邻二氮菲测定微量铁
《分光光度分析》实验四 邻二氮菲分光光度法测定铁
(7) 盐酸溶液(6 mol· -1) L
(8) 铁标准溶液(20 g· -1，200 g· -1配成250mL，见后面) mL mL 说明： (1) - (7) 由实验室教师配制，(8) 每组配制一份
四、实验内容
条件试验
铁含量的测定 摩尔比法测定配合物的组成比、摩尔吸光系 数及反应的平衡常数
亚铁的含量?试拟出一简单步骤。
4. 制作工作曲线和进行其它条件试验时，加入
试剂的顺序能否任意改变?为什么?
50 mL 容量瓶
1 mL盐酸羟胺溶液 摇匀
用水稀释至刻度，摇匀 放置l0 min
X mL 1 mol· -1 NaOH L
l cm比色皿 绘制A与pH关系 的酸度影响曲线
以蒸馏水为参比 在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度 (用pH计测量溶液pH值) A
pH
X mL NaOH: 0.00 mL，0.20 mL， 0.50 mL，1.00 mL 1.50 mL，2.00 mL ， 2.50 mL, 3.00 mL
2+
Fe2+ + 3 N N N Fe N
3
lg 3=21.3
Fe3+与邻二氮菲生成1:3的淡蓝色配合物，其lg 3＝14.1
盐酸羟胺还原
2 Fe3++2NH2OH· HCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-
为了尽量减少其他离子的影响，通常在微酸性(pH约5)溶液中
显色。
本法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、
实验四
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验八 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验八邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的2. 掌握邻二氮菲的制备方法及其在测定微量铁中的应用。
3. 理解标准曲线的绘制方法及其在实验中的应用。
二、实验原理邻二氮菲是一种具有荧光特性的有机物，其分子结构如图1所示。
图1 邻二氮菲分子结构邻二氮菲能够与铁(Ⅲ)形成荧光化合物，而这种荧光化合物的发射峰位于535nm左右，因此可以通过测量荧光发射强度来确定铁(Ⅲ)的含量。
在实验中，首先要制备邻二氮菲溶液。
制备方法如下：取一定量的邻二氮菲与一定量的苯甲酸，加入适量的氢氧化钠溶液，煮沸并搅拌至邻二氮菲完全溶解，加入足量的水，制成1mmol/L的邻二氮菲溶液。
然后测定铁离子溶液的荧光强度，在一定波长下测定它的荧光强度，得到标准曲线。
最后将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，测定混合溶液荧光强度，并用标准曲线计算出铁离子的含量。
三、实验步骤2. 制备标准曲线。
将一定量的FeCl3溶液加入邻二氮菲溶液中，混合均匀后，在535nm处测定其荧光强度。
重复上述步骤，得到一系列不同浓度的FeCl3溶液荧光强度数据。
3. 测定样品荧光强度。
将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，混合均匀后，在535nm 处测定其荧光强度。
4. 计算样品中Fe离子的含量。
使用标准曲线计算样品中Fe离子的含量。
四、实验注意事项1. 实验中所用的器皿应干净，避免污染。
2. 制备邻二氮菲溶液时应注意氢氧化钠的浓度和量，以确保邻二氮菲完全溶解。
3. 实验室应尽量保持安静，避免干扰荧光信号。
4. 注意各种溶液的安全操作，如防止接触皮肤和眼睛。
五、实验结果及分析利用邻二氮菲分光光度法测定一系列不同浓度的FeCl3标准溶液，得到的测量结果如下表所示。
所得数据可用图表表示，如下图所示。
根据标准曲线可以得到如下方程：y = 0.2948x + 2.2939，其中y表示荧光强度，x表示FeCl3溶液的浓度。
六、实验总结本实验通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，熟悉了邻二氮菲荧光原理及其制备方法，掌握了标准曲线的制备方法和其在实验中的应用。
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。
邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。
本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。
实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。
（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。
（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。
（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。
2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。
（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。
（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。
（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。
测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。
1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。
离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。
荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。
2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。
荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。
总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。
这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
holdon
k=polyfit(C,A1,1)
y=k(1)*C+k(2);
plot(C,y,'k')
%输出拟合后样品铁的浓度
CFe1=(0.161-k(2))/k(1)
2、吸收曲线的绘制
%输入数据
L=450:10:550
A2=[0.448 0.490 0.537 0.560 0.571 0.593 0.609 0.563 0.441 0.292 0.171];
波长λ/nm
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
550
吸光度A
0.448
0.490
0.537
0.560
0.571
0.593
0.609
0.563
0.441
0.292
0.171
数据处理
1、标准曲线的绘制及铁含量的测定
处理结果:
所以，该直线为：A=0.2990*C+0.0027
样品铁的质量浓度为: =10*CFe1=0.5295mg/L*10=5.295mg/L
原始实验数据
1、标准曲线的绘制及铁含量的测定波长：510nm
铁标准液体积/mL
024ຫໍສະໝຸດ 68105（样品）
吸光度A
0
0.132
0.243
0.350
0.475
0.610
0.161
2、吸收曲线的绘制铁标准体积：10mL
波长/nm
450
460
470
480
490
邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。
4、学会数据处理的基本方法。
5、掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
文档来自于网络搜索用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用显色剂邻二氮菲(又称邻菲罗啉)，邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法，在pH值为2-9的溶液中，邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物：文档来自于网络搜索=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104L·mol-1·cm-1，而Fe3+此配合物的lgK稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：文档来自于网络搜索2Fe3+ + 2NH 2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl-文档来自于网络搜索测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。
本实验采用HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显色反应进行完全。
文档来自于网络搜索为判断待测溶液中铁元素含量，需首先绘制标准曲线，根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化，对应实测样品引起的吸光度，计算样品中铁离子浓度。
文档来自于网络搜索本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-等离子不干扰测定。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
上海应用技术大学实验报告课程名称分析化学实验B 实验项目邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告姓名学号班级（课程序号） 1951926 组别同组者实验日期指导教师成绩 100邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告一、实验目的1．学习722S型分光光度计的使用方法2．学习测绘吸收曲线的方法3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算二、实验原理微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。
由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。
邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L••cm-1•mol-1。
显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡蓝色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。
本实验采用盐酸羟胺为还原剂：4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。
利用分光光度法进行定量测定时，通常选择吸光物质（即经显色反应后产生的新物质）的最大吸收波长作为入射光波长，这样测得的摩尔吸光系数ε值最大，测定的灵敏度最高。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 1、学会吸收曲线及标准
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3、学会722型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。
4、学会数据处理的基本方法。
5、掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用显色剂邻二氮菲，邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法，在pH值为2-9的溶液中，邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合，此配合物的lgK=21.3，摩尔吸光ε510=1.1×104L·mol-1·cm-1，稳=14.1。
所以在加入显色剂之而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl-测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。
本实验采用HAc-NaAc 缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显色反应进行完全。
为判断待测溶液中铁元素含量，需首先绘制标准曲线，根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化，对应实测样品引起的吸光度，计算样品中铁离子浓度。
本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。
但Bi3+、Cd2+、Hg2+、Zn2+、Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀干扰测定。
实验二邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁
实验⼆邻⼆氮菲分光光度法测定⽔中微量铁实验⼆邻⼆氮菲分光光度法测定⽔中微量铁⼀、实验⽬的1.学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2.掌握⽤邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁的⽅法原理。
3.学会722型分光光度计的正确使⽤，了解其⼯作原理。
4.学会数据处理的基本⽅法。
5.掌握⽐⾊⽫的正确使⽤。
⼆、实验原理根据朗伯-⽐⽿定律：A=εbc，当⼊射光波长λ及光程b⼀定时，在⼀定浓度范围内，有⾊物质的吸光度A与该物质的浓度c成正⽐。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应⽤相关的回归分析软件，将数据输⼊计算机，得到相应的分析结果。
⽤分光光度法测定试样中的微量铁，可选⽤显⾊剂邻⼆氮菲(⼜称邻菲罗啉)，邻⼆氮菲分光光度法是化⼯产品中测定微量铁的通⽤⽅法，在pH值为2-9的溶液中，邻⼆氮菲和⼆价铁离⼦结合⽣成红⾊配合物：=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104L·mol-1·cm-1，⽽Fe3+此配合物的lgK稳=14.1。
所以在加⼊显⾊剂之前，能与邻⼆氮菲⽣成3∶1配合物，呈淡蓝⾊，lgK稳应⽤盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：2Fe3+ + 2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl- 测定时酸度⾼，反应进⾏较慢；酸度太低，则离⼦易⽔解。
本实验采⽤HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显⾊反应进⾏完全。
为判断待测溶液中铁元素含量，需⾸先绘制标准曲线，根据标准曲线中不同浓度铁离⼦引起的吸光度的变化，对应实测样品引起的吸光度，计算样品中铁离⼦浓度。
本⽅法的选择性很⾼，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-等离⼦不⼲扰测定。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁(精)
测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总 量。
实验预习
❖预习邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 ❖了解TU-1901紫外-可见分光光度计的主要构造和使用方法。
仪器和试剂
仪器
TU-1901紫外-可见分光光度计，1 cm吸收池，10 mL 吸量管，50 mL 比色管 （或容量瓶）
注意事项和问题
1. 邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？ 2. 吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？ 3. 透射比与吸光度两者关系如何？测定条件指哪些？ 4. 邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？ 5. 加各种试剂的顺序能否颠倒？
谢谢观赏
勤能补拙，学有成就！
2021/11/11
12
实验步骤
1. 吸收曲线的绘制和测量波长的选择： 2. 用吸量管吸取2.00 mL1.0×10-3mol.L-1标准溶液，注入50mL比色管中， 加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，加入2.00 mL0.15%邻二氮菲溶液， 5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用1 cm比色皿，采用试 剂溶液为参比溶液，在440-560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度，以波 长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。
2. 工业盐酸中铁含量的测定：
(1)标准曲线的制作: 在5支50 mL比色管中，分别加入0.20、0.40、0.60、 0.80、1.00 mL 100 g/mL铁标准溶液，再加入1.00 mL10%盐酸羟胺溶液， 2.00 mL0.15%邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。
4、学会数据处理的基本方法。
5、掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用显色剂邻二氮菲(又称邻菲罗啉)，邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法，在pH值为2-9的溶液中，邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物：此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510= 1.1×104L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：2Fe3+ + 2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl-测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。
本实验采用HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显色反应进行完全。
为判断待测溶液中铁元素含量，需首先绘制标准曲线，根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化，对应实测样品引起的吸光度，计算样品中铁离子浓度。
本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-等离子不干扰测定。
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邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一、 实验目的：
（1） 学习确定实验条件的方法和测定铁的分光光度法。
（2） 掌握721型分光光度计的使用方法。
二、 实验原理：
可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。
（1） 入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。
（2） 显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。
（3） 溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH 缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA -PH 曲线，由曲线上选择合适的PH 范围。
（4） 有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。
（5） 干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。
邻二氮菲与Fe 2+ 在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。
配合无的ε =1.1 ×104 L· mol ·cm -1 。
配合物配合比为3：1，PH 在2-9（一般维持在PH5-6）之间。
在还原剂存在下，颜色可保
持几个月不变。
Fe 3+ 与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe 2+ 与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。
此方法选择性高Br 3+ 、Ca 2+ 、Hg 2+、Zn 2+ 及Ag + 等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn 2+、Al 3+、Ca 2+、Mg 2+ 、Zn 2+ 、Sio 32-，20倍的Cr 3+、Mn 2+、VPO 3-45倍的Co 2+、Ni 2+、Cu 2+等离子不干扰测定。
三、 仪器与试剂：
1.仪器：721型723型分光光度计，1cm 吸收池；10ml 吸量管;50ml 比色管。
2.试剂：
（1）铁标准溶液1.0×10-3mol/L,准确称取0.4822g 铁盐NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O 置于烧杯中，加入80ml 6mol/L HCl 和少量水，溶解后转移至1L 容量瓶中，以水稀释之标线摇匀。
（2）铁标准溶液100ug·ml -1.准确称量0.8634g NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O 置于烧杯中，加入80ml 6mol/L HCl 和少量水，溶解后转移至1L 容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。
（3）0.15%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟氨溶液（新鲜配制）；1mol/L 乙酸钠溶液，6mol/L HCl ；工业盐酸（试样）。
四、 实验步骤 （一）准备工作
打开仪器电源开关，预热，调解仪器。
（二）测量工作（以通过空白溶液的透射光强度为I 0，通过待测液的透射光强度为I,由仪器给出透射比T,再由T 值算出吸光度A 值）
Fe
2+
+
3N
N
N
N
3
Fe
2+
⒈吸收曲线的绘制和测量波长的选择
用吸量管吸取2.00 mL 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，加入2.00 mL 0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mLNaAc溶液，以水稀释至刻度。
在光度计上用1 cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在440～560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度（在最大吸收波长处，每隔2nm），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜
波长。
⒉显色剂条件的选择
①显色剂用量
在6支比色管中，各加入2.00mL 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀。
分别加入0.10，0.50，1.00，2.00 ，3.00及4.00mL 0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
在光度计上用1cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，测吸光度。
以邻二氮菲体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-试剂用量曲线，从而确定最佳显色剂用量。
⒊工业盐酸中铁含量的测定
①标准曲线的制作
在6支50mL比色管中，分别加入0.00、0.60、0.80、1.00、1.20、1.40mL 100μg/mL铁标准溶液，再加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，2.00mL 0.15%邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
在508nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，测吸光度A。
②试样测定
准确吸取适量工业盐酸三份，按标准曲线的操作步骤，测定其吸光度。
五、数据处理
1、最初波长的寻找
在电脑的软件中记录了铁标准溶液的最大吸收波长为512nm
后面的测定均是在波长为512nm的条件下测定的
2、显色条件的选择
由于时间关系，我们只做了一个显色剂的用量
有这个图中可以看出，最佳的显色剂15%邻二氮菲的体积（mL)的用量是1.0mL 3、工业盐酸中含铁量的测定 将三个样品的吸光度代入标准曲线中的公式算得
C 1=0.184588μg/mL C 2 =0.184589μg/mL C 3=0.184589μg/mL C 平均=1
3（0.184588+0.184589+0.184589）= 0.185703μg/mL SD=
(0.184588−0.185703)2+(00.184589−0.185703)2+（0.184589−0.185703）
2
2
=0.002429
RSD=SD/ C平均*100%= 1.3078%
当置信度为P=95%时,f=2,t0.95,2=4.3
置信区间μ=x̅±t0.95,2×
√n =0.185703±4.3
√3
=(0.185703±0.006029)μg/mL
在误差的允许范围内，工业盐酸中铁的含量为0.185703μg/mL
六、思考题
⒈邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？
答：工业盐酸中含有Fe2+和Fe3+，其中Fe2+与邻二氮菲(phen)能生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen)3]2+此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，然后，进行铁的总量的测定。
2参比溶液的作用是什么？在本实验中可否用蒸馏水作参比？
答：参比溶液的作用是扣除背景干扰，不能用蒸馏水作参比，因为蒸馏水成分与试液成分相差太远，只有参比和试液成分尽可能相近，测量的误差才会越小。
3邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？
答：邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有：酸度一般(PH=5~6)、温度、邻二氮菲的用量，显色时间等。
七、实验结果讨论
这次实验的溶液配制为了节约时间，我们分成了两组，一组寻找显色剂的最佳用量，一组绘制铁标准溶液的标准曲线，每组三个人，我们小组是负责绘制铁标准溶液的标准曲线，在绘制的过程中，我们发现5号铁标准溶液偏离程度比较大，R2只有两个9，于是我们就重新配置了5号铁标准溶液，第二次测量结果还是两个9，老师说两个9也可以，只是误差会大点，于是我们就接着往下做，做的过程中我们发现另一个小组也在重新配制溶液，原来他们的那个显色剂最佳用量也没找好，等他们测完后我们就接下去做，每个小组的数据都是自己的实验仪器测出来的，只是溶液时分开配的，一起用，所以即便我们两个小组的用的是相同的溶液，也会因为仪器的问题，会有些小偏差，我觉得这都是正常的。
这个实验的问题没有出很多，锻炼了我们小组团结合作的能力，使我们的配合更加好。