健骨冲剂对去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响
健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠整合素信号转导通路的影响
１１ 实验 材 料 ．
１１１ 药 物 ．． 健 骨 颗 粒 主 要 由煅 狗 骨 、淫 羊 藿 、
山茱 萸 、 党参 等药 味 组 成 。 药 材 由福 建 省 药材 公 原
司 提供 ，福 建 中 医药 研 究 院 中试 车 间 负 责加 工 制
备， 每克 颗 粒含 原 生 药 ２９ ｇ ． 。
ＴＫＲ ａ ａ ａ公 司 ）
１１３ 实验 动 物 ６月 龄雌 性 Ｓ 大 鼠 ５ ．。 Ｄ ０只 （ 由
上 海斯 莱 克实 验 动 物 有 限责 任 公 司提 供 ， 洁级 ） 清 体 重 ４ ０ ０ｇ 医学 实 验 动 物环 境 设 施 为福 建 中 ０ ±２ 。
卢 天 祥 ， 杨 华 ， 银 生 。林 煜 ， 云梅 ， 燕 萍 吴 ， 黄 林
（ ． 建 中 医 学 院 骨 伤 系 ， 建 福 州 ３ ０ ０ ；． 建 省 泉 州 市 人 民 医 院 骨 科 ， 建 泉 州 ３ ２ ０ ： １福 福 ５ １８ ２ 福 福 ６ ０ ０ ３ 福 建 中 西 医 结 合 研 究 院 骨 病 研究 所 ， 建 福 』 ５ １ ８ ４ 福 建 中 西 医 结 合 研究 院 ， 建 － ） ５ １ ８ ． 福 ’３００ ；． Ｉ ＇ １ 福 Ｎ Ｈ３ ０ ０ ）
１１２ 实 验 试 剂 ．． Ｔ Ｚ Ｌ （ 自 ＭＢ ｅｍ ｎａ ＲＩＯ 购 ＩＦ ｒ ｅ ｔｓ
重 视 。健 骨பைடு நூலகம்颗 粒具 补 肾健 脾 、 强筋 壮 骨 等 功 效 ， 前
期 的实 验 研 究 证 实 ，该 药 能 明显 改 善 去 卵 巢 骨 质 疏松 模 型 鼠的 骨 密度 和 骨小 梁 结 构 ．影 响 骨 组 织 中整 合 素 ８ ｌ的 表达 。近来 研究 表 明 ， 骨 细 胞 成 在整 合 素 Ｂ １的介 导 下 ， 多种 骨 基 质 蛋 白（ ： 与 如 Ｉ 型胶 原 、 维 粘 连 蛋 白 、 纤 玻璃 粘 连 蛋 白等 ） 合 ， 结 激 活细 胞 内 粘 着 斑 激 酶 （ Ａ Ｆ Ｋ）活 性 ． 起 细 胞 形 态 引 改变 、 胞骨架重建 ． 细 细胞 有 丝 分 裂 活性 提 高 。从 而 促 进 成 骨 细 胞 分 化 、 熟 ［。细 胞 外 基 质 一 合 成 ３ ３ 整 素一 粘着 斑 激 酶 一 胞 ， 架 。构 成 了整合 素 信号 转 细 居 导 通 路 ， 细 胞 外 信 息 传 递 到细 胞 内 。 将 调控 基 因表 达 ， 使 功 能 ［ 。 深入 探 讨 健 骨颗 粒 防 治 Ｐ Ｐ 行 ４ 为 １ ＭＯ 的作用 机理 ．本 实 验 采 取 切 除卵 巢 建 立 绝 经 后 骨 质 疏松 症 动 物 模 型 ， 进 行 药 物 干 预 ， 定 量 Ｐ Ｒ 并 用 Ｃ
健骨冲剂对去势大鼠骨组织基因差异表达影响的研究
健骨冲剂对去势大鼠骨组织基因差异表达影响的研究马宇滢;张新民;李世峰;顾一峰;陈伟华【期刊名称】《中国中西医结合杂志》【年(卷),期】2005(25)2【摘要】目的探索健骨冲剂对绝经后骨质疏松症疗效的作用机制。
方法采用差异显示反转录-PCR(DDRT-PCR)方法,寻找骨组织内与健骨冲剂疗效相关的有差异表达的基因。
结果共筛选出10条有差异表达的基因片段,经克隆、测序,BLAST搜索,有9条差异基因片断在Genebank中找到高同源性的对应序列,其中2条是已知功能基因的mRNA,即透明质酸调节的运动受体(hyaluronan mediated motility receptor,RHAMM)和Na+、K+ATP转运酶β3亚单位(ATP1b3)。
用半定量RT-PCR证实,这两个差异片段在健骨冲剂作用后表达分别下降和上调。
结论中药健骨冲剂对骨质疏松症疗效的作用机制可能与这两个蛋白质有关。
【总页数】5页(P138-142)【关键词】冲剂;骨组织;去势大鼠;疗效;作用机制;差异表达;绝经后骨质疏松症;结论;已知;方法【作者】马宇滢;张新民;李世峰;顾一峰;陈伟华【作者单位】复旦大学中西医结合研究所华山医院【正文语种】中文【中图分类】R283.6;R681【相关文献】1.抗疏健骨颗粒对去势大鼠骨组织形态及骨形态发生蛋白-2表达的影响 [J], 史传道;李鹏;张志勇;张荣强;李娟;;;;;2.抗疏健骨颗粒对去势大鼠骨组织形态及骨形态发生蛋白-2表达的影响 [J], 史传道;李鹏;张志勇;张荣强;李娟3.强骨冲剂对去势大鼠骨密度及骨组织形态计量学参数的影响 [J], 刘连起;孙丽萍;刘春梅;赵丽云;何基渊;孙承琳4.补肾壮骨冲剂对去势骨质疏松大鼠骨组织形态学的影响 [J], 邵玉;黄海;周丽;韩丽萍;李晓昊;邓伟民5.健骨冲剂对去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响 [J], 王晓达;胡庆沈;陈伟珍;江兰英;史炜镔;张凤华;符诗聪;杜宁;李国衡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
健骨颗粒对大鼠成骨细胞OCN_Cbfa1的影响
骨质疏松症主要是由于骨形成、骨吸收偶联的破坏，使骨形成减少，骨量降低所导致。
成骨细胞是骨形成的关键细胞，而成骨细胞的分化成熟、功能活性与骨形成密切相关。
前期在体、体外实验表明，补肾健脾中药健骨颗粒能明显增强成骨细胞的功能活动。
为进一步探讨健骨颗粒的作用机制，我们在前期研究的基础上，从成骨细胞分化的角度切入，旨在观察健骨颗粒对成骨分化的敏感指标骨钙素（osteocalcin ，OCN ）、核心结合因子（core binding factor apha 1，Cbfa1）的影响，探讨健骨颗粒对成骨细胞的分化作用，以揭示健骨颗粒有效防治骨质疏松症的作用机制。
１材料与方法１．１实验材料１．１．１实验药物：健骨颗粒由煅狗骨、淫羊藿、山茱萸、党参、山药等药组成，原药材由福建省医药公司提供，福建省中医药研究院中试车间负责加工制备，每克颗粒含原生药2.9g 。
１．１．２主要试剂与仪器：OCN 酶联免疫吸附测试试剂盒（美国ADL 公司）；TRIZOL （MBI Fermentas 公司）；Cbfa1、内参β-actin 的PCR 引物（博尚生物技术有限公司）；反转录试剂盒、SYBR （Premix Ex Taq TM PCR Kit （日本TaKaRa 公司）；9600DNA 扩增仪（美国PE 生物系统公司）；7500型实时定量PCR 仪（美国ABI 公司）。
１．２实验方法１．２．１成骨细胞培养纯化及鉴定：取新生SD 大鼠2只（由福建医科大学动物房提供），采用酶消化法分离收集其颅骨成骨细胞进行传代培养，差速贴壁法进行纯化，经重氮盐法碱性磷酸酶染色，观察形态学上符合成骨细胞生长特点，证实培养的细胞为成骨细胞。
１．２．２含药血清制备：取3月龄清洁级雄性SD大鼠20只（上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号：SCXK （沪）2003-0003，编号：0019151），随机分为含药血清组和生理盐水血清组，每组10只，分别喂服健骨颗粒2g ／（kg ·d ），用2ml 生理盐水溶解，生理盐水2ml ／d ，连续灌胃7d ，于最后1次灌胃后1h 腹主动脉无菌取血，常温下静置60min ，3000r ／min 离心10min 后取同组血清混合，再离心1次，56℃灭活30min ，过滤除菌，-20℃保存备用。
健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠血清TNF-α、TGF-β1的影响
健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠血清TNF-α、TGF-β1的影响林燕萍;周瑞祥;王和鸣;冯尔宥【期刊名称】《中国骨伤》【年(卷),期】2002(015)008【摘要】目的探讨补肾健脾中药健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠血清TNF-α与TGF-β1含量的变化.方法切除卵巢建立大鼠骨质疏松模型,随机分成三组,分别喂服健骨颗粒、骨松宝、生理盐水,用药12周后检测各组血清TNF-α、TGF-β1及E2含量.结果大鼠去卵巢后12周,随着E2水平下降,血清TNF-α含量明显升高,而TGF-β1浓度却明显降低.当喂服健骨颗粒12周后,血清E2水平和TGF-β1浓度回升明显,而TNF-α含量却出现下降,与同期生理盐水组相比有明显统计学意义.血清TGF-β1、E2含量与TNF-α呈负相关,而TGF-β1含量与E2水平高度正相关.结论E2对TNF-α有一定的抑制作用,而TGF-β1的分泌可能需要雌激素等的刺激.健骨颗粒通过综合调整作用以提高模鼠E2水平,既制约了TNF-α的合成、分泌及其活性,又解除了对TGF-β1的抑制作用,使破骨细胞的骨吸收活动减弱,成骨细胞的骨形成作用增强,改善骨代谢的负平衡.【总页数】3页(P465-467)【作者】林燕萍;周瑞祥;王和鸣;冯尔宥【作者单位】福建中医学院骨伤系,福建,福州,350003;福建医科大学基础医学院,福建,福州;福建中医学院骨伤系,福建,福州,350003;福建中医学院骨伤系,福建,福州,350003【正文语种】中文【中图分类】R58【相关文献】1.健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠骨组织结构的影响 [J], 林燕萍;周瑞祥;张爱平;黄美雅2.健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠整合素信号转导通路的影响 [J], 卢天祥;杨华;吴银生;林煜;黄云梅;林燕萍3.健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠骨代谢的影响 [J], 林燕萍;李咏高;马建华;黄美雅4.健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠尿脱氧吡啶酚及骨组织整合素β_1 mRNA表达的影响 [J], 林燕萍;周瑞祥;李异龙;袁俊;黄美雅5.健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子α及转化生长因子β1的影响(英文) [J], 林燕萍;周瑞祥;王和鸣;冯尔宥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
健骨复方对去卵巢致骨质疏松症大鼠的治疗作用
健骨复方对去卵巢致骨质疏松症大鼠的治疗作用邓英贤;马增春;谭洪玲;肖成荣;王宇光;高月【期刊名称】《中国中药杂志》【年(卷),期】2006(31)24【摘要】目的：观察健骨复方对去卵巢致骨质疏松症大鼠的治疗作用。
方法：切除双侧卵巢建立骨质疏松症大鼠模型,试验分正常对照组,假手术对照组,模型对照组,阳性药尼尔雌醇组和龙牡壮骨颗粒组,健骨复方低、中、高剂量组的剂量分别为3．25,6．5,13 g·kg^(-1)。
测定股骨密度、生物力学和骨形态学,同时测定用药后血清中钙、磷和碱性磷酸酶含量。
结果：健骨复方灌胃给药3个月后可以升高大鼠股骨密度、最大弯曲力和弯曲强度,升高血清中钙、磷浓度,降低碱性磷酸酶浓度,同时可以升高大鼠腰椎骨小梁面积、骨小梁面积比、骨小梁平均厚度以及皮质骨厚度。
结论：健骨复方通过增强骨密度、改善骨生物力学和骨代谢等途径对骨质疏松症有治疗作用。
【总页数】4页(P2070-2073)【关键词】健骨复方;骨质疏松;骨密度;生物力学【作者】邓英贤;马增春;谭洪玲;肖成荣;王宇光;高月【作者单位】空军总医院药学部;军事医学科学院放射与辐射医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.补肾健骨汤对去卵巢大鼠骨质疏松症骨密度和骨生物力学性能影响的实验研究[J], 张东鹏;张定华2.健骨冲剂对去卵巢大鼠骨质疏松症治疗作用的研究 [J], 史之茂;刘琴;邱文兴;周忠光3.补肾健骨中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Leptin启动子甲基化的影响[J], 王剑;丰雪妮;刘剑辉;谢剑;刘文艳;张景云;宋光熠;郑洪新4.阿胶补肾健骨方治疗去卵巢大鼠骨质疏松症的作用机制研究 [J], 贾玉民;向楠5.健骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症预防作用的研究 [J], 林燕萍;马建华;冯尔宥;黄美雅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药坚骨颗粒对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨骼力学性能的影响
中药坚骨颗粒对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨骼力学性能的影响王健智;冯坤;张灵菊;刘月桂;陈宝龙;古建立
【期刊名称】《中医正骨》
【年(卷),期】1999(11)7
【摘要】为进一步研究中药坚骨颗粒对骨质疏松的治疗作用，从生物力学角度评价补肾中药对骨质疏松的治疗效果，以卵巢切除后雌激素缺失诱导而成的骨质疏松大鼠为模型，研究了坚骨颗粒对大鼠股骨材料和结构力学性能方面的影响。
结果显示，用药４个月后，实验大鼠股骨的最大载荷、破坏载荷和能量吸收等结构力学参数与造模对照组比较有显著提高（Ｐ＜０．０５），并接近正常组。
表明中药坚骨颗粒可提高造模动物骨骼抵抗外力冲击的能力，改善骨质疏松大鼠骨的韧性，避免或减少骨折的发生。
【总页数】2页(P6-7)
【关键词】骨质疏松;中医药疗法;股骨;生物力学
【作者】王健智;冯坤;张灵菊;刘月桂;陈宝龙;古建立
【作者单位】河南省洛阳正骨医院正骨研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R274.91
【相关文献】
1.坚骨颗粒对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨密度和股骨力学性能的影响 [J], 冯坤;王健智;陈宝龙;刘月桂
2.荣骨颗粒对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨形态计量的影响 [J], 许昕;王莒生;戚团结
3.中药坚骨液对卵巢切除后大鼠骨质疏松的影响 [J], 冯坤
4.中药坚骨颗粒对卵巢切除实验性骨质疏松大鼠骨中无机元素的影响 [J], 陈宝龙;冯坤;刘月桂;张灵菊
5.中药坚骨液对卵巢切除后骨质疏松大鼠血、尿生化的影响 [J], 冯坤;刘月桂;张灵菊;高子范
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骨健颗粒剂对去势大鼠激素水平影响的实验研究
骨健颗粒剂对去势大鼠激素水平影响的实验研究
单丽娟;李凤森;张伟
【期刊名称】《中医药学刊》
【年(卷),期】2004(22)1
【摘要】目的 :观察填精补肾中药骨健颗粒对去势大鼠激素水平的影响。
方法 :通过切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型 ,观察骨健颗粒治疗后大鼠血中促卵泡激素(FSH)、黄体生成素 (LH)、促甲状腺素 (TSH )及雌激素雌二醇 (E2 )含量水平。
结果 :骨健颗粒通过刺激垂体性腺轴而提高促性腺激素水平。
结论 :骨健颗粒剂治疗骨质疏松症其部分机制是通过微弱的提高雌激素水平而实现的。
通过骨健颗粒剂治疗去势大鼠骨质疏松症 ,探讨该药对去势大鼠激素水平的影响。
【总页数】2页(P66-66)
【关键词】骨质疏松;骨健颗粒剂;去势大鼠;激素水平;填精补肾;实验非军事化
【作者】单丽娟;李凤森;张伟
【作者单位】新疆医科大学中医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R274.91;R285
【相关文献】
1.抗疏健骨颗粒对去势骨质疏松大鼠骨碱性磷酸酶、尿羟脯氨酸的影响 [J], 史传道;段永峰;贾文鹏;杨晓航
2.中药骨康对去势大鼠骨吸收与骨形成影响的实验研究 [J], 熊学华;余克强;刘庆思
3.补肾健骨中药对去势后大鼠骨质疏松症激素水平表达和骨密度影响的研究 [J], 张威;郑洪新
4.骨健颗粒剂对骨质疏松症骨结构及骨代谢影响的实验研究 [J], 单丽娟;庞辉群;田虹;文江;周铭心
5.益骨汤对去势大鼠血清激素水平、骨密度和骨生物力学影响的实验研究 [J], 姚新苗;杨林;王靖;卢建华;陈于东
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健骨冲剂对去卵巢大鼠骨质疏松症治疗作用的研究
【 键 词 】 健 骨 冲 剂 骨 质 疏 松 症 骨 密度 骨 钙 素 钙 关
本 研 究 采 用 切 除 大 鼠 卵 巢 建 立 去 卵 巢 骨 质 疏 松 症 的 模
磷
处 理 ， 间 比较 采 用 ｔ 验 组 检
２ 结 果 ２ １ 骨 密度 测 定结 果 ．
齐 齐 哈尔 医学 院 学 报 ２ １ ０ ０年 第 ３ 卷 第 ３期 １
・
３ ・ ３７
・
论 著 ・
健 骨 冲剂 对 去 卵 巢 大 鼠骨 质 疏 松 症 治疗 作 用 的研 究
史 之 茂 刘 琴 邱 文 兴 周 忠 光
【 要】 目的 摘 探 讨 中药健 骨 冲 剂 对 去 卵 巢 大 鼠 骨 质 疏 松 症 的 治 疗 作 用 。方 法 运 用切 除 大 鼠 卵
（９ ±２ ） ， １０ ０ ｇ 由黑 龙 江 中 医药 大学 实 验 动 物 中 心 提 供 。
１ ２ 药 物 及 试 剂 健 骨 冲 剂 由黑 龙 江 中 医 药 大 学 附 属 医 院 ． 提 供 ， 骨 冲 剂 用 纯 净水 配 成 悬 浊 液 （ ． ／ 和 ０ ２ ／ ） 健 Ｏ １ ｍｌ ｇ ． ｍ１ ｇ 剂 量 为 ５ ０ ａ ｋ ・ 和 １ ０ ０ ｇ・ ｇ ｎ ｄ ０ ０ ｍｇ・ ｇ １ ・ 两 种 浓 ｋ 一 ｄ 度 ， ℃冰 箱 保 存 备 用 。 ４ 血清 雌 二 醇 （ ２ 、 清 骨 钙 素 （ ＧＰ 放 免 法 试 剂 盒 由 天 Ｅ ）血 Ｂ ） 津 洁 瑞 医 学 生 物 研 究 有 限 公 司 提 供 。磷 、 比 色 法 试 剂 盒 由 钙
１ ／ ， 续 ３ 。分 层缝 合 肌 肉 、 肤 。术 后 一 周 开 始 用 药 。 次 ｄ连 ｄ 皮 假 手 术 组 及 模 型 组 给 等 容 积 蒸 馏 水 灌 胃 ， 据 前 期 预 实 验 结 根 果 ， 骨 冲剂 组 按 中 剂 量 １ ｌ ｌ ｇ 给 药 ， 健 ５１ ９ｇ ｋ １次 ／ ， 续 给 日 连
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・论 著・健骨冲剂对去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响王晓达1 胡庆沈2 陈伟珍1 江兰英2 史炜镔1 张凤华1 符诗聪1 杜 宁1 李国衡1(1.上海第二医科大学附属瑞金医院伤科 上海市伤骨科研究所 上海 200025;2.上海第二医科大学生物物理实验室)摘要 目的:评估健骨冲剂短期预防性应用对绝经后骨质疏松症的作用,并试图揭示其机理。
方法60只SD大鼠通过卵巢摘除术随机分为正常对照组(SHAM)、模型组、健骨冲剂高、中、低剂量组和仙灵骨葆组,治疗1月后作骨组织形态计量学观测。
结果:健骨冲剂组BV TV、T b.T h、骨小梁间距、节点数显著高于造模组,游离未端数显著少于后者;骨计量学指标低、高剂量组与仙灵骨葆无差别,中剂量组优于后者。
结论:健骨冲剂短期预防应用能够改善骨质疏松症模型大鼠的骨计量学指标:增加最终形成骨量,改善骨小梁结构,提高骨形成速率的同时降低骨吸收速率。
关键词 健骨冲剂 骨质疏松症 骨组织形态计量学中图分类号: 文献标识码:A 文章编号:1005-0205(2001)02-0017-03H isto m orpho m etr ic Study of the Effects if J i anguChongj i on theBone Turnover i n Ovar iecto m ized Fe ma le Ra tsW ang X iaoda,H u Q ingshen,Chen W eizhen,et alS hang ha i R u ij in H osp ita l A f f ilia ted toS hang ha i S econd M ed ica l U n iversity,S hang ha i200025ABSTRACT Objective:To assess the effects of J iangu Chongji(JC)on p reven ting po stm enopau sal o steo2po ro sis,attemp t to reveal its m echan is m.M ethods:60fem ale Sp rague2D aw ley rats at6mon th s of age w erecho sen:they w ere random ly devided6group s,ovariectom ized and treated fo r1mon th.T hen U nder V I DA S system,bone tu rnover w as assessed by bone h istomo rphom etry.Results:BV TV,T b.T h,Spacing,Juncti on increased and N om adic T erm inal decreased sign ifican tly in the group s fed on JC compared to model rats;thereis no rem arkab le difference betw een low,h igh do se2JC and X ian linggubao,bu t BV TV,T b.T h,Juncti on inm iddle do se2JC2group s w ere sign ifican tly increased w ith the group fed X.Conclusion:JC can op ti m ize param e2 teers of h istomo rphom etry:increase bone m ass,fo rce bone stuctu re and accelerate bone fo rm w ith decelerati onin bone ab so rp ti on in ovariectom ized fem ale rats.KEY WOR D S J ianguChongji Bone h istomo rphom etry O steopo ro sis 妇女绝经后雌激素水平下降导致骨转换速率加快,骨量下降引发骨质疏松症。
现有文献报道卵巢摘除术(OV X)诱导的原发性骨质疏松症大鼠收稿日期:2000-09-04基金项目:上海市科委资助项目 编号:97411903作者简介:王晓达(1973-),男(汉族),山东人,医学硕士医师。
模型在去势2周后即可以观察到血清降钙素水平显著低于Sham组1,尿吡叮酚、脱氧吡叮酚水平显著高于Sham组2,骨小梁骨量的丢失开始有显著意义,l个月后检测到骨密度显著降低3,4。
本实验运用骨组织形态计量学(h istom o r2 p hom etry)检测方法观察健骨冲剂对切除卵巢诱导骨质疏松症大鼠模型的影响,旨在评估早期短期应用健骨冲剂对绝经后骨质疏松症的预防作用,并试图揭示其作用机理。
材料与方法1 动物 6月龄SD大鼠60只,体重280±20克,由中科院动物实验中心提供(中科院实验动物合格证号:992004)。
2 药物和试剂 健骨冲剂(主要成分为党参、生白术、淫羊霍等)李国衡教授经验方,由上海瑞金医院制剂室提供;仙灵骨葆,由贵州仙灵药业有限责任公司生产,批号:980404。
3 仪器 德国Zeiss公司V I DA S全自动图像分析系统。
4 动物分组及处理 动物随机分为假手术(Sham)组、模型(OV X)组、仙灵骨葆(X)组、健骨冲剂低剂量(JL)组、健骨冲剂高剂量(JH)组、健骨冲剂中剂量(JM)组,每组10只。
Sham组行伪手术,余行双侧卵巢摘除术。
术后Sham组、OV X 组正常饲料,余组含药饲料喂养:X组,仙灵骨葆26.65m g 100g体重・只・天(成人每公斤体重每月的8倍);JL组,健骨冲剂0.0732g 100g体重・只・天(成人每公斤体重每月的4倍);JM 组,健骨冲剂0.1464g 100g体重・只・天(成人每公斤体重每月的8倍);JH组,健骨冲剂0. 2928g 100g体重・只・天(成人每公斤体重每月的16倍)。
术后第21、28天肌注盐酸四环素(50m g Kg),第30天处死取材:股骨远端、胫骨近端,第三腰椎,制备不脱钙塑料切片。
5 观察指标及方法 于全自动图像分析系统上作骨组织形态计量学测定,以一维之线、二维之面分别估测二维之面、三维之体5,每张切片每个指标测10个视野。
骨计量静力学参数:(1)BV TV:单位体积骨小梁骨量,%,视野中骨小梁面积占视野面积的百分比。
(2)T b.T h:平均骨小梁宽度,Λm,每个视野测10个宽度,求平均值。
(3)FLAW:平均骨小梁间距,Λm,每个视野测10个宽度,求平均值。
(4) JO I N T:骨小梁节点数,单位视野中骨小梁交汇点的数目。
(5)END:骨小梁游离末端数,单位视野中骨小梁断端的数目。
上述3参数可作为检测当时的最终形成骨量指标。
骨计量动力学参数(指时间上的动态观察): (1)M A R:矿化沉积速率,Λm day,四环素双标记线中点间的平均距离乘以Π 4,再除以2次标记所间隔的时间。
(2)B FR(T):组织水平的骨形成速率,以M A R乘以相对骨形成面(以四环素单标记面+1 2四环素双标记面) 骨小梁周长表示),即每天骨形成量。
6 统计学处理 采用SA S 6.04软件行方差分析。
结果1 股骨远端骨小梁形态计量学指标(见表1)与Sham组比较,OV X组BV TV降低,节点数减少,骨小梁厚度变薄,小梁间距增宽,M A R延长, B FR(T)加快,均有统计学意义。
与OV X组比较, JL组骨小梁厚度增宽,小梁间距减小,M A R延长,B FR(T)加快(P<0.05);JM组BV TV升高,骨小梁厚度增宽,小梁间距减小(P<0.05); JH组骨小梁厚度增宽,小梁间距减小(P<0.05)。
与X组比较,JL组骨小梁游离末端数减少, M A R延长,B FR(T)加快(P<0.05);JM组BV TV升高,骨小梁厚度增宽(P<0.05);JH组骨小梁游离末端数减少,厚度增宽,间距减小(P<0. 05)。
表1 股骨计量学图象分析结果 BV TV(%)JO I N T(个)END(个)T b.T h(um)FLAW(um)M A R( day)BFR(T, day) Sham64.03±7.174.60±1.430.40±0.52160.6±19.5193.0±7.71.01±0.120.63±0.06 OV X38.39±4.07s2.00±1.49s1.00±0.6777.5±4.0sx262.0±36.5sx1.35±0.18s0.87±0.12s JL41.49±4.912.60±1.26s0.20±0.42x132.4±11.7as168.9±20.0asx1.65±0.34sax1.04±0.23sax JM50.79±7.30asx3.00±0.94s1.20±1.03s158.8±13.7ax142.6±7.3as1.23±0.25s0.80±0.17s JH41.40±3.272.40±1.07s0.20±0.42x105.7±18.9asx124.0±21.8asx1.30±1.12s0.83±0.06s X43.32±7.942.20±1.231.60±0.84s120.8±14.7sa146.9±11.6as1.32±0.16s0.82±0.11s 注:a:与OV X组比较P<0.05;s:与S ham组比较P<0.05;x:与X组比较P<0.05。
2 腰椎骨小梁形态计量学指标(见表2) 与Sham组比较,OV X组BV TV降低,节点数减少,骨小梁厚度变薄,M A R延长,B FR(T)加快,均有统计学意义。
与OV X组比较,JL组BV TV 增加,节点数增加,小梁厚度增宽,间距减小, M A R延长(P<0.05);JM组BV TV升高,节点数增加,小梁厚度增宽,间距减小(P<0.05);JH 组骨小梁BV TV增加,节点数增加,厚度增宽,间距减小(P<0.05)。