家兔失血性休克实验设计

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家兔失血性休克实验设计

【实验原理与目的】

休克是一种全身性病理过程,失血、创伤、感染、过敏等多种原因都可以引起休克。血容量急剧降低、血管容量扩大和急性心功能衰竭可以作为休克的始动环节。

本实验通过对家兔大量放血,使其血容量急剧降低,复制出家兔失血性休克模型,观察失血性休克时血流动力学改变及微循环变化,探讨其发生机制。

【实验对象】

家兔1只,体重2.0~3.0 kg。

【实验器材与药品】

1.仪器BL-410/BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪,血压换能器,张力换能器。光学显微镜,超级恒温水浴器。

2.器械哺乳类动物手术器械一套,中心静脉压测量及输液装置,微循环观察装置(恒温灌流盒),动脉导管,静脉导管,输尿管插管,记滴器,500 ml烧杯,5 ml、10 ml及50ml注射器,体温计,三通管。

3.药物生理盐水,0.5%肝素生理盐水(5 mg/ml),3%戊巴比妥钠溶液,微循环灌流液(1%明胶台氏液)。

4.其他丝线、纱布、吸管、连接大号针头的胶管、硅胶管、擦镜纸。

【实验步骤与观察指标】

1.仪器装置按操作规程准备好BL-410/BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪的血压、呼吸、尿滴记录装置(见《常用实验仪器》),准备好微循环观察装置。

2.手术操作

(1)动物麻醉与固定:动物称重后,以3%戊巴比妥钠1 ml/kg(30mg/kg)静脉注射麻醉。将麻醉好的动物仰卧位固定于动物手术台上。

(2)备皮:剪去颈部、腹部及右侧腹股沟等手术部位的狗(或家兔)毛。

(3)颈部手术:在颈部正中切开皮肤(狗6~8 cm,家兔4~6 cm),分离气管、左颈总动脉和右颈外静脉。①行气管插管并连接马利氏鼓,通过鼓膜运动牵拉张力换能器的弹性敏感梁活动,张力换能器与仪器连接,记录呼吸。②行左颈总动脉插管并经三通管一压力换能器与仪器连接,记录动脉血压。③将静脉导管从右颈外静脉插入到上腔静脉入右心房口处(锁骨下1-2 cm)并与中心静脉压(CVP)测量输液装置连接,行测量中心静脉压和输液用。未测CVP时,维持每分钟10一15滴输液速度,以保持管道通畅。记录呼吸方法也可在剑突处皮肤上缝一针,用线连接张力换能器,但这种方法当动物清醒挣扎时,容易损坏张力换能器。也可以用呼吸换能器记录呼吸,免马利氏鼓。

(4)股部手术:于右侧腹股沟动脉搏动明显处沿动脉走向切开皮肤4~5 cm,分离出股动脉,夹上动脉夹。用连接大号针头胶管行股动脉插管,暂不松开动脉夹,备放血用。

(5)腹部手术:

1)在耻骨联合上作下腹部正切口,长约5 cm,找到膀胱,在其背面膀胱三角区找到并分离双侧输尿管,插入输尿管导管,用记滴器记录每分钟尿滴数或尿量。

2)在右侧腹直肌旁作6~8cm的腹部旁正中切口,钝性分离肌肉,打开腹腔后推开大网膜,找出一段游离度较大的小肠肠襻,轻轻拉出,置于微循环恒温灌流盒内,用显微镜观察肠系膜微循环。

3.观察与记录实验过程中动态观察记录的指标包括:动物一般情况、皮肤黏膜颜色、肛温、动脉血压、CVP、尿量和肠系膜微循环(血管口径、血流速和肠系膜毛细血管数及血液流变学参数)。

(1)放血前:手术完毕,待动物血压平稳后,观察与记录上述各项指标作实验对照值。

(2)放血造成休克:

1)松开股动脉上的动脉夹,预先在500 ml烧杯中加入肝素2 mg/kg,用于收集所放血

液。快速放血,在15 min内使平均动脉血压(MAP)降至40 mmHg(5.33 kPa),通过调节放血量,维持MAP 于40 mmHg,30 min。

2)测量放血量。

3)记录失血期间动物各项观察指标的改变,每5~10min记录1次,特殊变化随时记录。

(3)抢救:将所放出的血液用50ml注射器从静脉缓缓回输,输血完毕后观察30 min,每10 min记录1次各项观察指标变化。也可设计输入高渗盐水、胶体溶液等其他抢救方案。

【注意事项】

1.麻醉深浅要适度,麻醉过浅,动物疼痛可致神经源性休克。麻醉过程或麻醉后若出现呼吸暂停,应及时作人工呼吸。

2.尽量减少手术创伤引起出血。

3.牵拉肠襻要轻巧,以免引起创伤性休克。

4.血压换能器和动脉导管要排除气泡和加入一定量肝素抗凝。静脉导管一经插入后除非测量CVP,宜缓慢滴人生理盐水(10-15滴/min),以保持管道通畅。

【思考题】

1.放血使MAP降至40 mmHg后即停止放血,MAP有什么变化?为什么?

2.急性大量失血是如何引起休克发生的?

3.为什么输回所失的全部血液后狗血压仍未能恢复至原来的水平?

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