东北红豆杉的愈伤组织诱导
红豆杉的种植与管理
红豆杉繁衍方式红豆杉大多采用种子繁衍。
11月种子成熟后即可采收，以后将肉质种皮清洗干净晾干，随即用湿沙层积埋藏在背阴枯燥处，上面覆盖塑料膜及草帘。
夏秋季应每一个月翻动种子两次，到次年3月初即可播种育苗。
苗床应选择背风且排水良好的微酸性沙壤土地块，床宽1米，沟宽40厘米，东西向起高垅，垅双侧埋25厘米高、4厘米厚的钢板，深10厘米。
床土要求深翻并精细耕耘，施入呋喃丹防治地下虫害。
用蛭石、河沙、泥炭、园土各一份，并参加多菌灵或甲基托布津等杀菌剂，混合成基质填入钢板内，与侧板平中间高出3～5厘米。
覆上塑料膜密封熏蒸3至5天即可播种。
种子均匀散播于床面上，每平方米播种量在200粒左右，播种后用木板略压平，盖1至2厘米厚的混合基质土，覆盖草帘或塑料膜保温保湿。
遇天气枯燥应适当喷水，一般40天后可发芽出苗。
此时应去掉塑料膜或草帘，并在苗床上方搭设2米高的遮阴棚，上盖遮阴网避免阳光直射。
维持苗床湿润，遇雨天应搭低拱棚并盖塑料膜避免苗床水分过量。
做好苗床的排水通风工作，及时防治病虫害。
幼苗期每隔10天施一次腐熟淡饼肥水，忌用化肥和浓肥。
幼苗通过一年的精心养护管理，苗高可达15～25厘米，并有2～3个分叉枝。
4月上旬可进展移植。
种植地应选择背风、枯燥、富含腐殖质的微酸性沙壤地，深翻20厘米，每平方米施5千克腐熟有机肥。
起高垅，挖深沟，垅宽100厘米，沟宽30厘米。
每垅种5行，行距20厘米，株距15厘米。
移植宜选在阴天，应随移随种，需带土球移栽。
移栽后马上浇一次透水，并在上面搭2米高的遮阴棚，晴天盖遮阴网，阴雨天及晚上可将其去掉。
生长期增强肥水管理，一般每隔10天施一次腐熟饼肥水。
做好病虫害防治管理。
夏日增强遮光降温工作，必要时采取喷水降温，以创造冷凉湿润环境利于苗木生长。
红豆杉既是制作高级家具的上等材料，又是极具医疗价值的药材，更是园林绿化的优良树种，随着其人工繁衍和人工栽培技术的成熟和开展，红豆杉的应用范围将加倍普遍。
杉木愈伤组织诱导及植株再生
代增殖； 良 Ｍ ＋ 一 Ａ ．ｍ ／ Ｋ １５ ｇＬ － 改 Ｓ ６ Ｂ Ｏ ５ ｇＬ＋ Ｔ ．ｍ ／ 蔗糖 ３ Ｌ是诱导不定芽发 生的最佳培养基。 ４ ０ 关 键字 杉木 愈 伤组 织诱 导 植 株再 生
１ 材 料 和方 法
１ １ 试验 材料 及处 理 ．
以福 建洋 口国有林 场第 三代 种子 园 当年 收获 的优 良种 子 和成 熟合 子 胚 为外 植 体 ， 子使 用 前 在 ４ 种 ℃
冰箱 中冷藏保存。试验时先将冷藏的成熟种子取出， 自来水中浸泡过夜 ， 在 使其 吸水膨胀 ， 然后用镊子剥 去外种皮 ， 之后用洗洁精水或洗衣粉水浸泡 ２ ｍｎ 流水下冲洗 ２— ｈ ０ ｉ， ４ 。将冲洗好的种子在超净工作 台上 Ａ
杉木（ ｕｎ ｇ ａ ｉ Ｌ ｎｅ ａ ｏｋ ） Ｃ ｎｉ ｈｍａ ａｃｏ ｔ Ｈ ｏ． 生长快、 ｎ ｌａ 木材质量高 ， 成林又迅速 ， 是我国南方地区最重要的商 品 用材 和造林 树 种之 一 。近年 来 ， 木主要 以幼树 或成 年树 的嫩枝 为试验 材料 进行快 繁 研 究ｕＩＪ而有 关 杉 ， ６ 杉木成熟合子胚愈伤组织的诱导及植株再生 的研究 国内外均罕见报道 ¨ 。笔者以杉木成熟合子胚 为 起始外植体 ， 研究了基本培养基 、 植物激素 、 凝固剂种类、 有机附加物等 因素对杉木愈伤组织的诱 导、 愈伤 组织的继代培养及不定芽分化的影响 ， 旨在为杉木工厂化育苗的研究提供参考。
表 ｌ 基本 培 养基对 成 熟合子 胚愈伤 组 织诱导 的 影响
２４一 ， Ｄ浓度的影响 ： 成熟合子胚接种于 １２ Ｓ附加 ２４一 ． １ｍ ／ ／Ｍ ， Ｄ０ ５～ ０ ｇＬ的诱导培养基 ， 该培养基
第五章愈伤组织的诱导、形成及分化
第二节 愈伤组织形态建成
一、 愈伤组织形态建成的方式
愈 伤 组 织 形 态 建 成 方 式 通过产生单极性不定芽或不定 根，在不定芽下方长出不定根 或在不定根上产生不定芽，并 在二者之间分化出维管束组织 而形成完整植株 愈伤组织仅分化出不定根或不 定芽，形成无根苗或无苗根 体细胞胚胎途 径再生植株
裂潜能强，细胞分裂是脱分化形成愈伤组织的前提，因此是诱
导愈伤组织适合的外植体。 不同器官作为外植体所诱导的愈伤组织，其器官发生能力， 有的植物差别不大，如烟草和水稻；而有的则明显不同，如翅 鞘莎，以根、茎和叶为外植体时，愈伤组织的分化带有器官来
源的特征，如根外植体的愈伤组织易分化出根。
Fig.2. Various callus morphology from generative parts in VV024-6 of Alstroemeria
B、继代时间与变异
不同激素组合和浓度对蚕豆愈伤组织细胞倍性及染色 体畸变的影响
注意：
**愈伤组织遗传上的不稳定性因基因型、外植体、培养 基成分 和培养时间而异。 **同基因型的同一种外植体在不同培养基上会产生不同
的变异。
**组织培养中的遗传变异是不可逆的，这种遗传上的改
变可以是染色体畸变，细胞核破碎，或者多倍体以及分
差异是相对的，有时通过控制培养条件，尤其是生长
调节物质和继代的方式可以调控其进行形态建成。
三、Callus诱导、增殖及形态建成调控
不同物种、基因型或外植体在不同培养条件下 可以形成不同类型的愈伤组织，有的仅能诱导 形成非胚性愈伤组织，而有的在适宜条件下则 被诱导形成胚性愈伤组织，二者具有明显的不 同特点。 表4.1 春小麦胚性与非胚性愈伤组织的特点
红豆衫种植方法与药用价值
红豆衫种植方法与药用价值红豆杉又称紫杉，属国家一级保护的珍稀常绿乔木，枝、叶、皮、根可提取昂贵抗癌药物——紫杉醇。
此药全世界年需量4800公斤以上，而实际年生产量只有250公斤左右。
现在，我国北京、上海、辽宁、云南、四川虽然相继建成了紫杉醇的制药厂，但原料很缺乏，急需大力开展红豆杉繁育栽培的研究。
现将我场近几年有关红豆杉种植技术介绍如下：（一）红豆杉的种子繁殖技术。
（1）收集种子：9-10月采收红色果实，搓去红色假种皮和果肉，洗净，混湿沙贮藏。
（2）破损种皮：种子后熟期较长，有休眠特性，在自然条件下需经二冬一夏方可萌发，即冬季置室外冷冻，夏季接受高温、雨淋，翌年秋播，如春播可于入冬后仍留室外土中冷冻，3月下旬至4月上旬移入暖房催芽后播种，播后20多天能出苗。
若能将种子用粗沙用鞋底在粗糙水泥地上进行反复磨擦，磨破其不显眼的坚韧种皮、磨薄其坚硬的种壳（勿磨烂种仁），就能使种子容易透水、透气，播种发芽较快。
（3）变温处理：红豆杉种子有胚根、胚轴双休眠习性，胚根需通过1个月左右25℃以上高温阶段才能打破休眠，胚轴需在零下3℃～零下20℃条件下1个月左右才能解除休眠。
为了提早的加速种子萌发，只要将破损了种皮的红豆杉种子混上湿沙，置零下3℃以下的环境中冷冻25～40天，就可以解除其胚轴休眠，冬末或早春播种后，经过2个月左右遇上25℃以上的气温即能打破胚根休眠，种子就能萌芽出土。
（4）播种育苗：条播，出苗后要遮荫，幼苗怕日灼，荫棚的透光率15%-20%，并要勤除草，15-20天浇1次淡尿素水或清粪水提苗，1年后可露地移栽。
二）红豆杉扦插繁殖技术。
（1）收集插条：在春夏之交的5-6月，从4龄以上的母树上剪取当年生嫩枝作插条.（2）插条处理：剪取长15厘米以上的枝条作插穗，除去下部叶子，将枝条基部环剥出0.5-1厘米的伤口，待伤口周边处有瘤状物形成后，再把枝条从环剥处下部剪下，基端置100ppm吸哚乙酸或苯乙酸中浸泡3小时，或用200ppm ABT2号生根粉溶液浸泡8-10小时。
红豆杉细胞组织培养生产紫杉醇的综述
１ ． 简介 红豆杉又名紫杉 ，是世界公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌 植物 ， 红豆杉 的提取物紫杉醇 ， 因具有独特的抗癌机理 ， 被认为 是人类同癌症抗争的最有利武器。 在全世界共有十一种 ， 目前我 国共有四个种和一个变种 ， 即云南红豆杉 、 西藏红 豆杉 、 东北红 豆杉 、 中国红豆杉和南方红豆杉 （ 变种） 红豆杉产生 的二萜类次 药物， 亢 具有独特的抗癌机理 ， 因此红豆杉倍受关注『 。 ２ ］ 紫杉醇是红豆杉属植物 中的一种复杂的次生代谢产物， 也 是目前所了解 的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管 的药物。同位素示踪表明， 紫杉醇只结合到聚合 的微管 上， 不与 未聚合的微管蛋 白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞 内 积累大量的微管 ， 这些微管的积 累干扰了细胞 的各种功能， 特别 是使细胞分裂停止于有丝分裂期 ， 阻断了细胞的正常分裂 。 通 过 Ⅱ一ⅢＪ 研究， Ｉ 紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌 ， 对肺癌 、 大肠癌 、 黑色素瘤 、 头颈部癌 、 淋巴瘤 、 脑瘤也都有一定疗效 。 解决药源的问题的方法说来应该就两个大方面 ，即人工合 成和生物技术方法 ，也就是化学合成和利用相关生物技术解 决 紫杉醇 的药源 问题。但是 ， 由于紫杉醇化学结构 的复杂眭 ， 这就 意味着紫杉醇的化学合成在经济上是不可行的 ：而且紫杉醇 的 半合成原料 ， 例如从针叶红豆杉所分离得到的巴卡亭 Ⅲ， 也要从 红豆杉属植物中提取获得 【。这样看来 ， ３ 】 人工合成的方法 ， 不论 是全化学合成还是￣４ ＆合成 ， － ｇ 其可行 艮 。 低 从生物技 术角度来看 ， 人们主要从遗传转化 、 人工栽培 、 真 菌生产和植物细胞培养等几个方面尝 试解 决紫杉醇的药源 问 题 ，而其 中的细胞培养因具有众多优点而成为商业化生产 的首
红豆杉简介及栽培方法
红豆杉简介及栽培方法红豆杉又称紫杉.也称赤柏松。
国家一级珍稀保护树种――红豆杉，属浅根植物.其主根不明显、侧根发达。
是世界上公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物。
是第四纪冰川遗留下来的古老树种，在地球上已有250万年的历史。
由于在自然条件下红豆杉生长速度缓慢，再生能力差，所以很长时间以来，世界范围内还没有形成大规摸的红豆杉原料林基地。
由于红豆杉的提取物（TAXOL PACLI TAXEL）紫杉醇具有独特的抗癌机理，美国国立肿瘤研究所所长BRODER博士称紫杉醇是继阿霉素、顺铂以后，十五年来被认为是对多种癌症疗效好、副作用小的新型抗癌药物。
二十世纪八十年代开始，美国、英国、俄罗斯、韩国、中国都相继开展了深入的研究。
美国率先把研究成果应用于医学临床并在治疗各种癌症方面取得了显著的临床效果。
从此人类在抗癌领域中又取得了新的突破。
所以到目前为止以至在今后相当长的时间内，人类同癌症做抗争的的最有利的武器还只能是紫杉醇。
红豆杉除了重要的药用价值以外，其独特的外观造型、四季常青的鲜艳绿色，又是不可多得的绿化树种。
在纽约联合国总部门前；英国的白金汉宫门前；以及美国的白宫广场上都可以看到红豆杉美丽的身姿。
我们希望红豆杉的药用价值不仅能为人类造福，更希望在不久的将来，览龈还蟮暮於股迹芄话丫侔?008年奥运会的北京，装点的更加美丽、更加漂亮。
目前，国内的许多红豆杉种植企业正在开发红豆杉的系列产品。
如红豆杉盆景，可以将其修剪成伞型、塔型、圆型等。
红豆杉保健杯、红豆杉工艺品、红豆杉保健品等。
国家林业局曾对目前开展的"红豆杉工程"做出过明确的批示："红豆杉为我国一级保护树种，兼有很好的生态效益和极高的经济价值，国家支持在适当范围大力营造红豆杉林，社会各界以承包、租赁、拍卖、股份合作等多种形式参与造林绿化事业应予以提倡和鼓励”我国的红豆杉资源和世界上其它国家相比虽占一半以上，但从世界上的紫杉醇的需求量来看，还是远远不够的。
喜马拉雅红豆杉愈伤组织的诱导
喜马拉雅红豆杉愈伤组织的诱导卓嘎;杨小林;辛福梅;扎桑;陈向珍【期刊名称】《西部林业科学》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】Using young leaf, stems and root of Taxus wallichianga Zucc.as material, the effects of different ex-plants, basic medium, plant growth regulators, antioxidants, and culture conditions on callus induction were studied .The results showed that the callus induction rate of young leaves was higher than that of the young stems and roots and the callus volume was bigger than that of others.The basic medium of MS, 1/2 MS, B5 and WPM all could produce callus induction.Among them, the induction effect of MS medium was the best, significantly higher than other basic medium.When adding 1 mg/L 6-BA and 0.5 mg/L 2, 4-D on MS medium, induction rate reached 93.6 %, and the callus growth is most productive .When adding 1 mg/L Vc to MS basal medium, the browning phenomenon has been greatly inhibited and callus growth wasbetter .Dark culture conditions is good for callus induction and it could induct qualified callus.%采用喜马拉雅红豆杉的幼叶、幼嫩茎段、幼根为材料，比较不同外植体、基本培养基、植物生长调节剂的配比、抗氧化剂以及培养条件对愈伤组织诱导的影响。
愈伤组织的诱导形成及分化
第五章 愈伤组织的诱导、形成及分化第一节 愈伤组织的诱导、形成及特点一、愈伤组织的诱导和形成愈伤组织是在离体培养条件下，经植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的组织。
经一段时间的生长和增殖以后，在其内部出现一定程度的分化，产生出一些具有分生组织结构的细胞团、色素细胞或管状分子。
植物外植体在培养基和外界环境的作用下，经过一个复杂的过程形成愈伤组织，即： 外植体＋培养基＋环境愈伤组织愈伤组织的形成一般可分为三个时期：诱导期、细胞分裂期和细胞分化期（见图4.1）。
图4.1 愈伤组织的形成特点1. 诱导期愈伤组织诱导期又称启动期，是指外植体组织受外界条件刺激后，开始改变原来的分裂方向和代谢方式，合成代谢活动加强，大量合成蛋白质和核酸物质，为细胞分裂做准备。
诱导期的长短因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异，即使是同一种物种不同基因型同一外植体的愈伤组织，其诱导期也不同。
有的植物愈伤组织诱导期只有1天（菊芋），而有的植物诱导期需要数天（胡萝卜）。
刚收获的菊芋块茎的诱导期仅22 h ，但经贮藏5个月后，诱导期延长为2天。
2. 分裂期外植体在培养基上经过离体诱导后，外层细胞开始发生分裂，细胞脱分化。
愈伤组织的细胞分裂快，结构疏松，缺少组织结构，颜色浅而透明（见图4.2）。
分裂期的细胞分裂局限在愈伤组织的外缘，主要是垂周分裂。
小麦幼胚 分裂期 分裂期分化期 分化期图4.2 小麦幼胚愈伤组织诱导分裂期与分化期（东北农业大学小麦研究室，李文雄，曾寒冰，胡尚连等，1994）愈伤组织进入分裂期时，外植体的脱分化因植物种类、基因型、外植体种类和生理状况而有很大差异。
烟草、胡萝卜等的脱分化很容易，而禾谷类则较难；花器官脱分化较易，茎叶较难；幼茎组织脱分化较易，而成熟的老组织较难。
进入分裂期的愈伤组织，如仍在原来的培养基上继续培养，某些愈伤组织将不可避免地发生分化，产生新的结构，但将其及时转移到新鲜的培养基上（继代培养），则愈伤组织可无限制地进行细胞分裂增殖，维持不分化的状态。