亚临界水提取
亚临界水萃取板栗多糖及其清除自由基活性
*通讯作者 收稿日期：2012-05-06 基金项目：国家自然科学基金项目(309700309)；国家博士后基金项目(20100471379)；江苏省高校自然基金项目(05KJB550011)；江苏大学人 才基金项目(05JDG013，128300289)；江苏高校优势学科建设工程项目。 作者简介：邵亭亭(1986—)，女，山东济宁人，硕士研究生，研究方向为药食同源植物活性成分提取分离新技术研究。
Abstract: The present study was carried out to investigate the extraction and free radical scavenging capacity of polysaccharides from chestnut by subcritical water. In order to optimize the extracting parameters of subcritical water extraction, single factor and orthogonal experiment were conducted by taking polysaccharide yield as index. The results were as follows: the yield of chestnut polysaccharide was 14.89% at 5.0 MPa, 150 ℃ for 10 min with the liquid solid ratio of 20 mL/g, which was much higher than that hot water extraction (9.63%). Compared with traditional extraction method, subcritical water extracting polysaccharide from chestnut has obvious advantage in saving time and extraction ratio. Both of these two kinds of polysaccharides from subcritical water and hot water extraction had the scavenging activities to DPPH, hydroxyl and superoxide anion free radicals within a certain range of concentration, and the effect of the former was stronger than that of the latter. Key words: chestnut; polysaccharide; subcritical water; extraction; free radical scavenging
水的亚临界状态
水的亚临界状态
水的亚临界状态是指在一定的温度和压力条件下，水存在的流体状态。
根据物质的相图，在其临界点（对于水来说是374.4°C及22.1MPa）以下，随着温度升高至沸点以上但低于临界温度时，如果同时保持压力低于其相应的临界压力，水会处于一种既不是严格意义上的液体也不是气体的状态，而是一种液态与气态特征相互交融的流体状态。
在这个状态下，水的分子间作用力、氢键结构以及溶解能力等物理化学性质会发生显著变化，比如极性减弱、黏度降低、扩散系数增大，这使得亚临界水能够更有效地溶解某些在常温常压下难以溶解的有机物或无机物，因此在工业上，亚临界水萃取技术被广泛应用，如食品加工、环境保护、生物质能源等领域。
黄芩苷的色谱分析
黄芩中黄芩苷亚临界水提取及姜黄超临界提取物高效液相分析Study on SBWE of Baicalin from Radix Scutellariae and Identification of Curcuminoids in Supercritical CO2 Extract from from Curcuma longa L. by HPLC Analysis黄芩中黄芩苷亚临界水提取及姜黄超临界提取物高效液相分析摘要建立了黄芩药材中黄芩苷的亚临界水提取-高效液相色谱测定方法。
分别考察了温度、压力、提取时间、提取物颗粒度、溶剂比等因素对提取量的影响，并与有机溶剂提取法比较。
结果表明，当两者具有相同的提取效果时，亚临界水提取法的提取时间及提取溶剂的消耗量大大减少，避免了使用有机溶剂造成的污染。
并通过提取-高效液相色谱联机分析实现了对提取物的实时监测。
该技术有望成为从中药材中提取脂溶性成分的有效方法。
用液相色谱-质谱和紫外-可见光谱对姜黄超临界提取物中的3种主要成分进行了定性分析，用高效液相色谱进行了定量分析。
结果表明超临界CO2萃取的姜黄提取物中含对二脱甲氧基姜黄素、脱甲氧基姜黄素和姜黄素，姜黄提取物中的总姜黄素含量约为90%。
关键词：亚临界水提取，高效液相色谱，黄芩苷，姜黄，高效液相色谱-质谱Study on SBWE of Baicalin from Radix Scutellariae and Identification of Curcuminoids in Supercritical CO2 Extract from from Curcuma longa L. by HPLCAnalysisAbstractA method for the extraction of baicalin from Radix Scutellariae with subcritical water coupled to HPLC analysis was established. The effects of various parameters, which included the pressure, temperature, extraction time, and the particle size of the plant material as well as the solvent/ sample ratio on the yield were investigated. Compared to the conventional organic solvent extraction method, the subcritical water extraction method showed shorter handling time and lower solvent consumption without waste producing. This technique seems very promising for the extraction of liposoluble substances from plant materials.HPLC-MS, UV- VIS adsorption spectrum and HPLC- MS were employed to analyze the supercriticalCO2 extract of Curcuma longa L. Experimental results showed that curcumin, desmethoxycurcumin and bismethoxycurcumin were contained in the supercritical CO2 extract of Curcuma longa L. More than 90% of total curcuminoids was identified in the supercritical CO2 extract of Curcuma longa L.Key words：SBWE,HPLC,baicalin,Curcuma longa L.,HPLC- MS前言近年来超临界流体萃取(supercritical fluid extraction,SFE)技术又逐渐引起人们的重视，该技术大都采用超临界的CO2作为萃取剂，主要是因为CO2的低毒性及对环境无污染。
黄芩中4种黄酮类化合物的亚临界水提取研究
关键 词 ： 亚 临界水 ； 黄芩 ； 黄芩 苷 ； 汉黄芩 苷 ； 黄芩 素 ； 汉黄 芩素
中 图分 类号 ： ０ ６ ４ ３ ． ５ 文献 标识 码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ２ ４０ ２ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ － ０ ０ １ １ ４ ） ４
Ｓｕ ｂ ｃ ｒ ｉ ｔ ｉ ｃ ａ １ ｗａ ｔ ｅｒ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｆ ｏ ｕ ｒ ｆ ｌ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ ｆ ｒ Ｏ ｍ
摘要 ： 建 立 了黄芩 药材 中 ４种黄 酮类 化合 物（ 黄 芩苷 、 汉黄芩 苷 、 黄芩 素 、 汉黄芩 素 ） 的亚 临界 水提 取 测定方 法 。分 别考察 了温度 、 时 间、 水量对提 取 量的影 响 ， 并与 有机 溶剂 甲醇提取 法进 行 比较 。结果表 明 ， 在１ ６ ０ ｏ Ｃ， ６ ０ ｍ ｉ ｎ时黄芩 素 、 汉黄芩
２ ． Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｚｉ ｂ ｏ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｆ ｕ ｎ ｄ Ａ ｄ ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ，Ｚ ｉ ｂ ｏ ２ ５ ５ ０ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ）
Ｓｃ ｕ ｔ ｅ Ｉ ｌ ａ ｒ ｉ ａ ｂ ａ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｎ ｓ ｅ ｓ
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中药 与天 然活性 产物 专栏
黄芩 中 ４种黄 酮类 化合 物 的亚 临界水 提取研 究
枸杞多糖的不同提取分离方法比较
枸杞多糖的不同提取分离方法比较2.1 枸杞多糖的提取方法2.1.1 溶剂提取法因为多糖在水溶液中的溶解度较高，所以可以用水、酸、碱等极性溶剂或者甲醇、乙醇等质子型溶剂溶解。
研究证明了碱性条件下会通过破坏植物细胞壁及细胞膜，从而增加了细胞内多糖的溶出度，以此枸杞多糖的提取量就提高了。
但是酸碱提取法并不常使用，原因是其法会破坏糖苷键，使多糖的构型发生改变等，并且提取过程提取的物质在酸碱条件下，会发生特殊反应，产生干扰最终结果的副反应产物，提取后液体需要中和PH，其后期处理较为繁琐[3]，所以在溶剂提取法中最适宜和应用最广泛的是热水提取法，热水有成本低、来源广等优势，所以作为最优的溶媒介质。
下文的溶剂提取法主要探究热水提取法的有关事项。
热水提取法因为其简单的操作和实验设备简易的优点，是国内外提取多糖最常用的方法，但提取效率和纯度偏低。
在这个方法中，研究表明提取温度是影响提取率的最大因素，其中影响程度大小排列为提取温度>提取时间>提取次数>料液比[4]，根据查阅资料整理如下探究不同条件下热水回流法对提取率的影响，从而发现热水回流法提取枸杞多糖最适条件为下文序号1的条件。
详见表2-1。
表2-1 热水回流法提取枸杞中多糖的提取参数对比分分析图序号提取方法优化方法提取参数提取率/％10.33[5]1热水回流法单因素，正交温度为90℃，时间为2.5h，料液比为1：25，提取3次5.4[6]2热水回流法正交实验PH为1.5，温度为80℃，提取1.5h，提取2次，料液比为1：605.53[7]3热水回流法单因素，正交温度100℃，浸提4次，时间5h，料液比1：404热水回流法提取两次，每次3h 5.17[8]3.04[9]5热水回流法提取温度为80℃，提取时间为2h 6热水回流法单因素，正交提取温度为90℃，2.96[10]提取时间为4h，料液比为1：10，提取3次2.1.2 酶解提取法酶解法提取是在溶剂提取法之上加入合适的酶，利用酶的高度专一和高效的特点，分解或降解组成细胞壁的纤维素，果胶，蛋白质等物质，破坏枸杞细胞的细胞壁，这样，细胞里的多糖就会被释放，这样多糖提取量也就得到了增加，提取率也会升高。
灵芝三萜的提取工艺及其抗氧化研究进展
具有优秀的保肝活性。
物有显著的抑制 HIV-1 蛋白酶活性的作用。在抗 HIV
病毒的作用中，灵芝三萜类化合物的作用主要在于通过
抑制 HIV 病毒吸附宿主细胞或膜的融合，同时还抑制
HIV-1 反转录酶、HIV-1 蛋白酶等生物成分[6]。
分的研究已十分广泛，其中对于灵芝三萜的药理研究最
1.4 调节血脂作用
的灵芝三萜与羟自由基反应，加入结晶紫后测定溶液的
吸光度，以检测灵芝三萜的抗氧化性。显而易见，反应
介电常数，从而改变水的极性。在亚临界下离子水合、
后溶液吸光度越大，
抗氧化剂的抗氧化性就越强[14]。
离子缔合等微观结构发生特殊变化。此外，亚临界水还
可以充当酸碱催化剂或反应物，在一定条件下，还可以
3.3 超氧阴离子自由基的清除作用
种多孔菌科真菌灵芝的子实体。在上古时期，灵芝被称
具有补气安神、止咳平喘的功效，可用于治疗失眠心悸、
心神不宁[1]，其用药部位为子实体。灵芝含有萜类化合
物等有效成分。本文论述了灵芝三萜的提取工艺及抗
氧化特性，
以期为产业化生产和药理研究提供帮助。
1 灵芝三萜的药理作用
自二十世纪 80 年代以来，人们对于灵芝脂溶性成
超氧阴离子在人体内有一定数量存在，不发生化学
参与大分子生物聚合物的降解及其他反应产物的提
变化且对人体无害，但与羟基（-OH）结合后的产物会导
取。相对于传统的有机溶剂提取法，亚临界水提取具有
同时还能
通过抑制细胞周期以及诱导癌细胞凋亡等抑制癌细胞
在体内扩散。灵芝三萜结构的复杂性导致不同的三萜
类物质对于癌细胞的作用机制也不同，如子实体中提取
纯化的中性三萜对多种肿瘤细胞具有活性抑制作用，而
亚临界水萃取技术在食品工业中的应用
明： 添加 胶基 ４ ％ ， ５ 山梨糖 醇 ４ ％， 氢 ｐ 酸 ０４ ％ ， ０ 六 一 ． ｏ生产 ５ Ｊｕｎ ｌｏ ｈｊ ｎ ｎｖｒｉ ， ６ ｏｒ ａ ｆＺ ｅｉ ｇ Ｕ ｉｅｓｙ１（ ａ ｔ ）：７ ９ ７ ２，２ ０ ． ６ －７ ０５ 出来 的啤酒 花 口香 糖 口感 好 ， 味硬度适 中 ， 香 咀嚼性好 。 ［］ ａ Ｙ （ ３Ｍ Ｈ 马永 花） ｉｏ Ｘ 肖小 年） ｉＸ（ 醒）ｅ ａ ， ａ Ｎ（ Ｘ ， 易 Ｙ ，ｔ １ ．
Ａｂｓｒ ｃ ： Ｔ ｓ ａ ｒ ｖ ｒ ｉ ｗｅ ｔ ｅ ｍｐ ｃ ｅ ｏ ｅ ｔａ ｔｏ ｔｍｐ ｒ ｔ ｒ ， ｅ ｔａ ｔｏ ｐ ｅ ｓ ｅ ｅ ｔａ ｔｏ ｔａ ｔ ｈｉ ｐ ｐｅ ｏ ｅ ｖ ｅ ｓ ｈ ｉ ａ ｋ ｓ ｆ ｘ ｒ ｃ ｉｎ ｅ ｅ ａ ｕ ｅ ｘｒ ｃｉ ｎ ｒ ｓｕｒ ， ｘ ｒ ｃ ｉｎ
ｐ ｅ ｐ ｏ ｅ ｓ ｆ ａ ｒｃ ｌ ｒ ｌ ｒ ｓｄ ｅ ｅ ｅ ｔ ｄ ｌ ｎ ｉ ｅ ｔ ｃｉ ｎ ｉ ａ ｌ，ｐ ｏ ｐ ｃ ｔ ｐ ｌ ａ ｉ ｎ ｉ ｈ ｒ － ｒ ｃ ｓ ｍ ｏ ｇ ｉ ｕ ｔ ａ ｅ ｉ ｕ ｓ ｄ ｔ ｃｅ ，ｐ ａ ｔ ｏ ｌ ｘｒ ｔ ．Ｆ ｎ ｌ ’ｇ ｕ ａ ｏ ｙ ｒ ｓ ｅ ｔ ｉ ａ ｐｉ ｔ ｎ ｔｅ ｓ ｃ ｏ
０ 前言 ：
对有 机 物 的溶解 能力 大 大增 强 。
亚 临 界水 （ｕ － ｒ ｉａ ｗ ｔ ，ｓ ｗ）也 称 之为 高 温 １ 亚 临界 水萃 取原 理 ： Ｓ ｂ ｃ ｔ ｌ ａｅ ｃ ｉ ｃ ｒ
水 、 加热 水 、 超 高压 热 水或 热液 态 水 ， 是指 在 一定 压 力 下 ，
水 是对 环 境无 害 的萃 取剂 ，常 温 常压 下水 是 极性 很
草本植物生物活性成分提取技术研究考核试卷
B.提取温度过高
C.溶剂选择不当
D.空气接触
19.以下哪些方法可以用于提取液中的固体颗粒去除？（）
A.滤纸过滤
B.离心
C.超滤
D.沉淀
20.以下哪些生物活性成分通常用于药物研发？（）
A.抗肿瘤成分
B.抗炎成分
C.抗病毒成分
D.抗生素类成分
三、填空题（本题共10小题，每小题2分，共20分，请将正确答案填到题目空白处）
1.下列哪种溶剂常用于草本植物的生物活性成分提取？（）
A.水
B.煤油
C.稀盐酸
D.液态氮
2.超临界流体提取技术中常用的超临界流体是？（）
A.二氧化碳
B.水
C.氮气
D.氧气
3.下列哪种方法不属于草本植物生物活性成分的提取方法？（）
A.蒸馏法
B.超声波提取法
C.火焰原子吸收光谱法
D.酶解法
4.在超声波提取法中，超声波的主要作用是？（）
草本植物生物活性成分提取技术研究考核试卷
考生姓名：________________答题日期：________________得分：_________________判卷人：_________________
一、单项选择题（本题共20小题，每小题1分，共20分，在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
3. ×
4. ×
5. √
6. ×
7. ×
8. ×
9. √
10. √
五、主观题（参考）
1.超临界流体提取法利用超临界流体的特殊物理性质，如低粘度和高扩散性，以较低的温度和压力提取生物活性成分，避免热敏感成分的降解，具有提取效率高、无溶剂残留、对环境友好等优点。