决明子多糖含量测定方法
多糖含量测定
多糖含量的测定参照国标NY/1676-2008一、实验原理多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有特征吸收，与标准曲线比较定量。
二、试剂1、硫酸（H2SO4，国药集团），ρ=1.84g/mL；2、无水乙醇（国药集团）；3、苯酚（国药集团），重蒸馏；4、80%乙醇溶液（国药集团）；5、葡萄糖（国药集团），使用前于105℃恒温烘干至恒重；6、80%苯酚溶液：称取80g苯酚于100mL烧杯中，加水溶解，定容至100ml后转至棕色瓶中，置4℃冰箱中避光贮存。
7、5%苯酚：吸取5mL，80%的苯酚溶液，溶于75mL水中，混匀，现配现用。
8、100mg/L标准葡萄糖溶液：称取0.1000g葡萄糖于100mL烧杯中，加水溶解，定容至1000mL，4℃冰箱中避光贮存。
三、仪器双光束紫外可见分光光度计（TU-1901；北京普析通用仪器有限责任公司）分析天平（0.0001g；奥豪斯）超声提取器（KQ-500B;昆山市超声仪器有限公司）高速离心机（常州中捷实验仪器制造有限公司）四、操作步骤1、样品的提取称取样品0.1g于离心管中，加入20mL无水乙醇，充分混匀后超声提取30min，然后4000r/min离心10min，弃去上清液，不溶物用10mL乙醇溶液洗涤、离心。
用水将上述不溶物转移至圆底烧瓶中，加入50mL水，沸水浴回流提取2h。
冷却至室温，过滤，将上清液转移至100mL容量瓶中，残渣洗涤2-3次，洗涤液转移至容量瓶，加水定容。
2、标准曲线分别吸取0、0.2mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL标准液至试管中，蒸馏水补至1.0 mL。
向试液中加入1.0 mL5%苯酚溶液，快速加入5 mL硫酸，静置10min。
充分混匀后将试管放置于30℃水浴中反应20min,在490nm处测吸光度，以浓度为横坐标，吸光度未纵坐标，绘制标准曲线3、测定吸取1.00mL样品溶液于20mL具塞试管中，按照1、2操作，测定吸光度，同时做空白实验五、计算公式X（%）=m1*v1/(m2*v2)*0.9*10-4m1标曲上查的样品测定液中含糖量，μg；v1样品定容体积，mL；v2比色测定所移取样品测定液体积，mL；m2样品质量，g；0.9 葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有多种，以下列举其中几种常用的方法： 1. 酚硫酸法：将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物，通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法：样品经热水溶解后，乙醇沉淀，除去其他可溶性糖及杂质的干扰，用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便，测定速度快，可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法：在一定条件下，刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物，而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外，还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
方法一多糖提取与测定
多糖提取与测定方法一一、多糖含量的测定（标准曲线的建立）采用苯酚-硫酸法测定植物多糖含量，标准曲线的建立：分别取0、0.4mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL、1.2 mL、1.4 mL、1.6 mL及1.8 mL浓度为100ug/ml 的标准葡萄糖溶液，各加蒸馏水至2.0 mL，再加入6%苯酚1.0 mL，浓硫酸5.0 mL，静置10min，摇匀，室温放置20min，然后在490nm处测光密度值A，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得到多糖测定标准曲线，计算得回归方程。
植物多糖含量的计算：根据所测样品提取液的光密度值A，利用线性回归方程，计算得到多糖的含量。
二、浸膏率的测定把水煎煮液过滤后的葛根滤渣置于烘箱中，在50℃条件下烘烤甘草残渣3h，冷却30min，迅速精密称定重量，再在上述温度下干燥1h，冷却、称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止，根据减失的重量，计算甘草的浸膏率。
浸膏率的计算公式为：三、多糖提取流程方法一：植物组织切成小块→匀浆→热水浸提→过滤→上清液蒸发浓缩→加无水乙醇沉淀，静置48h→抽滤→沉淀物用95%乙醇、无水乙醇、丙酮各淋洗2次→60℃真空干燥→得粗多糖方法二：称取干燥至恒重的葛根85.0g先经80%乙醇回流提取2次，第一次提取2h，第二次提取3h，除去单糖和低聚糖；抽滤，药渣经真空干燥后用石油醚（60-90℃）回流脱脂提取2次，第一次提取2h，第二次提取3h，抽滤，药渣经真空干燥后，加蒸馏水回流，微博处理，抽滤，去上清液，浓缩记得葛根多糖。
方法三：称取干燥葛根4.0g，加400ml去离子水，85℃水浴回流提取2h，抽滤，将滤液定溶于500ml。
测定总多糖含量。
单因素考察实验分别考察料液比、提取温度、提取时间、乙醇沉淀浓度和提取次数对植物多糖总糖含量的影响。
多糖的含量=植物多糖的含量/植物原料的重量x100%。
(1)料液比对多糖总糖含量的影响称取干燥恒重药材10.00g，以不同料液比1:10、1:15、1:20、1:25、1:30(8-12倍)，在90℃的水浴下提取2h，用80%乙醇进行沉淀。
中国药典多糖含量测定方法
中国药典多糖含量测定方法咱们先得把样品准备好呀。
这就像是要做一道大菜之前，得先把食材准备齐全一样。
样品要是没处理好，后面的测定可就全乱套啦。
得按照严格的步骤来采集和处理这个样品，可不能马虎呢。
比如说，要是从植物里提取多糖，就得小心翼翼地把植物的相关部位取好，清洗干净，就像对待宝贝一样。
接下来就是提取多糖啦。
这一步就像是从宝藏里挖掘金子一样。
要用到合适的溶剂，就像一把神奇的钥匙，去打开多糖的“大门”，把它们从样品里释放出来。
这个溶剂的选择可讲究啦，要既能把多糖充分溶解，又不能对后面的测定产生干扰。
而且这个提取的过程也得控制好条件，温度啊、时间啊，就像照顾小婴儿一样，得刚刚好才行。
然后就是把提取出来的多糖进行纯化。
这纯化就像是给多糖洗个澡，把那些杂质都去掉。
可以用各种办法呢，像是沉淀法之类的。
把那些不想要的杂质像挑出沙子里的小石子一样剔除掉，只留下纯净的多糖。
再之后就是测定多糖的含量啦。
这可是重头戏呢。
有很多种测定的方法，比如说比色法。
就像给多糖量身高一样，通过颜色的变化来确定多糖的含量。
这个过程中，各种试剂的添加量要特别准确，就像厨师放盐一样，多一点少一点味道就不对啦。
而且仪器的使用也得很熟练，就像玩游戏要掌握好操作技巧一样。
整个过程中啊，每一个步骤都像是一个小关卡，要是哪一个没做好，就可能影响最后的结果。
而且做这个测定的人呀，得特别细心，有耐心。
就像一个耐心的工匠，精心雕琢自己的作品一样。
咱们做这个多糖含量测定可不仅仅是为了完成一个任务，而是为了能准确地知道样品里多糖到底有多少，这对很多方面都很重要呢，不管是在制药呀，还是在研究一些生物活性方面，都离不开这个准确的测定。
这就像是在一个大家庭里，每个成员都有自己的重要性，每个步骤都不能被忽视呀。
在测定的过程中呀，要是遇到了困难也别灰心。
就像爬山一样，可能会遇到陡峭的地方，但是只要坚持一下，想办法克服，就一定能到达山顶，得到准确的结果呢。
这中国药典里的多糖含量测定方法虽然有点复杂，但只要用心去做，就肯定能做好的。
多糖含量测定方法
多糖含量的测定粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定，还原糖用3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定，多糖含量 = 总糖 - 还原糖。
1、总糖含量测定实验原理：多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚生成橙黄色溶液，在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
试剂：浓硫酸（分析纯）、5%苯酚溶液（分析纯）、标准葡萄糖。
操作步骤：①制作标准曲线：准确称取105 ℃烘干至恒重的葡萄糖50mg于500ml容量瓶中配成0.1 mg/ml 的标准溶液，用蒸馏水分别配成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/ml。
1 ml标准液分别加入 5% 苯酚溶液1 ml，并迅速加入浓硫酸5 ml，静置10 min。
摇匀，30℃放置30 min后于490nm测定OD值，以葡萄糖含量为横坐标，OD值为纵坐标，制作得到标准曲线。
②样品含量测定：吸取1.0ml样品液，按照上述步骤操作测定OD490，并代入标准曲线计算样品的总糖含量。
2、还原糖含量实验原理碱性条件下，DNS可与还原糖反应生成3-氨基-5-硝基水杨酸。
此物质在煮沸条件下成棕红色，且颜色深浅在一定范围内与还原糖含量成线性关系。
据此可通过测定OD值确定还原糖含量。
试剂及配制：浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液。
DNS显色液：称取3.25g DNS溶于少量蒸馏水中并转移至500ml容量瓶中，加入2mol/L的NaOH溶液162.5ml，再加入7.5ml的丙三醇，摇匀，加蒸馏水定容至500ml，摇匀。
操作步骤①标准曲线制作：在6支试管中分别加入1mg/ml葡萄糖标准溶液0.00ml，0.10ml，0.20ml，0.30ml，0.40ml，0.50ml，补蒸馏水至0.5ml，然后加入1 / 2DNS试剂1.5ml，充分混匀。
置于沸水浴中煮沸5min，然后迅速流水冷却，并分别向试管中加入4ml蒸馏水，混匀。
在540nm处读OD值。
多糖的测定
多糖的测定是一种常见的生物化学实验，旨在确定样品中多糖的含量。
多糖是由许多单糖单元组成的碳水化合物，包括淀粉、糖原、纤维素等。
以下是多糖测定的常见方法和步骤：
1.碘滴定法：这是测定淀粉含量的常用方法。
它利用碘对淀粉蓝色复合物形
成的特征进行测量。
样品首先与碘溶液反应，形成蓝色化合物，然后根据颜
色的深浅来测量淀粉的含量。
2.酚-硫酸法：该方法用于测定糖原的含量。
它涉及将样品与酚和硫酸混合，
形成特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度计或比色计来测量，以确定糖原的含量。
3.酚硫酸法：这是一种用于测定纤维素含量的常见方法。
它包括将样品与酚
硫酸混合，生成一种具有特定吸光度的化合物。
吸光度可以用光度计或比色
计测量，从而确定纤维素的含量。
4.酚-硫酸-苯酚法：这是测定葡萄糖聚合物含量的方法。
它涉及将样品与酚、
硫酸和苯酚混合，产生特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度
计或比色计来测量，以确定葡萄糖聚合物的含量。
这些方法提供了测定不同类型多糖含量的有效手段，可以通过定量分析来确定样品中多糖的含量。
在实际操作中，严格遵循实验室安全操作规程以及特定的实验步骤非常重要，以确保准确和可重复的测定结果。
黄酮类决明子实验报告
一、实验目的1. 了解黄酮类化合物的基本性质及其在植物中的分布；2. 掌握黄酮类化合物的提取方法；3. 学习并运用分光光度法测定黄酮类化合物的含量；4. 分析黄酮类化合物在决明子中的分布及含量。
二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然有机化合物，具有多种生物活性。
本实验采用超声波辅助提取法从决明子中提取黄酮类化合物，利用分光光度法测定其含量。
在特定波长下，黄酮类化合物与一定浓度的铝离子形成络合物，络合物颜色深浅与黄酮类化合物含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：决明子、无水乙醇、氢氧化钠、硝酸铝、三氯化铝、氢氧化钠、蒸馏水等。
2. 仪器：超声波提取仪、分光光度计、电子天平、移液器、容量瓶、试管等。
四、实验步骤1. 样品处理：称取一定量的决明子粉末，加入适量的无水乙醇，超声提取30分钟，过滤，取滤液待测。
2. 标准曲线绘制：配制一系列不同浓度的芦丁标准溶液，分别加入一定量的硝酸铝溶液，显色后，于特定波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
3. 样品测定：取一定量的样品溶液，按照绘制标准曲线的方法进行显色，测定吸光度，根据标准曲线计算样品中黄酮类化合物的含量。
4. 结果分析：比较不同提取方法对黄酮类化合物提取效率的影响，分析黄酮类化合物在决明子中的分布及含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，得线性回归方程为：y = 0.0488x + 0.0063，相关系数R² = 0.9987。
2. 样品测定：按照上述方法测定样品溶液的吸光度，计算样品中黄酮类化合物的含量。
结果显示，决明子中黄酮类化合物的含量为2.56mg/g。
3. 结果分析：（1）超声波辅助提取法在提取决明子中黄酮类化合物方面具有较高的效率，提取时间短，操作简便。
（2）通过分光光度法测定，得决明子中黄酮类化合物的含量为2.56mg/g，说明决明子中黄酮类化合物含量较高，具有较好的开发利用价值。
HPLC测定决明子中红镰霉素龙胆二糖苷的含量
万方数据
万方数据
万方数据
HPLC测定决明子中红镰霉素龙胆二糖苷的含量
作者：唐力英， 王祝举， 邬秋萍， 赫炎， 黄璐琦， TANG Li-ying， WANG Zhu-ju， WU Qiu-ping， HE Yan， HUANG Lu-qi
作者单位：唐力英,王祝举,黄璐琦,TANG Li-ying,WANG Zhu-ju,HUANG Lu-qi(中国中医科学院,中药研究所,北京,100700)， 邬秋萍,WU Qiu-ping(江西中医学院,江西,南昌,330006)， 赫炎,HE
Yan(中国中医科学院,中医临床基础研究所,北京,100700)
刊名：
中国中药杂志
英文刊名：CHINA JOURNAL OF CHINESE MATERIA MEDICA
年，卷(期)：2008,33(4)
参考文献(5条)
1.冯映冰;龚志萍决明子药材中大黄酚含量的反相HPLC法测定[期刊论文]-分析测试学报 1999(04)
2.Wong S M;Wong M;Selignmnn O Anthraqulnong glycosides from the seeds of Cassia tora[外文期刊]
1989(01)
3.Wong S M;Wong M;Seligmann O New antihepatotoxic naphthopyrone glycosides from the seeds of Cassia tora[外文期刊] 1989(03)
4.张启伟;阴健;张俊生、炒决明子及其煎剂中部分活性成分的比较 1996(02)
5.中华人民共和国药典(一部) 2005
本文链接：/Periodical_zgzyzz200804006.aspx。
中药决明子的化学成分研究
中药决明子的化学成分研究摘要：目的：探讨建立鉴别中药决明子的高效液相色谱法（HLPC）方法，对中药决明子具有药理活性的化学成分（大黄素、大黄酚、大黄素甲醚）的含量进行测定。
方法：利用HLPC鉴别中药决明子，对照品为橙黄决明素；利用HLPC测定中药决明子具有药理活性的化学成分（大黄素、大黄酚、大黄素甲醚）的含量；色谱条件：采用Waters Symmetry C18 液相色谱柱（150×4.6mm，5?m），流动相为甲醇：醋酸：水（10：10：80）进行梯度洗脱，流速为1.2ml/min，柱温为30 ℃，检测波长为260nm，进样量为15?l。
结果：中药决明子中橙黄决明素与峰面积线性关系良好（r=0.9998）的范围0.0250-0.1550?g，精密度试验中RSD为0.78%、重现性试验中RSD为0.69%；中药决明子中大黄素含量为0.0700mg/g （RSD=0.78）、大黄酚含量为0.0700mg/g（RSD=0.78）、大黄素甲醚含量为0.0700mg/g（RSD=0.78）。
结论：以橙黄决明素作为对照品的HLPC鉴别中药决明子的方法精密度、重现性良好，操作简便、快捷，利用HLPC测量中药决明子化学成分大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均有可行性，准确性高。
关键词：决明子；HLPC；化学成分中药决明子作为豆科、决明属，以决明成熟种子入药，中医性味为微寒，味甘、苦，主归肝经及大肠经，具有清肝明目、润肠通便的药效，用于治疗肝火目赤、眩晕目暗及大便不畅[1]。
由于中药决明子的化学成分对于维持中药决明子的药效，通过对其化学成分含量进行控制，有利于提高药效、降低毒副作用及进一步提高药品质量标准。
现代研究表明，中药决明子的主要化学成分分类为蒽醌类、萘并吡喃酮类、脂脂酸类及多糖药；但发挥抗病原菌、降低血压、抑制血小板聚集、降低血脂、保肝泻下等药理活性的主要化学成分为大黄素、大黄酚、大黄素甲醚[2]。
随着中药决明子的化学成分研究不断深入，应用中药决明子制成的中成药广泛用于治疗眼疾、心脑血管疾病及消化系统疾病。
决明子生药鉴定实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过观察和分析决明子的外观性状、显微特征以及理化性质，对决明子进行生药鉴定，从而提高对中药的认识和鉴别能力。
二、实验材料1. 实验药品：决明子（钝叶决明、小决明）。
2. 实验仪器：显微镜、电子天平、水浴锅、乙醇、盐酸、碘液等。
3. 实验试剂：醋酸酐、硫酸、碘化钾、氢氧化钠等。
三、实验方法1. 外观性状鉴定（1）观察决明子的形状、大小、颜色、表面特征等。
（2）比较钝叶决明和小决明的异同。
（3）观察决明子的断面特征，包括种皮、胚乳、子叶等。
2. 显微特征鉴定（1）观察决明子的横切面和纵切面。
（2）观察决明子种皮、胚乳、子叶的细胞结构。
（3）观察决明子中的草酸钙簇晶、淀粉粒等。
3. 理化性质鉴定（1）测定决明子的水分、灰分等。
（2）进行决明子的酸碱度测定。
（3）进行决明子的浸出物测定。
四、实验结果1. 外观性状鉴定（1）钝叶决明：呈四棱性短圆柱形，一端钝圆，另一端倾斜并有尖头，长4～6mm，宽2～3mm。
表面棕绿色或暗棕色，平滑，有光泽，背腹面各有1条凸起的棱线。
棱线两侧各有1条从脐点向合点斜向的浅棕色凹纹。
质坚硬。
（2）小决明：短圆柱形，长3～5mm，宽2～2.5mm。
棱线两侧各有1条宽广的浅黄棕色带。
2. 显微特征鉴定（1）钝叶决明：最外为厚的角质层，表皮为一列栅状细胞，壁不均匀加厚，在细胞的1/2和下1/3处各有一条光辉带；以下为一列支柱细胞，略呈哑铃状，壁厚，相邻两细胞间有大的细胞间隙；内方为6～8列营养层薄壁细胞，内含草酸钙簇晶，直径3～10μm；最内一列种皮细胞排列整齐，长方形，含草酸钙棱晶。
（2）小决明：草酸钙簇晶多，直径10～19μm，部分支柱细胞外侧。
3. 理化性质鉴定（1）水分：钝叶决明为9.5%，小决明为10.2%。
（2）灰分：钝叶决明为6.2%，小决明为5.8%。
（3）酸碱度：钝叶决明为6.2，小决明为5.8。
（4）浸出物：钝叶决明为17.5%，小决明为15.2%。
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决明子多糖含量测定方法
决明子多糖是一种多元糖，它由三聚糖，果糖及半乳糖组成，可以用来改善食物的口感、保持食物的新鲜度等，因此，确定决明子多糖的含量及种类对于食品质量评价非常重要。
为了更好地检测决明子多糖，人们提出了一种特别困难的测定方法－－决明子多糖含量测定方法。
决明子多糖含量测定方法主要有三步：
第一步：样品准备。
样品从食物中提取，然后进行粉碎分离，来提取清楚的样品。
第二步：进行纯化步骤。
这一步是先将该样品在单糖染料下进行洗脱，这是为了将单糖和多糖分离开，接着进行沉淀，可以得到纯度较高的多糖溶液。
第三步：用高效液相色谱仪进行测定。
根据检测结果，查看曲线图，确定决明子多糖的含量及种类。
上述这三步是确定决明子多糖含量及种类的常用方法，它们都具有较高的准确度及重复性。
有许多因素可能影响测定结果的准确性，因此，在测定过程中必须将每个步骤的操作彻底地全部完成，以保证测定的准确性及重复性。
有了准确的决明子多糖含量测定，可以进一步研究多糖的功能特性，更好地为食品行业提供有效的参考和决策依据。
例如，多糖的含量影响了食品的口感、质地以及其它功能性特征；而多糖的种类可以帮助食品企业制定正确的添加量，从而达到控制食品质量的
目的。
因此，正确有效地测定和分析决明子多糖，对提升食品质量及预防污染非常重要，同时也有助于科学研究和开发，无论是在实验室还是在实践中都能发挥重要作用。
综上所述，决明子多糖含量测定方法是一种非常有用的方法，可以更好地检测和分析决明子多糖，以帮助食品行业更好地提高食品质量。