猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定
基于ISSR标记的猕猴桃品种r遗传多样性分析及指纹图谱构建
基于ISSR标记的猕猴桃品种r遗传多样性分析及指纹图谱构建张安世;韩臣鹏;齐秀娟;张中海【期刊名称】《植物资源与环境学报》【年(卷),期】2017(026)003【摘要】采用ISSR标记对中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)、美味猕猴桃〔A.chinensis var.deliciosa(A.Chev.)A.Chev.〕、软枣猕猴桃〔A.arguta(Sieb.et Zucc.)Planch.ex Miq.〕和毛花猕猴桃(A.eriantha Benth.)的32个样本进行了遗传多样性分析,并以ISSR标记为基础构建了DNA指纹图谱.结果表明:筛选的10个多态性高且条带清晰的引物共扩增出200个条带(位点),其中,多态性位点195个,多态性位点百分率(PPL)达97.50%;各引物的多态性信息含量(PIC)以及供试样本的观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei's基因多样性指数(H)和Shannon's多样性指数(I)的总均值分别为0.9080、1.9800、1.3569、0.2255和0.3613,4个猕猴桃种间的遗传分化系数(Gst)为0.4146,基因流(Nm)为0.7059,且32个样本间的Na、Ne、H和I值差异极显著(P<0.001).供试32个样本间的遗传相似系数(GS)为0.5650~0.9650,平均值为0.7164;基于GS值进行UPGMA聚类分析,在GS值为0.76处将32个样本分为4组,基本对应供试的4个猕猴桃种类,其中,第Ⅰ组的大多数样本属于美味猕猴桃品种,第Ⅱ组的样本均属于中华猕猴桃品种,第Ⅲ组的样本属于毛花猕猴桃品种,第Ⅳ组的样本均属于软枣猕猴桃品种.分子方差分析结果表明:4个猕猴桃的种间变异占总变异的40.84%,种内变异占总变异的59.16%.研究结果表明:供试的猕猴桃品种间遗传分化程度较高,基因交流频率较低,且总遗传变异的近60%存在于种内,说明供试的猕猴桃品种具有较丰富的遗传多样性.另外,根据10个ISSR引物的扩增结果,筛选出引物UBC818、UBC824、UBC854和UBC895扩增的15个多态性位点构建的DNA指纹图谱可用于供试32个猕猴桃样本的鉴定.%Genetic diversity of 32 samples of Actinidia chinensis Planch., A. chinensis var. deliciosa (A. Chev.) A. Chev., A. arguta (Sieb. et Zucc.) Planch. ex Miq. and A. eriantha Benth. were analyzed by using ISSR marker, and DNA fingerprinting was constructed based on ISSR marker. The results show that 200 bands ( loci) are amplified by 10 primers screened with high polymorphic and clear band, in which, there are 195 polymorphic loci with percentage of polymorphic loci ( PPL ) of 97. 50%. The overall averages of polymorphism information content ( PIC) of each primer, observed number of alleles ( Na) , effective number of alleles ( Ne) , Nei' s gene diversity index ( H) and Shannon' s diversity index ( I) of samples tested are 0. 9080, 1. 9800, 1. 3569, 0. 2255 and 0. 3613, respectively. The genetic differentiation coefficient (Gst) and gene flow (Nm) of four species in Actinidia Lindl. are 0. 4146 and 0. 7059, respectively. The differences in Na, Ne, H and I values among 32 samples are extremely significant ( P<0. 001 ) . The genetic similarity coefficient ( GS ) among 32 samples tested is 0. 5650-0. 9650 with average of 0. 7164. UPGMA cluster analysis is carried out according to GS value, and 32 samples are divided into four groups at GS value of 0. 76, which correspond to the four species in Actinidia tested. Among them, most of sam ples in group Ⅰ belong to cultivars of A. chinensis var. deliciosa, samples in group Ⅱ belong to cultivars of A. chinensis, sample in group Ⅲbelongs to cultivar of A. eriantha, and samples in groupⅣbelong to cultivars of A. arguta. Theresults of molecular variance analysis show that interspecies variation of four species in Actinidia accounts for 40. 84% of the total variation, while intraspecies variation accounts for 59. 16% of the total variation. It is suggested that cultivars of Actinidia spp. tested have high degree of genetic differentiation and low gene exchange frequency, and nearly 60% of the total genetic variation is existed in species, indicating that there is abundant genetic diversity in cultivars of Actinidia spp. tested. In addition, 15 polymorphic loci amplified by primers UBC818, UBC824, UBC854 and UBC895 are screened based on amplification result of ten ISSR primers, and DNA fingerprinting is constructed, which can be used to identify 32 samples of Actinidia spp. tested.【总页数】8页(P19-26)【作者】张安世;韩臣鹏;齐秀娟;张中海【作者单位】焦作师范高等专科学校理工学院,河南焦作454000;郑州绿博园管理中心,河南郑州451470;中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州450009;焦作师范高等专科学校理工学院,河南焦作454000【正文语种】中文【中图分类】S663.4;Q946-33【相关文献】1.猕猴桃种质资源的SRAP遗传多样性分析及指纹图谱构建 [J], 张安世;司清亮;齐秀娟;张中海2.基于ISSR标记的彩色马铃薯遗传多样性分析及指纹图谱构建 [J], 殷丽琴;彭云强;付绍红;杨进;陈涛;黄敏;余勤;韦献雅;牛应泽3.基于ISSR标记的铁线莲园艺品种遗传多样性分析和指纹图谱构建 [J],4.基于ISSR标记的16个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建 [J], 李国田;张美勇;相昆;徐颖;沈广宁;薛培生;杨军5.猕猴桃SCoT遗传多样性分析及指纹图谱的构建 [J], 张安世;张中海;齐秀娟;刘莹;骆扬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
30种猕猴桃雄株倍性及生物多样性的鉴定
III
目录
目录
摘要............................................................................................................................................ II Abstract..................................................................................................................................... III 1 文献综述.................................................................................................................................1
Abstract: China as a powerful kiwifruit production country, it has had a deeply research in the
fields of kiwifruit. The pollination of different male kiwifruits will affect the quantity and quality of female’s descendant. In order to authenticate the ploidy and genetic diversity of producing kiwifruits in Shanxi, this experiment adopted the Germany Partec CyFlow Cube flow cytometry instrument with known diploid Maohua kiwifruit of different varieties of kiwifruit to study detection times of male parent. According to the results, Mainly to pollinate Xuxiang, Hayward, Qinmei D.kiwifruit are tetraploid and hexaploid, and male plants which pollinate Hongyang, Haiwode and Huangjinguo were diploid. Meanwhile, this experiment used RAPD technology, by which with 34 different sequences of primers for the same times plant had carried on the qualitative analysis and compared the differences of DNA banding. There are 15 primers to detect polymorphisms of varieties, which reveals the genetic diversity between different male strains and lays the solid theoretical foundation of kiwifruit pollination.
中华猕猴桃不同倍性品种枝条的萌芽率差异分析
落叶果树 2022,54(1):23-26Deciduous Fruits ·试验研究· DOI: 10.13855/ki.lygs.2022.01.007 中华猕猴桃不同倍性品种枝条的萌芽率差异分析陈美艳1,刘小莉1,赵婷婷1,陈丽霞2,钟彩虹1∗(1.中国科学院武汉植物园/中国科学院猕猴桃产业技术工程实验室/中国科学院植物种质创新与特色农业重点实验室,湖北武汉430074;2.重庆金佛山国家级自然保护区管理局,重庆408400) 摘 要:研究中华猕猴桃二、四、六3个倍性的15个品种横向枝条的萌芽率差异。
结果表明,15个品种的上位芽、下位芽、侧位芽、总芽萌芽率分别为49.17%~90.93%、33.70%~56.25%、21.13%~84.93%、36.54%~71.69%,萌芽率表现为上位芽的显著高于侧位芽和下位芽的,侧位芽与下位芽的差异不明显。
各倍性表现为二倍体品种的上位芽、侧位芽、总芽的萌芽率均显著高于四倍体和六倍体品种的,四倍体与六倍体品种间的差异不显著;3个倍性品种的下位芽萌芽率差异不显著;六倍体品种的上、下、侧3方位芽的萌芽率差异也不显著。
关键词:中华猕猴桃;倍性;萌芽率;差异 中图分类号: S663.4 文献标识码: A 文章编号: 1002-2910(2022)01-0023-04Analysis on the difference of germination rates of differentploidy varieties of Actinidia chinensisCHEN Meiyan1,LIU Xiaoli1,ZHAO Tingting1,CHEN Lixia2,ZHONG Caihong1∗(1.Wuhan Botanical Garden,Chinese Academy of Sciences/Engineering Laboratory forKiwifruit Industrial Technology,Chinese Academy of Sciences/CAS Key Laboratory of PlantGermplasm Enhancement and Specialty Agriculture,Wuhan,Hubei430074,China;2.Chongqing Jinfoshan National Nature Reserve Administration,Chongqing408400,China) Abstract:In this study,the difference of germination rates of15cultivars with three ploidy lev⁃els(diploid,tetraploid and hexaploid)were analyzed in Actinidia chinensis.The results showed thatthe germination rates of up-bud,down-bud,lateral-bud and total bud were49.17%~90.93%,33.70%~56.25%,21.13%~84.93%and36.54%~71.69%,respectively.Thegermination rates of up-bud,lateral-bud and total bud of diploid cultivar were all significantlyhigher than that of tetraploid and hexaploid cultivars,however,there was no significant difference ofthe germination rates of down-bud was observed among three ploidy cultivars.The germination rateof up-bud was significantly higher than down-bud and lateral-bud,however,there was no sig⁃nificant difference between the germination rates of down-bud and lateral-bud. Key words:Actinidia chinensis;ploidy level;budding rate;differential analysis收稿日期:2021-05-11基金项目:现代农业产业技术体系(CARS-26);湖北省重点研发计划(2021BBA100);国家自然科学基金项目(31570678)。
猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定
猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定Chromosome ploidy of ten species in genus ActinidiaWANG Faming，LI Jiewei*，HU Yakang，MO Quanhui，JIANG Qiaosheng，GONG Hongjuan，YE Kaiyu，LIU Pingping （Guangxi Key Laboratory of Plant Conservation and Restoration Ecology in Karst Terrain，Guangxi Institute of Botany，Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences，Guilin *****，Guangxi，China ）Abstract：The genus Actinidia contains more than 66 species and 118 taxa（In the latest revision of the genus，all of them were classified as 54 species and 21 varieties），and most of them were Chinese endemic. As we know，inappropriate mating between parents with different ploidies usually result in crossbreeding failing or offspring-infertility in kiwifruit crossbreeding，so ploidy test would be one of the prerequisites for selecting crossing parents. But so far the chromosome ploidy of quite a number of species in actinidia has been poorly understood，which limits further development and utilization of these resources. In this study，ten ploidy-unknown species of Actinidia：A. albicalyx，A. cylindrica，A. diversicolora，A. linguiensis，A. indochinensis Merr. var. ovatifolia，A. persicina，A. wantianensis，A. longicarpa，A. rongshuiensis and A. pentapetala were studied for their chromosome ploidy with acid hydrolysis method，as most of the ten species are Guangxi endemic harboring unique and excellent horticultural traits and possess great production and development value. The results showed that all of the ten species were diploid （2n=2x=58）. The findings expand the genetic diversity database of Actinidia and provide information for the further rationaldevelopment and utilization of these resources.Key words：Actinidia，ploidy，acid hydrolysis method，resistance to bacterial canker，Guangxi endemic獼猴桃属（Actinidia）植物全世界共有66个种，约118个种下分类单位（变种、变型）（黄宏文等，2000），也有最近的文献将其划分为54个种（Li et al，2007），其中绝大部分为中国特有。
猕猴桃属33份种质资源的AFLP遗传多样性分析
猕猴桃属33份种质资源的AFLP遗传多样性分析张慧;张世鑫;吴绍华;田维敏;彭小列;刘世彪【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2018(035)002【摘要】运用扩增片段长度多态性(AFLP)技术,分析了采自于湖南、四川、贵州和海南的33份猕猴桃种质资源的遗传多样性和遗传差异.结果显示,23对AFLP引物共扩增出683条条带,其中多态性条带622条,多态性比例为91.07％,对33份种质材料的区分率达100％.对扩增结果的UPGMA聚类谱系图分析显示,33份种质资源之间的相似系数在0.51～0.95之间,遗传差异性显著.在相似系数0.70的水平上可以将33份种质分为3个类群,Ⅰ类为中华猕猴桃和美味猕猴桃,Ⅱ类为阔叶猕猴桃,Ⅲ类为对萼猕猴桃.在最大的I类类群中,31个中华猕猴桃和美味猕猴桃种质又可以在相似系数0.82水平上分为几个细类,它们具有按地理来源优先聚类的趋势和种内种间的聚类交叉现象.AFLP技术结合传统的形态分类方法可以作为猕猴桃种质分类及选育种的评价依据.【总页数】5页(P29-33)【作者】张慧;张世鑫;吴绍华;田维敏;彭小列;刘世彪【作者单位】吉首大学武陵山猕猴桃研究中心,吉首416000;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,儋州571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,儋州571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,儋州571737;吉首大学武陵山猕猴桃研究中心,吉首416000;吉首大学武陵山猕猴桃研究中心,吉首416000【正文语种】中文【中图分类】Q943.2;S663.4【相关文献】1.楸树优良种质资源的AFLP遗传多样性分析 [J], 李永涛;董玉峰;王振猛;张鹏远;王卫东;荀守华;秦光华;姜岳忠2.基于AFLP标记的贵州及其邻省薏苡种质资源遗传多样性分析 [J], 李秀诗; 周祥; 李志芳; 黎青; 杨成龙; 周明强; 付瑜华3.AFLP在植物种质资源鉴定与遗传多样性分析中的应用 [J], 王姗姗; 刘小娇; 靳玉龙; 白婷; 朱明霞; 王波; 张文会; 张玉红4.90份鳄梨种质资源AFLP遗传多样性分析 [J], 董美超; 岳建强; 杨帆; 李进学; 付小猛; 高俊燕; 周东果; 王绍华; 龙春瑞; 郭莉娜5.41份木槿种质资源的AFLP遗传多样性分析 [J], 窦霄;陈俊强;董章凯;刘红;段正洪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猕猴桃属(Actinidia)植物的遗传多样性
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猕猴桃属 （ !"#$%$&$’） 植物的遗传多样性
黄宏文 ! 龚俊杰 ! 王圣梅 ! 何子灿 ! 张忠慧 ! 李建强
（ 中国科学院武汉植物研究所， ! 武汉 ! ;<%%=; ）
果重 大小 23-,+ （ 7） 5+6
中华猕猴桃美味猕猴桃复合体自然居群倍性变异格局的研究的开题报告
中华猕猴桃美味猕猴桃复合体自然居群倍性变异格局的研究的开题报告一、研究背景中华猕猴桃是一种珍贵的水果，具有丰富的营养价值和独特的口感，深受人们的喜爱。
然而，由于其复杂的倍性变异格局与多样的天然居群，导致其栽培难度大，收成不稳定。
因此，研究其倍性变异格局与自然居群分布特征，对于提高中华猕猴桃的栽培品质和收成具有重要意义。
二、研究内容本研究将以中华猕猴桃为研究对象，通过对其自然居群的采样和分析，了解其分布特征和倍性变异格局；通过对其不同居群的遗传多样性分析，探究其基因多样性和群体遗传结构特征；并对不同倍性类型的中华猕猴桃进行配对杂交实验，验证其杂交稳定性和遗传规律性。
通过以上研究，可以对中华猕猴桃的栽培和选育提供理论基础和实践指导。
三、研究方法1. 采集中华猕猴桃不同自然居群样本，在保证样本数量的前提下，尽可能选取地理分布、生态环境差异大的居群进行研究。
2. 通过倍性测定和核型分析，确定不同倍性类型的中华猕猴桃；通过遗传标记分析，评估其基因多样性和遗传结构。
3. 利用克隆繁殖技术，培育出同一倍型的中华猕猴桃。
进行不同倍性类型的中华猕猴桃交配实验，研究其杂交稳定性和遗传规律性。
4. 通过实验数据分析，探究中华猕猴桃的自然居群分布和倍性变异格局，揭示其遗传多样性和群体遗传结构特征，为中华猕猴桃的栽培和选育提供理论依据。
四、预期成果1. 确定中华猕猴桃自然居群的分布规律和倍性变异特征；2. 揭示中华猕猴桃基因多样性和群体遗传结构的特征；3. 验证不同倍性类型的中华猕猴桃的杂交稳定性和遗传规律性；4. 提出中华猕猴桃的栽培和选育的理论基础和实践指导。
五、研究意义本研究通过对中华猕猴桃自然居群的采样和分析，揭示了其分布规律和倍性变异特征，为中华猕猴桃的栽培和选育提供了基础数据和理论支撑；同时，通过验证不同倍型中华猕猴桃的杂交稳定性和遗传规律性，可以为其遗传改良和品种选育提供依据。
研究成果将推动中华猕猴桃的可持续发展，促进果蔬产业的健康发展和经济增长。
猕猴桃的遗传转化研究以及SSR分子标记在其遗传多样性中的应用
猕猴桃的遗传转化研究以及SSR分子标记在其遗传多样性中的应用摘要：猕猴桃栽培品种存在一定的缺陷，利用遗传转化技术对猕猴桃品质特性改良具有广泛的应用前景。
对猕猴桃目的基因的分离，猴桃遗传转化的基本方法和研究进展以影响猕猴桃转化效率的因素进行了总结，并对猕猴桃遗传转化需解决的问题进行了探讨。
综述了SSR标记技术在猕猴桃群体遗传多样性研究、基因连锁图谱的构建、种质资源鉴定以及分子标记辅助育种等方面的应用概况，并在此基础上提出了今后猕猴桃育种发展的方向。
关键词：猕猴桃；遗传转化；SSR；猕猴桃；遗传多样性猕猴(Actinidia)属猕猴桃科猕猴桃属植物，其风味独特，营养丰富，Vc含量高，有一定保健功效，因而倍受关注。
我国猕猴桃栽培面积居世界第一位，产量排第二位。
目前，猕猴桃的栽培品种往往存在某些性状缺陷，如耐贮藏性和抗逆性较差等。
通过常规育种方法改良往往周期长、工作量大、效率较低，很难满足生产发展的需要。
采用遗传转化技术培育新品种，有几个明显的优点：首先，它可以有目的、有计划地引入优良性状而不需要改变原有的其它特性；其次，它可以突破物种障碍，把许多原来植株中没有的基因引入；另外，它可以在幼苗期对转化植株进行筛选和鉴定，大大缩短了得到稳定遗传的新品种所需要的时间。
因此，遗传转化技术为猕猴桃种质改良开辟了一条新的途径，其将大大缩短猕猴桃的育种年限，扩展猕猴桃的育种范围，拓宽猕猴桃的基因资源，从而大力推动猕猴桃育种工作的进程。
一直以来，我国乃至世界上的主要栽培品种比较单一，引种区域相对狭小，此外，由于猕猴桃属中普遍存在自发的种间杂交和种内多倍化的现象，因此不同学者对该属植物种的界定及亲缘关系存在不同的看法。
分子标记技术是猕猴桃群体遗传结构分析、物种遗传多样性鉴定、遗传基因连锁图谱构建以及分子标记育种等方面的理想工具。
利用分子标记技术分析生物个体之间DNA序列差别并用于作图的研究始于1980年。
经过多年的发展，现在的DNA标记技术已有10多种，其中简单重复序列(SSR)或称微卫星DNA、简单串联重复序列(STRP)是高等真核生物基因组中种类多、分布广、具有高度的多态性和杂合度的分子标记技术，比RFLP和RAPD分子标记具有更丰富的多态性，呈孟德尔式遗传。
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猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定
Chromosome ploidy of ten species in genus Actinidia
WANG Faming，LI Jiewei*，HU Yakang，MO Quanhui，JIANG Qiaosheng，GONG Hongjuan，YE Kaiyu，LIU Pingping （Guangxi Key Laboratory of Plant Conservation and Restoration Ecology in Karst Terrain，Guangxi Institute of Botany，Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences，Guilin *****，Guangxi，China ）
Abstract：The genus Actinidia contains more than 66 species and 118 taxa（In the latest revision of the genus，all of them were classified as 54 species and 21 varieties），and most of them were Chinese endemic. As we know，inappropriate mating between parents with different ploidies usually result in crossbreeding failing or offspring-infertility in kiwifruit crossbreeding，so ploidy test would be one of the prerequisites for selecting crossing parents. But so far the chromosome ploidy of quite a number of species in actinidia has been poorly understood，which limits further development and utilization of these resources. In this study，ten ploidy-unknown species of Actinidia：A. albicalyx，A. cylindrica，A. diversicolora，A. linguiensis，A. indochinensis Merr. var. ovatifolia，A. persicina，A. wantianensis，A. longicarpa，A. rongshuiensis and A. pentapetala were studied for their chromosome ploidy with acid hydrolysis method，as most of the ten species are Guangxi endemic harboring unique and excellent horticultural traits and possess great production and development value. The results showed that all of the ten species were diploid （2n=2x=58）. The findings expand the genetic diversity database of Actinidia and provide information for the further rational
development and utilization of these resources.
Key words：Actinidia，ploidy，acid hydrolysis method，resistance to bacterial canker，Guangxi endemic
獼猴桃属（Actinidia）植物全世界共有66个种，约118个种下分类单位（变种、变型）（黄宏文等，2000），也有最近的文献将其划分为54个种（Li et al，2007），其中绝大部分为中国特有。
猕猴桃种质资源具有丰富的多样性，是进行品种改良和新品种选育的基础。
目前世界上大部分的猕猴桃品种主要通过“中华”、“美味”类猕猴桃选育而来，遗传背景比较单一，制约了诸多性状的进一步改良，例如“中华”、“美味”类猕猴桃普遍高感溃疡病，通过实生选育或种内杂交获得抗性种质十分困难。
而其它猕猴桃种类很多具有优良的溃疡病抗性，通过种间杂交的方式获得溃疡病抗性品种成为一种有效手段。
而进行猕猴桃种间杂交，首先必须明确各个杂交亲本的染色体倍性，以减少杂交育种的盲目性。
黄宏文等（2000）对猕猴桃属的染色体倍性多样性进行了较充分的综述和研究，但其中研究比较清楚的只有46个种或亚种，仍有很大一部分猕猴桃种或亚种的染色体倍性未知。
目前，针对猕猴桃属各种或亚种的染色体倍性研究进展相对缓慢，主要是大部分研究单位缺少相应的种质资源或收集的资源比较分散，无法进行系统研究。
广西植物研究所自1980年开始猕猴桃的分类学研究和野生种质资源的调查、收集和保存，并与武汉植物园等单位进行合作和交流，目前已建立了华南地区最大的猕猴桃野生种质资源圃，收集保存了70多个种（包括变种），其中原产于广西的种类（变种）38个，具有丰富的遗传多样性。
本研究充分发挥资源优势，针对倍性未知的10个猕猴桃种（变种）进行染色体制片和观察，确定其倍性，以进一步丰富猕猴桃种质资源多样性数据库和为这些遗传资源的合理开发利用奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
本研究使用的材料均采集于广西壮族自治区中国科学院广西植
物研究所猕猴桃种质资源圃。
其中临桂长果、桃花、融水、二色花、白萼、五瓣和宛田猕猴桃为李瑞高等于2021年报道的新种，而卵圆叶和白花柱果猕猴桃为李瑞高等于2021年报道的新变种。
1.2 染色体制片
于春季4月初上午10：00左右，取刚萌发的嫩枝茎尖，使用锋利的解剖刀迅速剥去外面包裹的绒毛和皮层，截取2 mm左右的茎尖部分，迅速置于0.1%的秋水仙素中，避光保存。
用秋水仙素处理2.5～3.0 h后，用无菌水冲洗干净，使用卡诺固定液（乙醇∶冰醋酸=3∶1）于4 ℃固定30 min以上。
去掉固定液，无菌水冲洗2遍，加入1 mol·L-1盐酸与45%醋酸溶液1∶1的混合液，于60 ℃水浴锅中解离5 min，解离后用无菌水冲洗3遍，至于载玻片上，卡宝品红染色，压片，使用蔡司显微镜Axio Imager M2于400倍下进行染色体观察和计数。
2 研究结果
这10个种类的猕猴桃染色体倍性均为二倍体，2n=2x=58（表1），其染色体数目详见图1。
3 讨论
猕猴桃染色体数目较多且形态较小，每条染色体的平均长度0.6～1.5 μm（Bowden，1945；Mcneilane Considine，1989；Watanabe Takahashi，1989），使得其染色体制片和进行核型分析相对困难。
而且猕猴桃属于多年生雌雄异株果树，其基因组杂合程度较高，在生产上或研究上一般通过嫁接的方式进行繁殖或进行种质资源的异地迁移保护，所以对其进行染色体制片观察无法选用常用的效果较理想的根尖材料，只能使用接穗上的组织。
使用茎尖分生组织进行猕猴桃染色体的制片和倍性观察是一种常用的方法，然而选用的茎尖最好是处于分生组织分裂较旺盛的阶段，所以取样的季节和时间对制片效果都至关重要，本研究通过多次取样比较，发现春季4月份气温上升到25 ℃左右时于白天上午10：00～11：00取样效果相对较好，获得的中期分裂比例相对较多。
猕猴桃倍性变异较为广泛，从二倍体到八倍体甚至非整倍体均有报道（黄宏文等，2000；曾华等，2009），该研究报道的10个猕猴桃种类均为二倍体，但不能排除在自然群体中可能存在其它倍性的变型或变种，有待进一步考察和发现。
在猕猴桃杂交育种中，不同倍性之间选配不当会造成杂交失败、后代不育等后果（王圣梅等，1994），因此倍性鉴定是猕猴桃常规育种亲本选择前提条件之一。
该研究使用的材料大部分为广西植物研究所收集保存的广西特有物种（其叶片和果实的基本性状见图2），很多种类中蕴藏着独特的优良园艺性状，具有很高的生产和开发价值，例如长果猕猴桃因其独特的风味、高Vc、易剥皮和其它多种优异的园艺性状，目前已经选育成品种并已初步推广（李洁维，2007）。
而其它几个种也具有较高的利用价值，如白萼和白花柱果的常绿性状，二色花、临桂和卵圆叶对溃疡病的高抗性状等。
该研究为利用这些猕猴桃种类进行种间杂交培育新品种，或为其系统发育、细胞遗传以及其它方面的研究提供了生物学资料，丰富了猕猴桃种质资源多样性数据库，为进一步推动这些猕猴桃种类的合理开发利用奠定基础。