良【作者单位】华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定苹果酸发酵液中的有机酸 [J], 黄慧敏;张伟国2.反相高效液相色谱法测定嗜碱微生物发酵液中的有机酸 [J], 史春云;田晶;马延和;许国旺3.高效液相色谱法测定克鲁维酵母菊芋发酵液中的乙醇,糖和有机酸类代谢成分 [J], 袁文杰;孔亮;孜力汗;白凤武4.高效液相色谱法测定啤酒、发酵液和麦汁中的可发酵糖和有机酸 [J], 单连菊;王成红;单凌青;林艳5.高效液相色谱法测定螺旋霉素发酵液中的有机酸 [J], 李友元;陈长华;陶萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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摘要: 采用 K rom a sil C 18 色谱柱 ( 5 Λ m 粒径, 200×4. 6 mm 内径) , 流动相为乙腈- 10 mm o l L 乙酸铵溶液 (V ( 乙腈) ∶V ( 乙酸铵) = 60∶45) , 建立快速分析抗生素新药必特螺旋霉素中复杂多组分的分析方法。 采用电 喷雾离子化源, 以正离子检测方式进行一级、 二级全扫描质谱分析。 研究表明: 其中含有 10 种螺旋霉素类衍 生物并推断出化学结构, 通过与对照品的色谱和质谱行为对比得到验证。采用液相色谱2质谱联用技术 (L C 2 便捷的分 M Sn ) 可以快速阐明复杂多组分抗生素新药必特螺旋霉素类的化学组成, 并且可以作为一种简单、 析方法对大环内酯类新抗生素进行高通量筛选。 关键词: 质谱学; 必特螺旋霉素多组分测定; 液相色谱2质谱联用法 (L C 2 M Sn ) ; 大环内酯类抗生素 中图分类号: O 657. 63; R 917 文献标识码: A 文章编号: 100422997 ( 2003) 042460204
霉素乙腈溶液直接注入质谱仪, 获得必特螺旋霉 素的一级全扫描质谱图 ( 示于图 1 ) 。 在质谱图 中, 相对丰度比较高的的准分子离子峰 [M + + 969、 927、 955、 941、 899, 及一组 H ] 为 m z 983、 2+ 分别对应的双电荷离子峰 [M + 2H ] m z 492、 485、 464、 478、 471、 450。 必特螺旋霉素中各主要 成分在正离子检测方式下的一级全扫描色谱图 中有 10 个主要的色谱峰 ( 示于图 2) 。 其对应的 准分子离子峰 [M + H ] + 列于表 1, 分别做二级全 扫描质谱分析, 二级碎片离子见表 1。 其中峰 b 和峰 d、 峰 c 和峰 I 、 峰 e 和峰 f, 峰 g 和峰 h 分别 具有相同的准分子离子峰, 但二级质谱碎片不 同, 推测为四对同分异构体。 根据各自的二级全 扫描质谱碎片, 并与异戊酰螺旋霉素 的二级全 扫描质谱碎片离子对比, 可以推测 R 1 和 R 2 的异 同, 从而推断出各自的化学结构 ( 示于图 3 和列 于表 1) 。由此可见, 必特螺旋霉素为多种组分的 混合物。 螺旋霉素类衍生物的化学结构主要由四部 分 组 成: 内 酯 环 (M acro lide ) 、福 洛 氨 糖 (Fo ro sam ine ) 、 碳霉氨糖 (M ycam ino se ) 和碳霉 糖 (M yca ro se) , 其结构示于图 3。
Table 1 Com ponen ts in B itesp iram yc in
峰 ( Peak ) m z
a b c d 983 969 927 969
M S2 824, 755, 596 810, 741, 582 768, 699, 681 810, 755, 596
组分 (Com ponen ts) 异戊酰螺旋霉素 异戊酰螺旋霉素 异戊酰螺旋霉素
( ( Iso ) Bu tanoylsp iram ycin ( ( Iso ) Bu tanoylsp iram ycin ( P rop ionylsp iram ycin ( P rop ionylsp iram ycin (A cetylsp iram ycin (A cetylsp iram ycin ( Sp iram ycin ) ) ) ) )
图 1 必特螺旋霉素一级全扫描质谱图
F ig. 1 Full scan ma ss spectrum of B itesp iram yc in
图 2 必特螺旋霉素一级全扫描色谱图
F ig. 2 Full scan chroma togram of B itesp iram yc in
图 3 螺旋霉素类衍生物化学结构式示意图
第 24 卷 第 4 期
2003 年 10 月
质谱学报
Jou rna l of Ch inese M a ss Sp ectrom etry Society
. 24 N o. 4 Vol O ct. 2003
液相色谱- 质谱联用法鉴定必特螺旋霉素中多组分
史向国, 钟大放
( 沈阳药科大学药物代谢与药物动力学实验室, 辽宁 沈阳 110016)
收稿日期: 2003202224; 修回日期: 2003209215 基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (39930180) 作者简介: 史向国 (1974 ～ ) , 男 ( 汉族) , 吉林长春市人, 博士生, 药物代谢与药物动力学专业
E-ma il: sx iangguo@ 163. com 3 通讯作者: 钟大放, 教授, 博士生导师, 电话: (024) 23902539, E 2 m ail: Zhongdf@ ch ina. com
© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
第 4 期 史向国等, 液相色谱2质谱联用法鉴定必特螺旋霉素中多组分
461
有限公司产品; 水为自制二次重蒸水。
2 实验方法
2. 1 液相色谱2质谱分析条件 色谱柱: K rom a sil C 18 柱 ( 5 Λ m 粒径, 200 × 4. 6 mm 内径) : 天津凯德科学仪器有限公司产 品; 流动相: 乙腈 - 10 mm o l L 乙酸铵溶液 ( V ( 乙腈) ∶V ( 乙酸铵溶液) = 60 ∶45 ) ; 质谱条件: ES I 源; 正 离 子 检 测; 鞘 气 (N 2 ) 流 速 0. 75 L m in; 辅助气 (N 2 ) 流速 0. 15 L m in; 源电压 4. 5 kV ; 毛细管温度 180 ℃; 毛细管电压 6 V ; 管透
4. 3 半定量
图 4 异戊酰螺旋霉素
二级全扫描质谱图
a t m z 983
F ig. 4 Product ion spectrum of [M + H ] + of Isova lerysp iram yc in
4 讨 论
4. 1 色谱条件
实验中曾尝试使用了市售多种品牌的 C 8 和
过已有的各组分对照品进行验证, 旨在证明液相 色谱2质谱联用法用于分析复杂大环内酯类抗生 素具有独特的优越性。
1 实验部分
1. 1 主要仪器 L CQ 型液相色谱2质谱联用仪: 美国 F inn i2 gan 公司产品, 配有 电 喷 雾 离 子 化 源 ( ES I) 及 L CQ 1. 2 数据处理系统, 具有软电离和多级离子
10 mm o l L ) , 分离效果越好, 10 mm o l L 是电喷
雾质谱仪常规使用时所能采用的最高浓度。 如调 节流动相至酸性, 则分离度降低; 如调节流动相 至碱性, 则分离度继续增加, 但会使色谱保留时 间过长, 并且在正离子检测方式下, 使灵敏度下 降, 故实验中未调节流动相的酸碱度。 4. 2 质谱条件 如果流动相或样品溶液中含有甲醇, 螺旋霉 素类衍生物在正离子检测方式下, 会出现甲醇加 合峰, 降低检测灵敏度及干扰待测物质的分析, 故分析系统中没有使用甲醇。 由于螺旋霉素类衍生物中含有两个氨基糖: 福洛氨糖和碳霉氨糖, 带有一定的碱性 (p K 1 = 7. 1, p K 2 = 8. 4) , 使其在质谱中具有较高的灵敏 度。 在一级全扫描质谱图中不仅可看到各组分的 准分子离子峰 [M + H ] + , 还可以看到大量对应 的双电荷离子峰 [M + 2H ] 2+ 。 对双电荷离子峰 做二级全扫描质谱分析, 与准分子离子峰二级全 扫描质谱分析结果对比, 有助于推断和验证各组 分的化学结构。
或 CO CH (CH 3 ) 2
CO CH 2CH 2CH 3
e f g h i j
955 955 941 941 927 899
796, 741, 582 796, 755, 596 782, 741, 582 782, 755, 596 768, 741, 582 755, 740, 596
( 异) 丁酰螺旋霉素
)
CO CH 3 CO CH 2CH 3 CO CH 3 CO CH 2CH 3 CO CH 3 CO H 2CH 3
或 CO CH (CH 3 ) 2
CO CH 2CH 3 CO CH 2CH 3 CO CH 3 CO CH 3 H
丙酰螺旋霉素 丙酰螺旋霉素 乙酰螺旋霉素 乙酰螺旋霉素 螺旋霉素
根据推断的化学结构, 与各自对应的对照品 的色谱和质谱行为对比, 验证推断结果的准确 性: 采用液相色谱质谱联用法分析各组分对照品 的乙腈溶液, 发现组分 a 2j 分别与各自对应对照 品的一、 二级质谱、 色谱行为相同。
F ig. 3 Geom etr ic structure prof ile of Sp iram yc in der iva tives
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质 谱 学 报 第 24 卷 表 1 必特螺旋霉素中各组分一览表
由中国医学科学院研制的必特螺旋霉素 ( 原 名生技霉素) , 属基因工程菌产生的螺旋霉素类 衍生物的混合物, 主要成分为异戊酰螺旋霉素 , , [ 1 ] , 是处于临床研究阶段的抗生素新 药。 为阐明复杂混合物中主要成分的化学结构, 传统的成分鉴定方法为通过正相和反相色谱分 离得到每个化合物的单体, 再进行结构解析, 其 中有些分离鉴定出来的单体为已知化合物, 此过 程耗费大量的时间、 人力和物力[ 2 ]。液相色谱2质 n 谱联用法 (L C 2 M S ) 集液相色谱的高分离能力与 质谱的高灵敏度和高专属性于一体, 已成为包括 药物微量杂质的分析鉴定[ 3 ]、 药物降解产物的分 [4] 析鉴定 、 体内药物及代谢产物的药物动力学研 究等在内的现代药学研究领域最强有力的分析 n 工具之一[ 5 ]。 采用 L C 2 M S 对微生物发酵产生的 多组分混合物进行化学筛选, 一次或少数几次即 可全面地获得整个发酵产物的化学组成、 含量及 结构等信息, 在研究的早期即鉴别或鉴定出化合 物的结构及预测出新化合物的存在[ 6 ]。 n 本实验拟采用 L C 2 M S 快速鉴定大环内酯 类抗生素新药必特螺旋霉素中 10 种组分, 并通