三种小鼠骨质疏松模型骨组织形态计量学观察与评价
补肾壮骨液对骨质疏松模型大鼠血清OPG、RANKL蛋白表达的影响
补肾壮骨液对骨质疏松模型大鼠血清OPG、RANKL蛋白表达的影响徐强;冯小玲;白巍;郭宏伟【期刊名称】《中医药信息》【年(卷),期】2009(026)004【摘要】目的:观察补肾壮骨液(BGY)对骨质疏松(POP)模型大鼠骨形态计量学变化及血清OPG、RANKL表达的影响.方法:采用去势法建立大鼠POP动物模型,BGY 三个剂量组和阳性对照组分别给予BGY和rhIGF-1.3个月后,采用图象分析系统进行骨形态计量学分析,ELISA法分别测定大鼠血清OPG、RANKL.结果:BGY高、中剂量组骨形态计量值与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);BGY三个剂量组、阳性对照组及模型组的血清OPG和RANKL均较正常组升高,而BGY三个剂量组、阳性对照组测得较高的OPG和RANKL值,较之模型组有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:BGY可通过上调OPG,下调RANKL的表达,影响OPG/RANKL/RANK 系统,使其骨量增加,骨结构改善,从而起到防治POP的作用.【总页数】2页(P80-81)【作者】徐强;冯小玲;白巍;郭宏伟【作者单位】黑龙江中医药大学;黑龙江中医药大学;哈尔滨市红十字中心医院;黑龙江中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.补肾活血颗粒对骨质疏松大鼠骨组织中OPG／RANKL mRNA及蛋白表达的影响 [J], 芮丹云;唐丽媛;陈洁;邹天南2.续苓健骨方对骨质疏松模型大鼠骨密度及OPG和RANKL蛋白表达的影响 [J], 葛继荣;李生强;陈娟;谢丽华;许惠娟;马海珍3.黄精多糖对去卵巢大鼠骨质疏松模型中OPG和RANKL蛋白表达的影响 [J], 严芳娜;曾高峰;宗少晖;彭小明;吴平平;张磊;何基琛;韦诚明;施雄智4.骨灵片对骨质疏松大鼠血清OPG/RANKL、PICP和相关细胞因子的影响 [J], 曹艳艳;李娟;杨春莉;黄少慧;吴湘慧;赵毅5.补肾健骨汤对类风湿关节炎继发骨质疏松患者外周血RANKL/OPG的影响 [J], 汪剑华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【国家自然科学基金】_骨质疏松模型_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
科研热词 推荐指数 骨质疏松 16 骨密度 11 大鼠 5 骨质疏松症 4 骨生物力学 3 生物力学 3 成骨细胞 3 小鼠 3 骨形态计量学 2 肾虚 2 糖尿病 2 破骨细胞 2 模型 2 椎体骨折 2 护骨素 2 抗氧化剂 2 实验研究 2 去势大鼠 2 共培养 2 高脂 1 骨骼 1 骨质量 1 骨质疏松,绝经后 1 骨科 1 骨矿物质 1 骨疏丹 1 骨灵片 1 骨形态发生蛋白-2 1 骨强度、骨组织形态计量学 1 骨同化作用 1 骨保护索 1 骨保护素配体 1 骨保护素 1 骨代谢平衡 1 雌二醇 1 阈值 1 钙沉积 1 钙 1 针刺 1 转基因小鼠 1 转化生长因子β 1 表观吸收率 1 补钙制剂 1 补肾方药 1 补肾中药/药理学 1 血管钙化 1 脉冲电磁场 1 脂肪乳剂 1 肾细胞 1 肾上腺功能低下性骨质疏松 1 股骨 1 肌形态学 1
老年性骨质疏松 羟脯氨酸 羊 维甲酸 维生素d 组织构建 磷 磨损颗粒 磁场强度 碱性调宁蛋白 番茄红素 生物利用率 环磷酰胺 玉米黄质 油茶 椎体成形术 杜仲叶活性部位ⅰ 有限元分析 有限元 显微ct 旋转中心 护骨素配体 抗骨松颗粒 快速老化小鼠samp6 快速老化小鼠p6 微结构 归经 强的松龙 应力,物理 左心室 山茶 复方丹参合剂 基因敲除 同位素技术 双丹口服液 原发性骨质疏松症 动脉粥样硬化 动物模型 前弯力矩 净钙吸收率 依那西普 体层摄影术,x线计算机 低频脉冲电磁场 人甲状旁腺素相关蛋白 人工关节 中药 β -隐黄质 smad泛素调节因子2 smad6 d-半乳半糖 bmp-4 41ca
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
骨质疏松常见模型
骨质疏松常见模型1.概念:骨质疏松症就是一种以骨量降低、骨微细结构破坏、骨强度下降,导致骨脆性增加,易发生骨折(骨折风险性增加)为特征得全身性骨骼疾病、2.临床表现:腰背部疼痛,体长缩短,驼背及发生骨折。
3.按严重程度分:骨质疏松得发生程度包括低骨量、骨质疏松症与骨质疏松性骨折。
依次程度增加。
4.现代医学将骨质疏松症分为原发性、继发性、特发性骨质疏松症三大类。
原发性骨质疏松症(ｐｒimaｒy ｏstｅoporｏｓis,PＯP),因年龄所致得体内性激素突然减少及生理性退行性改变所致。
分为Ⅰ型绝经后骨质疏松症(ｐoｓtｍenopausaｌｏｓteoporosiｓ,POMP)与Ⅱ型老年性骨质疏松症。
继发性骨质疏松症,由疾病或药物因素诱发,疾病如内分泌代谢病(糖尿病、甲状腺功能亢进症)、肾脏疾病、肝脏疾病等,药物诱发如长期大剂量得肝素、免疫抑制剂、抗癫痫病药、糖皮质激素得应用。
而特发性骨质疏松症,一般伴有遗传疾病史,女性多见,妇女哺乳期与妊娠期得骨质疏松症往往也列为此类现代医学得研究1.发病机制:主要机制就是因为衰老、体内性激素减少、药物与某些疾病等因素导致骨吸收与骨形成平衡失调,骨矿物质与有机质等比例丢失,导致骨量减少与骨质疏松,进而引发骨折,为全身性代谢性骨病。
总得来说,就是由遗传、激素、营养、失用、年龄、生活习惯及免疫学等方面多种因素交互影响得结果。
2.诊断与治疗:①诊断:依靠临床表现、骨量得测定、骨密度(boｎe mineｒａｌdeｎsity,BMD)及骨转化生化指标等,其中以骨量测定最为重要。
临床上采用采用BMD测量作为诊断、与测量骨质疏松症骨折风险、监测自然病程以及评价药物干预疗效得最佳定量指标。
临床上测量BMＤ得方法有双能Ｘ线吸收测定法(DXA)、外周双能X线吸收测定法(pDXA)、定量计算机断层照相术(QCT)及定量骨超声(QUS)等,其中DＸA测量值就是目前国际学术界公认得临床骨质疏松症诊断得“金标准”。
十一酸睾酮对雄性大鼠骨质疏松骨代谢及骨组织形态计量学的影响
・
９ ３・ ２
第２ ０卷
第 ９期
医 学 研 究 生 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｄ ｃ ｌＰ ｓｇ ａ ｕ ｔｓ ｏ ｒ ａ ｆＭｅ ｉａ ｏ ｔｒ ｄ ａｅ
・
Ｖｏ ． ０ Ｎｏ ９ １２ ． Ｓ ｐ． ０ ｅ ２ ０７
２０ ０ ７年 ９月
ｌ ｅ ｅｍｏ ｅ ａ ｈ ｓ ｎｔｅｎ ｒ ｌ ｏ ｔ ｌ（ ０ ０ ） Ｔ ｅｒｓｌ ｏ ｏ ｅｈｓ ｍ ｒｈｍｅ ｙ ｏ ｒｉ ｔ ｄｌ ｔ ｎｔｏｅｉ ｈ ｏｍａ ｃ ｎｒ ｓ Ｐ＜ ． ５ ． ｈ ｅｕｔ ｆｂ ｎ ｉｏ ｏ ｏ ｔ ｗ ｎｈ ｓｈ ｏ ｔ ｐ ｒ
０ ０ ） 全身及 股 骨 中点骨 密度 也显 著下 降 （ ．１ ， Ｐ＜０ ０ ） ２ 羟脯 氨酸 、 ． ５ ，４ｈ尿 尿钙 、 尿磷 与肌 酐 比值显 著 增高 （ Ｐ＜ ００ ） ． １ 。有关 骨组织 形态计量学 的指标一骨 小梁体积与骨小梁平 均厚度 均显著下 降 （ Ｐ＜０ ０ ） 骨表 面面积／ 积 ．１ ， 体
（ ｅａｔ ｅｔｆＥ ｄ ｃ ｎｌ ｙ ｔｅ ｆ ｌ ｔ ｒｍ Ｔｗ ｒ ｏ ｉ ｌ Ｍｅ ｉ ｌ ｏ ｅｅ Ｎ ｎｉ ｎｖｒ ｔ， Ｄ ｐ ｒ ｎ ｎ ｏｒ ｏｏ ， ｆ ｉ ｅ Ｄ ｕ ｏ ｅ ｓ ｔ ｍ ｏ ｉ ｇ ｈＡ ａｄ ｉ Ｈ ｐ ａ ｏ ｄ ａ ｌｇ ， ａｊ ｇ Ｕ ｉ ｓｙ ｆ ｃ Ｃｌ ｎ ｅｉ
Ｔｈ ｒｙ． ． ｅ ．ｌ ｌ ｐ ｇ ｅ． ｗｌ ｙ ｒ ｔ ｄ ｒ ｎ ｒ ｈ ｄ ｃ ｏ ｎｄ ｔ ｅ ｒ ａ ｄ ｍｌ ｖ ｄ ｄ ｉｔ ．ｗｏ １ ｗｅ ｋ． ｄ ｍａ ｅ Ｓ ａ ｕ ． ｔ ５． ｏ Ｄａ ｅ ａｓｕｎ ｅ ｗｅ ｔｏ ｃ ｉ ｅ ｔｍｙ ａ ｈ ｎ ｗｅ ｅ ｒ ｎ ｏ ｙ ｄｉｉ ｅ ｉ ｔ ｒ ｕ ：ａ ｎ ｒ ｌｃ ｎ ｒｌ ｎ ｏ ３ ｇ ｏ ｐｓ ｏ ｍａ ｏ ｔｏｓ，ａ ｍｏ ｅ ｎ ｎ ｒｏ ｒａ ｅ ｒ ｕ ｄ ｌａ ｄ ａ ａ ｄ ｉｌｔｅ ｔ ｄ ｇ ｏ ｐ．Ｂｉｃ ｅ ｃ ｌｍａ ｋ ｒ ｏ ｈ ｍｉａ ｒ ｅ ｓ，ｂ ｎ ｅ ｓ－ ｏ ｅ ｄ ｎ ｉ
骨质疏松症动物模型的制作与评价
骨质疏松症动物模型的制作与评价付小卫;宋长恒;刘梅洁;于峥;赵宏艳;张治国;张方珍;李岳泽【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2014(020)010【总页数】3页(P1338-1340)【关键词】中医药;骨质疏松症;实验研究;动物模型【作者】付小卫;宋长恒;刘梅洁;于峥;赵宏艳;张治国;张方珍;李岳泽【作者单位】陕西中医学院第二临床医学院,陕西咸阳 712046;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700【正文语种】中文【中图分类】R332骨质疏松症(Osteoporosis，OP)是以骨量减少或(和)骨组织微结构破坏为特征的全身性骨骼疾病，表现为骨强度下降、骨脆性增加，从而极易发生骨折。
骨质疏松症及由其引起的骨折等并发症，对中老年人尤其是绝经后妇女的身体健康和生存质量构成了严重威胁，并极大地增加了社会和家庭的经济和生活负担。
近20多年来，中医药工作者在大量临床实践经验的基础上，开展了广泛的防治骨质疏松症的实验研究工作，取得了较大的研究成果。
本文简述中医药科研中各种骨质疏松症动物模型的制作方法并进行评价。
1 去势法去势法分为雌性去卵巢法和雄性去睾丸法。
1.1 去卵巢法此法是20世纪60年代末由Saville利用实验大鼠首次建立的［1］，目前已成为研究绝经后骨质疏松症的经典模型之一。
大鼠双侧卵巢切除后的骨丢失，与妇女绝经或卵巢切除后的骨丢失极为相似，都是由于体内雌激素水平迅速降低，使其对成骨细胞的促成熟功能和对破骨细胞的抑制功能减弱，使骨代谢呈现负平衡，即骨吸收和骨形成都明显增加，但骨吸收功能大于骨形成功能，以骨丢失为主，进而启动了骨的合成，属高转换型骨质疏松。
三种养骨组方对骨质疏松症的防治作用实验研究
中药与临床尸//orwac少C//"/cs q,C77/•狀此A/W eW fl 2019; 10(3/4)•17 ••药理毒理•三种养骨组方对骨质疏松症的防治作用实验研究管志美、易延逵2，杨灿3[摘要]目的：研究三种不同养骨组方对去卵巢骨质疏松症大鼠模型的影响，为养骨方选择最佳组方配比。
方法：通过手术摘除大鼠双侧卵巢.建立骨质孩■松动物模型，模型成功后分别给予三种不同养骨组方（养骨A方、养骨B方、养骨C方）干预，给药90 d后取材，剥离大鼠右侧股骨称重后测量股骨中心骨密度、远心端骨密度以及测定骨钙含量。
结果：与假手术组比较，模型对照组大鼠骨密度及骨钙含量均显著降低（P<0.01);与模型对照组比较，养骨B组、养骨C组大鼠骨密度及骨钙含量均显著升高（P<0.05或P<0.01),其中养骨C方优于养骨B方。
结论：三种养骨方均能使骨钙丢失减少，骨钙乘枳增多而达到治疗骨质兢松症的目的，其中养骨C方为最佳养骨方。
[关键词]骨质疏松症；养骨方；骨质疏松大鼠模型[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A[文章编号]丨674-926乂(2〇丨9)〇3/〇4-0〇6-〇3Experimental study on the preventive and therapeutic effects of three bone-nourishing prescriptions on osteoporosis/ GUAN Zhi-mei', YI Yan-kui , YANG Chari //(l.Hunan Drug Evaluation and Certification and Adverse Reaction Monitoring Center, Changsha 410000, Hunan; 2. School of Traditional Chinese Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong; 3. Hunan Chunguang Jiuhui Modern Chinese Medicine Co., Ltd., Liuyang 410331, Hunan)|Abstract] Objective: To study the effects of three different prescriptions for nourishing bone on ovariectomized osteoporosis rat model, and to select the best prescription for nourishing bone prescription. Method: Bilateral ovaries of rats were removed and osteoporosis animal models were established. After successful operation, three different bone-nourishing formulas (A, B and C) were given to intervene. After 90 days of administration, samples were taken. Bone mineral density (BMD) in the centerof femur, BMD of distal end of femur and bone calcium content were measured after weighing the right femur of rats. Result: Compared with the sham-operated group, the BMD and bone calcium content in the model control group were significantly decreased (P < 0.01). Compared with the model control group, the bone mineral density and calcium content of rats in group B and C were significantly increased (P < 0.05 or P < 0.01), and the formula C had a better effect than the formula B. Conclusion:All three prescriptions can reduce the loss of bone calcium and increase the product of bone calcium to achieve the goal of treating osteoporosis. Among them, formulas C is the best prescription for nourishing bone.[Key words) Osteoporosis; prescriptions for nourishing bone; osteoporosis rat model养骨方主要由D-氨基葡萄糖酸盐、硫酸软骨素 钠、碳酸钙及巴戟天提取物构成，文献报道上述物 质均能通过不同的环节参与骨代谢的过程[1~3]，在治 疗和预防骨质疏松方面均具有积极的意义，但是单 独使用其临床疗效均不显著，配伍使用或能协同增[作者单位]1.湖南省药品审评认证与不良反应监测中心，湖 南长沙410000; 2.南方医科大学中医药学院，广东广州510515; 3.湖南春光九汇现代中药有限公司，湖南浏阳410331[作者简介]管志美，男，副主任药师，药理学专业，主要从 事药品评审工作Tel**************Email:****************[通讯作者]杨灿，女，助理工程师，主要从事于药品研究、药品生产等工作Tel:135****2940Email:****************[收稿日期]2019-07-21效，故本实验旨在通过观察三种不同组方的养骨方 对实验性骨质疏松症大鼠鼠骨密度及骨钙含量的影 响，筛选出最佳组方配伍。
中药对实验性骨质疏松大鼠骨骼影响的形态计量学研究
取样。在处死大 鼠前 １天进行第 １ ５ 次荧 光标 记 ， 盐酸 四环 素 每天 ３ ｍ ・ｓ， ２ ０ ｇｋ 分 次灌 胃， ２ ， 连续 天 处死大 鼠前 ３ 进行 天，
第 ２次标记 ， 方法 同前 。
２３ 骨标本 的制备 ． 将留取的股骨标本 用砂 纸磨成 ３Ⅱｎ Ⅱ 厚
２４ 骨 计 量 学 参 数 的测 量 和 计 算 【 ４ 骨 小 梁 体 积 比 ． ２） －
（ Ｂ ％ ）骨小梁体积 占被测骨髓腔总体 积的百分 比 ， ＴＶ ： 是骨量 水平 的主要标 志 ； 活性成 骨表面百分 比（ Ｏ ％）具有 成骨细 ＡＳ ：
胞活性 的骨表面百分比 ， 表示骨的成骨 活性 大小 ； 吸收表面 骨 百分 比（ Ｂ ％）有破骨细胞 活性 的骨表 面百分 比 ， 示骨 的 ＲＳ ： 表 吸收活性 大小 ； 骨小 粱类骨质表 面百 分 比（ Ｏ ％）骨 小梁类 ＴＳ ：
每克颗粒剂含 生药 Ｏ ７ 。苯 甲酸雌二 醇 （ 海通用 药业股 ．５ｇ 上 份有 限公 司生产 ） 。盐 酸四环素（ 华北制药天星有 限公 司） 。 １３ 仪 器及 试 剂 硬 质 切 片机 （ ． 德 国 ） 荧光 显 微镜 ， （ Ⅸ０ １本 ）图像处理系统（衄 ＰｏＰｕ 美 国） Ｎ Ｎ， ３ ， Ｉ ｒ ｌ ｓ 。乙醇 、 丙 酮 、 甲基丙烯酸 甲酯 、 酸银 、 聚 硝 硫代硫酸钠 、 ｉ ｓ 染液等 。 Ｇｅ ａ ｍ
明 中药接骨颗粒对骨质疏松症具有一定的治疗作 用。 主题词 骨质疏松症／ 中医药疗法 中药坚骨颗粒／ 药效学 骨形态计量 实验研究 大鼠
老年性骨质疏松性骨 折病人表 现 出的高并存症 、 高 术后 并发症 、 高致残率 以及康复期高死亡率现象 ， 折临床 和基 在骨 础研究 中引起重视 。我们早期的临床研 究发 现中药接骨颗粒
小鼠踝关节炎实验简介
小鼠踝关节炎实验简介实验目的：对小鼠进行人为因素诱导其患关节炎，导致其前爪踝关节出现严重的骨质缺损和骨质流失。
然后对患关节炎的小鼠进行药物治疗，寻找和比较不同药物的治疗效果。
实验方法：实验是在广州中科恺盛公司的小动物Micro-CT公共实验平台上完成的。
实验分为3组，第一组是对正常小鼠前爪踝关节进行CT扫描；第二组是对患关节炎小鼠前爪进行CT扫描；第三组是对药物干预的小鼠前爪进行CT扫描。
从形态结构和骨质密度等参数方面分别进行比较。
实验结果：患关节炎和正常小鼠前爪踝关节的结构形态和骨质密度数据都具有较大的差异。
广州中科恺盛于2009年组建了国内第一家小动物Micro CT实验平台，几年来为国内各大医学院校、医院及研究机构提供了大量的专业服务。
获得了非常好的口碑。
中科恺盛自主研发小动物Micor CT系统包含了17项骨参数。
例如骨密度BMD、组织矿物质密度TMD、骨小梁数目、骨小梁厚度和骨小梁分离度等等。
并可同其它第三方软件（如Mimics、Ansys 等）进行无缝对接，满足您的各个方面需求。
现把实验的一些数据图片分享给同行研究人员或者相关学习研究者们参考，希望能对你们在相关领域有所帮助。
本次实验Micro-CT的扫描参数是电压50Kvp，功率40W，6帧叠加，视野4cm×4 cm。
实验材料选择有小鼠前爪踝关节样本三组，固定后进行扫描。
扫描重建后进行三维图像截图和骨参数分析。
在上图中我们通过Micro-CT扫描得到的踝关节三维图。
我们可以很明显分辨出正常和患关节炎小鼠前爪的结构形态的差异。
正常的小鼠踝关节骨质的密度与周围骨相似，而且骨皮质表面光滑，关节骨结构整齐有规则。
相比较下，患关节炎小鼠的踝关节部骨质密度低，骨皮质表面粗糙，关节骨结构无规则，有明显的骨质溶解流失的表象。
进一步比较骨密度BMD、组织矿物质密度TMD等参数，发现正常小鼠踝关节骨参数的BMD和TMD值比患关节小鼠的要高3倍左右。
补肾壮骨颗粒对雌性骨质疏松大鼠体重及骨组织计量学的影响
！！ 堂 塑 旦笙 笙
！ ！
！ ！ ： 竺
！０ ： ： ｖ：
．３７ ２５ ．
补 肾壮 骨颗粒对雌性骨质疏松大 鼠体重及 骨组 织 计 量黄海 ，
广 州军 区广 州总 医院 中医科（ 广州 ５ ０ １ ）２ １０ ０ 广东省第 二人 民医院中医科 （ 州 ５０ １ ） 广 １３ ７
ｔ ｎ— ｎ ｕｅ ｓ ｏ ｏｏｉ Ｌ Ｘａ ｈ ｏ ＬＮ ＾ ， Ｄ Ｎ ｅ —ｍｎ ＨＵ Ｎ ａ． Ｄｐ ｒ ｅｔｆ Ｔａ ｉ ｎｌ ｉ ｉｄ ｃｄｏｔ ｐ ｒｓ ． ／ ｉ ｏ ｃ ｓ ｏ— ａ ， Ｉ ， Ｅ Ｇ Ｗ ｉ ｉ， Ａ ＧＨ ｉ ｅａｔ ｎ ｒｄｔ ａ ｍ ｏ ｉ ｏ Ｃ ｉ ｓ Ｍｅｉｎ ， ｈｎｓ Ｐ ＡＧ ｎｒｌ ｏ ｉ ｌ ｕｎｚｏ ｌａｙＡｅ ， ｕ ｎｚｏ １０ ０ Ｃ ｉ ｈｎ ｅ ｄｃ ｅ Ｃ ｉ ｅ Ｌ ｅｅ ｓ ｔ Ｇ ａｇｈｕＭｉｔｒ ｒａ Ｇ ａ ｇｈ ｕ５ ０ １ ，ｈｎ ｅ ｉ ｅ ａＨ ｐａｏ ｆ ｉ ａ
Ｏｓ ｏ ｏｏ ｉ ｒｔｍｏ ｅ ｓ ｅ ｔ ｂ ｉ ｅ ｙ ｅ ｓ ｕ ａｉｎ Ｔ ｅ ｄ ｒｔ ｎ ｏ ｄ ｎｓｒ ｔ ｎ ｗ ｓ １ ｅ ｋ ． Ｐ ｎ ｅ ａ ｒｗｔ ｔ ｐ ｒ ｓｓ ａ ｄ ｌ ｅ ｗａ ｓａ ｌ ｈ ｄ ｂ ｍａ ｃ ｌ ｔ ． ｈ ｕ ａｉ ｆ ａ ｍｉ ｉｔ ｉ ａ ３ ｗ ｅ ｓ ｓ ｏ ｏ ａｏ ｏ ｄ ｒ ｇｏ ｈ ｌ ａ ｄ ｉ ｄ ｃ ｓｏ ｏ ｅ ｈ ｓ ｍｏ ｐ ｏ ｔ ｓｒ ｃ ｒ ｅ ｏ ｎ ｙ ｉ． Ｒｅ ｕ ｔ Ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ｄ ｌｇ ｏ ｐ，ｐ ｎ ｅ ａ ｒ ｗ ｈ ｎ ｎ ｉｅ ｆｂ ｎ ｉｔ ｒ ｈ ｍｅ ｒ ｗａ ｅ ｏ ｄ ｄ ｆｒａ ａ ｓｓ ｏ ｙ ｌ ｓ ｓ ｌ ｏ ａ ｅ ｉ ｍｏ ｅ ｒ ｕ ｈ ｏ ｄ ｒ ｇｏ ｌ ｔ
骨组织形态计量学方法解析
2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋（1）包埋前单体（甲基丙烯酸甲酯）的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗（2L）中。
②加入5% NaOH溶液500ml，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。
③重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱阻滞剂）。
④加入500ml蒸馏水，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。
⑤重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱NaOH）。
⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2（1000 ml：500g）脱水2次。
⑦滤纸过滤，收集滤液。
⑧-20℃保存备用，第二天取出看有无冰晶漂浮：无，表明无水可备用；有，则需重新脱水。
（2）胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开，暴露骨髓腔，解剖部位如下：②脱水分别通过70%乙醇2天，95%乙醇2天，100%乙醇1天，100%乙醇1天，四个脱水过程，二甲苯透明1天。
③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。
三种浸液的配制方法如下：浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，磁力搅拌器上搅拌3小时。
浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化笨甲酰1.0g，磁力搅拌器上搅拌4小时。
浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化苯甲酰2.5g，磁力搅拌器上搅拌6小时。
（3）包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ（当日配置）倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中，倒入的包埋剂约，盖好瓶盖，并在瓶盖上插一注射器针头，室温过夜。
第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时，直至包埋块形成。
若为胫骨中段骨，则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬，变硬后为1.5cm高为宜。
包埋时将胫骨中段至于瓶中央，在倒入2cm高的包埋剂。
若为胫骨上段，仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋，倒入约3.5cm高的包埋剂即可。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三种小鼠骨质疏松模型骨组织形态计量学观察与评价司徒永立;柯行;刘义;吕思敏;钟月春;崔燎;吴铁【摘要】目的：探讨D-半乳糖是否会引起骨质疏松,与去卵巢致骨质疏松有何异同,去卵巢后再加上D-半乳糖是否会加速加重骨质疏松的进展,补充雌激素是否有预防作用。
方法 SPF级小鼠60只,随机分为假手术组、D-半乳糖组、去卵巢组、去卵巢+D-半乳糖组、去卵巢+D-半乳糖+己烯雌酚组和D-半乳糖+己烯雌酚组。
实验70 d后,取右胫骨进行不脱钙骨组织切片及骨形态学计量学观察与评价。
结果与假手术组比较,去卵巢组%Tb. Ar、Tb. Th、Tb. N明显降低(P<0.01),Tb. Sp明显升高(P<0.05),反映骨吸收指标的Oc. Pm、Oc. No.、%Oc. S、Oc. N/mm明显升高(P<0.01),反映骨形成指标的%L. Pm、MAR、BFR/TV、BFR/BV、BFR/BS明显降低( P<0.01)。
D-半乳糖组反映骨吸收的4个指标明显升高(P<0.05),反映骨形成的4个指标明显降低(P<0.05)。
去卵巢+D-半乳糖组也有明显的骨质疏松的表现,但各指标与去卵巢组相比,差异没有显著性,与D-半乳糖组相比,各指标差异也没有显著性。
雌激素对D-半乳糖和去卵巢联合D-半乳糖导致的骨质疏松相关指标均有明显的对抗作用。
结论去卵巢、D-半乳糖、去卵巢联合D-半乳糖均能建立小鼠骨质疏松模型,雌激素能有效防止D-半乳糖和去卵巢联合D-半乳糖致骨量丢失。
%Aim To investigate whether D-galactose cause osteoporosis and the difference compared with the osteoporosis induced by ovariectomy, and to deter-mine whether ovariectomy coupled with D-galactose ac-celerated the progress of osteoporosis and whether es-trogen had a preventive effect on these osteoporosis models. Methods Sixty SPF mice were randomly divided into six groups , namely sham-operated group, D-galactose group, OVX group, OVX + D-galactose group, OVX + D-galactose + diethylstilbestrol group and D-galactose + diethylstilbestrol group. Seventy days later, the right tibia was processed with undecal-cified sections for bone histomorphometric analysis. Results Compared with the sham-operated group, %Tb. Ar, Tb. Th and Tb. N decrease by 50. 4%, 25. 4%, 50. 9% ( P <0.01 ) respectively, Tb. Sp in-creased by 169. 4% (P <0.05), Oc. pm, Oc. No. ,%Oc. S, Oc. N/mm which reflected bone absorption significantly increased ( P < 0.01 ) , and % L. Pm, MAR, BFR/TV, BFR/BV, BFR/BS which reflected bone formation significantly decreased ( P <0.01 ) in OVX group. %Tb. Ar decreased by 30. 4% in D-ga-lactose group, but there was no statistically significant difference. However, the four parameters reflected the bone absorption in D-galactose group increased signifi-cantly ( P<0.05 ) , while the four parameters reflected bone formation decreased significantly ( P < 0.05 ) . OVX+D-galactose group has obvious performance of osteoporosis, but there was no significant difference compared to OVX group, nor to D-galactose group. Estrogen had significant preventive effect on related pa-rameters of osteoporosis induced by D-galactose and o-variectomy coupled with D-galactose. ConclusionsOsteoporosis model of mice can be established by OVX, D-galactose and OVX +D-galactose. Estrogen can effectively prevent bone loss induced by D-galac-tose and OVX+ D-galactose.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】7页(P1281-1286,1287)【关键词】骨质疏松;胫骨上段;骨形态计量学;小鼠;D-半乳糖;己烯雌酚【作者】司徒永立;柯行;刘义;吕思敏;钟月春;崔燎;吴铁【作者单位】广东医学院病原生物学与免疫学研究所;广东医学院药理学教研室;广东天然药物研究与开发重点实验室，广东湛江 524023;广东医学院药理学教研室;广东医学院药理学教研室;广东天然药物研究与开发重点实验室，广东湛江524023;广东医学院药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R.332;R336;R363.332;R681;R977.12骨质疏松是一种以骨量减少和骨微结构退变为特征，致使骨脆性和骨折危险性增加的系统性骨骼疾病［1］。
绝经后骨质疏松主要是由于随着年龄的增长，女性绝经后雌激素缺乏所引起，它是绝经后妇女常见病、多发病。
目前骨质疏松动物模型的建立有多种方法，如去卵巢致骨质疏松动物模型、糖皮质激素性骨质疏松动物模型、环磷酰胺诱导骨质疏松动物模型等，各种骨质疏松动物模型都有其特点，可用于相应骨质疏松症的研究，但其不足之处我们必须引起重视。
D-半乳糖常用于衰老动物模型的建立，近年来，D-半乳糖对小鼠骨组织的研究已有一些报道，但研究发现D-半乳糖对小鼠骨量的影响结果不一，覃冬云等［2］研究发现D-半乳糖能导致♀小鼠发生骨质疏松；但罗红梅等［3］研究发现D-半乳糖可提高♀小鼠矿化程度。
本研究旨在探讨D-半乳糖对♀小鼠是否会产生骨质疏松，这种骨质疏松与去卵巢导致的骨质疏松有何异同？去卵巢后再加上D-半乳糖是否会加速加重骨质疏松的进展？补充雌激素对这些骨质疏松是否有预防作用？1 材料与方法1.1 药物与试剂己烯雌酚片：合肥久联有限公司，批号：20100920；D-半乳糖：天津市光复精细化工研究所，批号：20090921；钙黄绿素、盐酸四环素：美国Sigma公司。
1.2 动物分组、给药及实验方法 60只2月龄SPF级昆明♀小鼠，由广东医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（粤）2008-0008。
动物适应性喂养1周后，按体重随机分成6组，分别为假手术组（S）、D-半乳糖组（D）、去卵巢组（O）、去卵巢＋D-半乳糖组（O＋D）、去卵巢＋D-半乳糖＋己烯雌酚组（O＋D＋d）和D-半乳糖＋己烯雌酚组（D＋d）。
O组、O＋D组、O＋D＋d组进行双侧去卵巢手术，其余组做假手术对照，休养2 d后给药。
D组和O＋D组皮下注射D-半乳糖120 mg·kg-1·d-1，O＋D＋d组和D＋d组皮下注射D-半乳糖120 mg·kg-1·d-1，灌胃给予己烯雌酚0.038 mg·kg-1·d-1，其余组皮下注射、灌胃给予等量蒸馏水，所有小鼠于处死前d 10～11和d 3～4分别皮下注射盐酸四环素35 mg·kg-1、钙黄绿素7.5 mg·kg-1，进行荧光标记，全程自由饮食，每周称重1次，实验周期为70 d。
实验结束当天，颈椎脱臼处死小鼠，右胫骨按文献［4］步骤，进行不脱钙包埋切片、染色，并以生长板下0.5 mm到2 mm为测量范围，对上述范围的松质骨进行测量、计算和分析。
1.3 统计学处理使用SPSS 16.0软件进行ANOVA单因素方差分析，所有数据以¯x±s表示。
2 结果2.1 各组小鼠体重观察各组小鼠体重见Fig 1，由Fig 1可见：与D组比较，D＋d组第3、5、8周体重降低（P＜0.05）。
与O＋D组比较，O＋D＋d组第7、8、9周体重降低（P＜0.01）。
Fig 1 Body weight in m ice（±s，n＝10）*P＜0.05，**P＜0.01 vs S group，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01 vs D group；ΔP＜0.05；ΔΔP＜0.01 vs O＋D group2.2 各组小鼠胫骨上段骨小梁面积与骨小梁形态观察从Fig 2可见，S组骨小梁结构紧密、粗而均匀，连续性好，数量多；D组骨小梁结构稀疏，变细、断裂，不连续，数量减少；O组只剩下一小部分的断裂骨小梁，出现大量无骨小梁骨髓区；O＋D组也只剩下一小部分的断裂骨小梁，出现大量无骨小梁骨髓区；O＋D＋d组较O＋D组骨小梁面积有所增大，数量有所增加，但结构较稀疏；D＋d组骨小梁较D组结构紧密，明显增粗、增大，连续性较好，数量明显增加。